生物化學實驗理論考試題答案

1、生物化學實驗理論考試題答案1. 醋酸纖維薄膜電泳時點樣端應靠近電極的哪一端，為什么？答；電泳時點樣端應靠近負極，因為血清中各種蛋白質(zhì)在PH為8.6的環(huán)境中均帶負電，根據(jù)同性相吸，異性相斥原理，點樣端在負極時蛋白質(zhì)向正極泳動從而實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離。2. 用分光光度計測定物質(zhì)含量時，設(shè)置空白對照管的作用,為什么？答；空白對照是為了排除溶劑對吸光度的影響。溶液的吸光度表示物質(zhì)對光的吸收程度，但是作為溶劑也能吸收，反射和透射一部分的光，因此必須以相同的溶劑設(shè)置對照，排除溶劑對吸光度的影響。3. 簡述血清蛋白的醋酸纖維薄膜的電泳原理？答；血清蛋白中各種蛋白質(zhì)離子在電場力的作用下向著與自身電荷相反的方向涌動，

2、而各種蛋白質(zhì)等電點不同，且在PH為8.6時所帶電荷不同，分子大小不等，形狀各有差異，所以在同一電泳下永動速度不同從而實現(xiàn)分離。4. 何謂Rf值？影響Rf值的因素？答;Rf是原點到層析中心的距離與原點到溶劑前沿的距離之比。Rf的大小與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，性質(zhì)，溶劑系統(tǒng)，層析濾紙的質(zhì)量和層析溫度有關(guān)，對同一種物質(zhì)來講Rf是一個常量。5. 什么是鹽析？鹽析會引起蛋白質(zhì)的變性嗎？一般用什么試劑? 答;鹽析是指當溶液中的中性鹽持續(xù)增加時，蛋白質(zhì)的溶解度下降，當中性鹽的濃度達到一定程度的時候，蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象。鹽析不會引起蛋白質(zhì)的變性，因為蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)并未發(fā)生改變，去掉引起鹽析的因素蛋白質(zhì)仍能溶解；一般用

3、飽和硫酸銨溶液進行鹽析6. 簡述DNS法測定還原糖濃度的實驗原理？ 答;還原糖與DNS在堿性條件下加熱被氧化成糖酸，而DNS被還原為棕紅色的3-氨基-5-硝基水楊酸。在一定范圍內(nèi)還原糖的量與3-氨基-5硝基水楊酸顏色的深淺成正比，用分光光度計 測出溶液的吸光度，通過查對標準曲線可計算出3-氨基-5硝基水楊酸的濃度，從而得出還原糖的濃度。7. 影響蛋白質(zhì)沉淀的因素是什么？沉淀和變性有什么聯(lián)系？答;水溶液中的蛋白質(zhì)分子由于表面形成水化層和雙電層從而形成穩(wěn)定的親水膠體顆粒，在一定的理化因素影響下蛋白質(zhì)顆粒因失去電荷和脫水而沉淀。這些因素包括溶液的酸堿度、鹽溶液的濃度、溫度、重金屬離子以及有機溶劑等。

4、變性蛋白質(zhì)不一定沉淀，沉淀的蛋白質(zhì)不一定變性。沉淀時蛋白質(zhì)可能仍然保持天然構(gòu)像，而變性是蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)被破壞失去活性。8. 簡述薄層層析法分離糖類的原理/? 答;薄層層析的實質(zhì)就是吸附層析，也就是在鋪有吸附劑的薄層上，經(jīng)過反復地被吸附劑吸附以及被擴展劑擴展的過程。而吸附劑對不同的物質(zhì)的吸附力不同，從而使糖在薄層上的涌動速度不同達到分離的目的9. 等電點的定義？蛋白質(zhì)在等電點時有哪些特點？答;當溶液的PH為一定數(shù)值時，其中的蛋白質(zhì)正負電荷相等，即凈電荷為零，此時的PH值就是該蛋白質(zhì)等電點。蛋白質(zhì)在等電點時的溶解度最小。10. 蛋白質(zhì)顯色黃色反應的原理是什么?反應結(jié)果為什么深淺不一？答;含有苯環(huán)

5、的氨基酸如酪氨酸和色氨酸，能被硝酸硝化成黃色的物質(zhì)，而且不同蛋白質(zhì)中所含的苯環(huán)數(shù)量不同，造成與試劑反應的程度不同，因此呈現(xiàn)顏色深淺不一 。11. RNA水解后的三大組分是什么？怎樣各自驗證的？答;核糖，磷酸，嘌呤堿。核糖+苔黒酚Fe（濃HCI）綠色物質(zhì)；磷酸+鉬酸銨藍色；嘌呤堿+硝酸銀白色12. 等電點時為什么蛋白質(zhì)溶解度最低？答;蛋白質(zhì)形成膠體二等條件是帶電荷，從而在外表面形成水化膜，導致各膠體顆粒不結(jié)合，當PH等于PI時，靜電荷為零，蛋白質(zhì)分子之間不存在排斥，則聚集沉淀，所以在等電點時溶解度最小。13. 雞蛋清可以用作鉛汞中毒的解毒劑是為什么? 答;由于重金屬離子能與蛋白質(zhì)中帶負電基團如C

6、OOH等作用，生成難溶重金屬的蛋白質(zhì)鹽，減少機體對重金屬的吸收。14. 血清醋酸纖維薄膜電泳可將血清蛋白依次分為哪幾條帶？哪帶電泳最快？影響電泳速度有哪些？答;有血清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白、r-球蛋白；其中血清蛋白點用最快。影響因素蛋白質(zhì)所帶電荷數(shù)，分子大小與形狀以及緩沖液濃度。15. 什么是抑制劑？什么是變性劑？區(qū)別是什么？答;凡是能使酶活性降低而不使酶失活變性的物質(zhì)成為抑制劑；凡是能引起蛋白質(zhì)變性失活的物質(zhì)叫變性劑。抑制劑只是抑制蛋白質(zhì)的特性而變性劑則破環(huán)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。16 簡述橘皮中提取果膠原理？答；果膠不溶于乙醇的原來將其沉淀得到果膠。17 離心管如何在天平上平衡？操作離心時應注意什么?答;把放在小燒杯中的離心管（包括蓋子）和管套放在平衡的天平上，用膠頭滴管取離心液調(diào)平。注