塞絡(luò)通灌胃后人參皂苷在大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)和腦分布探究

1、塞絡(luò)通灌胃后人參皂昔在大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)和腦分布探究摘要塞絡(luò)通(slt)是由人參、銀杏葉、西紅花組 方，主治血管性癡呆的現(xiàn)代復(fù)方中藥。為探討slt藥效物質(zhì) 基礎(chǔ)，并為給藥方案提供依據(jù)，該文對(duì)治療劑量slt給與大 鼠后，人參皂昔成分的血藥濃度、藥代特征、以及腦分布進(jìn) 行了研究。實(shí)驗(yàn)建立了同時(shí)檢測(cè)生物樣品中7種人參皂昔的 高靈敏度lc-ms/ms分析方法，經(jīng)過對(duì)線性、專屬性、回收 率、準(zhǔn)確度、精密度的考察，所建立的分析方法符合臨床前 藥代動(dòng)力學(xué)研究要求。灌胃slt 60 mg kg-1后，7種目標(biāo) 成分均在大鼠血漿中檢出，其中二醇型皂昔比三醇型的皂昔 有更髙的血藥濃度和更長的消除半衰期。血漿中人參

2、皂昔 rgl, re, rbl, rb2/b3, rc, rd的平均消除半衰期分別為 15. 26, 2. 46, 18.41, 27. 70, 21.86, 61. 58 h；平均峰濃 度分別為 7. 15, 2. 83, 55. 32, 30. 22, 21.42, 8.81 u g l-lo slt給藥后人參皂昔成分能夠迅速進(jìn)入腦組織，但是隨 時(shí)間下降很快。人參皂昔rgl, re, rbl, rc腦組織中含量 較高的成分。研究結(jié)果顯示服用slt后，人參皂昔成分能夠 快速吸收入血并進(jìn)入腦組織。人參皂昔，尤其是rgl, re可 通過快速進(jìn)入腦組織直接作用于神經(jīng)細(xì)胞發(fā)揮作用；以二醇 型為主的人

3、參皂昔在血漿中長時(shí)間滯留，連續(xù)給藥方式時(shí)會(huì) 累計(jì)達(dá)到較高穩(wěn)態(tài)血藥濃度，它們可能是通過對(duì)外周的藥理 作用保護(hù)腦組織的主要成分。關(guān)鍵詞塞絡(luò)通；人參皂昔；lc-ms/ms；藥代動(dòng)力學(xué)； 腦分布收稿日期12013-08-26基金項(xiàng)目國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng) (2012zx09101214 )； 北京市科技計(jì)劃項(xiàng)目 (z121102001112006)；國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81072929)通信作者*劉建勛，研究員，中藥藥理方向，tel: (010) 62874049, e-mail： jianxun_liu163 com作者簡介張穎，副研究員，研究方向?yàn)樗幋鷦?dòng)力學(xué)，tel: (010) 62

4、835641, e-mail： zhyingdesina. com 塞絡(luò) 通(簡稱slt)是根據(jù)臨床治療缺血性腦血管病常用藥物人 參、銀杏葉、西紅花的療效及經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合現(xiàn)代藥理學(xué)研究結(jié) 果研制開發(fā)的新型現(xiàn)代中藥產(chǎn)品。具有益氣活血、化瘀通絡(luò)、 健腦益智的功效，主治血管性癡呆、缺血性中風(fēng)恢復(fù)期等疾 病。藥理研究表明該藥可保護(hù)腦組織，抑制炎癥反應(yīng)，改 善絡(luò)脈瘀阻證候的相關(guān)性改變1,升高腦內(nèi)與學(xué)習(xí)記憶相 關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)水平2,延遲癡呆病程發(fā)展，對(duì)缺血性中風(fēng)及 其引起的血管性癡呆有預(yù)防和治療作用。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)該藥在 血管性癡呆動(dòng)物模型上較對(duì)照藥達(dá)納康、哈伯因表現(xiàn)出更強(qiáng) 的升高中樞相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)含量、改善空間學(xué)習(xí)記

5、憶、抗氧化 等作用3。人參是該復(fù)方中的君藥，其主要成分為人參皂昔。近代 藥理研究表明人參皂昔成分具有多種腦保護(hù)作用。例如人參 皂昔rgl (g-rgl)能夠減輕老年癡呆模型大鼠的記憶損傷 41；人身皂昔rbl和rd都具對(duì)腦缺血損傷的神經(jīng)保護(hù)作 5-6 o為探討slt藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，并為給藥方案提供依據(jù), 本實(shí)驗(yàn)對(duì)治療劑量塞絡(luò)通給予大鼠后人參皂昔成分在體內(nèi) 的血藥濃度、藥代特征、以及在腦組織分布進(jìn)行了研究。1材料1. 1實(shí)驗(yàn)儀器液相質(zhì)譜聯(lián)用儀(api 4000qtrap),配有turbo vtm離 子源倉，離子噴霧和大氣壓電離離子源，以及analysis 1. 4. 2 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，美國appl

6、ied biosystem公司產(chǎn)品；髙效液 相系統(tǒng)為agilent 1200系統(tǒng)。配置包括g1322a氣機(jī)， g1311a四元梯度泵，g1329a自動(dòng)進(jìn)樣器g1316a柱溫箱， g1330b進(jìn)樣盤溫控器，g1314b檢測(cè)器，美國agilent公司 產(chǎn)品。臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(mikro 22r),德國hettich 公司產(chǎn)品。氮吹儀(model 18780),美國pierce公司產(chǎn)品。1.2藥品與試劑g-re 對(duì)照品(批號(hào) 110754-200421 ), g-rgl (批號(hào) 110703-200424), g-rbl (批號(hào) 110704-200420), g_rb3 (批 號(hào)111686-2

7、00501)均為供含量測(cè)定用對(duì)照品，購自中國食 品藥品檢定研究院。g-rb2, rc, rd, rf對(duì)照品購自南京青 澤醫(yī)藥公司，純度大于98%o塞絡(luò)通制劑由中國中醫(yī)科學(xué)院 西苑醫(yī)院藥學(xué)室提供，批號(hào)060925,其中含人參總皂昔提取 物 45.5%, g-rgl, re, rbl, rb2/b3, rc, rd, rf 在總皂昔 提取物中的含量分別為13.8%, 4.62%, 11%, 2. 11%, 6.37%, 1.17%, 3.4%o流動(dòng)相用色乙睛、甲醇均為色譜純，購自美 國fisher公司產(chǎn)品。流動(dòng)相用甲酸為美國j. t. baker公司 色譜純產(chǎn)品。1.3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用大鼠為雄性wist

8、ar大鼠，購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所，合格證號(hào)scxk (京)2005-0013o2方法與結(jié)果2. 1對(duì)照品溶液的配制分別精密稱量人參皂昔rgl,re,rbl,rd對(duì)照品2.00 mg, 以甲醇溶解并定容至10ml量瓶中，配制成質(zhì)量濃度為200 mg l-1的儲(chǔ)備液；分別精密稱量人參皂昔rc, rb2, rb3對(duì)照 品1. 00 mg,以甲醇溶解并定容至2 ml量瓶中，配制成質(zhì)量 濃度為500 mg l-1儲(chǔ)備液。以上儲(chǔ)備液均放置于4 £冰箱 儲(chǔ)存待用。2.2血漿樣品前處理37 °c水浴解凍樣品后，精密吸取血漿200 nl,加入 200 u l 醋酸緩沖液(0. 2

9、 mol lt ph 4.6)和 400 u l 的 丙酮，渦流混合1 min,避光靜置10 min,離心(15 000 r -min-1) 10 min,分離上清液800 u l于50 £氮?dú)饬飨麓?干，殘留物用iml的混合萃取液(乙酸乙酯與正丁醇的1 : 1 混合液，用水飽和)溶解，渦流混合1 min, 15 000 r min-1 離心10 min,取上清液800 u l于50 °c氮?dú)饬飨麓蹈桑?入100 ul的50%的甲醇液復(fù)溶，再次渦流混合1 min, 15 000 r min-1離心10 min,取上清液進(jìn)行l(wèi)c-ms/ms分析。 2. 3腦組織樣品前處理按

10、照本實(shí)驗(yàn)室已建立的文獻(xiàn)中血漿處理方法7, 37 °c 水浴解凍樣品后，精密吸取腦組織勻漿100 ul,加入1000 ul混合萃取劑(乙酸乙酯與正丁醇的1 ： 1混合液，用水飽 和)，渦流混合1 min, 15 000 r min-1離心10 min,取上 清液800 ul于50 °c氮?dú)饬飨麓蹈?，加?00 ul的流動(dòng) 相復(fù)溶，取上清液進(jìn)行l(wèi)c-ms/ms分析。2. 4血漿樣品中人參皂昔成分的分析液相條件：agilent zorbax sb-c18 分析柱(4. 6 mmx 150 mm, 5 y m),美國 agilient 公司產(chǎn)品；zorbarx sb-c18 保 護(hù)

11、柱 (4. 6 mmx 12. 5 mm, 5 u m),美國 agilient 公司產(chǎn) 品；流動(dòng)相，a相，水-甲醇198 : 2,含有l(wèi)mmol l-1乙 酸鐵；b相，甲醇，含有1 mmol l-1乙酸鐵。按照以下梯 度洗脫的流動(dòng)相比例變化：07 min, 67% b98% b,流速 600 p l min-1； 79. 5 min, 98% b,流速 600 u l min-1；9.51-15 min, 67% b,流速 700 n l - min-lo 柱溫保持在 30 °co質(zhì)譜條件：離子源為esi源。氣簾氣體為103. 425 kpa0 源內(nèi)溫度600 °co源內(nèi)

12、氣體gs1： 413. 7kpao源內(nèi)氣體gs2： 60 413. 7 kpao 離子噴射電壓(is)： 5 000 vo 碰撞氣(cad)： higho檢測(cè)方式：正離子檢測(cè)。掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(mrm) 方式，用于定量分析的離子及其質(zhì)譜參數(shù)，見表1。表1人參皂昔成分定量離子及質(zhì)譜參數(shù)table lion transitions and mass spectrum parameters for the quantitotion of ginsenosides2. 5腦組織樣品中人參皂昔成分的分析按照文獻(xiàn)中描述本實(shí)驗(yàn)室已建立生物樣品分析方法檢 測(cè)的腦組織樣品中的人參皂昔成分7。2. 6塞絡(luò)通藥

13、代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)樣品采集健康雄性wistar大鼠6只，體重(220±20) g,實(shí)驗(yàn) 前12 h禁食不禁水，實(shí)驗(yàn)期間自由飲水，實(shí)驗(yàn)2 h后進(jìn)食。 按60 mg kg-1的劑量灌胃給藥(給藥體積為10 ml kg-1), 分別于給藥后 0. 083, 0. 167, 0. 333, 0. 667, 1, 1. 5, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 24, 36, 48, 60, 72 h經(jīng)大鼠眼眶靜脈叢采 血約0. 4 ml,置肝素化離心管中,離心，吸取上層血漿，-30 °c 保存待測(cè)。2. 7塞絡(luò)通組織分布試驗(yàn)樣品采集健康雄性wistar大鼠24只，體重(2200

14、77;150) go 隨機(jī)分成4個(gè)時(shí)間組，試驗(yàn)前禁食12 h,給藥2 h后自由進(jìn) 食與飲水。以塞絡(luò)通60 mg kg-1的劑量灌胃給藥，4個(gè)時(shí) 間組的受試大鼠分別在給藥后0.25, 2, 7, 24 h取血后處 死，立即解剖采集腦組織。用生理鹽水沖凈腦組織上殘留血 液后，用濾紙吸干水分，稱重后，以1 ： 3 (g ： ml)體積加 入生理鹽水，冰浴下高速勻漿。樣品于-30 £保存待測(cè)。2. 8血漿分析方法學(xué)的確證2.8.1專屬性取大鼠空白血漿，按“血漿樣品前處理” 項(xiàng)下方法操作，獲得大鼠空白血漿樣品的色譜圖；將人參皂 < rgl, re, rbl, rb2/b3, rc, rd

15、對(duì)照品系列溶液加入大 鼠空白血漿中，依同法進(jìn)行樣品處理，獲得相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)樣品色譜圖;大鼠灌胃塞絡(luò)通后的血漿樣品,依同法操作，獲得實(shí)測(cè)樣品色譜圖。結(jié)果表明在該處理方法下大鼠血漿及腦組 織中內(nèi)源性物質(zhì)均不干擾人參皂昔的測(cè)定，實(shí)測(cè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)樣本色譜行為一致。待測(cè)物g-rb 1, rb2/rb3, rc, rd, re,rgl 的保留時(shí)間分別為 7. 77, 8. 30, 7. 83, 9.01, 3. 68, 3.91 mirio2.8.2標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍制作標(biāo)準(zhǔn)曲線當(dāng)天取對(duì)照品 儲(chǔ)備液用50%甲醇逐級(jí)稀釋成系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。取空白大鼠血 漿900 nl,加人參皂昔類成分系列標(biāo)準(zhǔn)溶液100 ul,配 制

16、成相當(dāng)于系列標(biāo)準(zhǔn)血漿樣品，精密吸取200 ul按“樣品處理”項(xiàng)下依法操作，進(jìn)樣20 ul,進(jìn)行l(wèi)c-ms/ms分析;以待測(cè)物濃度為橫坐標(biāo)，待測(cè)物峰面積比值為縱坐標(biāo)，用加 權(quán)最小二乘法進(jìn)行回歸運(yùn)算，求得的直線回歸方程即為標(biāo)準(zhǔn) 曲線。各成分在血漿中的典型標(biāo)準(zhǔn)曲線為：g-rgl ,y=l. 32x 104x+9. 91 x 103,r=0. 987,線性范圍 0. 16100 u g-l-l； g-re, y=1.97x 104x+3. 41x 103, r=0. 990,線性范圍 0. 1620 ug - l-l； g-rbl, y=1.06x103x+l. 48x103,r=0. 998 ,0.

17、 8 500u g lt ； grd ,y二205x 103x+487, r二0.995,線性范圍 0.8500 pg - l-l；g-rb2, y=l. 16x103x+497, r=0. 995,線性范圍 0. 8500 u g-l-l； g-rc, y=l. llx103x+319, r=0. 995,線性范圍 0. 8 500 p g llo2. 8.3回收率在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)選擇低、中和高3種濃 度，以空白血漿配制各人參皂昔3個(gè)濃度的qc樣品，每個(gè) 濃度點(diǎn)5份樣品，同時(shí)配制相同濃度以檢測(cè)流動(dòng)相為基質(zhì)的 標(biāo)準(zhǔn)溶液。將相同濃度的樣品在同1 d按照樣品處理方法與 處理后分析，每份樣品進(jìn)樣1次

18、。同時(shí)將未經(jīng)預(yù)處理的同濃 度標(biāo)準(zhǔn)溶液以同樣方法分析。以qc樣品峰面積和標(biāo)準(zhǔn)溶液 峰面積相比計(jì)算回收率，3種濃度下的大鼠血漿中各人參皂 昔成分的回收率基本一致，平均值分別為62. 9% (g-rgl), 58.4% (g-re), 20.8% (g-rbl), 38. 5%(grb2), 17.0%(g-rc), 30. 4% (g-rd)o2.8.4精密度和準(zhǔn)確度按'血漿樣品處理”項(xiàng)下操作，應(yīng)用大鼠空白血漿，配制各人 參皂昔新型范圍內(nèi)低、中、高3個(gè)濃度的質(zhì)量控制（qc）樣 品，每個(gè)濃度5份，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算qc樣品的測(cè)得濃 度，與配制濃度對(duì)照，求得測(cè)定方法的準(zhǔn)確度與精密度?？?察結(jié)果

19、顯示測(cè)定方法的準(zhǔn)確度在92. 5%113.5%,精密度（rsd）在 2. 7%13. 2%o2.9塞絡(luò)通給藥后人參皂昔成分的血藥濃度及藥代動(dòng)力 學(xué)大鼠灌胃給塞絡(luò)通60 mg - kg-1, 7種目標(biāo)成分均在血 漿中檢出，其平均血藥濃度-時(shí)間曲線見圖lo采用das2. 0 生物統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)大鼠灌胃給藥后7種人皂昔的血藥濃度進(jìn) 行非房室模型（統(tǒng)計(jì)距法）計(jì)算主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)列于表 2o各成分曲線下面積auco-t從大到小順序依次為g-rbl, g-rb2/rb3, g-rc, g-rd, g-rgl, g-re。g-rd 的消除半衰期 tl/2最長，達(dá)到61. 6 h,而g-re的半衰期只有不到3

20、 h, 其他成分的半衰期也較長，在1528 ho2. 10塞絡(luò)通給藥后人參皂昔成分的腦組織分布由于人參皂昔成分在腦組織中的分布含量較血藥濃度 更低，對(duì)腦組織中人參皂昔成分的含量測(cè)定方法做了進(jìn)一步 優(yōu)化，采用更靈敏的lc-ms/ms方法檢測(cè)腦組織中8種人參 皂昔成分7?？瞻啄X組織對(duì)8種成分的檢測(cè)沒有干擾。各 成分在腦組織勻漿中的標(biāo)曲和線性范圍為：g-rgl , y=1.05x104x + 784（r=0. 993,線性范圍 0. 1 25 ug l-l）； g-re, y=5. 86x103x + 5. 5 （r=0. 992,線性范圍 0. 1-25 u g-l-l）； g-rb 1, y=l

21、. lx 104x + 1.29x 103 （r=0. 998,線 性范圍 0.1 25 ug l-l）； g-rf, y二l.llx104x + 141（r=0. 994,線性范圍 0.1 25 u g l-l ）； g-rb2/b3, y=6. 96x 103x + 677（r=0. 999,線性范圍 0. 1 25 u g l-l）； g-rc, y=2. 35x103x + 271 （r=0. 979,線性范圍 0. 1-25 ng-l-l）； g-rd, y=3. 06x103x + 151 （r=0. 996,線性范圍 0. 1 25 y g l-l ）o大鼠灌胃給予塞絡(luò)通60 m

22、g kg-1后，測(cè)得各人參皂昔 成分在腦組織中的含量隨時(shí)間變化見圖2所示?？梢钥吹剿?有待測(cè)人參皂昔成分均能夠進(jìn)入在腦組織，但是隨時(shí)間下降 很快，到7 h時(shí)只有g(shù)-rgl有微量檢出外，其他人參皂昔均 未能檢出。8種人參皂昔中g(shù)-rgl, re, rbl, rc和是含量較 高的成分。a. g_rgl ； b. g_re ； c.g-rbl； d. g_rb2/rb3； e.g-rc； f. g-rdo圖1大鼠灌胃給與slt 60 mg kg-1后，各人參皂昔成 分血藥濃度-時(shí)間圖（n=6）fig.lplasma concentration-time curves of ginsenosides

23、after adm inist rati on of slt at dose of 60 mg kg-1 （n=6）表2大鼠灌胃給與slt 60 mg - kg-1后,各人參皂昔成 分藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)(n=6)table 2pharmacokinetic parameters of ginsenosides after administration of slt at dose of 60 mg kg-1 (n=6)3討論已有文獻(xiàn)研究表明人參皂昔成分的生物利用度低，因此 對(duì)這類成分的檢測(cè)需要建立高靈敏度的分析方法。近年來基 本采用液質(zhì)聯(lián)用方法實(shí)現(xiàn)對(duì)這類成分的體內(nèi)分析。通過比較 目標(biāo)人參皂昔在正、

24、負(fù)離子源中的質(zhì)譜裂解行為，選擇了信 號(hào)更為穩(wěn)定的esi+源。此外，實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)這些目標(biāo)人參皂昔 的一級(jí)離子中加鈉離子的信號(hào)遠(yuǎn)強(qiáng)于加氫離子，并且離子信 號(hào)很穩(wěn)定。為獲得更高靈敏度，測(cè)定時(shí)選擇各人參皂昔 m+na碎片離子作為定量離子對(duì)。所分析人參皂昔成分中， g-rb2和g-rb3是立體差向異構(gòu)體，普通的反相分析柱上無 法分離，因此在該位置出現(xiàn)的峰應(yīng)是兩者之和。此外，g-rc 和g-rb2/b3也是同分異構(gòu)體，在色譜柱上的保留行為相似, 經(jīng)過對(duì)流動(dòng)相和分析柱優(yōu)化比較，最終采用較長的分析柱和 緩梯度實(shí)現(xiàn)峰位的良好分離。經(jīng)方法學(xué)確證，證明該分析方 法的準(zhǔn)確度、精密度及線性等均符合藥代動(dòng)力學(xué)定量要求， 且

25、靈敏度較zhou等8建立的多皂昔分析方法更為靈敏，能 滿足在較低口服給藥劑量下，對(duì)大鼠血漿中多種人參皂昔成 分的分析要求。圖2大鼠灌胃給與slt 60 mg kg-1后，在不同時(shí)間點(diǎn) 各人參皂昔成分在腦組織中的含量(n=6)fig. 2brain distribution of ginsenosides at different time points after administration of slt at dose of 60 mg kg-1 (n=6)塞絡(luò)通灌胃給與大鼠后，7種人參皂昔均能進(jìn)入血循環(huán), 并且顯示出血藥濃度和皂昔的結(jié)構(gòu)類型相關(guān)性很強(qiáng)的特征。 盡管在slt藥物中g(shù)-rgl

26、, g-re含量較髙，但是它們?cè)诮o藥 后大鼠血漿內(nèi)的濃度非常低，均在10 u g l-1以下。血漿 中二醇型人參皂昔(g-rbl, g-rb2/rb3, grc, g-rd) 的 血藥濃度均高于三醇型人參皂昔(g-rgl, g-re)o這和liu 等9在三七皂昔中發(fā)現(xiàn)的特征相似，原因可能是由于三醇 型皂昔極性更強(qiáng)，不利于透過小腸上皮吸收所致。二醇型人 參皂昔類的消除半衰期都較長，因此雖然單次給藥后，人參 皂昔類成分的血藥濃度并不高，但是在連續(xù)給藥方式下，會(huì) 累計(jì)達(dá)到較高穩(wěn)態(tài)血藥濃度，從而產(chǎn)生相應(yīng)的藥效。在slt給藥后腦組織分布的分析結(jié)果可以看出，人參皂昔成 分能很快進(jìn)入腦組織，但是除g-rgl

27、外，均只在15 min, 2h 2個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢出，且濃度下降較快，和血漿中表現(xiàn)的長半衰 期不一致。而且濃度順序也顯示和血藥濃度不一致的結(jié)果， g-rgl, g-re在腦組織中有較高濃度，并且都高于同時(shí)間點(diǎn) 的血藥濃度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示服用slt后，人參皂昔成分能夠快速吸收 入血，并進(jìn)入腦組織。人參皂昔可以通過進(jìn)入腦組織直接作 用于神經(jīng)細(xì)胞發(fā)揮作用，尤其是g-rgl, g-re可能是發(fā)揮快 速、直接對(duì)腦組織作用的主要成分。同時(shí)，以二醇型為主的 人參皂昔在血漿中長時(shí)間滯留，它們可能是通過對(duì)外周的藥 理作用10保護(hù)腦組織的主要人參皂昔成分。參考文獻(xiàn)1 任建勛，徐立，林成仁，等.塞絡(luò)通膠囊在絡(luò)脈瘀阻證腦梗死

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30、2)：155.7 林力，劉建勛，張穎，等.lc-ms/ms法同時(shí)測(cè)定 犬血漿中7種人參皂昔類成分及其在人參提取物藥代動(dòng)力學(xué) 研究中的應(yīng)用j.世界科學(xué)技術(shù)一一中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2012, 14 (3)：1572.8 zhou d, tong l, wan m, et a.1. an lcms methodfor simultaneous determination of nine ginsenosides in rat plasma and its application in pharmacokinetic study j. biomed chromatogr, 2011,25 (6)：720.9

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33、na) abstractsailuotong ( slt ) is a compound preparation composed of ginseng, ginkgo and saffron for the treatment of vascular dementia. in order to identify its material foundation and provide evidence for therapeutic regimen , the pharmacokinetics and brain distribution of ginsenosides were invest

34、igated after intragastric administration of slt an lc-ms/ms method was developed for the determination of 7 ginsenosides in rat plasma simultaneously. statistical analysis of obt ained data demons trated that the met hod has achieved the desired linearity , precision , accuracy and sensitivity. after administration of slt at 60 mg kg-1 dose, 7 ginsengosides were all absorbed into systematic circulation. the quantitative and statistical analysis of gensenosides in plasma showedthat protopanaxdiol saponins exhibited higher conc