喘息靈膠囊Ⅰ（含馬兜鈴）和喘息靈膠囊Ⅱ（不含馬兜鈴）平喘作用的比較

1、喘息靈膠囊i （含馬兜鈴）和喘息靈膠囊ii （不含馬兜鈴）平喘作用的比較:鄧元榮，謝振家，劉詩洪，邱騰穎【摘要】 目的比較喘息靈膠囊i （原方，含馬兜鈴）和ii （新 方，不含馬兜鈴）的平喘作用。方法用豚鼠噴霧致喘法和豚鼠離體 氣管螺條法比較喘息靈膠囊二個樣品的平喘作用，用量反應六點法 計算 其效價比。結果喘息靈膠囊二個樣品3個劑量均能明顯延長 哮喘潛伏期并對離體氣管平滑肌具有松弛作用；豚鼠噴霧致喘法的 效價比i : 11=1 : 0.97 （95%可信限為0.47-1.47）,豚鼠離體氣 管螺條法的效價比i : 11=1 ： 0.98 （95%可信限為0.761.20）。 結論 喘息靈膠囊i

2、 （原方）和ii （新方）均有明顯的平喘作用， 二個樣品的效價相當。【關鍵詞】 喘息靈膠囊i、ii;馬兜鈴；平喘作用；噴霧致喘 法；離體氣管螺條法abstract:objective chuanxiling capsules i debilis sieb. et zuccto pare the anti(original prescription,)and chuanxilingasthmatic effects of containing aristolochia capsules ii (modifiedprescription, not containing aristolochia d

3、ebilis sieb. et zucc) methods the antitussive effects of chuanxiling capules i and ii ethod of spray induced asthma on the guinea pigs and the method of in vitro trachea on the guinea pigs, and calculate the potency ratios ethod of dosage reaction. results all the three doses of the tples can prolon

4、g the animal' s cough latent period and relieve the in vitro trachea smooth muscle. the potency ratio under the method of spray induced asthma is i ： 11 = 1 ： 0.97 (95% confidence interval is 0.471.47). and the ratio under the method of in vitro trachea is i ： ii = 1 ： 0.98 (95% confidence inter

5、val is 0.76 1.20). conclusion both chuanxiling capsules i and ii have the obvious anti asthma effect and their potency ratios are almost the samekey a effect ； method of spray induced asthma ； in vitro trachea喘息靈膠囊是由中藥（含馬兜鈴等）和化學藥組成的中西夯復 方制劑，經(jīng)國家批準1,臨床用于治療哮喘，以緩解氣喘、咳 嗽、咳痰等癥狀，療效確切。近年來，由于有關馬兜鈴引起慢性腎 損害的報道

6、及許多國家對馬兜鈴的禁用2,故擬將喘息靈膠囊中 的馬兜鈴去除，觀測其對平喘、止咳和祛痰的影響。本研究通過豚 鼠噴霧致喘法實驗和豚鼠離體氣管螺條法實驗觀察喘息靈膠囊i（原方，含馬兜鈴）和膠囊ii （新方，去馬兜鈴）的平喘作用，并 比較兩藥在平喘作用上的差異。1實驗材料1.1動物 豚鼠100只,體質(zhì)量300400 g,雌雄各半，清潔級， 由上海申旺實驗動物養(yǎng)殖場提供，許可證號：scxk （7）2002-0012, 合格證號:n0007262；實驗動物室，福建衛(wèi)生職業(yè)技術學院屏障系 統(tǒng)動物實驗室（syxk（閩）20060004）。1.2試劑與儀器喘息靈膠囊i （原方），規(guī)格:0.29 g/粒（含馬兜

7、 鈴30 mg）,批號:050101。喘息靈膠囊ii （新方），規(guī)格:0.26 0粒（去馬 兜鈴），批號:050109o試驗中兩藥等效劑量比為1 ：0.9,均為中試產(chǎn) 品，由廈門建發(fā)制藥有限公司提供。磷酸組胺，5妙瓶，上海國藥集 團化學試劑有限公司提供，批號:f20041224o氨茶堿，上海一平制藥 有限公司提供，批號：20040529c氯乙酰膽堿,5 g/片，上海國藥集團 化學試劑有限公司提供，批號:lot.no.6240-bd生物信號采集分析系 統(tǒng)，成都儀器廠生產(chǎn)。1.3統(tǒng)計學處理用spss 13.0進行統(tǒng)計分析，用單因素方差分析和生物六點法 方差分析，p<0.05為差異有顯

8、著性。2方法與結果2豚鼠噴霧致喘法3篩選豚鼠：取健康豚鼠，用多功能 霧化器將0.1%磷酸組胺和1.0%氯乙酰膽堿等容積混合液以2 ml/min流速向密封玻璃容器（容積4 000 ml）開始噴霧，到玻璃容 器內(nèi)全部充滿白色霧為準，將豚鼠放入其中接受噴霧15 s,噴霧終 止，立即取出豚鼠，記錄自噴霧起出現(xiàn)哮喘的潛伏期。哮喘分級： i.呼吸加速;ii呼吸困難;iii.抽搐;iv.翻倒。以iv翻倒為標準，潛伏 期以120 s為限，超過者認為不敏感，棄除（注：動物一出現(xiàn)抽搐， 即拉開箱門取出動物，以免動物因窒息而死亡）。次日實驗取合格豚鼠82只，體質(zhì)量300400 g,雌雄各半，隨 機分為8組：陰性對照

9、組12只，其余各組10只。各給藥組按劑量 灌胃給藥，灌胃容積均為15 ml/100 g bg kg-lo末次給藥前各組 動物禁食給水12 h。末次給藥后1 h,讓豚鼠接受噴霧刺激，方法同 前篩選實驗，記錄自噴霧起岀現(xiàn)哮喘的潛伏期。哮喘以iv翻倒為標 準。每組動物均按以上方法同樣操作，每組試驗結束后，必須更換 溶液，以免影響因濃度而產(chǎn)生誤差。結果見表13。從表1可見，喘息靈膠囊i和ii的3個劑量對0.1%磷酸組胺和 1.0%氯乙酰膽堿致豚鼠氣管痙攣所引起的哮喘有明顯延長哮喘發(fā)生 潛伏期作用，與生理鹽水組比較差異有顯著性（p<0.01）,說明具 有平喘作用。表1喘息靈膠囊i和ii對豚

10、鼠噴霧致喘法的影響（略）tab.l the parison of the effects of chuanxiling capsules i and ii on the guinea pigs ethod of spray induced asthma與生理鹽水組比較：*p<ool表2喘息靈膠囊i和ii對豚鼠噴霧致喘法六點法方差分析 （略）tab.2 the variance analysis of six point method applied on chuanxiling capsules i and ii on the guinea pigs ethod of spray

11、 induced asthma表3喘息靈膠囊i和ii對豚鼠噴霧致喘法效價比較（略）tab.3 the potency ratios of chuanxiling capsules i and ii on the guinea pigs ethod of spray induced asthma從表2可見，喘息靈膠囊i和ii二個藥物間的變異無顯著性 （p>0.05）,說明兩藥作用強度差別無顯著性；回歸間和組間變 異有顯著性（p<o.ol）,說明實驗劑量比值及實驗組安排妥當； 偏離平行、二次曲線及反向二次曲線檢驗無顯著性（p>oo5）, 說明兩藥的量效曲線

12、無二次曲線關系和反向曲線關系，兩線呈直線 平行關系，可以計算效價。綜上所述，可見本實驗的可靠性檢查是 合格可靠的，因此可進行可信限計算。分析結果表3表明，喘息靈膠囊i和ii二個藥品，對哮喘潛伏 期延長率作用的效價比i : ii二1 : 0.97 （95%可信限為0.47- 1.47） o2.2離體氣管平滑肌螺旋條收縮實驗32.2.1藥物的配制 實驗前24 h取喘息靈i和ii各10.0 g和8.9 g,分別加克氏液（ph-7.1） 100 ml,配成濃度為10%與8.9%溶 液，放入詔°c冰箱內(nèi)進行浸泡保存?zhèn)溆?。次日離心取上清液并在取 得的上清液基礎上再用克氏液稀釋10倍，即為1.0%

13、與0.89%的受 試藥物溶液，測量其ph值分別為6.0和5.9o實驗時分別取1.25. 0.625、0.312 ml的受試藥物溶液到容量為30 ml麥氏浴槽中，喘息 靈膠囊i給藥3劑量組的終濃度為4.167 x 10-4> 2.083 x 10-4.1.042 x 10-4 g/l,喘息靈膠囊ii給藥3劑量組的終濃度為2.967x10- 4、1.483xi0-4> 0.742x10-4 g/l。陰性組給予克氏液,陽性組給予 鹽酸異丙腎上腺素。2.2.2離體氣管平滑肌螺旋條的制備取400500 g豚鼠，擊 昏，立即剪開頸部皮膚，分離氣管，從屮狀軟骨下至氣管下端分叉 處將整段氣管剪下，

14、置含氧的k h （krebs henseleit）液的培養(yǎng)皿中，細心剔除氣管周圍的結締組織，將氣管剪成螺旋條狀，寬 度以23個氣管環(huán)為宜(一段氣管可制成23個螺旋條，采用拉 氏浴槽內(nèi)用(37±0.5)°ck h液30 ml灌注，通入氧氣。開啟 rm6240 bd多道生理信號采集分析系統(tǒng)，設置儀器參數(shù)，靜止丁法選取螺旋條做實驗)。定于容量為30 ml麥氏浴槽中,在麥負荷為1 g,靈敏度為1 g,走紙速度為10.0 s/div (0.5 mm/s)。2.2.3實驗方法 離體氣管平滑肌螺旋條固定于麥氏浴槽中，描 記正常曲線30 min,加入0.1%磷酸組胺0.05 ml (終濃度

15、5.0x10-7 mmol l-1)刺激，使氣管平滑肌呈收縮狀態(tài)，待收縮到平穩(wěn)時，給 予各受試藥品，此時開始記錄時間并描記5 min曲線，然后 計算 抑制白分率。各受試藥物試驗順序采用拉丁法排序，方法同前。結 果見表4-6 o抑制率二(給藥前曲線高度給藥后曲線高度)/給藥前曲線高 度 x100%表4喘息靈膠囊i和ii對離體氣管平滑肌螺旋條收縮抑制的影 響(略)tab.4 the inhibitory effects of chuanxiling capsules i and ii on contracting of in vitro trachea smooth muscle與克氏液組比較：*

16、p<0.01從表4可見，喘息靈膠囊i和ii的3個劑量對0.1%磷酸組胺致 豚鼠離體氣管平滑肌螺旋條收縮有明顯抑制作用，與克氏液組比較 差異有顯著性(p<0.01),說明具有解除氣管平滑肌痙攣作用。從表5可見，喘息靈膠囊i和ii二個藥品間的變異無顯著意義 (p>0.05),說明兩藥作用強度差別無顯著性；回歸和組間變異 有顯著意義(p<0.01),說明實驗劑量比值及實驗組安排妥當； 偏離平行、二次曲線及反向二次曲線檢驗無顯著意義 (p>0.05),說明兩藥的量效曲線無二次曲線關系和反向曲線關 系，兩線呈直線平行關系，可以計算效價

17、。綜上所述，可見本實驗 的可靠性檢查是合格可靠的，因此可進行可信限計算。分析結果表6表明，喘息靈膠囊i和ii對豚鼠離體氣管平滑肌 螺旋條收縮抑制作用的效價比，i ： ii = 1 : 0.98 (95%可信限為 0.76-1.20) o表5喘息靈膠囊i和ii對離體氣管平滑肌螺旋條收縮抑制六點 法方羌分析(略)tab.5 the variance analysis of six point method applied onchuanxiling capsules i and ii on in vitro trachea smooth muscle表6喘息靈膠囊i和ii對離體氣管平滑肌螺旋條收縮抑制的效 價結果（略）tab.6 the potency result of the inhibitory effects of chuanxiling capsules i and ii on contracting of in vitro trachea smooth muscle2.3最大耐受量（mtd）和最大給藥量測定4取昆明小鼠 60只，雌雄各半，隨機分為3組，陰性對照組、喘息靈