選1-3-1(學(xué)案)菊花的組織培養(yǎng)(做好的)

1、課題1 菊花的組織培養(yǎng)【教學(xué)目標(biāo)】1、熟悉植物組織培養(yǎng)的基本過程2、理解細(xì)胞分化的概念及離體植物細(xì)胞的脫分化和再分化3、通過聯(lián)系農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)際，培養(yǎng)學(xué)生活學(xué)活用，理論聯(lián)系實(shí)際的能力【教學(xué)重點(diǎn)】植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術(shù)【教學(xué)難點(diǎn)】植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術(shù)一、基礎(chǔ)知識(shí)（一）植物組織培養(yǎng)的基本過程1.細(xì)胞分化（1）概念：在個(gè)體發(fā)育中，相同細(xì)胞的后代在_、_、_上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。（2）過程：如：受精卵增殖生長(zhǎng)分化形成組織、器官、系統(tǒng)。（3）特點(diǎn)：持久性：是一種持久性的變化，它發(fā)生在生物體的整個(gè)生命過程中,在_期達(dá)到最大限度。穩(wěn)定性：細(xì)胞分化是穩(wěn)定的，一般是_的。全能性：已分化的細(xì)胞

2、，仍具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。（4）結(jié)果：形成不同的細(xì)胞和組織。（5）原因：_的結(jié)果。2.細(xì)胞全能性（1）定義：生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能的特性。（2）原理：生物體的每一個(gè)細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個(gè)體所必需的全部基因。（3）實(shí)例：已分化的植物細(xì)胞，仍具有全能性。高度特化的動(dòng)物細(xì)胞，從整個(gè)細(xì)胞來說，全能性受到限制。但它的細(xì)胞核仍然保持著全能性，這是因?yàn)開 _。（4）全能性的比較: 受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞。3.植物組織培養(yǎng)（1）必要條件：細(xì)胞離體；一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件。（2）原理:細(xì)胞的全能性（3）相關(guān)概念:外植體：_。

3、脫分化：由高度分化的植物組織或細(xì)胞_的過程，稱為植物細(xì)胞的脫分化，或者叫做去分化。再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個(gè)過程叫做再分化。愈傷組織: _,是高度液泡化的、成無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。（二）影響組織培養(yǎng)的因素1.外植體的選取不同植物的組織培養(yǎng)難度不同；同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同。菊花的組織培養(yǎng)一般選擇_。2.培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基)大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S；微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。植物激素：生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等。3.不同植物激素濃度，使用順序和使用量

4、使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先生長(zhǎng)素，后細(xì)胞分裂素有利于分裂但不分化先細(xì)胞分裂素，后生長(zhǎng)素同時(shí)使用分化頻率提高生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素比值結(jié)果比值高時(shí)促根分化，抑芽形成比值低時(shí)2 / 12比值適中促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng) 4.消毒在培養(yǎng)的整個(gè)過程中，都需要是一個(gè)_環(huán)境。5.pH、溫度、光照菊花： pH=_；溫度控制在_； 每日用日光燈照射_h。二、實(shí)驗(yàn)操作（一）MS固體培養(yǎng)基制備1配置各種母液無機(jī)物中大量元素濃縮_倍，微量元素濃縮_倍，常溫保存。激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物一般可按1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液。用母液配制培養(yǎng)基時(shí)，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量。2配制培養(yǎng)基 配制培養(yǎng)液； 調(diào)PH；培

5、養(yǎng)基的分裝。分裝到錐形瓶中，每瓶分裝50ml或100ml。由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此不必添加植物激素。3滅菌分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。（二）外植體消毒1選材：菊花莖段，取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝。2消毒流水沖洗：菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min左右。 酒精處理：用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為70的酒精中搖動(dòng)_次，持續(xù)_s，立即將外植體取出，在無菌水中清洗。消毒液處理：取出后用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1的氯化汞溶液中12min，取出后在無菌水中至少清洗_次，漂凈消毒液。（三）接種1接

6、種室消毒污染的主要來源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接種室消毒是至關(guān)重要的。用70的酒精噴霧使空氣消毒， 酒精或新潔爾滅搽洗工作臺(tái)并用紫外線照射20分鐘。2無菌操作要求操作要在_完成，每次使用器械后，都需要_，接種后立即_。3材料的切取和接種4接種注意事項(xiàng)每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為75的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種。外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，一般胡蘿卜_塊，菊的莖或葉_塊，也不要太少，以充分利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和光照條件。插入時(shí)應(yīng)注意_，不要_。莖段、莖尖基部插入培養(yǎng)基利于_。思考：應(yīng)該做幾組重復(fù)、設(shè)置幾組對(duì)照實(shí)驗(yàn)？答

7、： （四）培養(yǎng)1愈傷組織的培養(yǎng)從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織需經(jīng)過2周時(shí)間。2周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長(zhǎng)出乳白色或黃白色的瘤狀愈傷組織。首次培養(yǎng)愈傷組織時(shí)，恒溫箱的門應(yīng)該關(guān)閉不必見光，因?yàn)樵跓o光條件下愈傷組織長(zhǎng)的更快。2周后，培養(yǎng)基成分接近耗盡，必須更換培養(yǎng)基，進(jìn)行_。2愈傷組織的繼代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)愈傷組織的相同，在嚴(yán)格的無菌條件下，將愈傷組織連同原來的外植體一起移到新培養(yǎng)基上。愈傷組織的繼代培養(yǎng)一代為20d。如果延長(zhǎng)時(shí)間，培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)減少，外植體會(huì)分泌有毒物質(zhì)，造成自身中毒。如果愈傷組織長(zhǎng)到直徑為_cm時(shí)，就可以進(jìn)行試管苗培養(yǎng)，否則還需進(jìn)行第二代繼代培養(yǎng)。在愈傷組織繼代培養(yǎng)

8、期間，將恒溫箱的門打開，讓愈傷組織見光，愈傷組織見光后顏色可以轉(zhuǎn)為綠色。3試管苗的培養(yǎng)當(dāng)愈傷組織長(zhǎng)到一定大小后，可以更換培養(yǎng)基，進(jìn)行試管苗的見光培養(yǎng)。（五）移栽1打開封口膜移栽生根的菊花試管苗之前，應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日。2清洗轉(zhuǎn)移用流水清洗根部的培養(yǎng)基，將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間。3移栽：幼苗長(zhǎng)壯后，移栽到土壤中。（六）栽培幼苗移栽后，每天觀察并記錄幼苗的生長(zhǎng)情況，適時(shí)澆水、施肥，直至開花。小結(jié)1、同微生物培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營養(yǎng)，無機(jī)鹽混合

9、物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類。2、你認(rèn)為組織培養(yǎng)過程中，成功的關(guān)鍵有哪些？這些步驟的適宜條件是什么？組織的脫分化及愈傷組織的再分化。植物組織培養(yǎng)過程中，影響植物細(xì)胞脫分化、再分化的最重要因素是植物激素，生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素之間的濃度比可以調(diào)控植株組培過程中 和 的形成。 3、高等植物是光能自養(yǎng)型生物，為什么在植物組織培養(yǎng)過程中還需要提供有機(jī)物培養(yǎng)基？此時(shí)的組織或細(xì)胞為離體的，即細(xì)胞所生活的環(huán)境為液體有機(jī)物營養(yǎng)環(huán)境，而不是能體現(xiàn)其整個(gè)植物體的光能自養(yǎng)。4、培養(yǎng)過程中為什么需要進(jìn)行光照？在培養(yǎng)過程中，是脫分化、再分化的過程，隨著芽和根的形成，就具有了自養(yǎng)的能力，是由細(xì)胞到一個(gè)個(gè)體的演

10、變過程。5、在整個(gè)操作過程中，是如何來實(shí)現(xiàn)無菌環(huán)境的？（1）、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）（2）、外植體的消毒（酒精、氯化汞）（3）、接種的無菌操作（酒精、酒精燈灼燒）（4）、無菌箱中的培養(yǎng)；（5）、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。 例1、甘薯種植多年后易積累病毒而導(dǎo)致品種退化。目前生產(chǎn)上采用莖尖分生組織離體培養(yǎng)的方法快速繁殖脫毒的種苗，以保證該品種的品質(zhì)和產(chǎn)量水平。這種通過分生組織離體培養(yǎng)獲得種苗的過程不涉及細(xì)胞的 A.有絲分裂B.分化C.減數(shù)分裂D.全能性答案：C 解析：離體的植物器官、組織或細(xì)胞，在培養(yǎng)一段時(shí)間后，脫分化，通過細(xì)胞分裂，形成愈傷組織；脫分化的愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)，又可重新分

11、化成根或芽等器官；再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發(fā)育成完整的植物體。由愈傷組織發(fā)育為完整的植物體體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性。植物組織培養(yǎng)的過程是無性繁殖的過程，不涉及減數(shù)分裂，減數(shù)分裂是生物在進(jìn)行有性生殖的過程中的一種分裂方式。本題解決的關(guān)鍵是要了解植物的組織培養(yǎng)過程。例2、植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是A.導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因B.將成熟的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中C.用適當(dāng)濃度的秋水仙素處理D.脫離母體后，給予適宜的營養(yǎng)和適宜的溫度等外界條件答案：D 解析：植物細(xì)胞只有脫離了植物體，在一定的外部因素作用下，經(jīng)過細(xì)胞分裂形成愈傷組織，才能表現(xiàn)出全能性，由愈傷組織細(xì)胞發(fā)育、分化出新的植物體。例

12、3、在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項(xiàng)條件是不需要的A.消毒滅菌 B.適宜的溫度 C.充足的光照 D.適宜的養(yǎng)料和激素答案：C 解析：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化過程是在無菌條件下進(jìn)行的，在愈傷組織形成過程中，需要適宜的溫度、一定的營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素的誘導(dǎo)，但不需要陽光?；A(chǔ)訓(xùn)練：1.下列實(shí)例中能體現(xiàn)細(xì)胞全能性的是()用培養(yǎng)基培養(yǎng)的胡蘿卜單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)成了可育的植株 植物用種子進(jìn)行繁殖 用煙草組織培養(yǎng)的單個(gè)組織培育出了可育的完整植株 胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培育出植株 紫色糯性玉米種子培育出植株 轉(zhuǎn)入抗蟲基因的棉花細(xì)胞培育出植株 番茄與馬鈴薯體細(xì)胞雜交后培育出植株A

13、B C D2.植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化是指()A植物體的分生組織通過細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞 B未成熟的種子經(jīng)過處理培育出幼苗的過程C植物的器官、組織或細(xì)胞通過離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過程D取植物的枝芽培育成一株新植物的過程3.用菊花的莖尖植物組織培養(yǎng)可培育出試管苗。下面關(guān)于這一過程的說法正確的是() A.進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，一次性加足營養(yǎng)物質(zhì)以防止污染 B.整個(gè)培養(yǎng)過程應(yīng)在光下進(jìn)行，有利于長(zhǎng)葉 C.要根據(jù)培養(yǎng)過程的實(shí)際情況，更換培養(yǎng)基 D.整個(gè)培養(yǎng)過程都應(yīng)在密閉條件下進(jìn)行，以免雜菌的污染4.污染是植物組織培養(yǎng)過程中的最大技術(shù)難題，可發(fā)生于不同的對(duì)象和不同階段，某同學(xué)按照教材中的實(shí)驗(yàn)操作，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基中

14、出現(xiàn)白色暈圈或有色菌落，下列關(guān)于此項(xiàng)分析錯(cuò)誤的是 ()A.可能是錐形瓶口處理不當(dāng) B.組織培養(yǎng)的每一個(gè)環(huán)節(jié)都有可能出現(xiàn)污染C.可在培養(yǎng)基中添加生長(zhǎng)素等物質(zhì)來避免污染 D.先初培養(yǎng)，挑出無污染的物質(zhì)再進(jìn)行培養(yǎng)，可減少污染5.影響植物組織培養(yǎng)的因素包括()培養(yǎng)基配制外植體選取激素的運(yùn)用消毒溫度、pH、光照A B C D6.(2011年晉城)要想獲得無病毒植株，可選擇以下植物什么部位進(jìn)行離體培養(yǎng)() A根尖 B花粉粒 C韌皮部細(xì)胞 D葉肉細(xì)胞7.植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是()A給予適宜的營養(yǎng)和外界條件 B導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因C脫離母體后的具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞或組織，給予適宜的營養(yǎng)和外界條件D

15、將成熟篩管細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵細(xì)胞中8.在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項(xiàng)條件不是都需要的()A消毒滅菌 B適宜的溫度 C充足的光照 D適宜的養(yǎng)料和激素9.在植物組織培養(yǎng)過程中要使用植物激素，但不同的植物激素的濃度以及使用的先后順序和用量的比例都影響細(xì)胞的分裂、分化。下列敘述中錯(cuò)誤的是() A先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素，有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化B先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂也分化C生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值低，有利于芽的分化，抑制根的形成D不使用植物激素，有利于愈傷組織的形成11.關(guān)于制備MS固體培養(yǎng)基的過程，有誤的是(多選)()A在使

16、用提前配制的母液時(shí)，可直接用移液管從母液中取B配制母液時(shí)，無機(jī)物中大量元素濃縮10倍，微量元素濃縮100倍C配制培養(yǎng)基時(shí)，瓊脂要及早加熱熔化DMS培養(yǎng)基的pH要求不太嚴(yán)格，可控制在57之間12.在一個(gè)多細(xì)胞生物體內(nèi)，存在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上具有穩(wěn)定性差異的細(xì)胞，是因?yàn)?)A細(xì)胞失去全能性 B不同的細(xì)胞，基因是不同的C不同細(xì)胞中基因選擇性表達(dá)的結(jié)果 D變異一般是不定向的【課后鞏固拓展】1利用菊花的莖段進(jìn)行組織培養(yǎng)過程中，下列哪項(xiàng)操作或條件是可以省略的（）A消毒滅菌B適宜的溫度C適宜的養(yǎng)料D添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素2（2010·浙江理綜，6）將無根的非洲菊幼苗轉(zhuǎn)入無植物激素的培養(yǎng)基中，在

17、適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，應(yīng)出現(xiàn)的現(xiàn)象是（）3下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中，正確的是（）A為了提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓，培養(yǎng)基中應(yīng)添加葡萄糖B培養(yǎng)液中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素會(huì)影響愈傷組織的生長(zhǎng)和分化C器官、組織的細(xì)胞在不離體的情況下必須通過脫分化才能形成愈傷組織D同一株綠色開花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織的基因是相同的4植物組織培養(yǎng)的特點(diǎn)不包括（）A一般需經(jīng)歷脫分化和再分化兩個(gè)過程B培養(yǎng)抗病毒植株C不改變?cè)参锏幕蛐虳通過平衡的植物激素配比進(jìn)行調(diào)控5在菊花的組織培養(yǎng)操作完成了34天后，觀察同一溫室中的外植體，發(fā)現(xiàn)有的瓶?jī)?nèi)外植體正常生長(zhǎng)，有的瓶?jī)?nèi)外植體死亡，你認(rèn)為外植體死亡的

18、原因不可能是（ ）A接種時(shí)培養(yǎng)基滅菌不徹底B接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體C愈傷組織形成初期沒有給予充足的光照D培養(yǎng)過程中保持溫度、pH的適宜，但沒有及時(shí)調(diào)整各種營養(yǎng)物質(zhì)、激素的比例6下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中，正確的是（雙選）（）A培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓B培養(yǎng)時(shí)先使用生長(zhǎng)素后使用細(xì)胞分裂素，細(xì)胞既能分裂，又能分化C離體器官或組織的細(xì)胞都必須通過脫分化才能形成愈傷組織D在進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)時(shí)確定花粉發(fā)育時(shí)期可用剛果紅染色法7植物組織培養(yǎng)技術(shù)指的是在含有營養(yǎng)物質(zhì)及植物生長(zhǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)離體植物組織（器官或細(xì)胞）并誘導(dǎo)使其長(zhǎng)成完整植株的技術(shù)。請(qǐng)回答下列問題：（1）植

19、物組織培養(yǎng)用到的是固體培養(yǎng)基，原因是培養(yǎng)基中添加了，培養(yǎng)基的主要成分是和有機(jī)物、植物激素。（2）培養(yǎng)基中常要添加，這兩種激素的影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。如果外植體是菊花的莖段，則不必添加植物激素，其原因是。（3）外植體要經(jīng)過（填消毒或滅菌）后，才能接種。8（2010·安徽理綜，31）草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代，導(dǎo)致產(chǎn)量降低。品質(zhì)變差。運(yùn)用微型繁殖技術(shù)可以培育出無病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過程如下： 外植株愈傷組織芽、根植株請(qǐng)回答：（1）微型繁殖培育無病毒草莓苗時(shí)，一般選取作為外植體，其依據(jù)是。（2）在過程中，常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和，在

20、配制好的培養(yǎng)基中，常常需要添加，有利于外植體啟動(dòng)細(xì)胞分裂形成愈傷組織。接種后25d，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是。（3）在過程中，愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是。9（2009·廣州一模，38）下圖是月季花藥離體培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問題：（1）選用的材料合適與否是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素，一般來說選用期的花粉可提高成功率。選擇花粉時(shí)，一般要通過來確定花粉是否處于合適的發(fā)育期，這時(shí)需要對(duì)花粉的細(xì)胞核進(jìn)行染色，常用的染色劑是。 （2）上圖中花藥經(jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于培養(yǎng)基中。（3）胚狀體與愈傷組織在結(jié)構(gòu)上

21、的主要區(qū)別在于愈傷組織的細(xì)胞排列疏松無規(guī)則，是一種高度的薄壁細(xì)胞，胚狀體與發(fā)育形成的胚有類似的結(jié)構(gòu)，即具有胚芽、胚軸和胚根。（4）無菌技術(shù)也是成功誘導(dǎo)出花粉植株的重要因素，請(qǐng)說明下列各項(xiàng)需要消毒，還是需要滅菌。培養(yǎng)基培養(yǎng)皿接種環(huán)花蕾實(shí)驗(yàn)操作者的雙手三角錐形瓶。（填編號(hào)）需要滅菌，（填編號(hào)）需要消毒。（5）試管苗移栽到土壤前，通常要進(jìn)行壯苗處理，應(yīng)如何壯苗？。 課后反思： 三、答案及解析1-5D B B B C 6AC7（1）瓊脂（凝固劑）大量元素、微量元素（2）生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量比例菊花的莖段組織培養(yǎng)比較容易（3）消毒8（1）莖尖、根尖不含病毒 （2）有機(jī)物植物激素外植體消毒不徹底 （3）

22、培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素類物質(zhì)和細(xì)胞分裂素類物質(zhì)用量的比值偏低9（1）單核鏡檢（顯微鏡觀察）醋酸洋紅（2）激素的種類及其濃度配比（3）液泡化正常受精卵（或受精卵）（4）（5）將試管苗移栽到經(jīng)消毒過的培養(yǎng)基中生活一段時(shí)間，等幼苗長(zhǎng)壯后再移栽到土壤中【基礎(chǔ)知識(shí)】答案一、基礎(chǔ)知識(shí)（一）植物組織培養(yǎng)的基本過程1.細(xì)胞分化（1）形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生理功能。 （3）特點(diǎn)：胚胎。不可逆轉(zhuǎn)。（5）原因：基因在特定的時(shí)間和空間條件下的選擇性表達(dá)。2.細(xì)胞全能性（3）實(shí)例：細(xì)胞核內(nèi)含有該物種遺傳性所需要的遺傳物質(zhì)。3.植物組織培養(yǎng)（3）相關(guān)概念:外植體：從活植物體上切下進(jìn)行培養(yǎng)的那部分細(xì)胞、組織或器官。脫分化：產(chǎn)生愈傷組織。 愈

23、傷組織:細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則。（二）影響組織培養(yǎng)的因素1.外植體的選?。何撮_花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。3.不同植物激素濃度，使用順序和使用量先細(xì)胞分裂素，后生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂也分化比值低時(shí)，促芽分化，抑根形成4.消毒：無菌。 5.pH、溫度、光照：pH=5.8；溫度1822；照射12。二、實(shí)驗(yàn)操作（一）MS固體培養(yǎng)基制備1配置各種母液：10倍，微量元素濃縮100倍，常溫保存。（二）外植體消毒2消毒： 酒精處理： 23次， 67s。消毒液處理： 3次。（三）接種2無菌操作要求：酒精燈火焰旁；用火焰灼燒滅菌；蓋好瓶蓋。4接種注意事項(xiàng)胡蘿卜34塊，菊的莖或葉68塊。方向，不要倒插；吸收水分和養(yǎng)分。

24、思考：應(yīng)該做幾組重復(fù)、設(shè)置幾組對(duì)照實(shí)驗(yàn)？答：每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。（四）培養(yǎng)1愈傷組織的培養(yǎng)：繼代培養(yǎng)。2愈傷組織的繼代培養(yǎng)：11.5。課本答案和提示課題成果評(píng)價(jià)（一）對(duì)接種操作中污染情況的分析接種34 d后，在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng)物會(huì)表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。請(qǐng)學(xué)生適時(shí)統(tǒng)計(jì)污染率，分析接種操作是否符合無菌要求。（二）是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，看看是否培養(yǎng)出了愈傷組織，記錄多長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)出愈傷組織。統(tǒng)計(jì)更換培養(yǎng)基后愈傷組織進(jìn)一步分化成根和芽的比例和時(shí)間。（三）是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄做好統(tǒng)