實(shí)驗(yàn)2,3 植物組織含水量的測(cè)定

1、實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 植物組織含水量的測(cè)定植物組織含水量的測(cè)定 - - 水分測(cè)定儀法水分測(cè)定儀法實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三 植物組織水勢(shì)的測(cè)定植物組織水勢(shì)的測(cè)定 - - 小液流法小液流法 含水量含水量是表示植物組織水分狀況的常用指標(biāo)。是表示植物組織水分狀況的常用指標(biāo)。對(duì)于正常生長(zhǎng)的組織，含水量的多少直接影響植對(duì)于正常生長(zhǎng)的組織，含水量的多少直接影響植物的生長(zhǎng)狀況；對(duì)于水果、蔬菜，含水量的多少物的生長(zhǎng)狀況；對(duì)于水果、蔬菜，含水量的多少對(duì)品質(zhì)有著很大的影響；對(duì)于貯藏中的種子，含對(duì)品質(zhì)有著很大的影響；對(duì)于貯藏中的種子，含水量的多少對(duì)于能否安全貯藏起著決定性的作用。水量的多少對(duì)于能否安全貯藏起著決定性的作用。 植物組織含水

2、量的測(cè)定在植物生理學(xué)研究中植物組織含水量的測(cè)定在植物生理學(xué)研究中具有重要的意義。具有重要的意義。實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 植物組織含水量的測(cè)定植物組織含水量的測(cè)定 -水分測(cè)定儀法水分測(cè)定儀法一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康膎了解含水量的表示方法了解含水量的表示方法n了解了解絕對(duì)含水量絕對(duì)含水量和和相對(duì)含水量相對(duì)含水量的區(qū)別的區(qū)別n掌握掌握HG63HG63水分測(cè)定儀的使用水分測(cè)定儀的使用二、原理二、原理n表示組織含水量的方法有兩種：一是以干重為基數(shù)表示；二是以鮮重為基數(shù)表示。從而分為干重法和鮮重法： 植物組織的含水量常用水分含量占鮮重或干重的百分比來(lái)表示。在研究水分生理時(shí)，相對(duì)含水量與水分飽和虧也是常用的水分生理指

3、標(biāo)。 測(cè)定植物組織的鮮重(FW)、干重(DW)、飽和鮮重(SFW)后，用下式計(jì)算以上幾個(gè)生理指標(biāo)：組織含水量組織含水量( (占鮮重占鮮重%) =%) = ( (FWFW-DW/FWDW/FW) )100 100 組織含水量組織含水量( (占干重占干重%) = %) = ( (FWFW-DW/DWDW/DW）100100組織相對(duì)含水量組織相對(duì)含水量(RWC%) = (RWC%) = ( (FWFW-DW)/DW)/( (SFWSFW-DWDW) )100100組織水分飽和虧組織水分飽和虧(WSD%) = (1-RWC)RWC)100100三、材料、儀器與用具三、材料、儀器與用具1、材料：大葉紫薇

4、(Lagerstroemia speciosa L.) （單數(shù)組）和海芋(Alocasia macrorrhizos L.) （雙數(shù)組）。2、儀器與用具：HG63鹵素水分測(cè)定儀、剪刀。頂頂面面觀觀HG63HG63鹵素水分測(cè)定儀鹵素水分測(cè)定儀l 主要由一臺(tái)鹵素加熱單元和一臺(tái)精密天平兩個(gè)儀器組成。l 儀器根據(jù)熱解重量原理：測(cè)定開(kāi)始，水分測(cè)定儀測(cè)定樣品的重量，然后，樣品由內(nèi)置的鹵素加熱單元和水分蒸發(fā)器快速加熱。在干燥過(guò)程中，儀器連續(xù)測(cè)定樣品重量并顯示失去的水分。干燥結(jié)束時(shí)，顯示水分含量和干燥物質(zhì)含量作為最終結(jié)果。 HG63 HG63鹵素水分測(cè)定儀的特點(diǎn)鹵素水分測(cè)定儀的特點(diǎn)1、操作簡(jiǎn)便、測(cè)量準(zhǔn)確。2、

5、采用鍍金輻射體，確保樣品加熱的均勻性。3、兼顧樣品稱(chēng)重和干燥功能，在干燥過(guò)程中，水分儀持續(xù)測(cè)量并即時(shí)顯示樣品丟失的水分含量%，干燥程序完成后，最終測(cè)定的水分含量值被鎖定顯示。 HG63 HG63鹵素水分測(cè)定儀的特點(diǎn)鹵素水分測(cè)定儀的特點(diǎn)4 4、與國(guó)標(biāo)烘箱加熱法相比、與國(guó)標(biāo)烘箱加熱法相比，鹵素加熱可以在高溫鹵素加熱可以在高溫下將樣品均勻地快速干燥，樣品表面不易受損，下將樣品均勻地快速干燥，樣品表面不易受損，其其檢測(cè)結(jié)果與國(guó)標(biāo)烘箱法具有良好的一致性檢測(cè)結(jié)果與國(guó)標(biāo)烘箱法具有良好的一致性, ,具有可具有可替代性替代性, ,且檢測(cè)效率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于烘箱法。且檢測(cè)效率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于烘箱法。一般樣品只一般樣品只需幾分鐘即

6、可完成測(cè)定。需幾分鐘即可完成測(cè)定。 HG63HG63鹵素水分測(cè)定儀技術(shù)參數(shù)鹵素水分測(cè)定儀技術(shù)參數(shù)n測(cè)量值測(cè)量值 可讀性水分含量可讀性水分含量 0.01 % 重復(fù)性重復(fù)性(sd) 2 g樣品樣品 0.05 % 重復(fù)性重復(fù)性(sd) 10 g樣品樣品 0.01 %n測(cè)定結(jié)果評(píng)估測(cè)定結(jié)果評(píng)估 水分和干重含量水分和干重含量% 質(zhì)量質(zhì)量 g ATRO Dry, ATRO Wet n天平天平 最大樣品量最大樣品量 61 g 最小樣品量最小樣品量 0.1 g 可讀性可讀性 1 mgn干燥單元干燥單元 干燥技術(shù)干燥技術(shù) 環(huán)形鹵素?zé)舡h(huán)形鹵素?zé)?溫度范圍溫度范圍 40200C 溫度調(diào)節(jié)增量溫度調(diào)節(jié)增量 1C 升溫

7、程序升溫程序 標(biāo)準(zhǔn)、快速標(biāo)準(zhǔn)、快速n關(guān)機(jī)模式關(guān)機(jī)模式 時(shí)間控制時(shí)間控制(分鐘分鐘)+手動(dòng)手動(dòng) 0.5-480 自動(dòng)關(guān)機(jī)自動(dòng)關(guān)機(jī)(5 級(jí)級(jí)) 自由關(guān)機(jī)模式自由關(guān)機(jī)模式 n用戶(hù)支持用戶(hù)支持 方法測(cè)試功能方法測(cè)試功能(Test) 自動(dòng)進(jìn)樣腔自動(dòng)進(jìn)樣腔 測(cè)定方法儲(chǔ)存測(cè)定方法儲(chǔ)存 10 測(cè)定方法命名測(cè)定方法命名(數(shù)字?jǐn)?shù)字) 每個(gè)樣品注釋行每個(gè)樣品注釋行 1 自由因子自由因子 LCD背亮液晶顯示屏背亮液晶顯示屏 內(nèi)置打印機(jī)內(nèi)置打印機(jī)HA-P43 HG63P標(biāo)配標(biāo)配n質(zhì)量管理質(zhì)量管理 天平校驗(yàn)天平校驗(yàn) 50 g 加熱單元校驗(yàn)加熱單元校驗(yàn) 100/160C 稱(chēng)量指導(dǎo)稱(chēng)量指導(dǎo) 主動(dòng)主動(dòng)/被動(dòng)被動(dòng) 參數(shù)修改保護(hù)參

8、數(shù)修改保護(hù) 符合符合GLP / GMP規(guī)范的打印輸出規(guī)范的打印輸出 該關(guān)機(jī)模式依據(jù)單位時(shí)間失重，只要在指定時(shí)間該關(guān)機(jī)模式依據(jù)單位時(shí)間失重，只要在指定時(shí)間內(nèi)平均失重小于預(yù)設(shè)置，儀器就認(rèn)為干燥過(guò)程完成，并內(nèi)平均失重小于預(yù)設(shè)置，儀器就認(rèn)為干燥過(guò)程完成，并自動(dòng)終止測(cè)量過(guò)程。在干燥過(guò)程中所顯示的時(shí)間表示測(cè)自動(dòng)終止測(cè)量過(guò)程。在干燥過(guò)程中所顯示的時(shí)間表示測(cè)量過(guò)程經(jīng)歷時(shí)間。量過(guò)程經(jīng)歷時(shí)間。自動(dòng)關(guān)機(jī)自動(dòng)關(guān)機(jī)(5(5級(jí)級(jí)) ) 測(cè)量結(jié)果可靠性的相關(guān)因素測(cè)量結(jié)果可靠性的相關(guān)因素1. 1. 樣品的制備樣品的制備 樣品制備決定了測(cè)量速度和結(jié)果的準(zhǔn)確性。請(qǐng)注意樣品制備的基本規(guī)則：請(qǐng)注意樣品制備的基本規(guī)則：l 所選擇樣品應(yīng)

9、盡可能小(0.10.5 g).l 樣品量大需要更多干燥時(shí)間，因此而延長(zhǎng)測(cè)量過(guò)程。若樣品量少，則測(cè)量結(jié)果不具代表性。l 注意樣品的取量和均勻。樣品越不均勻，樣品量要求則越大。l 樣品要均勻分布于樣品盤(pán)上，盡量增加樣品表面積，便于熱量吸收。2.2.主要測(cè)量參數(shù)的正確選擇主要測(cè)量參數(shù)的正確選擇l 干燥溫度-根據(jù)樣品正確選擇干燥程序后（ 或 ），設(shè)置好溫度。l 關(guān)機(jī)模式-可確定樣品結(jié)束干燥的時(shí)間。l 干燥時(shí)間。注意：注意：儀器上的平衡珠是否處儀器上的平衡珠是否處于水平狀態(tài)，稱(chēng)盤(pán)是否放平。于水平狀態(tài)，稱(chēng)盤(pán)是否放平。1 1、開(kāi)機(jī)按 ,儀器自檢 選擇與設(shè)置“干燥程序”（快速 ，75） 選擇“關(guān)機(jī)模式”（出廠

10、設(shè)置 ，適用于大多數(shù)樣品） 選擇“結(jié)果顯示類(lèi)型”（樣品水分含量以占鮮重%顯示 ） 去皮重按 。2、植物葉片剪碎，注意大小盡量一致（2 mm 5 mm），取樣均勻，快速。四、操作步驟四、操作步驟3 3、按“打開(kāi)/關(guān)閉自動(dòng)加樣室，按鍵 ，加樣品0.10.5 g取出樣品盤(pán)，將樣品擺勻 再按一次 鍵關(guān)閉。4、按start鍵，儀器開(kāi)始工作。待儀器自動(dòng)停止工作后，讀取測(cè)量結(jié)果。準(zhǔn)備稱(chēng)準(zhǔn)備稱(chēng)量狀態(tài)量狀態(tài)準(zhǔn)備去準(zhǔn)備去皮狀態(tài)皮狀態(tài)準(zhǔn)備啟準(zhǔn)備啟動(dòng)狀態(tài)動(dòng)狀態(tài)干燥與測(cè)干燥與測(cè)量狀態(tài)量狀態(tài)l 本次實(shí)驗(yàn)要有平行！本次實(shí)驗(yàn)要有平行！l 結(jié)果要算出結(jié)果要算出標(biāo)準(zhǔn)差標(biāo)準(zhǔn)差。 含水量（%）= 78.9 0.568注意：注意：一一

11、. .實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆罩参锛?xì)胞水勢(shì)概念及計(jì)算公式，掌握植物細(xì)胞水勢(shì)概念及計(jì)算公式，了解小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)的方法。了解小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)的方法。實(shí)驗(yàn)三植物組織水勢(shì)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)三植物組織水勢(shì)的測(cè)定（小液流法）（小液流法）德天瀑布黃果樹(shù)瀑布二二. .實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理： 植物細(xì)胞、組織之間以及植物體和環(huán)境間的水植物細(xì)胞、組織之間以及植物體和環(huán)境間的水分間移動(dòng)方向都由水勢(shì)差決定。分間移動(dòng)方向都由水勢(shì)差決定。 當(dāng)植物細(xì)胞或組織放在某一溶液中時(shí)，如蔗糖當(dāng)植物細(xì)胞或組織放在某一溶液中時(shí)，如蔗糖溶液。溶液。 w = w = + + + + 水勢(shì)水勢(shì) = = 滲透勢(shì)滲透勢(shì) + + 壓力勢(shì)壓力勢(shì)

12、 + + 重力勢(shì)重力勢(shì) 水分子的移動(dòng)方向？水分子的移動(dòng)方向？w w1. 1. w w ，則植物組織失水，溶液濃度下降，則植物組織失水，溶液濃度下降 ，液滴上升，液滴上升 。2. 2. w w ，則植物組織吸水，溶液濃度增加，則植物組織吸水，溶液濃度增加 ，液滴下降，液滴下降 。3. 3. w =w =，則二者水分保持動(dòng)態(tài)平衡，液滴不動(dòng)。，則二者水分保持動(dòng)態(tài)平衡，液滴不動(dòng)。 利用溶液的濃度不同其比重也不同的原理來(lái)測(cè)定試驗(yàn)前后溶利用溶液的濃度不同其比重也不同的原理來(lái)測(cè)定試驗(yàn)前后溶液濃度的變化，然后根據(jù)公式計(jì)算滲透勢(shì)。液濃度的變化，然后根據(jù)公式計(jì)算滲透勢(shì)。w ww wH2OH2O0 0.05 0.1

13、0 0.15 0.20 0.25 蔗糖溶液蔗糖溶液 （mol/Lmol/L，試管中），試管中） 浸提液滴浸提液滴 （含甲烯藍(lán)）三、材料與方法1、實(shí)驗(yàn)材料：實(shí)驗(yàn)材料： 大葉紫薇(Lagerstroemia speciosa L.)（單數(shù)組）， 海芋(Alocasia macrorrhizos L.)（雙數(shù)組）。2 2、實(shí)驗(yàn)步驟：、實(shí)驗(yàn)步驟： 1）取系列不同濃度的蔗糖溶液：0、0.05、0.1、0.15、0.20 mol/L 各4 ml，放入刻度試管中，分別加入15片葉圓片至試管中。 取葉圓片時(shí)避開(kāi)葉脈取葉圓片時(shí)避開(kāi)葉脈3）另取6支試管編號(hào)，按順序（從低濃度到高濃度）放入系列濃度蔗糖溶液5 ml。4）用1 mL注射器分別吸取各試管中著色的液體少許，伸入對(duì)應(yīng)試管蔗糖溶液的中部，緩慢放出一滴藍(lán)色試驗(yàn)溶液，抽出針頭；然后觀察和拍照觀察和拍照小液滴移動(dòng)的方向。2）放止30 min以上（偶爾搖晃試管），加入1小滴（半滴）亞甲基藍(lán)染料染色。 記錄小液滴不移動(dòng)的試管蔗糖溶液的濃度，并將結(jié)果入公式計(jì)算： -w =RTiC 4 ml5 ml葉圓片放置30 min以上偶爾搖動(dòng)試管滴加1滴染料（亞甲基藍(lán)）取1滴著色液滴加到溶液中部蔗糖溶液(mol/L)0.7 cm打孔器15片 避開(kāi)葉脈避開(kāi)葉脈1.準(zhǔn)確配制蔗糖梯度溶液，正確使用移液管。2.葉片大小和厚薄均一，每管葉數(shù)相同。3.實(shí)驗(yàn)中多次搖動(dòng)試管，