注射劑研發(fā)的基本流程細(xì)則

1、注射液研發(fā)的流程一、 試驗前期資料信息的收集1、 初步調(diào)查品種的基本情況，包括品種的市場份額、銷量，藥物研究歷史等安全有效的信息，有無專利和保護(hù)信息、技術(shù)壁壘等。2、 綜合評估撰寫項目可行性分析報告，包括產(chǎn)品基本信息，立項目的與依據(jù)，有無知識產(chǎn)權(quán)和藥政保護(hù)，產(chǎn)品的特點及試驗難易程度、設(shè)備是否齊備、國家政策風(fēng)險等，有無技術(shù)壁壘，產(chǎn)品優(yōu)劣勢，經(jīng)費預(yù)算與市場回報。3、 是否有合法原料提供，及價格如果只是進(jìn)行制劑的仿制研究，必須提供原料藥的合法證明；對于仿制原料的話，必須對藥物的合成工藝打通，優(yōu)化中試生產(chǎn)，質(zhì)量合格，雜質(zhì)種類和數(shù)量不高于上市品，必須與制劑一同申報。4、 了解臨床資料、不良反應(yīng)資料及產(chǎn)品

2、說明書等相關(guān)資料5、 了解國內(nèi)及進(jìn)口制劑劑型及規(guī)格全面掌握擬仿制藥物的國內(nèi)外上市情況，包括上市的劑型、規(guī)格、廠家等。6、 產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)查閱產(chǎn)品相關(guān)的國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)（藥典標(biāo)準(zhǔn)和國內(nèi)首仿標(biāo)準(zhǔn)）和進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)，并試著草擬自己的標(biāo)準(zhǔn)。7、 工藝研究資料查閱參考文獻(xiàn)（CNKI、博碩論文、維普、專利），查閱其合成工藝或制劑工藝，或查找相同劑型的工藝研究資料，對其分析匯總，撰寫自己的初步研究方案。8、 專利、國家政策及生產(chǎn)注冊情況查詢專利、國家政策及生產(chǎn)注冊情況，以保證產(chǎn)品研究能夠順利報批。二、 試驗用物品的采購1、 原料的采購如果只是申請制劑的仿制，必須提供原料的合法來源及其證明文件，必須選擇國內(nèi)外合法的廠商進(jìn)行原

3、料的購買，購買時需要廠家提供原料藥的批準(zhǔn)證明文件，藥品標(biāo)準(zhǔn)，檢驗報告，原料藥生產(chǎn)企業(yè)的營業(yè)執(zhí)照，藥品生產(chǎn)許可證，藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范認(rèn)證證書，購銷發(fā)票，供貨協(xié)議等復(fù)印件，并要注意原料的種類，是注射級別的還是口服級別的，原料的包裝規(guī)格，原料標(biāo)準(zhǔn)是藥典標(biāo)準(zhǔn)還是注冊標(biāo)準(zhǔn)，原料的采購量是否充足，價格如何等。2、 輔料和包材的購買要保證輔料和包材的合法來源，通過對仿制藥處方及劑型的分析，粗略知道所用輔料和包裝材料的種類和用量，已有的材料不需購買，沒有的在國家批準(zhǔn)的廠家購買輔料和包材，并需要廠家提供輔料和包材的廠家資質(zhì)（生產(chǎn)許可證和營業(yè)執(zhí)照，GMP 證書），藥品包裝材料和容器注冊證，發(fā)票，檢驗報告，標(biāo)準(zhǔn)，

4、購銷合同等的復(fù)印件。要注意輔料的種類，有食用、藥用和注射級之分，輔料的規(guī)格，級別，是否為藥用，輔料的標(biāo)準(zhǔn)及輔料包材的用量及用途。輔料采購后還用根據(jù)自身情況，擬定檢驗標(biāo)準(zhǔn)，對輔料和包材進(jìn)行檢驗，出具檢驗報告書。3、 對照品的購買針對擬仿制品，首先查詢國家中檢院有無標(biāo)準(zhǔn)品提供，如果中檢院沒有標(biāo)準(zhǔn)品提供的，可以在國內(nèi)外其他廠家購買，但要保證合法性，采購時要注意對照品的種類，是否需要購買異構(gòu)體，對照品的規(guī)格及用途，是定性還是定量使用，采購量是否充足，價格如何。4、 對比藥物（原研品）的購買仿制藥必須進(jìn)行對比研究，首選原研廠產(chǎn)品進(jìn)行對比，要購買市售品，重點購買原研藥物，另外購買一部分國內(nèi)仿制品進(jìn)行全面研

5、究以更具有說服力，注意市售品的生產(chǎn)廠家，劑型和產(chǎn)品規(guī)格及包裝規(guī)格，采購量是否充足，必須提供購貨發(fā)票，如果有質(zhì)量標(biāo)注更好。5、 試驗研究用耗材的購買通過查閱質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，及草擬的試驗方案，先期購買試驗可能用的耗材，如色譜柱、雜質(zhì)對照品等，并應(yīng)有相應(yīng)資質(zhì)材料、發(fā)票等。三、 處方前研究1、 藥物理化性質(zhì)測定包括藥物在各種溶劑中溶解度、在各pH條件下的溶解度，pKa值、油/水分配系數(shù)、比旋度、熔點、晶形、水分等。2、 考察藥物在固態(tài)和/或液態(tài)下對光、熱、濕、氧等的穩(wěn)定性情況、所含雜質(zhì)情況。3、 觀察、測定藥物的基本性狀包括藥物的外觀、吸濕性等。4、 考察、了解藥物的生物學(xué)性質(zhì)（在生理環(huán)境下的穩(wěn)定性、藥代動

6、力學(xué)性質(zhì)、毒副作用及治療窗）。5、 藥物的鑒別試驗參考原料藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)或出廠檢驗標(biāo)準(zhǔn)、或參考相關(guān)資料對藥物進(jìn)行鑒別試驗，包括化學(xué)鑒別和色譜鑒別等。鑒別試驗方法要進(jìn)行驗證，項目包括專屬性和耐用性。6、 對比藥物（原研品）研究參考已上市的制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（或參考其它注射液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)），逐項對原研品進(jìn)行試驗研究。7、 考察輔料相容性調(diào)研分析擬用輔料的理化性質(zhì)與合理用量范圍，調(diào)研分析藥物與擬用輔料之間、不同輔料之間的相容性，進(jìn)行相容性研究。四、 質(zhì)量分析方法研究（一） 含量檢測（含方法學(xué)驗證）參考已上市制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（或參考其它注射液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，或自擬標(biāo)準(zhǔn)）中含量測定方法項，一般情況下，有滴定法、紫外分

7、光光度法和高效液相色譜法，以后兩項為多。含量測定需要進(jìn)行方法學(xué)驗證，包括準(zhǔn)確度、精密度（重復(fù)性和中間精密度）、專屬性、線性、范圍、耐用性。1、 紫外分光光度法1) 紫外波長掃描 確定含量檢測最佳波長（制劑處方確定后或用原研品，進(jìn)行波長掃描，保證在選擇的波長處輔料無干擾）。2) 準(zhǔn)確度（回收率） 在規(guī)定范圍內(nèi)，設(shè)定3個濃度，每個濃度分別制備3個樣品，進(jìn)行測定。3) 精密度 a、重復(fù)性（設(shè)定3個濃度，每個濃度3個樣品或相當(dāng)于100%濃度的樣品至少測定6次）；b、中間精密度（不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備）；c、重現(xiàn)性（制劑按一定的濃度處理，進(jìn)樣六次）。4) 專屬性 （在雜質(zhì)可獲得的情況下，試樣中

8、可加入雜質(zhì)和輔料，考察測定結(jié)果是否受干擾，并與未加雜質(zhì)和輔料的試樣比較測定結(jié)果；在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣進(jìn)行測定，與另一經(jīng)驗證的方法或藥典方法比較結(jié)果；用強光照射、高溫、酸堿水解或氧化的方法進(jìn)行加速破壞，以研究可能的降解產(chǎn)物和降解途徑，對比二法的結(jié)果）5) 線性 （至少制備5份系列濃度的樣品，列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線形圖）6) 范圍 （應(yīng)為測試濃度的80%120%）7) 耐用性 （被測溶液的穩(wěn)定性、樣品的提取次數(shù)、時間等）2、 高效液相色譜法1） 確定固定相和流動相（無參考標(biāo)準(zhǔn)的，要先進(jìn)行篩選）2） 確定進(jìn)樣量、流速、柱溫、檢測器（有紫外吸收的用紫外檢測

9、器，先用紫外分光光度計掃描樣品，確定紫外檢測波長）3） 準(zhǔn)確度（回收率） 在規(guī)定范圍內(nèi)，設(shè)定3個濃度，每個濃度分別制備3個樣品，進(jìn)行測定。4） 精密度 a、重復(fù)性（設(shè)定3個濃度，每個濃度3個樣品或相當(dāng)于100%濃度的樣品至少測定6次）；b、中間精密度（不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備）；c、重現(xiàn)性（制劑按一定的濃度處理，進(jìn)樣六次）。5） 專屬性 （在雜質(zhì)可獲得的情況下，試樣中可加入雜質(zhì)和輔料，考察測定結(jié)果是否受干擾，并與為加雜質(zhì)和輔料的試樣比較測定結(jié)果；在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣進(jìn)行測定，與另一經(jīng)驗證的方法或藥典方法比較結(jié)果；用強光照射、高溫、酸堿水解或氧化

10、的方法進(jìn)行加速破壞，以研究可能的降解產(chǎn)物和降解途徑，對比二法的結(jié)果）6） 線性 （至少制備5份系列濃度的樣品，列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線形圖）7） 范圍 （應(yīng)為測試濃度的80%120%）8） 耐用性 （被測溶液的穩(wěn)定性、樣品的提取次數(shù)、時間等；流動相的組成和pH值、不同廠牌或不同批號的同類型色譜柱、柱溫、流速等）（二） 有關(guān)物質(zhì)檢測（含方法學(xué)驗證）對在合成、純化和貯存中實際存在的雜質(zhì)和潛在的雜質(zhì)，應(yīng)采用有效的分離分析方法進(jìn)行檢測。對于表觀含量在0.1%及其以上的雜質(zhì)以及表觀含量在0.1%以下的具有強烈生物作用的雜質(zhì)或毒性雜質(zhì)，予以定性或確證其結(jié)構(gòu)。對在穩(wěn)定性實驗中出現(xiàn)的降解產(chǎn)物，也應(yīng)按上述要求

11、進(jìn)行研究。雜質(zhì)的檢測分析方法應(yīng)專屬、靈敏。雜質(zhì)檢查應(yīng)盡量采用現(xiàn)代分離分析手段，主成分與雜質(zhì)和降解產(chǎn)物均能分開，檢測限應(yīng)滿足限度檢查要求，對需作定量檢查的雜質(zhì)，方法的定量限應(yīng)滿足相應(yīng)的要求。雜質(zhì)測定中需檢驗的項目和驗證內(nèi)容包括需定量（準(zhǔn)確度、精密度（重復(fù)性、中間精密度）、專屬性、定量限、線性、范圍、耐用性）和只需考察限度（專屬性、檢測限、耐用性）。雜質(zhì)研究一般采用薄層色譜法、高效液相色譜法。對高效液相色譜法應(yīng)做下述研究。1、 確定固定相和流動相（無參考標(biāo)準(zhǔn)的，要先進(jìn)行篩選）2、 確定進(jìn)樣量、流速、柱溫、檢測器（有紫外吸收的用紫外檢測器，先用紫外分光光度計掃描樣品，確定紫外檢測波長）3、 準(zhǔn)確度（

12、雜質(zhì)定量測定） 向制劑中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測定。如不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測定的結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較。在不能測得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的響應(yīng)因子或不能測得對原料藥的相對響應(yīng)因子的情況下，可用原料藥的響應(yīng)因子。應(yīng)明確表明單個雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)于主成分的重量比或面積比。 進(jìn)行回收率測定，在規(guī)定范圍內(nèi)，設(shè)定3個濃度，每個濃度分別制備3個樣品，進(jìn)行測定。4、 精密度（雜質(zhì)定量） a、重復(fù)性（設(shè)定3個濃度，每個濃度3個樣品或相當(dāng)于100%濃度的樣品至少測定6次）；b、中間精密度（不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備）；c、重現(xiàn)性（制劑按一定的濃度處理，進(jìn)樣六次）。5、 專屬性 （在雜質(zhì)可獲得的情況下

13、，試樣中可加入雜質(zhì)和輔料，考察測定結(jié)果是否受干擾，并與為加雜質(zhì)和輔料的試樣比較測定結(jié)果；在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣進(jìn)行測定，與另一經(jīng)驗證的方法或藥典方法比較結(jié)果；用強光照射、高溫、酸堿水解或氧化的方法進(jìn)行加速破壞，以研究可能的降解產(chǎn)物和降解途徑，對比二法的結(jié)果）6、 檢測限（雜質(zhì)檢查） 一般以信噪比為3:1或2:1時相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測限。應(yīng)附測試圖譜，說明測試過程和檢測限結(jié)果。7、 定量限（雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量時） 一般以信噪比為10:1時相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定定量限。8、 線性（雜質(zhì)定量測定時） 至少制備5份系列濃度的樣品，列出回歸方程、相

14、關(guān)系數(shù)和線形圖。9、 范圍（雜質(zhì)定量測定時） 應(yīng)根據(jù)初步實測，擬訂為規(guī)定限度的±20%。10、 耐用性（雜質(zhì)測定定量和限度中）被測溶液的穩(wěn)定性、樣品的提取次數(shù)、時間等；流動相的組成和ph值、不同廠牌或不同批號的同類型色譜柱、柱溫、流速等。五、 處方工藝研究（一） 處方工藝摸索1、 規(guī)格的確定參考國內(nèi)外上市品確定規(guī)格。并確定應(yīng)使用的安瓿瓶，且應(yīng)對安瓿瓶的材質(zhì)進(jìn)行篩選。2、 處方設(shè)計處方組成以參考原研處方為依據(jù)，對輔料的用量根據(jù)其常用量來摸索，若達(dá)不到理想結(jié)果，可以根據(jù)劑型和常用輔料及其用量，參考中國藥典制劑通則和藥審中心指導(dǎo)原則自行設(shè)定。1） 根據(jù)藥物的基本性質(zhì)，首先看水溶性如何，根據(jù)

15、規(guī)格要求是否需要增溶。2） 對原料藥進(jìn)行酸、堿、氧化、光照、高溫等破壞試驗，看藥物在什么條件下不穩(wěn)定，基本確定注射劑的pH范圍，是否需要加抗氧劑或充氮氣、是否需要棕色安瓿瓶及確定貯藏條件等。3） 初步制備一批注射劑，考察藥物在不同滅菌條件下的穩(wěn)定性情況，和原研制劑對比，基本確定滅菌條件。4） 根據(jù)以上試驗結(jié)果，參考原研制劑，綜合評定，草擬處方，初步確定滅菌條件。5） 明確影響制劑質(zhì)量的關(guān)鍵因素。3、 處方篩選及優(yōu)化對草擬的處方，采用各種實驗設(shè)計（如單因素考察、正交設(shè)計、均勻設(shè)計等），對所加入的每一種輔料，設(shè)定一系列的比例，配制溶液，灌封安瓿，滅菌，按注射劑穩(wěn)定性重點考察項目，考察性狀、含量、p

16、H值、可見異物、有關(guān)物質(zhì)等，并進(jìn)行影響因素試驗，綜合數(shù)據(jù)，并和原研制劑進(jìn)行比對，考察原輔料相容性，確定每一種輔料的使用量。初步確定23個較好的處方。4、 處方確定對初步確定好的較好處方，制備小樣，對小樣樣品進(jìn)行影響因素考察，按注射劑穩(wěn)定性重點考察項目，考察性狀、含量、pH值、可見異物、有關(guān)物質(zhì)等，為評價指標(biāo)選擇確定最優(yōu)的處方，并初步確定制備工藝過程。5、 用最優(yōu)處方，配制樣品，加入不同比例的活性炭，用于除去熱原，篩選活性炭的使用量，并考察活性炭對藥物是否有吸附，確定活性炭的使用量，如果活性炭對藥物有吸附，則在處方中要考慮吸附損耗的量。6、 滅菌工藝確定用最優(yōu)的處方，用確定的制備工藝制備一批樣品

17、，用不同的滅菌溫度和不同的滅菌時間進(jìn)行滅菌工藝的篩選。一般情況先用濕熱滅菌，設(shè)定115(30min、45min、60min)，121（15min、20min、30min、45min、60min），126（8min、15min、20min、30min），確定最終滅菌條件。對不適宜高溫滅菌的樣品，再考慮其它滅菌方式，比如干熱滅菌、輻射滅菌、氣體滅菌或過濾除菌等。最終確定滅菌工藝。7、 注射液凍融試驗將樣品放置在0、-18，于2天取樣，看是否能復(fù)溶完好。608、 擬定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（二） 中試放大、完善處方工藝根據(jù)確定的處方及工藝，使用大生產(chǎn)設(shè)備，達(dá)到中試生產(chǎn)規(guī)模，完善處方與工藝，生產(chǎn)三批樣品，并填寫批生

18、產(chǎn)記錄，確定各步操作的控制項目及參數(shù)和范圍。三批樣品作為質(zhì)量研究和穩(wěn)定性研究樣品。對樣品進(jìn)行檢驗。產(chǎn)品合格繼續(xù)進(jìn)行工藝驗證，不合格，則修訂處方與工藝。制訂出最終的處方與工藝。（三） 工藝驗證根據(jù)處方與工藝，在生產(chǎn)車間，達(dá)到批量級的生產(chǎn)規(guī)模生產(chǎn)三批制劑，填寫批生產(chǎn)記錄，作為工藝驗證研究樣品，對樣品進(jìn)行檢驗。六、 質(zhì)量研究如有原標(biāo)準(zhǔn)，以現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)為依托，主要參照現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中的方法，對主要方法學(xué)進(jìn)行驗證，并進(jìn)行仿制藥與原研品的全面質(zhì)量比較。為全面考察產(chǎn)品質(zhì)量，必要時增加標(biāo)準(zhǔn)以外的項目研究。如無標(biāo)準(zhǔn)參考或原標(biāo)準(zhǔn)不適用，可參考化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗證指導(dǎo)原則進(jìn)行質(zhì)量研究，參照藥典同劑型標(biāo)準(zhǔn)擬定本品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案，檢測項目根據(jù)劑型和藥物的特點確定。對中試三批樣品和對比原研制劑進(jìn)行檢測，研究，一般包括以下項目：（一） 性狀、外觀（二） 鑒別，包括理化鑒別和色譜鑒別項目（三） 檢查1、 一般檢查項 按照制劑通則檢查。2、 微生物限度（無菌、