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文檔簡介
1、復習班生物二輪復習 專題三 實驗與探究(一) 觀察類實驗(6個)一觀察DNA和RNA在細胞中的分布1實驗原理(1)甲基綠和吡羅紅對DNA和RNA的親和力不同 顯示DNA和RNA在細胞中的分布 (2)鹽酸:改變細胞膜的通透性加速染色劑進入細胞;使染色質中的DNA與蛋白質分離有利于DNA與染色劑結合。2實驗流程4個注意問題(1)選材:口腔上皮細胞、無色的洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細胞,不能用紫色洋蔥表皮細胞或葉肉細胞,以防止顏色的干擾。(2)用緩水流的目的:防止載玻片上的細胞被沖走。(3)幾種試劑在實驗中的作用0.9%的NaCl溶液(生理鹽水):保持口腔上皮細胞正常形態(tài)。8%的鹽酸:a.改變細胞膜的通透性,
2、加速染色劑進入細胞;b.使染色質中DNA與蛋白質分離,有利于DNA與染色劑結合。蒸餾水:a.配制染色劑;b.沖洗載玻片。吡羅紅甲基綠染液:混合使用,且現(xiàn)用現(xiàn)配。(4)DNA和RNA在細胞核和細胞質中均有分布,只是量的不同,故結論中強調(diào)“主要”而不能說“只”存在于細胞核或細胞質中?!炯磿r鞏固】(2014·長沙市模擬)下圖表示觀察DNA和RNA在細胞中的分布實驗基本實驗步驟,對該實驗基本步驟的敘述錯誤的是()A表示制片,首先應在潔凈的載玻片上滴一滴質量分數(shù)為0.9%的NaCl溶液B表示解離,需要用質量分數(shù)8%的鹽酸處理烘干后的裝片C表示用緩水流沖洗,以免影響染色D表示用甲基綠和吡羅紅對標
3、本先后進行染色二用顯微鏡觀察多種多樣的細胞三觀察線粒體和葉綠體1.實驗原理(1)觀察葉綠體應選用富含葉綠體的蘚類葉片或菠菜葉等。由于葉綠體本身含有色素,呈綠色,所以不需要染色。(2)觀察線粒體應選用動物或人體細胞,如人口腔上皮細胞。用健那綠染液染色,健那綠染液是專一性用于線粒體染色的活細胞染料,能將線粒體染成藍綠色。2.實驗步驟(1)葉綠體的觀察:低倍鏡觀察:在低倍鏡下找到葉肉細胞高倍鏡觀察:在高倍鏡下,觀察葉綠體的形態(tài)和分布情況(2)線粒體觀察:制片低倍鏡觀察:找到口腔上皮細胞高倍鏡觀察:線粒體呈藍綠色,細胞質接近無色3.注意點5個(1)觀察葉綠體應選用細胞內(nèi)葉綠體數(shù)量較少、體積較大、葉片薄
4、的植物(如苔蘚類,黑藻,菠菜下表皮帶葉肉細胞)(2)觀察線粒體應選擇無色細胞如口腔上皮細胞。不能選擇含葉綠體的植物細胞,因為葉綠體的綠色會影響被染成藍綠色的線粒體的觀察。(3)該實驗要保持細胞的生活狀態(tài),臨時裝片隨時保持有水狀態(tài)。觀察線粒體需染色。(4)健那綠染液是專一性對線粒體染色的活體染料,可使活細胞中線粒體呈現(xiàn)藍綠色,而細胞質接近無色。(5)線粒體和葉綠體的雙層膜是電子顯微鏡下能看到而光學顯微鏡下看不到的結構。【即時鞏固】(2014·宿州模擬)下列有關用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體的實驗說法不正確的是()A健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料,可以使活細胞中線粒體呈現(xiàn)藍綠色B觀察
5、葉綠體時選用蘚類的葉或黑藻的葉,原因是葉片薄而小,葉綠體清楚C用菠菜葉作實驗材料,要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉D可用高倍鏡直接觀察葉綠體和線粒體四觀察植物細胞的質壁分離和復原1實驗原理成熟的植物細胞構成滲透系統(tǒng)可發(fā)生滲透作用。2質壁分離與復原實驗流程3.植物細胞質壁分離及復原有關的5個總結(1)實驗材料的選擇(紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞、黑藻葉肉細胞)一般不選擇細菌細胞,它能發(fā)生質壁分離,但現(xiàn)象不明顯。不能選擇動物細胞,它無細胞壁,不能發(fā)生質壁分離現(xiàn)象。(2)實驗試劑使用使用濃度過高的蔗糖溶液(0.5 g/mL),質壁分離現(xiàn)象明顯,但不能復原,因為溶液濃度過高,細胞過度失水而死亡。使用質量濃度
6、為1 mol·L1的KNO3溶液,因為K和NO可被細胞吸收,使細胞液濃度增大,所以細胞先發(fā)生質壁分離后又自動復原(尿素、甘油、乙二醇等現(xiàn)象同上)。(3)發(fā)生質壁分離時在細胞壁和細胞膜之間充滿的是外界溶液,原因是細胞壁具有全透性。(4)質壁分離與復原過程中水分移動是雙向的,總結果是單向的。(5)本實驗用顯微鏡觀察了三次,第一次與第二次形成對照,第三次與第二次形成對照,該對照方法為自身對照。4質壁分離實驗的拓展應用(1)判斷成熟植物細胞是否有生物活性(2)測定細胞液濃度范圍 (3)比較不同植物細胞的細胞液濃度(4)比較未知濃度溶液的濃度大小(5)鑒別不同種類的溶液(如KNO3和蔗糖溶液)
7、【即時鞏固】(2014·江蘇四市調(diào)研)某同學探究“不同濃度蔗糖溶液對葉表皮細胞形態(tài)的影響”,得到下圖所示結果。相關敘述不正確的是()A實驗主要原理是成熟的植物細胞能夠發(fā)生滲透作用B實驗中需要使用血細胞計數(shù)板、蓋玻片、顯微鏡等儀器C葉表皮細胞浸潤在蒸餾水中時,細胞會發(fā)生膨脹D結果表明大多數(shù)細胞的細胞液濃度介于0.20.25 mmol/L之間五觀察細胞的有絲分裂1實驗原理(1)植物的分生組織細胞有絲分裂較為旺盛。(2)有絲分裂各個時期細胞內(nèi)染色體行為變化不同,根據(jù)各個時期內(nèi)染色體的變化情況,識別該細胞處于有絲分裂的哪個時期。(3)細胞核內(nèi)的染色體(質)易被堿性染料著色。2實驗操作步驟及分
8、析過程操作步驟說明根尖培養(yǎng)實驗前34 d,將洋蔥放在瓶內(nèi)裝滿清水的廣口瓶上,底部接觸清水,置于溫暖處,常換水,待根長約5 cm時取用裝片制作取材剪取根尖23 mm(注意取材時間)解離解離液:質量分數(shù)為15%的鹽酸和體積分數(shù)為95%的酒精按11體積比混合時間:35 min目的:使組織中的細胞相互分離開來漂洗漂洗液:清水時間:約10 min目的:洗去解離液,防止解離過度染色染色液:0.01 g/mL的龍膽紫溶液或0.02 g/mL的醋酸洋時間:35 min目的:使染色體(或染色質)著色紅溶液裝片制作制片用鑷子將處理過的根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一
9、片載玻片,然后用拇指輕輕地按壓載玻片觀察先低倍鏡觀察:找到分生區(qū)細胞(正方形、排列緊密) 后高倍鏡觀察:找出各時期細胞,觀察特點并記錄各時期的細胞數(shù)目繪圖中期細胞繪圖要點:植物細胞形態(tài)近正方形、著絲點排列在赤道板上;有染色單體、紡錘體;無核膜、核仁和中心體3.易錯點5個(1)解離時間要嚴格控制,解離時間不能太短,否則細胞間果膠未溶解,壓片時細胞不易分散;時間過長則細胞分離過度、過于酥軟,無法取出根尖進行染色和制片。(2)漂洗是為洗去細胞內(nèi)部的鹽酸,因此要保證足夠的時間,否則會影響對染色體(質)的染色。(3)控制染色時間,染色時間不能太短,否則染色體或染色質不能完全著色;時間過長則使細胞核等其他
10、部分充滿染色劑無法分辨染色體。(4)對細胞有絲分裂的過程觀察不可能看到連續(xù)的分裂過程,因為在解離過程中細胞已經(jīng)死亡,我們觀察到的只是一個固定的時期,要不斷地移動裝片,在不同的視野中找到各個時期的分裂圖像,所以在制作裝片時要讓細胞分散成一層,這樣才能找到各個分裂時期的細胞。(5)在顯微鏡下觀察到間期的細胞數(shù)目最多,因為間期歷時最長。【即時鞏固】在“觀察植物細胞的有絲分裂”實驗中,以下操作和結論正確的是()A剪取5 cm根尖,用15%鹽酸和甲基綠分別解離和染色B持續(xù)觀察細胞,能看到分裂成兩個子細胞C細胞中DNA數(shù)是細胞中的二倍D觀察裝片時,時期的細胞數(shù)目最多六觀察細胞的減數(shù)分裂1、實驗步驟(1)裝
11、片制作(同有絲分裂裝片制作過程):解離漂洗染色壓片。(2)顯微觀察:2.觀察減數(shù)分裂實驗的2個注意點(1)實驗材料的選取宜選用雄性個體生殖器官,其原因為:雄性個體產(chǎn)生精子數(shù)量多于雌性個體產(chǎn)生卵細胞數(shù)量。在動物卵巢內(nèi)的減數(shù)分裂沒有進行徹底,排卵時排出的僅僅是次級卵母細胞,只有和精子相遇后,在精子的刺激下,才繼續(xù)完成減分裂。(2)精巢內(nèi)精原細胞既進行有絲分裂,又進行減數(shù)分裂,因此可以觀察到染色體數(shù)為N、2N、4N等不同的細胞分裂圖像。【即時鞏固】小鼠常被用作研究人類遺傳病的模式動物。請?zhí)畛溆^察小鼠細胞減數(shù)分裂的實驗步驟。供選材料及試劑:小鼠的腎臟,睪丸、肝臟,蘇丹染液,醋酸洋紅染液,詹納斯綠B(健那綠)染液、解離固定液。(1)取材:用_作實驗材料。(2)制片:取少量組織低滲處理后,放在_溶液中,一定時間后輕輕漂洗。將漂洗后的組織放在載玻片上,滴加適量_。一定時間后加蓋玻片,_。(3)觀察:用顯微鏡觀察時,發(fā)現(xiàn)幾種不同特征的分裂中期細胞。若它們正常分裂,產(chǎn)生的子細胞是_。下圖是觀察到的同源染色體(A1和A2)的配對情況。若A1正常,A2發(fā)生的改變可能是_。書是我們時代的生命別林斯基書籍是巨大的力量列寧書是人類進步的階梯高爾基書籍是人類知識的總統(tǒng)莎士比亞書籍是人類思想的寶庫烏申斯基書籍舉世之寶梭羅好的書籍是最貴重的珍寶別林斯基書是唯一不
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