板藍(lán)根化學(xué)成分研究

1、板藍(lán)根化學(xué)成分研究孫琴1*，趙劍2，張?jiān)婌o1，姜黎1（1.瀘州醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，四川 瀘州 646000；2.瀘州醫(yī)學(xué)院附屬中醫(yī)醫(yī)院，四川 瀘州 646000）摘要 目的：研究板藍(lán)根的化學(xué)成分。方法：運(yùn)用多種層析分離手段，通過(guò)1H，13C-NMR等波譜技術(shù)及理化數(shù)據(jù)鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果：從板藍(lán)根中分離并鑒定了6個(gè)化合物，分別為（1）正二十一烷酸、（2）谷甾醇、（3）靛玉紅、（4）腺嘌呤核苷、（5）大黃素、（6）Fructopyrano-(14)-glucopyranose。結(jié)論：化合物1和6為首次從板藍(lán)根中分離得到。關(guān)鍵詞：板藍(lán)根；化學(xué)成分 Isolation and identificatio

2、n of chemical constituents from lsatidis Radix Sun Qin1, Zhao jian2, Zhang Shi-jing1,Jiang Li1（1. Pharmacy of Luzhou Medical College, Luzhou 646000,China; 2.Affiliated Hospital of Chinese Medicine, Luzhou Medical College, Luzhou, 646000,China）Abstract Objective: To study the chemical constituents fr

3、om lsatidis Radix. Methods: The chemical constituents of the plant were isolated and purified by column chromatography and their structures were elucidated by spectroscopic analysis. Results: Six compounds were isolated and identified as n-heneicosanoic acid, -sitosterol, indirubin, adenosine, emodi

4、n, Fructopyrano-(14)-glucopyranose. Conclusion: Compounds 1 and 6 are isolated for the first time from the plants of lsatidis Radix.Key words: lsatidis Radix; chemical constituents板藍(lán)根Isatidis Radix為臨床常用中藥，始載于神農(nóng)本草經(jīng)，味苦，性寒，有清熱解毒、涼血利咽之功能，臨床常用于治療病毒性及細(xì)菌感染性疾病，其抗病毒的療效確切。已有學(xué)者1-4對(duì)板藍(lán)根的醇提物和水提取物的化學(xué)成分進(jìn)行了分離鑒定。然而，其

5、抗菌抗病毒的作用物質(zhì)基礎(chǔ)還并不明確，為進(jìn)一步研究其抗病毒的作用物質(zhì)，本論文對(duì)板藍(lán)根的化學(xué)成分進(jìn)行了進(jìn)一步的分離，為下一步藥效學(xué)的研究奠定基礎(chǔ)。1 儀器和材料ZF-90型暗箱式紫外透射儀（上海顧村電光儀器廠），X-4型顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀（上海精密科學(xué)儀器有限公司），Bruker Avance 400和500型核磁共振儀（德國(guó)Bruker公司），Autospec Premier質(zhì)譜儀（美國(guó)Waters公司），薄層層析和柱層析硅膠（青島海洋化工廠），Sephadex LH-20(Amersham Biosciences)，其余試劑均為化學(xué)純或分析純。板藍(lán)根（Isatidis Radix）購(gòu)于瀘州百草堂中

6、藥飲片公司，經(jīng)瀘州醫(yī)學(xué)院生藥教研室稅丕先教授鑒定為十字花科植物菘藍(lán)Isatis indigotica Fort.的干燥根。2 提取與分離10 kg板藍(lán)根干燥飲片，分別用10倍量、8倍量的95乙醇提取2.0、1.5 h，合并兩次提取液，過(guò)濾并濃縮至干，減壓干燥至恒重，得浸膏140克。拌樣上200-300目硅膠吸附，用二氯甲烷：甲醇梯度洗脫（100:0-1:1）共101組分，每組分1000ml，其中二氯甲烷：甲醇24:1部分得到化合物1（20mg）；二氯甲烷：甲醇20:1和二氯甲烷：甲醇10:1部分得到化合物2（50mg）和3（25mg）；二氯甲烷：甲醇7:1部分再經(jīng)過(guò)硅膠柱色譜、凝膠柱色譜得到化

7、合物4（16mg）；二氯甲烷：甲醇3:1部分得到化合物5（10mg）；二氯甲烷：甲醇1:1部分經(jīng)反復(fù)重結(jié)晶得到化合物6 （300mg）。其中化合物1和化合物6為首次從該植物中分離得到。3 結(jié)構(gòu)鑒定化合物1，分子式C21H42O2，無(wú)色油狀，Negative ESI-MS: m/z = 325M-H-; 從該化合物核磁數(shù)據(jù)可以看出為長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)，碳譜173.3信號(hào)顯示有羧基信號(hào)，故推測(cè)為脂肪酸類化合物，根據(jù)分子量325可得到分子式為C21H42O2，1H-NMR (500 MHz, CD3OD) : 2.29 (1H, t, J = 7.6 Hz), 0.87 (3H, t, J = 7.6 Hz)

8、; 13C-NMR (100 MHz, CD3OD) : 173.3 (s), 34.0 (t), 31.9 (t), 24.8 (t), 22.7 (t), 14.1 (q)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)5報(bào)道一致，故鑒定為正二十一烷酸 (n-heneicosanoic acid)?；衔?，分子式C29H50O，白色晶體，mp 138140 。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) : 5.35 (1H, br t, J = 2.5 Hz), 3.53 (1H, m), 1.00 (3H, s), 0.91 (3H, d, J = 6.2 Hz), 0.68 (3H, s); 13C-NMR (

9、100 MHz, CDCl3) : 140.7 (s), 121.7 (d), 71.8 (d), 11.8 (q), 11.9 (q)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)6報(bào)道一致，與-谷甾醇對(duì)照品共薄層Rf值相同，混熔點(diǎn)無(wú)下降，故鑒定為谷甾醇 (sitosterol)。化合物3，分子式C15H10N2O2，紅色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)347349。1H-NMR(400MHZ, DMSO-d6 ): 11.02(1H, s, NH), 10.90(1H, s, NH), 8.76(1H, d, J =8.0Hz, H-4), 7.64(1H, d, J =7.2 Hz, H-4), 7.56(1H, t, J =7.2,

10、 8.0 Hz, H-6), 7.40(1H, d, J =8.4 Hz, H-7 ), 7.25(1H, t, J =7.6, 7.0 Hz, H-6), 7.00(2H, t, J =7.2, 7.6Hz, H-5, 5), 6.89(1H, d, J =7.6 Hz, H-7); 13C-NMR(100MHz, DMSO-d6) : 137.3, 129.5, 124.9, 124.6, 121.5, 120.0, 113.7, 109.8，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)7報(bào)道一致，與靛玉紅對(duì)照品共薄層Rf值相同，混熔點(diǎn)無(wú)下降，故鑒定為靛玉紅(indirubin)?；衔?，分子式C10H13N5O4，

11、無(wú)色粉末，根據(jù)給出的核磁碳譜，顯示有10個(gè)信號(hào)，氫譜中8.18和8.30的2個(gè)氫可以看出該化合物含有雜原子，分子量為268，應(yīng)該含有偶數(shù)個(gè)雜原子，Positive ESI-MS: m/z = 269M+H+; 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) : 8.18 (1H, s, H-2), 8.30 (1H, s, H-8), 6.01 (1H, d, J = 6.0, 10.5 Hz, H-1), 4.75 (1H, t, J = 6.0, 10.5 Hz, H-2), 4.38 (1H, dd, J = 6.0, 10.5 Hz, H-3), 4.26 (1H, dd, J = 6

12、.0, 10.5 Hz, H-4), 3.89 (1H, dd, J = 6.0, 10.5 Hz, H-5a), 3.80 (1H, dd, J = 6.0, 10.5 Hz, H-5b); 13C-NMR (100 MHz, CD3OD) : 153.5 (d, C-2), 149.4 (s, C-4), 119.8 (s, C-5), 156.7 (s, C-6), 141.6 (d, C-8), 89.6 (d, C-1), 74.8 (d, C-2), 71.8 (d, C-3), 87.1 (d, C-4), 62.6 (t, C-5)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)8報(bào)道一致，與腺嘌呤核苷對(duì)照品

13、共薄層Rf值相同，故鑒定為腺嘌呤核苷 (adenosine)?；衔?，分子式C15H10O5，磚紅色粉末，該化合物為紅色粉末，且核磁碳譜給出15個(gè)碳信號(hào)，其中有2個(gè)共軛的羰基信號(hào)189.6和181.1，除去21.6的甲基和2個(gè)羰基剩余12個(gè)碳信號(hào)均在烯區(qū)，故推斷該化合物為蒽醌類，1H-NMR(400 MHZ, DMSO-d6 ): 11. 98(1H，s, 8-OH), 11.90(1H, s, 1-OH), 11.35(1H, s, 6-OH), 7.34(1H, s, 5-H), 7.04(1H, s, 4-H), 6.50(1H, s, 2-H), 7.00(1H, s, 7-H),

14、2.34(3H, s, CH3); 13C-NMR(100 MHZ, DMSO-d6) : 189 .6(C-9), 181.1(C-10), 165.7(C-6), 164.5(C-8), 161.5(C-1), 148.2(C-3), 135.0(C-11), 132.6(C-14), 124.1(C-2), 120.5(C-4), 113.2(C-13), 108.9(C-5), 108.9(C-12), 107.9(C-7), 21.6(CH3)，與文獻(xiàn)9數(shù)據(jù)分析比較，化合物結(jié)構(gòu)為1，3，8一三羥基-6-甲基蒽醌(1，3，8-trihydroxy-6-methylanthraquino

15、ne)，即大黃素。與大黃素對(duì)照品共薄層Rf值相同，故鑒定為大黃素 (emodin)?；衔?，C12H22O11，無(wú)色粉末，綜合核磁碳譜共有12個(gè)碳信號(hào)，且化學(xué)位移在60-105ppm范圍，可能為二糖類，Negative ESI-MS: m/z = 341M-H- ; 1H-NMR (500 MHz, D2O) : 5.45 (1H, d, J = 3.8 Hz, H-1), 3.40-4.30 (13H, m); 13C-NMR (100 MHz, D2O) : 92.5 (d, C-1), 74.3 (d, C-2), 72.9 (d, C-3), 81.7 (d, C-4), 76.8

16、(d, C-5), 60.4 (t, C-6), 104.0 (s, C-1), 72.7 (d, C-2), 71.4 (d, C-3), 69.5 (d, C-4), 62.7 (t, C-5), 61.7 (t, C-6)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)10報(bào)道一致，故鑒定為Fructopyrano-(14)-glucopyranose。參考文獻(xiàn)：1左麗，李建北，徐景，等.板藍(lán)根的化學(xué)成分研究J.中國(guó)中藥雜志，2007，32(8)：688-691.2孫東東，李祥，陳建偉，等.板藍(lán)根醇提部位化學(xué)成分研究J.中國(guó)藥房，2007，18(30)：2324-2326.3何立巍，李祥，陳建偉，等.板藍(lán)根水提取液中的

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