車間空氣中磷胺 衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

1、車間空氣中磷胺 衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) 本標(biāo)準(zhǔn)適用于生產(chǎn)和使用磷胺的各類企業(yè)。 1衛(wèi)生要求 車間空氣中磷胺最高允許濃度為0.02mg/m3(皮)。 2監(jiān)測檢驗方法 本標(biāo)準(zhǔn)的監(jiān)測檢驗方法采用酶化學(xué)法,見附錄a。 附錄a 酶化學(xué)法 (補充件) a.1原理 磷胺對膽堿酯酶有抑制作用,而膽堿酯酶能促進(jìn)乙酰膽堿的水解,乙酰膽堿的量可用氯化鐵比色法定量測定,由此換算成磷胺的含量。 本法的檢出下限為0.1g/ml。 a.2儀器 a.多孔玻璃板汲取管。 b.恒溫水浴箱:37±0.5。 c.秒表。 d.分光光度計。 e.個體采樣器。 a.3試劑 a.3.1汲取液:蒸餾水。 a.3.2緩沖液(ph=7.2):將16.

2、72g磷酸氫二鈉(na2hpo4·12h2o)及2.72g磷酸二氫鉀(kh2po4)溶于1l水中。 a.3.3氯化乙酰膽堿溶液:稱0.1000g氯化乙酰膽堿,溶于100ml緩沖液(ph=7.2),保存于冰箱內(nèi)。 a.3.4堿性羥胺溶液:臨用前將下列溶液(1)及(2)等體積混合。 溶液(1):13.9%鹽酸羥胺溶液,保存于冰箱內(nèi)。 溶液(2):14%氫氧化鈉溶液。 a.3.5三氯乙酸溶液:10g三氯乙酸溶于100ml12鹽酸中。 a.3.610%氯化鐵溶液:將10g氯化鐵(fecl3·6h2o)加到0.84ml鹽酸及少量水中,微熱使溶解,然后加水至100ml。 a.3.7標(biāo)準(zhǔn)

3、溶液:精確稱取磷胺的純品,溶于甲醇中,配成1ml含100mg磷胺的貯備液,保存于冰箱中,臨用時取適量貯備液用汲取液稀釋配成1ml含2g磷胺。 a.3.8膽堿酯酶溶液:以健康馬血清為酶原,用緩沖液稀釋成酶活力為70%80%(見酶活力測定),保存于冰箱中。 酶活力測定:取3ml健康馬血清置于25ml容量瓶中,用緩沖液稀釋至刻度,以此馬血清溶液按表a1配制酶活力標(biāo)準(zhǔn)管。各管分別加1ml水,置于37恒溫水浴箱預(yù)熱10min,然后向每管各加入1.0ml氯化乙酰膽堿溶液(每隔30s加一管),精確地在37下反應(yīng)30min,30min末,加入2ml堿性羥胺溶液(每隔30s加一管),按順序從水浴中取出劇烈振搖4

4、min,然后向各管加入1ml三氯乙酸溶液,搖勻后,加入1ml氯化鐵溶液,振搖過濾,濾液在波長為520nm下測其吸光度,以水作參比液。用公式(b-x)/b×100(%)(式中b為零管的吸光度,x為各管的吸光度),得到氯化乙酰膽堿在37被酶水解30min的水解百分?jǐn)?shù),取水解百分?jǐn)?shù)為70-80%的馬血清作標(biāo)準(zhǔn),依據(jù)馬血清含量(25ml中含純馬血清毫升數(shù))配制膽堿酯酶溶液。 a.4采樣 取盛有5ml汲取液的多孔玻璃板汲取管做采樣管,以0.5l/min的速度抽取10l空氣。 a.5分析步驟 用汲取管中汲取液洗滌進(jìn)氣管內(nèi)壁3次,然后倒入10ml具塞比色管中,取1.0ml樣品溶液置于25ml具塞比

5、色管中,同時按表a2配制標(biāo)準(zhǔn)管。 b管加1ml緩沖液,樣品管和標(biāo)準(zhǔn)管(包括b管)放在37恒溫水浴箱中預(yù)熱10min,然后各管(除b管外)加入1.0ml膽堿酯酶溶液,每隔30s加一管,在恒溫水浴箱中精確反應(yīng)30min再向各管加入1.0ml氯化乙酰膽堿溶液(每隔30s加一管),反應(yīng)30min后(不時搖動),每管加入2ml堿性羥胺溶液(每隔30s加一管),按順序從水浴中取出后劇烈振搖4min,然后向各管中加入1ml三氯乙酸溶液,搖勻,加入1ml氯化鐵溶液,振搖過濾,濾液在波長520nm下測其吸光度,并以水作空白參比液,將所得吸光度按下式計算出膽堿酯酶被磷胺抑制的百分?jǐn)?shù)(或稱百分抑制率)。 式中:b、c對照管b和c管的吸光度; x樣品管的吸光度。 用磷胺含量對相應(yīng)的膽堿酯酶百分抑制率繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算出樣品的百分抑制率,再由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出磷胺含量。 式中:x空氣中磷胺的濃度,mg/m3; c所取樣品溶液中磷胺的含量,g; v0換算成標(biāo)準(zhǔn)狀況下的采樣體積,l。 a.6留意事項 a.6.1每一批馬血清,須測定其活力,如血清在冰箱中保存時間超過一個月,必需重新測酶活力。 a.6.2磷胺標(biāo)準(zhǔn)液只能當(dāng)日稀釋,當(dāng)日使用,放置24h后就會有部分水解,使?jié)舛冉档?現(xiàn)場采得樣品,應(yīng)避光保存,并須在24h內(nèi)進(jìn)行分析。 附加說明: 本標(biāo)準(zhǔn)由全國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)委員會勞動衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)分