硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程

1、題目： 硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程編 碼ZL2-頁 碼共19 頁版 本1復(fù)印份數(shù)：起草人：茍希俠審核人：批準(zhǔn)人：頒發(fā)部門：質(zhì)量管理部分發(fā)部門：辦公室執(zhí)行日期：變更記錄修訂號 批準(zhǔn)人 執(zhí)行日期變更原因及目的：·目的 指導(dǎo)硫酸奈替米星原料的檢驗，為硫酸奈替米星原料的檢驗提供書面依據(jù)。·范圍 硫酸奈替米星原料。·責(zé)任 中心檢驗室、檢驗員。·內(nèi)容1、性狀1.1.1取本品少量放在白紙板上目視觀察為白色或類白色粉末或疏松塊狀物。1.1.2取本品少許放入口中味微苦，用鼻聞無臭。1.1.3取本品少量，置潔凈的燒杯中，久置于空氣中變?yōu)榈S色。 1.1.4取本品1g加10ml

2、水全部溶解。1.1.5取本品1g分別用10000ml乙醇、氯仿者不能全部溶解。1.2比旋度 1.2.1檢驗用具：WZZ2A型旋光儀1.2.2供試品溶液的制備：精密量取本品適量，用水制成10mg/ml作為供試品溶液。1.2.3按WZZ2A型旋光儀操作規(guī)程打開旋光儀，穩(wěn)定15分鐘。1.2.4將水注入試管中排除汽泡作為空白溶液，校零。共19 頁第1頁1.2.5將供試品溶液注入試管中排除汽泡，測定記錄顯示屏數(shù)據(jù)，按下復(fù)測按鈕反復(fù)寫3次 取平均值吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程計算公式：（a）=100A / LC其中：L為試管長度，C為100ml中所含溶值克數(shù)，A為測得旋光度。1.2.6 注

3、意事項 1.2.6.1每次測定前應(yīng)以溶劑作空白校正，測定后，再校正1次以確定在測定時零點有無變化，如第2次校正發(fā)現(xiàn)零點有變動，則應(yīng)重新測定旋光度。1.2.6.2 對溫度有嚴(yán)格要求的供試品，在測定前應(yīng)將儀器及供試品置規(guī)定溫度的恒溫水浴箱內(nèi)恒溫至少1小時，如有特殊規(guī)定溫度應(yīng)調(diào)節(jié)至120±0.5。1.2.6.3 未接通電源前應(yīng)檢查儀器樣品室內(nèi)有無異物，鈉光燈和其它示數(shù)開關(guān)是否放在有關(guān)或規(guī)定的位置，鈉光燈啟輝后儀器不許搬動，以免損壞鈉光燈。 1.2.6.4 鈉光燈啟輝后至少20分鐘后發(fā)光才穩(wěn)定，測定或讀數(shù)對應(yīng)在鈉光燈穩(wěn)定后讀數(shù)，盡量使用直流電路供電，不測定時，間隔置于交流供電，以延長鈉光燈壽

4、命。 1.2.6.5 測定零點或停點時，必須按動復(fù)測鈕數(shù)次使檢偏鏡分別向左或向右偏離光學(xué)零位，減少儀器的機械誤差，同進通過觀察左右復(fù)測數(shù)次的停點，檢查儀器的重復(fù)性和穩(wěn)定性，必要時，也可用旋光標(biāo)準(zhǔn)石英管校正儀器的準(zhǔn)確度。 1.2.6.6 測定管若有汽泡，應(yīng)先使汽泡浮于凸頸處或除去透光面兩側(cè)的玻璃，應(yīng)用軟布擦干。 1.2.6.7 測定管兩端的螺帽應(yīng)旋至適中的位置，并注意測定管測定時的位置和方向。 2、鑒別 2.1.1鑒別用儀器：薄層色譜硅膠G薄層板、層析缸。2.1.2鑒別用試液：二氯甲烷、甲醇、濃氨溶液；0.2%茚三酮的水飽和正丁醇溶液：取0.2g茚三酮加水飽和的正丁醇溶液（向正丁醇中國入水充分混

5、勻即可）。 2.1.3 供試品溶液的制備：取本品適量制成3mg/ml的溶液即可。2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備：取奈替米星標(biāo)準(zhǔn)品適量制成3mg/ml的溶液。2.1.5 取2.1.3 及2.1.4的兩種溶液按1：1比例混合。2.2操作步驟2.2.1照薄層色譜法將三種溶液各2ml點于同一薄層板上。共19頁第2頁2.2.2 以二氯甲烷甲醇濃氨溶液（4：4：2）為展開劑展開晾開。吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程2.2.3 噴以0.2%茚三酮的水飽和正丁醇溶液。 2.2.4 在110加熱20分鐘即可顯示出斑點。2.2.5 注意事項2.2. 5.1 點樣時，樣點為圓點，點樣基線距底邊2.0cm，

6、點樣時切勿操作薄層表面。2.2.5.2 將點好樣品的薄層板放入展開劑的濃度為距，薄層板底邊0.51.0cm（切勿將樣點浸入展開劑中）密封缸蓋，待展開至規(guī)定距離（1015cm）取出薄層板晾干。3、酸度3.1檢驗用儀器：PHS3C型酸度計及其復(fù)合電極。3.2檢驗步驟：3.2.1取本品適量加水制成40mg/ml溶液作為供試品溶液。3.2.2打開PHS3C型酸度計電源，將溫控旋鈕調(diào)制室溫穩(wěn)定15分鐘。3.2.3用鄰苯二鉀緩沖液定位，用混合磷酸鹽緩沖液校正。3.2.4供試品溶液浸沒復(fù)合電極，輕輕晃動，放穩(wěn)后看顯示屏讀數(shù)反復(fù)測定3次取平均值。3.3注意事項3.3.1酸度計的精密度和準(zhǔn)確度應(yīng)符合規(guī)定每年檢定

7、一次。3.3.2應(yīng)用新沸過并冷至室溫的純化水制備緩沖液，用標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校正和測定供試品溶液前，用水充分洗滌電極并用濾紙將水吸干。3.3.3標(biāo)準(zhǔn)緩沖液配置后可使用23個月，但發(fā)現(xiàn)有混濁，發(fā)毒或沉淀現(xiàn)象時應(yīng)停止使用重新配制。3.3.4復(fù)合電極使用期限為一年。4、溶液澄清度4.1試劑烏洛托品（AR級）、硫酸肼（AR級） 4.2儀器與用具容量瓶、恒溫干燥箱 4.3操作步驟：共19頁第3頁4.3.1本法系在室溫條件下，將用水稀釋至一定濃度的供試品溶液與等量的濁度標(biāo)準(zhǔn)液分別置于配對的比濁用玻璃等（內(nèi)徑1516mm，平底，具塞，以無色、透明、中性硬質(zhì)玻璃制成）中，在濁度標(biāo)準(zhǔn)液制備5分鐘后，在暗室內(nèi)垂直同置于傘

8、棚燈下，照度為1000LX，從水平方向觀察、比較；用以檢查溶液的澄清度或其渾濁度程序。除另有規(guī)定外，供試品溶解后應(yīng)立即檢視。正文中規(guī)定的“澄清”，系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過0.5濁度標(biāo)準(zhǔn)液。吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程4.3.2濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備：稱取105干燥至恒重的硫酸肼1.00g，置100ml置瓶中，加水適量使溶解，必要時可在40的水浴中溫?zé)崛芙?，并用水稀釋至刻度，搖勻，放置46小時；取此溶液與等容量的10%烏洛托品溶液混合，搖勻，于25避光靜置24小時，即得。本液置冷處避光保存，可在兩個月內(nèi)使用，用前搖勻。4.3.3濁度標(biāo)準(zhǔn)原液的制備：取濁度標(biāo)準(zhǔn)貯

9、備液15.0ml，置1000ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，取適量置1cm吸池中，照分光光度法。在550nm的波長處測定，其吸收度應(yīng)在0.120.15范圍內(nèi)。本液應(yīng)在48小時內(nèi)使用，用前搖勻。4.3.4渾濁度標(biāo)準(zhǔn)液的制備取濁度標(biāo)準(zhǔn)原液與水，按下表配制，即得。本液應(yīng)臨用時制備，使用前充分搖勻。級號0.51234濁度標(biāo)準(zhǔn)原油/ml水/ml2.5097.505.095.010.090.030.070.050.050.05、溶液顏色5.1試劑K2Cr2O7(AR級) 、 CuSO4(AR級) 、 Na2SO3(AR級) 、 CoCl2、 EDTA2Na 5.2儀器與用具納氏比色管 5.3操作步驟：

10、5.3.1第一法：除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的供試品，加水溶解，置于25ml的納氏比色管中，兩管同置白色背景上，自上向下透視，或同置白色背景前，平視觀察；供試品管呈的顏色與對照比較，不得更深。共19頁第4頁 5.3.1.1比色用重鉻酸鉀液：取重鉻酸鉀，研細后，在120干燥至恒重，精密稱取0.4000g，置500ml量瓶中，加適量水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。每1ml溶液中含0.800mg的K2Cr2O7。吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程 5.3.1.2比色用硫酸銅液：取硫酸銅約32.5g，加適量的鹽酸溶液（140）使溶解成500ml，精密量取10ml，置碘量瓶中，加水50m

11、l、醋酸4ml與碘化鉀2g，用硫代硫酸鈉滴定液 （0.1mol/L）滴定，至近終點時，加淀粉指示液2ml，繼續(xù)滴定至藍色消失。每1ml硫代太酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于24.97mg的CuSO45H2O。根據(jù)上述測定結(jié)果，在剩余的原溶液中加適量的鹽酸溶液（140），使每1ml溶液中適含62.4mg的CuSO45H2O，即得。 5.3.1.3比色用氯化鉆液：取氯化鉆約32.5g，加適量的鹽酸溶液加氨試液至溶液加氨試液至溶液由淺紅色轉(zhuǎn)變至綠色后，加醋酸醋酸鈉緩沖液（pH6.0）10ml，加熱至60，再加二甲酚橙指示液5滴，用乙二胺四臘酸二鈉滴定液（0.5mol/L）相當(dāng)于11.90mg的C

12、oCl26H2O。根據(jù)上述測定結(jié)果，在剩余的原溶液中加適量的鹽酸溶液（140），使每1ml溶液中適含59.5mg的CoCl26H2O，即得。 5.3.1.4個種色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備：按下標(biāo)量了比色用氯化鉆液、比色用重鉻酸鉀液、比色用硫酸銅液與水搖勻，即得。各種色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)貯備液的配制表色 調(diào)比色用氯化鉆液/ml比色用重鉻酸鉀液/ml比色用硫酸銅液/ml水/ml黃綠色黃色橙黃色橙紅色棕紅色22.51.24.010.612.012.522.823.319.020.020.07.204.0045.068.872.766.4680 各種色調(diào)色號標(biāo)準(zhǔn)比色液的制備按下表量取各色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)貯備液與水，搖勻，即得。

13、各色調(diào)號標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制表色號12345678910貯備液加水量/ml0.59.51.09.01.59.02.08.02.57.53.07.04.55.56.04.07.52.510.006、有關(guān)物質(zhì)共19頁第5頁6.1檢驗用儀器：薄層色譜板、層析缸。吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程6.2檢驗用試劑：三氯甲烷、甲醇、濃氨溶液 0.2%茚三酮的水飽和正丁醇溶液。6.3標(biāo)準(zhǔn)品溶液：取奈替米星標(biāo)準(zhǔn)品制成1.5mg/ml和3mg/ml的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液（1）、（2）取西梭米星標(biāo)準(zhǔn)品加水制成1.44mg/ml的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液（3）。6.4供試品溶液的制備：取本品加水制成150mg/

14、ml的溶液作為供試品溶液。6.5操作步驟：6.5.1照薄層色譜法將四種溶液各2ml點于同一薄層板上。6.5.2以二氯甲烷，甲醇濃氨溶液（4：4：2）為展開劑展開，晾干。6.5.3噴以0.2%茚三同水飽和正丁醇溶液。6.5.4在110加熱20分鐘，即可顯出斑點。6.6注意事項6.6.1點樣時，樣點為圓點，點樣距線底邊2.0cm點樣時切勿損傷薄層表面。6.6.2將點好樣品的薄層板放入展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.51.0cm（切勿將樣點浸入展開劑中）密封缸蓋，待展開至規(guī)定距離（1015cm）取出薄層板，晾干。7、硫酸鹽7.1儀器與用具：三角燒杯、滴定管、移液管7.2操作步驟： 7.2

15、.1精密稱取本品約0.12g，加水100ml使溶解7.2.2用濃氨溶液調(diào)節(jié)PH至11。7.2.3精密加氯化鋇滴定液（0.1mol/L）10ml，酞紫指示劑5滴。7.2.4用乙二胺四醋酸二鈉滴定液（0.05 mol/L）滴定。7.2.5至紫色開始消退加入乙醇50ml，繼續(xù)滴定，只藍色消失。7.3注意事項：滴定過程PH保持11。7.4計算公式：V×9.601×F共19頁第6頁 ×100% m吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程8、細菌內(nèi)毒素8.1檢驗用材料鱟試劑（0.5Eu/ml）、細菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品、細菌內(nèi)毒素檢查用水。8.2檢驗用設(shè)備電熱干燥箱，恒溫水浴

16、箱，酒精溫度計，旋渦混合器。8.3檢驗用具移液管、封口膜、時鐘、試管8.4檢驗步驟8.4.1將移液管用洗滌劑和自來水洗凈，控干水分后，置洗液中浸泡4小時，取出將洗液控干，用自來水將殘余的洗液洗凈，再用新鮮純化水沖洗干凈后置適宜的密閉金屬容器中，迅速置干燥箱中。8.4.2將玻璃器皿置恒溫干燥箱后，將恒溫干燥箱調(diào)至250，待恒溫干燥箱溫度升至設(shè)定溫度后，記時1小時后，關(guān)斷電源，待恒溫干燥箱溫度自然降至室溫，取出金屬容器。8.4.3取細菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品1支，輕彈瓶壁，使粉末落入瓶底，用75%酒精棉球擦拭后開啟，（應(yīng)防止玻璃屑落入瓶內(nèi)）。按標(biāo)準(zhǔn)使用說明書用移液管加入規(guī)定量的細菌內(nèi)毒素檢查用水，用封口

17、膜將瓶口封嚴(yán)，置旋渦混合器上混合15分鐘，再用內(nèi)毒素檢查用水制成1Eu/ml濃度的內(nèi)毒素溶液，作陽性對照液。8.4.4取本品加內(nèi)毒素檢查用水使之稀釋成0.25mg/ml作為供試品，備用。8.4.5再取1支細菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品，按10.4.3方法，用本品制成1.0Eu/ml，作為供試品陽性對照液備用。8.4.6在制備內(nèi)毒素溶液和供試品陽性對照液的同時，取0.1ml/支的鱟試劑8支，手指輕彈瓶壁瓶頸部，使頸部瓶壁上的粉未落入瓶內(nèi)，用75%乙醇棉球擦拭瓶外壁后，開啟，加入0.1ml內(nèi)毒素檢驗用水輕輕轉(zhuǎn)動瓶壁，使內(nèi)容物充分溶解，避免產(chǎn)生氣泡。8.4.7取溶解后的鱟試劑原安瓿8支，取其中2支各加入供試品

18、0.1ml作供試品管。8.4.8其中2支加0.1ml的內(nèi)毒素陽性對照溶液，作陽性對照管。8.4.9其中2支加入0.1ml的內(nèi)毒素檢查用水陰性對照管。共19頁第7頁8.4.10其中2支加入0.1ml的供試品陽性對照液，作為供試品陽性對照管。8.4.11將試管中溶液輕輕混勻后，用封口膜封閉管口，垂直放入37±1水浴中，保溫60±2分鐘，此過程應(yīng)避免受震動，以免造成假陰性結(jié)果。吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程8.4.12將試管從水浴中輕輕取出，緩緩倒轉(zhuǎn)180：其中管內(nèi)凝膠不變形、不滑脫者為陽性，凝膠不能保持完整，并從管壁滑脫者為陰性。8.4.13供應(yīng)品2管均為陰性，陰

19、性管為陰性，陽性管和供試品陽性對照為陽性，應(yīng)認為符合規(guī)定，否則應(yīng)另取復(fù)試。8.5注意8.5.1實驗前，須用肥皂洗手，用75%乙醇棉球消毒。8.5.2試驗時須戴工作帽和口罩。8.5.3本試驗應(yīng)在潔凈室或潔凈工作臺內(nèi)進行。8.5.4用移液管吸取樣品時，須用洗球，勿用嘴吸、吹，防止唾液濺入。9、水分9.1檢驗試劑 I2（AR級）、SO2（AR級）、C5H5N（AR級）、無水CH3O4（AR級）9.2儀器與用具附滴定裝置的棕色瓶、微量水分測定儀9.3操作步驟9.3.1原理： 本法是根據(jù)碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中能與水起定量反映的原理以測定水分。所用儀器應(yīng)干燥，并能避免空氣中水分的侵入；測定操作者宜

20、在干燥處進行。本法即為費休氏法中的容量測定法。9.3.2費休氏試液的制備與標(biāo)定9.3.2.1配制：稱取碘（置硫酸干燥器內(nèi)48小時以上）110g，置干燥的具塞燒瓶中，加污水吡啶160ml，注意冷卻，振搖至碘全部溶解后，加無水甲醇300ml，稱定重量，將燒瓶置冰浴中冷卻，通入干燥的二氧化硫置重量增加72g，在加無水甲醇使成1000ml，密塞，搖勻，在暗處放置24小時。本液應(yīng)遮光，密封，置陰涼干燥處保存。臨用前主在標(biāo)定濃度。共19頁第8頁9.3.2.2標(biāo)定：用水份測定儀直接標(biāo)定?；蛉「稍锏木呷Ｆ?，精密稱入重蒸餾水約30mg，除另有規(guī)定外加無水甲醇25ml，用本液滴定至溶液由淺黃色變?yōu)榧t棕色，或用永

21、停滴定法指示終點：加作空白試驗，按下式計算。吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程WF = A- B式中 F為每1ml費休氏試液相當(dāng)于水的重量，mg；W為稱取重蒸餾水的重量，mg；A為滴定所消耗費休氏試液的容積，ml；B為空白所消耗費休氏試液的容積，ml。9.3.2.3測定法：精密稱取供試品適量（約消耗費休氏試液15ml），除另有規(guī)定外，溶劑為甲醇，用水分測定儀直接測定?；?qū)⒐┰嚻分粮稍锏木呷Ｆ恐?，加溶?5ml，在不斷振搖（或攪拌）下用費休氏試液滴定至溶液由淺黃色變?yōu)榧t棕色，或用永停滴定法指示終點；另作空白試驗，按下式計算。（A-B）F供試品中水分含量（%） = ×100%

22、W式中 A為供試品所消耗費休氏試液的容積，ml； B為空白所消耗費休氏試液的容積，ml； F為每1ml費休氏試液相當(dāng)于水的質(zhì)量，mg； W為供試品的重量，mg。9.4注意事項：9.12.1配制時所用試劑的純度，特別是含水量應(yīng)嚴(yán)格控制在0.1%一下，如試劑水分超過規(guī)定，可是選用干燥的分子篩將其水分除掉后再用。本試液接觸的一切儀器均應(yīng)清潔干燥，標(biāo)定或測定時宜在干燥環(huán)境中進行。9.12.2配制本試液時必須配戴眼鏡等保護用具。9.12.3本試液不穩(wěn)定，隨放置時間增加濃度逐漸降低，因為碘、二氧化硫、吡啶、甲醇四中組分在一起容易發(fā)生副反應(yīng)。當(dāng)F值降低至3.0mg/ml以下時，滴定終點不敏銳，不宜再用。F值

23、應(yīng)在12.0mg/ml以上。9.12.4某些固體供試品需先溶于無水甲醇（或規(guī)定溶劑）25ml中，在以法測定。另作空白試驗矯正。共19頁第9頁10、熾灼殘渣吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程10.1儀器與用具：高溫爐、坩鍋、坩鍋鉗、通風(fēng)柜。10.2試藥與試液硫酸（分析純）10.3操作方法10.3.1空坩鍋恒重 取坩鍋置于高溫爐內(nèi)，將蓋子斜蓋在坩鍋上，經(jīng)700-800熾灼約3060分鐘，取出坩鍋，稍冷片刻，移置干燥器內(nèi)并蓋上蓋子，放冷至室溫（一般約需60分鐘），精密稱定坩鍋重量。再在上述條件下熾灼約30分鐘，取出，置干燥器內(nèi)放冷、稱重、重復(fù)數(shù)次直到恒重。 10.3.2稱取供試品 取供試品

24、2.0g，置已熾灼恒重的坩鍋內(nèi)，精密稱定；10.3.3炭化 將盛有供試品的坩鍋斜置電爐上（避免供試品驟然膨脹而逸出），熾灼至供試品全部炭化呈黑色，并不冒濃煙，放冷至室溫。“炭化”操作應(yīng)在通風(fēng)柜內(nèi)進行。10.3.4灰化 除另有規(guī)定外，滴加硫酸0.5-1.0ml，使灰化物全部濕潤，繼續(xù)在電爐或煤氣燈上加熱至硫酸蒸氣除盡，白煙完全消失（以上操作應(yīng)在通風(fēng)柜內(nèi)進行），將坩鍋移置高溫爐內(nèi)，蓋子斜蓋于坩鍋上，在700-800熾灼約60分鐘，使供試品完全灰化；10.3.5恒重 按操作方法（13.3.1）自“取出坩鍋稍冷片刻”起，依法操作，直至恒重。10.4注意事項熾灼殘渣檢查同時做幾份時，坩鍋宜預(yù)先編碼標(biāo)記，

25、蓋子與坩鍋應(yīng)編碼一致。坩鍋從高溫爐取出的先后次序，在干燥器內(nèi)的放冷時間，以及稱量順序，均應(yīng)前后一致；每一干燥器同時放置坩鍋最好不超過4個，否則不易恒重。11、重金屬11.1儀器與用具：納氏比色管、過濾器、濾膜、50ml注射器11.2試藥和試液11.2.1標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液 精密稱取在105干燥至恒重的硝酸鉛0.1598g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml與水50ml溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當(dāng)于10g的Pb）11.2.2硫代乙酰胺試液、硫化鈉試液、醋酸鹽緩沖（pH3.5）與抗壞血酸等均按藥典規(guī)定

26、。共19頁第10頁11.2.3稀焦糖溶液 取蔗糖或葡萄糖約5g，置磁坩堝中，在玻璃棒下斷攪拌下，加熱至呈棕色糊狀，放冷，用水溶解成約25ml，濾過，貯于滴瓶中備用。臨用時，根據(jù)供試液色澤深淺，取適當(dāng)量調(diào)節(jié)使用。吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程11.3操作方法11.3.1取熾灼殘渣項下遺留的殘渣，加硝酸0.5ml蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后，加水15ml滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，微熱溶解后，移至乙管中，加水稀釋成25ml。11.3.2空白對照的制備：取配制供試溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（pH3

27、.5）2ml與水15ml微熱溶解后，移至甲管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，加水稀釋成25ml。11.4注意事項11.4.1在弱酸條件下測定時，應(yīng)嚴(yán)格控制溶液的酸堿度，因為pH值3.0-3.5，硫化物沉淀比較完全，酸度太大或太小都使顏色顯色淺，從而結(jié)果不正確。11.4.2本法以10g -20gPb35ml所產(chǎn)生的渾濁度為最佳目視比色范圍。11.4.3在酸性溶液中檢查重金屬，以硫代乙酰胺試液作為顯色劑，如用硫化鈉試液，容易分解析出硫，引起渾濁而影響比色。在堿性溶液中，則用硫化鈉試劑作為顯色劑。11.4.6供試品在未加硫乙酰胺以前帶色，可用稀焦糖液，將標(biāo)準(zhǔn)溶液調(diào)整，使兩者顏色一致，而后加硫代乙酰胺；若滴加

28、稀焦糖溶液，仍不能使顏色一致時，可加其他對測無干擾的試液，如加常用的指示液調(diào)色。如按上述方法仍不能使供試品管與標(biāo)準(zhǔn)管顏色一致時，可取該藥品上規(guī)定的二倍量的供試品試液，加水溶解后，分成兩等分，在一分中加硫代乙酰胺試液，用濾膜（孔徑3m）濾除金屬硫化物沉淀后，加入規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液作為對照溶液，再與另一分供試溶液按藥典規(guī)定方法處理比較?；蛘邔⒐┰嚻纷饔袡C破壞，除去顏色，再作重金屬檢查。11.4.7微量高鐵離子的存在，能在弱酸溶液中氧化硫化氫溶液而析出硫，產(chǎn)生渾濁而影響重金屬的比色，因此必須除去；藥典中利用加入抗壞血酸或鹽酸羥胺使微量高鐵還原成亞鐵離子，因亞鐵不干擾檢查。11.4.9藥品本身生成不溶

29、性硫化物，影響重金屬的檢查，可加入掩蔽劑以避免干擾。如檢查硫酸鋅或葡萄糖酸銻鈉中的重金屬，在堿性溶液中加入氰化鉀或在中性溶液中加入酒石酸，使與鋅離子或銻離子生成穩(wěn)定的絡(luò)合物，再依次檢查鉛鹽。共19頁第11頁11.4.10含有Pb2+的中性或弱酸性溶液，經(jīng)濾紙過濾時，因濾紙能吸附Pb2+而造成Pb2+的大量損失，故一般不應(yīng)經(jīng)過濾。必要時可加對酚酞呈微堿性的飽和醋酸銨溶液，溫?zé)岷笥弥睆捷^小的定量濾紙濾過。吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程11.4.11具有芳環(huán)或雜環(huán)的有機藥物，如需先行熾灼破壞，右按中國藥典（1995年版二部附錄制（H）操作，使與有機物分子結(jié)合的重金屬游離，但應(yīng)注意熾灼的

30、溫度不能高于600，以免重金屬損失，溫度適宜。11.4.12為了消除鹽酸或其他試劑可能夾雜重金屬，故在配制供試品溶液時，如使用鹽酸超過1ml（或與鹽酸1ml相當(dāng)?shù)南←}酸）使用氨試液超過2ml，以及用硫酸與硝酸進行有機破壞，或加入其他試劑進行處理者，除另有規(guī)定外，對照溶液應(yīng)取同樣量試藥在坩堝或瓷皿中蒸干后，依法檢查。11.4.13為使有機物分解破壞完全，熾灼殘渣需加硝酸加熱處理，故必須蒸干除去氧化氮，否則，亞硝酸可氧化硫化氫析出硫，影響比色檢查。蒸干后殘渣加鹽酸處理，使重金屬鹽成為鹽酸鹽，置水浴上蒸干，趕除殘留鹽酸，再加蒸餾水溶解，以氨試液調(diào)至對酚酞指示液顯中性，依法檢查，使供試品液的pH值仍為

31、3.5左右。11.4.14標(biāo)準(zhǔn)鉛液應(yīng)在臨用前，精密量取鉛貯備液新鮮配制，使用不得超過一周，以防止鉛的水解而造成誤差，否則貯存時間過久，顯色不得超過一周，以防止鉛的水解而造成誤差，否則貯存時間過久，顯色愈淺。但硝酸鉛貯備液（內(nèi)含適量硝酸，可防止水解），則可放置較長時間，并需注意制標(biāo)準(zhǔn)鉛液用的玻璃儀器，均不得有鉛的雜質(zhì)。11.4.15硫化鈉試液穩(wěn)定性與硫化鈉的純度的很大關(guān)系，采用分析純硫化鈉配制，貯存色瓶中可保持12個月。11.4.16硫代乙酰胺在弱酸性條件下水解，產(chǎn)生硫化氫，可與重金屬離子生成有色硫化物的均勻混懸液。PH3.5 11.5記錄與計算11.5.1計算標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液度計算207.2

32、5;0.1598×1000 331.2×10001mol的硝酸鉛Pb（No3）2的質(zhì)量為331.2g，含鉛（Pb）207.2g；稱取硝酸鉛0.1598g配成1000ml貯備液，含Pb量為： 0.1mg/ml貯備液依法稀釋十倍后所得標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的濃度為每1ml含10µg的Pb。共19頁第12頁11.5.1.2重金屬限量計算 吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液體積（ml）×標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度（g/ml）供試品理（g）重金屬限量 ×100 11.5.1.3標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液取樣量計算 根據(jù)取供試品量及限量計算，如取供試品2.0g，依法檢查，規(guī)定

33、含重金屬不得過百萬分之五，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（10gPBml）多少毫升？重金屬限量×供試品重（g）標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度(g/ml)（/V 11.6結(jié)果判定11.6.1甲管與乙管比較，乙管所呈顏色淺于甲管，判為符合規(guī)定。12、含量12.1儀器與用具12.1.1 操作室光線明亮，操作室應(yīng)分為兩面三刀部分，彼此分開；一部分為一般操作間，一部分為半無菌操作間半無菌操作間，設(shè)有紫外線燈達到空氣消毒。應(yīng)裝有空調(diào)設(shè)備，控制室溫在。操作臺可用穩(wěn)固的水泥臺，臺而用玻璃板墊平，用水平儀校準(zhǔn)，保持水平。室內(nèi)注意抗生素的污染。12.1.2 雙碟 為硬質(zhì)玻璃或塑料培養(yǎng)平皿，內(nèi)徑約90mm,高1617mm,碟底厚薄均勻水

34、平，無氣泡。碟底平度檢查，可將雙碟放在水平臺上，下墊一張白紙，碟內(nèi)加水23ml,再滴加藍墨水，觀察藍色深淺是否一致。用過的雙碟經(jīng)高壓滅菌倒出培養(yǎng)基后，置玻璃儀器專用洗液或其它清洗液中浸泡過夜，沖洗，瀝干，置150160干熱滅菌2小時或高壓121蒸汽滅菌30分鐘，備用。12.1.3陶瓦蓋 內(nèi)徑約103mm，外徑108mm，平坦，吸水性強，應(yīng)定期干燥、清洗。12.1.4鋼管 內(nèi)徑（6.1±0.1）mm外徑（8.0±0.1）或（7.8±0.1）mm,每套鋼管重量差異不超過±0.05g，內(nèi)外壁及兩端面光潔平坦，管壁厚薄一致。每次使用后應(yīng)置11000新潔爾滅溶液內(nèi)

35、，浸泡2小時以上，進行滅菌后再行洗滌，先用水洗滌，超聲波超聲30分鐘或用沾有去污粉的沙布條串擦內(nèi)外壁，水沖洗，淋干，再用蒸餾水沖洗3次后，置帶蓋的容器內(nèi)，在150160干熱滅菌2小時備用。共19頁第13頁12.1.5鋼管放置器 置于半無菌操作間內(nèi)，有6孔和4孔兩種，鋼管下落時應(yīng)垂直平穩(wěn)、位置正確，雙碟升降平穩(wěn)。應(yīng)保持清潔，防止抗生素污染。可定期用75乙醇棉擦拭，并用乙醇棉火焰燒小孔。置鋼管的玻璃管定期干烤滅菌。吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程恒溫培養(yǎng)箱 隔水式，3537及2426，隔板上可備有帶孔的玻璃板并墊平。滅菌刻度吸管 吸取菌液及培養(yǎng)基用。試驗用后應(yīng)立即置5石炭酸或1：100

36、0新潔爾滅溶液中消毒后再按玻璃容器常規(guī)洗滌。吸口處塞入脫脂棉（應(yīng)松動，透氣），置適宜容器中，120以上干革命熱滅菌2小時或121蒸氣滅菌30分鐘，烘干備用。12.1.6玻璃容器 包括滴定管、移液管、刻度尺、容量瓶等，按“下班器皿檢定規(guī)程”進行標(biāo)定，要符合一等品規(guī)定，每次應(yīng)用前用潔液浸泡，水沖洗、蒸餾水沖洗3次，淋干。12.1.7稱量瓶 具塞，重量在10g以下。用畢先用水沖洗、淋干，置清潔液浸泡2小時以上，水洗、蒸餾水沖洗3次，置潔凈的大平皿中，在120干熱3小時，待冷至7060時，取出置于干燥器中備用 。12.1.8毛細滴管 用玻璃管拉制，管口光滑。應(yīng)用清潔液浸泡、水沖洗、蒸餾水沖洗3次，置適

37、宜容器中，在120干燥3小時后備用 。12.1.9 天平 分析天平，感量0.1mg.12.2.0 抑菌圈直徑（面積）測量儀12.2.1 可用ZX-300A型或CHB型抑菌圈面積測量儀及適當(dāng)?shù)臏y試儀。儀器必須按抑菌圈測量儀檢驗規(guī)程檢驗，符合規(guī)定者方能應(yīng)用。12.2.2游標(biāo)卡尺 精度0.05mm,長度125mm。12.2.3超凈工作室用于菌種的接種或傳代.超凈工作臺須置潔凈工作室或半無菌室內(nèi)。12.2.4試液 磷酸鹽緩沖液(PH7.8),取磷酸氫二鉀5.59g與磷酸氫二鉀0.41g,加水使成1000ml,濾過。12.2.5培養(yǎng)基號培養(yǎng)基。12.2.6試驗用菌種短小芽胞桿菌，為冷凍干燥菌種。12.2

38、.7菌種的復(fù)蘇與保存 在無菌室或超凈工作臺內(nèi)進行。12.2.8 菌種的復(fù)蘇12.2.9 把凍干菌種管、滅菌1ml毛細滴管、雙碟、鑷子、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂斜面數(shù)支，移入接種室或超凈工作臺。12.3.0將凍干菌種管外壁用碘灑擦洗消毒、稍干，用75乙醇棉擦凈，放在滅菌雙碟內(nèi)，待干。點燃酒精燈，將菌種管的封口一端在火焰上，燒灼紅熱，用滅菌毛細滴管吸取營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，滴在灼熱的菌種管封口一端，使驟冷而炸裂。共19頁第14頁12.3.1取滅菌鑷子,大火焰旁,將炸裂的管口打開,放入滅菌雙碟內(nèi),另取一支毛細滴管,在火焰旁吸取營養(yǎng)肉湯少許,加至菌種管底部,將凍干菌塊攪動促使溶解,隨即吸出管內(nèi)菌液,分別接種

39、至營養(yǎng)瓊脂斜面及普通肉湯內(nèi),并將毛細滴管及菌種管投入消毒液內(nèi),將已接種的營養(yǎng)肉湯及營養(yǎng)瓊脂斜面置3537培養(yǎng)2224小時。吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程12.3.2 取出培養(yǎng)物,仔細觀察菌苔形態(tài)、有無雜菌、涂片、革蘭氏鏡檢，呈典型菌落后，轉(zhuǎn)種3代即可應(yīng)用。如發(fā)現(xiàn)菌形不典型，可進行平板分離單菌落。12.3.3 菌種的接種與保存12.3.4準(zhǔn)備需用的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基應(yīng)新鮮制備,如斜面已無冷凝水者,不宜再使用.標(biāo)簽上注明菌名及接種日期.自冰箱取出的菌種斜面,應(yīng)在室溫放置約30分鐘,待溫度平衡后再移入接種室或超凈工作臺。12.3.5點燃酒精或其它燈,在左手握住菌種斜面,將管口靠近火焰旁,右

40、手接處棒后端,將接種環(huán)燒紅30秒鐘,隨后將全部接種棒金屬部分在火焰上燒灼,往反通過3次.右手用無名指、小指及掌部夾住棉塞，左手將管口在火焰上旋轉(zhuǎn)燒灼，右手再輕輕撥開棉塞，將接種環(huán)伸入管內(nèi)先在近壁的瓊脂斜面上靠一下，稍冷卻再移至菌苔上，刮取少量菌苔，隨即取出接種棒，并將菌種管口移至火焰旁。堵上棉塞，左手將菌種管放下，取營養(yǎng)瓊脂斜面支，照上述操作打開棉塞，將接種環(huán)伸入管內(nèi)至瓊脂斜面的底部，由底向上，將接種環(huán)輕貼斜面的表面曲折移動，使細菌劃在斜面的表面上。12.3.6取出接種棒,在火焰旁將培養(yǎng)基管棉塞堵上,然后將接種過細菌的接種棒在火焰上燒灼滅菌。12.3.7將已接種畢的細菌管置3537培養(yǎng)2224

41、小時，霉菌管一般置2425霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)7日.取出后放入冰箱保存,一般13個月轉(zhuǎn)種一次。12.3.8菌懸液的制備12.3.9短小芽孢桿菌Bacillus pumilus CMCC(B)63202懸液 取短小芽孢桿菌工作用菌種營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，加滅菌水12ml將菌苔洗下，制成懸液，用吸管將此懸液接種至盛有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的扁瓶內(nèi)，均勻攤布，在3537培養(yǎng)7日。取菌苔少許涂片，革蘭氏染色鏡檢，應(yīng)有芽孢85以上，用滅菌水10ml將芽孢洗下，制成芽孢懸液，合并至滅菌大試管內(nèi)，在7075水浴內(nèi)加熱30分鐘將菌體殺死，待冷后放冰箱貯藏為濃菌液。12.4 操作方法12.4.1 稱量12.4.1.1 稱量前

42、,將標(biāo)準(zhǔn)品從冰箱取出,使與室溫平衡;供試品應(yīng)放于干燥器內(nèi)至少30分鐘方可稱取.共19頁第15頁12.4.1.2 稱量 供試品吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程與標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用同一天平;吸濕性較強的搞生素,在稱量前12小時更換天平內(nèi)干燥劑.12.4.1.3 標(biāo)準(zhǔn)品與供試品的稱量最好一次取樣稱取,不得將已取出的標(biāo)準(zhǔn)品或供試品倒回原容器內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)品稱量不可少于20mg,取樣后立即將稱量瓶或適宜的容器及被稱物蓋好,以免吸水.稱樣量的計算：WV.CP式中 W為需稱取標(biāo)準(zhǔn)品或供試品的重量（mg）;V 為溶解標(biāo)準(zhǔn)品或供試品制成濃溶液時用容量瓶的體積量（ml）；C 為標(biāo)準(zhǔn)品或供試品濃溶液的濃度（uml或&

43、#181;gmg）；P 為標(biāo)準(zhǔn)品的純度或供試品的估計效價（umg或µgmg）。12.4.1.4稀釋 稀釋操作應(yīng)遵照容量分析的操作規(guī)程。12.4.1.5 從冰箱中取出的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,必須先在室溫放置,使其溫度達到室溫后,方可量取.12.4.1.6標(biāo)準(zhǔn)品與供試品溶液的稀釋應(yīng)采用容量瓶，每步稀釋，取樣量不得少于2ml為宜，稀釋步驟一般不超過3步。舉例： 取濃溶液1000uml。第一步 取5ml(1000uml)50ml容量瓶100uml第二步 取5ml(100uml)50ml容量瓶10uml(H) 取5ML(100uml)100ml容量瓶5uml(L)12.4.1.7每次吸取溶液用密刻度玻璃

44、吸管,量取溶液前要用被量液流洗吸管23次,吸取樣品溶液后,用濾紙將外壁多余液體擦去,從起始刻度開始放溶液.12.4.1.8稀釋標(biāo)準(zhǔn)品與供試品用的緩沖液應(yīng)一批和同瓶,以免因PH或濃度不同影響測定結(jié)果.12.4.1.9 稀釋時,每次加液至容量瓶近刻度前,稍放置片刻,待瓶壁的液體完全流下,再準(zhǔn)確補加至刻度.12.4.2.0 (2.2)法,標(biāo)準(zhǔn)品與供試品高、低溶液濃度之比為2：1或4：1。（3.3）法，標(biāo)準(zhǔn)品與供試品高、中、低溶液濃度之比這1：0.8.但所選用的濃度必須在劑量反應(yīng)直線范圍內(nèi).12.4.2.1雙碟的制備 在半無菌室內(nèi)進行,應(yīng)注意微生物及抗生素的污染,培養(yǎng)基應(yīng)在水浴中或微波爐中融化,避免直

45、火加熱.12.4.2.2 底層 用滅菌大口吸管(20ml)或其它37滅菌分裝器,吸取已融化的培養(yǎng)基20ml注入雙碟內(nèi),等凝固后更換干燥的陶瓦蓋，放于3537培養(yǎng)箱中保溫，使易于攤布菌層。共19頁第16頁12.4.2.3菌層 取出試驗用菌懸液,按已試驗妥的菌量(2.2)法標(biāo)準(zhǔn)品溶液的高濃度所致的抑菌圈直徑在1822mm,(3.3)法標(biāo)準(zhǔn)品溶液的中心濃度所致的抑菌圈直徑在1518mm,用滅菌吸管吸取菌懸液加入已融化并保溫在水浴中(一般細菌4850,芽孢可至60)的培養(yǎng)基,內(nèi),搖勻作為菌層用.用滅菌大口10ml吸管或其它分裝器,吸取菌層培養(yǎng)基5ml,使均勻攤布在底層培養(yǎng)基上,置水平臺上,用陶瓦圓蓋覆

46、蓋,放置2030分鐘,待凝固,備用.吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程12.4.2.4放置鋼管 用鋼管放置器,將干熱滅菌的鑷子或適宜方法將鋼管裝于玻璃管中,放于鋼管放置器上,將雙磺打開,放入雙碟臺上,托起雙碟臺,使鋼管平穩(wěn)落在培養(yǎng)基上,注意使各個鋼管下落的高度基本一致.鋼管放妥后,應(yīng)使雙碟靜置510分鐘,使鋼管在瓊脂內(nèi)稍下沉穩(wěn)定后,再開始滴加抗生素溶液.12.4.2.5滴加抗生素溶液12.4.2.6 每批供試品取410個雙碟,滴加溶液用毛細滴管或定量加樣器,在滴加之前須用滴加液洗23次.12.4.2.7 滴加標(biāo)準(zhǔn)品與供試品溶液,因?qū)嶒炘O(shè)計方法不同而異.(2.2)法,在雙碟的4個鋼管中

47、分別成對角滴加標(biāo)準(zhǔn)(S)及供試品(T)高(H)低(L)兩種濃度的溶液.(3.3)法的6個鋼管中間隔3個鋼管中分別滴加標(biāo)準(zhǔn)品及供試品高、中（）低種濃度溶液，并使相同濃度成對角。滴加溶液的順序：（2.2）法SHTHSLTL;(3.3)法SHTHSMTMSLTL.滴加溶液至鋼管口平滿,注意滴加溶液間隔不可過長,因溶液的擴散時間不同影響測定結(jié)果.12.4.2.8每份滴加的溶液為1單位,但雙碟數(shù)每次不起過5個,如1份溶液滴加雙碟數(shù)目多,可分次滴加.每種溶液各用1支毛細滴管.12.4.2.9 滴加完畢,用陶瓦蓋覆蓋雙碟,平穩(wěn)于雙碟托盤內(nèi),雙碟疊放不要超過3個,避免受熱不均,影響抑菌圈大小,以水平位置平穩(wěn)移

48、入培養(yǎng)箱中間位置,3537或3032培養(yǎng)至所需時間.12.4.3.0抑菌圈測量12.4.3.1 將培養(yǎng)妥的雙碟取出,打開陶瓦蓋,將鋼管倒入盛有1:1000新潔爾滅溶液或其它消毒液內(nèi),換以玻璃蓋,按樣品號排妥;測量抑菌圈前應(yīng)檢查抑菌圈是否圓整,如有破圈或圈不圓整應(yīng)將該碟棄之,切記主觀挑選抑菌圈及雙碟,使結(jié)果造成偏倚.12.4.3.2 測量抑菌圈可用抑菌圈自動測量分析系統(tǒng),也可用游標(biāo)卡尺;使用游標(biāo)卡尺測量時,眼睛視線應(yīng)與讀數(shù)刻度垂直,用游標(biāo)卡尺的尖端與抑菌圈直徑的切點成垂直方向測量.12.4.3.3記錄與計算 兩劑量法計算公式共19頁第17頁P-1T2+T1-S2-S1T2+S2-T1-S1

49、15;I×100吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程式中 P為供試品效價（相當(dāng)于標(biāo)示量或估計效價的百分數(shù)）；S2為標(biāo)準(zhǔn)品高濃度溶液所致抑菌圈直徑（面積）的總和；S1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度溶液所致抑菌圈直徑（面積）的總和；T2為供試品高濃度溶液所致抑菌圈直徑（面積）的總和；T1為供試品低濃度溶液所致抑菌圈直徑（面積）的總和；I為高、低劑量之比的對數(shù)值，2：1進，I=0.301。4:1時,I=0.602。12.4.3.4結(jié)果判斷12.4.3.5 可靠性測驗 該法的設(shè)計是根據(jù)量反應(yīng)平行線原理,在實驗所用的劑量范圍內(nèi),以數(shù)劑量和反應(yīng)呈直線關(guān)系,供試品和標(biāo)準(zhǔn)品的直線應(yīng)平行.當(dāng)用卡尺沒量后的結(jié)果

50、,將參數(shù)輸入電腦,有專用(2.2)法和(3.3)法的軟件程序進行統(tǒng)計學(xué)處理.用測量儀測量抑菌圈時,測量與統(tǒng)計學(xué)處理一次完成,統(tǒng)計學(xué)分析按藥典生物檢定統(tǒng)計規(guī)定進行F的顯著性測驗.(2.2)法要求直線回歸、劑間P0.01,偏離平行P0.05;(3.3)法除(2.2)法的規(guī)定外,尚考查二次曲線和反二次風(fēng)線P0.05,試驗結(jié)果認為可靠,方可進行誑價和可信限率計算.12.4.3.6可信限率 考核實驗的精密度，除藥典各論另有規(guī)定外，本法的可信限率不得超過5。上述各項規(guī)定都能符合者，試驗結(jié)果成立。12.4.3.7 實驗計算所得效價低于估計效價的90或高于估計效價的110,則檢驗結(jié)果公作為初試,應(yīng)調(diào)整供試品估

51、計效價,予以生試.12.4.3.8 原料藥效價測定一般而雙份樣品,平行實驗以便核對.對不符合規(guī)定的樣品應(yīng)至少有2次符合規(guī)定的結(jié)果,才能發(fā)出報告.12.4.3.9效價結(jié)果的數(shù)字按藥學(xué)規(guī)定取舍小數(shù)位.12.4.4.0供試品測定操作要點12.4.4.1原料藥品 是指大包裝或半成品干燥粉末或結(jié)晶性粉末,不含輔料,一般測定純度(umg或µgmg),根據(jù)抗生素品種及廠方提供的效價進行估計單位,稱取樣品,估計效價盡量接近真實效價,如估計效價與真實效價距離較遠時,可先作初測試驗,然后按初測結(jié)果來估計效價,再作精密測定.原料藥品一般皆以干燥品或無水物計算效價，先測其含水的供試品效價，再根據(jù)供試品的水分

52、或干燥失重的結(jié)果折算成干燥品或無水物的效價。干燥品效價（umg）=濕品效價（umg）I供試品干燥失重量13、薄膜過濾法：共19頁第18頁13.1本法適用于有抗菌作用或大容量的供試品。13.2按集菌使用規(guī)程安裝好集菌儀。吉林玉皇藥業(yè)有限公司硫酸奈替米星檢驗操作規(guī)程13.3取供試品擦拭消毒后，除去塑料蓋，插好倒灌，進行抽濾，濾液從排液管排出。13.4同法操作將培養(yǎng)基抽到全封閉式集菌培養(yǎng)器中。13.5取需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基和真菌培養(yǎng)基各1管，同法操作加入相應(yīng)的镕基作陰性對照。13.6陽性對照管應(yīng)根據(jù)供試品特性在接種櫥內(nèi)加入相應(yīng)對照菌液1ml。（抗細菌藥物以金黃色葡萄球菌為對照菌，抗厭氧菌藥物以生孢梭

53、菌為對照菌，抗真菌藥物以白色念珠菌為對照菌）。13.7需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基管置3050培養(yǎng)箱中，真菌培養(yǎng)基管置2025培養(yǎng)箱中各培養(yǎng)7日；陽性對照管細菌應(yīng)在培養(yǎng)2448小時，真菌應(yīng)在培養(yǎng)2472小時有菌生長。13.8結(jié)果判定：當(dāng)陽性管顯渾濁并確有菌生長，陰性對照管呈陰性時，可根據(jù)觀察所得的結(jié)果判定：如需氣菌、厭氣菌及真菌培養(yǎng)基管均為澄清或雖顯渾濁，但經(jīng)證明并非有菌生長，均應(yīng)判為供試品合格。如需氣菌、厭氣菌及真菌培養(yǎng)管中任何1管顯渾濁并確證有菌生長，應(yīng)重新2倍量取樣，分別依法復(fù)試，除陽性對照管外，其它各管均不得有菌生長，否則應(yīng)判為供試品不合格。共19頁第19頁題目： 注 射 用 硫酸奈替米星檢驗

54、操作規(guī)程編 碼ZL2137-1頁 碼共 20 頁版 本復(fù)印份數(shù)：起草人：茍希俠審核人：批準(zhǔn)人：頒發(fā)部門：質(zhì)量管理部分發(fā)部門：辦公室執(zhí)行日期：變更記錄：2005年5月5日修訂號 ：ZL2137-1批準(zhǔn)人 執(zhí)行日期變更原因及目的：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)升級·目的 指導(dǎo)注射用硫酸奈替米星原料的檢驗，為硫酸奈替米星成品的檢驗提供書面依據(jù)。·范圍 硫酸奈替米星成品。·責(zé)任 中心檢驗室、檢驗員。·內(nèi)容1、性狀1.1.1取本品少量放在白紙板上目視觀察為白色粉末或疏松塊狀物。2、鑒別 2.1.1鑒別用儀器：薄層色譜硅膠G薄層板、層析缸。2.1.2鑒別用試液：二氯甲烷、甲醇、濃氨溶液；0.2%茚三酮的水飽和正丁醇溶液：取0.2g茚三酮加水飽和的正丁醇溶液（向正丁醇中國入水充分混勻即可）。 2.1.3 供試品溶液的制備：取本品適量制成3mg/ml的溶液即可。2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)