耐藥基因TopoⅡ在肺癌中表達(dá)與預(yù)后的研究

1、 17 中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)揑j chin med univ第29卷 第1期2000年2月耐藥基因topo n在肺癌中表達(dá)與預(yù)后的研究竺空束繼江v王恩華邱務(wù)杉（中血冠其學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室沈陽110001）摘要 目的；明碣非小細(xì)肺展（nonsmall cell lung cancer. nsclc）中topo 1靈達(dá)與紐妖英14細(xì)胞分化僱 度.tnm分期是否和關(guān)；是否彭響nsclc息者的m后。方法：采用s-p尢疫組化方洙，檢測(cè)97例化療誼nsclc 患者中topol的a這情況.結(jié)果,topo 1應(yīng)辮癌中高転達(dá)丨且彩響息者京后.結(jié)論.nsclc中序&著原發(fā)耐知 topol粗達(dá)是nsclc總

2、者丹后巧形響因索之一.關(guān)鍵詞 嚴(yán)“、細(xì)屯爭(zhēng)痊，擔(dān)壯另枸晦'週旦9p免皮紐化方法expression of topo i in nonsmatl celt lung cancersun limen zhu jijiang wang enhua i et al（department of pathology college of basic medical sciences* china medical university shei'yng, 117001）abstract objective: our purpose was to analyze whether the exp

3、ression of topo i is corrrkted to histological type. degree of the tumor cells« and tnm stages whether its expression effects prognosis o( nonsmall cell lung cancer (nsclc) patients. methods ； sp immunohimochemical method wa ised to examine expressions of topo 1 in 97 samples of primary nsclc.

4、results: the positive rate of topo 1 was correlated to histological type (f v0 05) we found topo i ah«ted prognosis of patients. ccnclus5i>a： primary drug resistance exist in nsclc and the expression of topo i is correlated to histolo：cc? type and affects prognosis o( patients.key words nons

5、matl cell lung canceri topoisomerase i i prognosis, sp immunohistochemical method拓?fù)洚悩?gòu)酶 1 ctopoisomerase i , topo i介 導(dǎo)的耐藥,稱為不典型多藥耐藥（atypical mdr , at- mdr）。top。是dna復(fù)制時(shí)必需的酶，催化單鏈 或雙鏈dna短暫的斷裂分離以利復(fù)制。topo視制 劑（抗癌藥）可抑制dna復(fù)制。當(dāng)基皙突變時(shí)，抗獅 藥物不能與其結(jié)合，而產(chǎn)生耐藥本實(shí)臉采用高敏 感的s p免疫組化方法，對(duì)大樣本的實(shí)體腫痼一非 小細(xì)胞肺癌（nonsmall cell lung can

6、e«r, nsclc）中 耐藥基因topo i的衷達(dá)進(jìn)行研究為臨床制定個(gè)體 化療方案提供有益的信息。1材料與方法1.1材料吹集甲國醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院外科 病理室1978年!月1994年12月手術(shù)切除原發(fā) 性肺癌標(biāo)本，經(jīng)常規(guī)福爾馬林固定，石蠟包埋，挑選 有完整隨訪記錄和tnm分期且術(shù)后均采用化療的 病例97例。其中靖癌55例（高分化10例中分化 21例低分化24例），腺癌39例（高分化12例、中 分化14例，低分化13例，大細(xì)胞癌3例。年齡27 78歲，生存期的計(jì)算是從手術(shù)日期起到隨訪日期 或由于復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移而死亡的日期為止。1-2免疫組化方法 將標(biāo)本制成4 的連續(xù)切 片經(jīng)阮蠟、脫苯、

7、水化后采用福州邁新公司生產(chǎn)的 即用型sp免疫組化試劑盒進(jìn)行染色，其中topo i 單克隆抗體經(jīng)高壓鍋抗原修復(fù)，4£冰箱過夜。陰性 對(duì)照采用pbs液代祥一抗其它步驟不變.1.3結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析每張切片都選 較好的5個(gè)視野計(jì)數(shù)500個(gè)尙細(xì)胞中topo i染色 的核陽性數(shù).細(xì)胞核無著色定為陰性.將陽性反應(yīng) 按陽性刪細(xì)胞占全部細(xì)胞的百分比分為4個(gè)等級(jí): <25%為+ ;26%-50%為卄51 %75%為卅； 76%為廂。其中統(tǒng)計(jì)學(xué)分析中以著色細(xì)胞超過25% 為免疫組化反應(yīng)陽性.<25%為陰性統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用sas軟件進(jìn)行x2檢驗(yàn)、t檢 驗(yàn)2結(jié)果topo i主要在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)

8、，陽性反應(yīng)細(xì)胞呈 局灶性，在周圍正常肺組織胞漿或胞核無一著色（見 圖1）。topo i的總陽性率為6596%,其表達(dá)與 nsclc的組織類型相關(guān)（見表1）,與細(xì)胞分化程度 及tnm分期均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。topo i陽性表達(dá)者 乎均生存時(shí)間大于陰性表達(dá)病例（p<0. 05） 見表 2。線普資訊 http:/www.cqvip.coin中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)第29卷1肺鱗癌癌細(xì)胞桟中topol的陽性表達(dá)sp x4o0figure 1 squamous cel carcinoma of the lung showing positive reaction in nuckar of carcinoma

9、cells by topo < monoclonal antibody. streptavidin peroxidase conjugated method x400表1 topol在nsclc中表達(dá)與組織類型關(guān)系table 1 relationship between histological type and expression of topo i組織類型n+陽性率（）s5411474. 55 °39211853. 85*大細(xì)胞癌32133. 33注：百分?jǐn)?shù)（陽性鍥/總例數(shù)）p<0. 05衣2topo 1喪達(dá)與nsclc術(shù)后平均生存時(shí)間關(guān)系(丘table 2 exp

10、ression of topo i and patientssurvival after tumor resection表達(dá)n生存時(shí)間gd19751.683即+131 098. 46± 1038. 84h281 487. 14 士;2492241 123. 75: 1132. 98糊101 o6o.ooih35.75p<0.053討論實(shí)驗(yàn)證明東些耐藥腫胸細(xì)胞內(nèi)藥物聚集總余上接第16頁)cancer rhoraft jpt: j cancer (gann)* 1985, 761 43524 丁俊文賈心善歸癌希儀抗原的表達(dá)日本醫(yī)學(xué)介紹，1994,15 (2)i 935 satomu

11、ra yo«hitake» norio sawabu» et al. expression of virous tialylafed carbohydrate antigen in rnaligrutnt pancreatic timue«« pancrcast 1991. 6(4)i 4484586 ichihara s> aoyirna h intraductal carcinoma of the breast aeso ciated with high levels of circulating txmot”$oci0ted ant

12、igens并無減少亦無p gp的過憾表達(dá)，而是與細(xì)胞內(nèi)酶 的改變或dna修復(fù)機(jī)制等有關(guān)故提出at-mdr 概念并認(rèn)為at-mdr出現(xiàn)可能咼由于藥物識(shí)別結(jié) 合）部位、atp消耗.topo i數(shù)橄和分布、確酸化等 的改變所引起的，其中tcpc i在耐藥中的作用更為 突出叭eijdcms等用人nsclc細(xì)胞系sw-1573分析 topo i的變化與肺癌mdr的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)在耐藥細(xì) 胞中topo i數(shù)最滅少和活性減低推測(cè)肺您mdr 的產(chǎn)生與topo i數(shù)最減少和（或）活性降低育關(guān)*。 雖然topo i表達(dá)與耐藥關(guān)系密切，但目前的嶄究主 要集中于體外細(xì)胞觀察，對(duì)體內(nèi)或臨斥上的topo i 表達(dá)與腫痛耐藥關(guān)

13、系則報(bào)道不多.本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)97例 未經(jīng)化療的nsclc患者tope i表達(dá)情況其結(jié)果 topo i是在鱗癌中高表達(dá)（屮=435e p v005） 符合勞癌對(duì)化療藥物敏感的現(xiàn)象，進(jìn)一步表明topo i表達(dá)與耐藥關(guān)系密切。topo i表達(dá)對(duì)預(yù)后有影 響,其陽性表達(dá)者平均生存時(shí)間大于陰性表達(dá)病例. 這表明toro §在評(píng)檢玫后方面也起重要作用。姜考文獻(xiàn)1 dt jongsw xooistra ajr de vrie e. et ah topoisomerase j as a target of vm-26 and 4*-< 9-acridmylamino） mcthanesulfonm

14、- amside in atypical urokidtug resistant human small cell lung car- cinoma cells% cancer res 1993. 53（5） i 106410712 cole spci chanda er dicke fpi et al. non-p-gycoprotein- mediated mukidrug resistance in a broajl cell lung cancer cell hnei evidence for decreased susceptiboity to drug-induced dna da

15、mage and reduced levels of topoinoraerase i cancer rm 1991> 51（13）i 3345-33523 eijdenu ew t de haas m> timmerman aj» ct reduced topoiaomerabc i activity in multidrug-resiatant human non- small-cell lung cancer cell lia“ br j cancer 1995» 71（1） i 40 -47<1998 12-04 收槁(ca 15-3 and ncc-tt-4-39), cancer 199“ 73(8)： 21bl- 21857 hatakeyaroa s&#