獸醫(yī)病理解剖學(xué)實習(xí)報告

1、目錄一、 尸體剖檢4（一）概述41概念42目的43 意義44病理剖檢的方法、步驟45尸檢方法和順序56尸檢記錄與報告編寫5（二）鴨的剖檢61實驗器材62 實驗藥品63實驗動物64 實驗方法及步驟6（三）豬的剖檢91 實驗器材92 實驗動物93 實驗方法和步驟10二、取材與固定14（一）概述141取材142固定142 實驗方法和步驟（鴨）15三 器官組織病變的識別151 肺臟152 淋巴結(jié)163肝164腎165心176脾17四、病理組織切片的制作和染色17（一）實驗?zāi)康?7（二） 過程171固定組織的取材和準(zhǔn)備172脫水193 透明194 透蠟205包埋206修塊217玻片處理218 切片219

2、展片2210撈片2211 烘片和烤片2212染色23五、病理組織切片的觀察和分析25（一）制片存在的問題25（二）切片分析251禽白血病腫瘤252實質(zhì)性心肌炎283肺淤血304 網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞增生癥315脾凝固性壞死32一、 尸體剖檢（一）概述1概念尸體剖檢是運用病理解剖的有關(guān)知識，通過檢查尸體的病變以診斷疾病的方法。2目的尸體剖檢觀察死畜生前的各器官病變，通過科學(xué)的分析推斷，得出符合實際的病理解剖學(xué)診斷，為疾病的診斷提供理論依據(jù)。 3 意義1）是最客觀、迅速的動物疾病診斷方法之一。通過剖檢可方便、直接、客觀地觀察到臟器的變化。故此法為目前最常用的動物疾病診斷方法。2）提高臨床診斷和治療質(zhì)量。剖

3、檢可以驗證前者。3）提供醫(yī)學(xué)科研的素材，促進(jìn)醫(yī)學(xué)發(fā)展。動物病理模型、藥物及治療試驗等。4）促進(jìn)病理教學(xué)和學(xué)科發(fā)展。(意大利的莫爾加尼根據(jù)700例病人的尸檢記錄寫成了疾病的部位和原因一書)4病理剖檢的方法、步驟4.1剖檢前1）仔細(xì)閱讀送檢單，了解基本情況（發(fā)病、治療、死亡情況等），以確定能否剖檢。如能，則進(jìn)行下一步。2）準(zhǔn)備剖檢器械及藥品刀、剪、鑷、鋸等；來蘇兒、新潔而滅、碘酊、固定液、酒精、福爾馬林等。3）選擇剖檢地點最好在室內(nèi)，以利于消毒控制；野外應(yīng)選擇人畜少到、高處、遠(yuǎn)離水源的地方，方便就地掩埋。4）尸體清洗和消毒先用水或消毒液清洗尸體表面，防止體表病變被污泥等覆蓋和剖檢時體表塵土、羽毛揚

4、起。特別是死于傳染病的尸體，要慎重做好防疫措施。 4.2 剖檢中1）注意個人防護(hù)佩戴防護(hù)用品；保證皮膚無傷口等。2）取材要輕防擠壓，避免材料的人為變化。 4.3 剖檢后場地，運輸工具、解剖器械等消毒處理；廢棄物、尸體、墊料和被污染的土層撒上生石灰或噴灑消毒液后深埋或焚燒。5尸檢方法和順序全面系統(tǒng)尸檢時，必須按一定的方法和順序進(jìn)行；常規(guī)要求剖檢時，根據(jù)不同的動物、不同的疾病規(guī)律性，在保證質(zhì)量的基礎(chǔ)上有一定的靈活性?？傊?，剖檢方法和順序不是一成不變的。 通常采用的剖檢順序如下：1） 外部檢查：營養(yǎng)狀況、皮膚被毛、天然孔、可視粘膜等。2） 內(nèi)部檢查：皮下、胸腹腔等檢查。3）

5、60;內(nèi)臟器官的取出和檢查（腹腔、盆腔、胸腔、顱腔、口腔和頸部、鼻腔、肌肉關(guān)節(jié)、骨和骨髓）6尸檢記錄與報告編寫6.1記錄的重要性是剖檢報告的重要依據(jù)和原始資料。要求其內(nèi)容完整、詳細(xì)、客觀、如實；最好邊剖邊記；忌用專業(yè)術(shù)語；若眼觀正常則記錄為未見眼觀變化。 6.2報告的組成通常由四部分組成：概述、剖檢所見、病理解剖學(xué)診斷、最后診斷6.2.1概述記載動物主人，動物的性別、年齡、特征、臨床摘要及臨床診斷、死亡日期和時間，剖檢日期和時間，剖檢號數(shù)、剖檢人、記錄人等。其中臨床摘要及臨床診斷要扼要記載流行情況、臨床癥狀，發(fā)病經(jīng)過及診斷和治療情況。6.2.2剖檢所見以尸體剖檢記錄為依據(jù)，按尸體所呈現(xiàn)病理變化

6、的主次順序進(jìn)行詳細(xì)、客觀的記載，此項可包括肉眼檢查和組織學(xué)檢查，剖檢時所作的微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)等檢查材料也要記載。6.2.3病理解剖學(xué)診斷 根據(jù)剖檢所見病變，進(jìn)行綜合分析，找出各病變之間的內(nèi)在聯(lián)系、病變與臨床癥狀之間的關(guān)系，作出判斷。闡明動物發(fā)病和致死的原因。6.2.4疾病診斷 結(jié)合病理學(xué)變化以及臨床診斷、實驗室診斷等，對動物疾病作出定性。（二）鴨的剖檢1實驗器材尸體剖檢器械一套（解剖刀 眼科剪 鑷子）、搪瓷盤、口罩、一次性橡膠手套、工作服、臉盆、廣口瓶、沖洗設(shè)備2 實驗藥品新潔爾滅、固定液（10%福爾馬林）3實驗動物鴨（3周齡）4 實驗方法及步驟4.1外部檢查從籠子里取出一只小鴨，觀察其精神

7、狀態(tài)和皮膚、冠、髯、毛、爪、天然孔等，發(fā)現(xiàn)其精神活躍，除腳鱗有出血和肛門外有少量黃綠色稀糞外，其他均無明顯病理變化。4.2 處死4.2.1方法在鴨頸部的左側(cè)用手術(shù)刀劃開一道小口，用手撕開皮膚，找到頸靜脈，割開頸靜脈后倒提鴨身放血。4.2.2注意事項1）選擇左側(cè)開刀是因為右側(cè)頸靜脈離食管較近，容易割到食管。2）放血時注意不要用手用力擠壓鴨身，防止局部器官放血不全或造成人為損傷，與死前病理變化混淆。4.3 消毒將整個尸體浸泡于消毒液中進(jìn)行清洗、消毒，可以逆向梳理被毛，以使消毒液充分浸潤到皮膚。4.4 剖檢4.4.1腹腔的打開將尸體背側(cè)臥置于搪瓷盤中，從腹部下方向胸骨方向沿正中線剪開皮膚，然后用手將

8、皮膚向兩邊撕開，充分暴露腹部肌肉。從腹部下方呈U型剪開腹腔，剪斷兩側(cè)肋軟骨和劍狀軟骨后，即可充分暴露腹腔。4.4.2 臟器的取出、檢查4.4.2.1腹腔和泄殖腔器官1）肝位于腹腔前部，分左右兩葉，紅褐色，質(zhì)地脆。無明顯病理變化2）胃和腸將消化管從賁門處至大腸末端的部分取出，在搪瓷盤中展開，為發(fā)現(xiàn)有明顯病理變化。沿腺胃縱軸依次剪開腺胃和肌胃，可見有一些未消化完全的食物殘渣，腺胃和肌胃交界處的粘膜易脫落。3）脾位于腺胃和肌胃交界處的右背側(cè)，呈三角體狀，棕紅色。無明顯病理變化。4）腎取出腸后，可見腎位于腰薦骨兩旁和髂骨的腎窩內(nèi)，前端達(dá)最后椎肋骨，每側(cè)腎分前、中、后三葉。一手用鑷子提起后葉尾端的粘膜，

9、一手用手術(shù)刀刀柄小心將腎與體壁分離，取出腎。 無明顯病理變化。5）腔上囊橢圓形盲囊狀。無明顯病理變化。4.4.2.2 胸腔器官1）心臟位于胸腔前下方，心尖位于肝的左右葉之間。無明顯病理變化。2）肺略呈扁平四邊形，不分葉，位于胸腔背側(cè)的兩邊。背側(cè)面有椎肋骨嵌入，形成幾條肋溝。無明顯病理變化。4.4.2.3 頭頸部器官1）沿一側(cè)喙角由口腔剪開食管，未見明顯病理變化。2）咽的底部為喉，從喉部剪開氣管，未見明顯病理變化。3）撕開頸部皮膚，可見皮下從頸前部到胸部沿頸靜脈呈鏈狀分布有大大小小蠶豆?fàn)畹男叵?，左右各七?）在頭蓋骨上用手術(shù)刀劃一個十字，在兩個眼眶間、眼眶后緣各剪一刀，撬開頭蓋骨，暴露腦組織。撕

10、去硬腦膜，小心用手術(shù)刀刀柄從顱腔中取出大小腦。 以上未見明顯病理變化。4.4.2.4 其他病理變化在檢查腸管時，發(fā)現(xiàn)腸管末端有一個直徑2cm左右的黃白色球狀物，與腸以結(jié)締組織相連，捏之如囊。切開瞬間可聽到“噗”的一聲，球狀物迅速癟下，有大量氣體放出，囊內(nèi)容物溢出，為淡黃色渣狀物，氣味刺鼻。（三）豬的剖檢1 實驗器材尸體剖檢器械一套（解剖刀 眼科剪 鑷子 鋸子）、搪瓷盤、口罩、一次性橡膠手套、工作服、沖洗設(shè)備2 實驗動物仔豬3 實驗方法和步驟3.1 外部檢查3.1.1皮膚被毛較為光澤，皮膚紅潤，右后肢股部內(nèi)側(cè)有一直徑2cm左右的囊腫。3.1.2 天然孔眼、鼻、口、肛門、外生殖器均正常無異物。3.

11、1.3膘情較好3.1.4 運動情況左后肢跛行，跖部著地。3.1.5精神狀態(tài)尚好，但由于處于應(yīng)激狀態(tài)，十分驚恐。3.2 處死（腋下動脈放血）將豬放倒側(cè)臥，一人踩住肩胛部，一人踩住臀部，一人執(zhí)刀抬起一只前肢，迅速劃開腋下皮膚和結(jié)締組織，找到腋下動脈。將手術(shù)刀對準(zhǔn)血管，放下前肢（蓋住血管，減少血流噴濺），快速割破血管，血流即噴涌而出。約5min后，豬即失血而死。將地上血跡和尸體沖洗干凈后，把尸體抬上手術(shù)臺，待剖檢。3.3 剖檢3.3.1固定將尸體背側(cè)臥，為了穩(wěn)定豬體，切斷四肢內(nèi)側(cè)肌肉和體表的聯(lián)系，使四肢平攤而固定。3.3.2 患肢檢查抬起左后肢，發(fā)現(xiàn)為一畸形肢，跖部及趾部以下僵直而拖于在地上，背側(cè)皮

12、膚因磨損而出血；對比左右后肢，可發(fā)現(xiàn)左后肢明顯發(fā)育不良、遲緩，蹄部因不用力而明顯纖??；切開關(guān)節(jié)未見膿腫病變。3.3.3皮下檢查在切開體腔過程中進(jìn)行，檢查皮下無出血、水腫、脫水、炎癥和膿腫；頜下淋巴結(jié)、頸淺淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)大小、顏色、硬度、切面均正常；肋骨與肋軟骨交界處無串珠狀腫大。3.3.4腹腔的打開和觀察自頜下至恥骨聯(lián)合直線切開皮膚（生殖器，乳房處環(huán)行），自劍狀軟骨沿兩側(cè)肋軟骨至腰椎橫突作橫切線，外翻即露出腹腔，觀察：臟器位置和外形（有無變位、扭轉(zhuǎn)、粘連、破裂、腫瘤、寄生蟲結(jié)節(jié)以及淋巴結(jié)形狀）；腹水的數(shù)量和性狀；腹腔內(nèi)有無異物（氣體、血凝塊、胃腸內(nèi)容物、膿汁、寄生蟲、腫瘤）；腹膜的性狀（

13、色澤、是否光滑，有無充血、出血、纖維素、膿腫、破裂、腫瘤）；橫膈膜的緊張程度、有無破裂。以上檢查均無明顯病理變化。3.3.5腹腔臟器的取出、檢查3.3.5.1網(wǎng)膜和脾臟脾臟邊緣銳薄，提起脾臟甩動，柔韌而富有彈性。無明顯病理變化。3.3.5.2 胃腸無明顯病理變化。3.3.5.3腎臟腎臟的形態(tài)、大小、色澤和質(zhì)度均正常，縱切開腎，發(fā)現(xiàn)包膜容易剝離且光滑透明；皮質(zhì)、髓質(zhì)、腎盂無明顯病理變化。3.3.5.4肝臟先檢查肝門部的動脈、靜脈、膽管和淋巴結(jié)，然后檢查肝臟的形態(tài)、大小、色澤、包膜性狀、有無出血、結(jié)節(jié)、壞死等；最后切開肝組織，觀察切面的色澤、質(zhì)度和含血量等情況，注意切面是否隆起，肝小葉結(jié)構(gòu)是否清晰

14、，有無膿腫、寄生蟲結(jié)節(jié)和壞死等。無明顯病理變化。3.3.6盆腔器官的取出和檢查在未采出骨盆腔臟器前，先檢查各器官的位置和概貌。3.3.6.1膀胱檢查黏膜、尿量、色澤。無明顯病理變化。3.3.6.2 包皮無積尿。3.3.7胸腔的打開先檢查胸腔是否為負(fù)壓，然后打開胸腔。方法1：從兩側(cè)最后肋骨的最高點至第一肋骨的中央部作第二鋸線，鋸開胸腔。用刀切斷橫隔附著部、心包、縱膈與胸骨間的聯(lián)系，除去鋸下的胸壁，即露出胸腔。方法2：用刀切斷兩側(cè)肋骨和肋軟骨的連接，去掉胸骨，逐一切斷肋間肌肉，分別將肋骨向背側(cè)扭轉(zhuǎn)，撥開肋骨小頭與周圍關(guān)節(jié)的聯(lián)系，露出胸腔。本次實驗采取方法2。打開胸腔后，觀察胸膜腔有無液體以及液體的

15、數(shù)量、透明度、色澤、性質(zhì)、濃度和氣味。注意漿膜是否光滑，有無黏連等病變。以上檢查無明顯病理變化。3.3.8胸腔器官的取出和檢查3.3.8.1 心臟沿左縱溝左側(cè)的切口切至肺動脈起始部；沿左縱溝右側(cè)的切口切至主動脈起始部；然后將心臟翻轉(zhuǎn)過來，沿右縱溝左右兩側(cè)作平行切口，切至心尖部與左側(cè)心切口相連；切口再通過房室口切至左心房及右心房。經(jīng)過上述切線，心臟全部剖開。檢查心腔內(nèi)血液的含量及性狀；檢查心內(nèi)膜的色澤、光滑度、有無出血，各個瓣膜、腱索是否肥厚，有無血栓形成和組織增生或缺損等病變；對心肌的檢查，注意各部心肌的厚度、色澤、質(zhì)度、有無出血、瘢痕、變性和壞死等。無明顯病理變化。3.3.8.2 肺臟觀察其

16、大小、色澤、重量、質(zhì)度、彈性、有無病灶及表面附著物等；將整個肺臟縱橫切割數(shù)刀，觀察切面有無病變、切面流出物的數(shù)量、色澤變化等。無明顯病理變化。3.3.9顱腔的打開清除頭部的皮膚和肌肉，先在兩側(cè)眶上突連線處作一橫鋸線，再從此橫鋸線兩端經(jīng)兩側(cè)額骨、頂骨側(cè)面至枕骨外緣作兩條縱鋸線，然后從枕骨大孔兩側(cè)作一“V”形鋸線與二縱鋸線相連；沿鋸線撬開頭頂骨，露出顱腔。顱頂骨除去后，觀察骨片的厚度及其內(nèi)面的形態(tài)。無明顯病理變化。3.3.10腦的取出和檢查檢查硬腦膜，沿鋸線剪開硬腦膜，檢查硬腦膜、蜘網(wǎng)膜及腦脊液的數(shù)量和性狀；用剪刀或外科刀將路腔內(nèi)的神經(jīng)、血管切斷，將大小腦和腦干一并取出。先觀察腦膜的性狀，發(fā)現(xiàn)其透

17、明、平滑、濕潤、有光澤，無明顯病理變化。檢查腦回和腦溝的狀態(tài)，觸檢各部分腦實質(zhì)的質(zhì)度，無明顯病理變化。3.3.11口腔的檢查檢查扁桃體，無炎癥二、取材與固定（一）概述1取材1.1選取方法1）有病變的器官或組織，要選擇病變顯著部分或可疑病灶。2）取樣要全面而具有代表性。3）不同疾病病變部位不同，選取病理材料時也不完全一樣。遇病因不明的病例時，應(yīng)多選取組織，以免遺漏病變。4）為了使胃腸粘膜保持原來的形態(tài)，在小動物可將整段腸管剪下。5）為了防止組織塊在固定時發(fā)生彎曲、扭轉(zhuǎn)，對易變形的組織如胃、腸、膽囊等，切取后可將其漿膜面向下平放在稍硬厚的紙片上，然后徐徐浸入固定液中；對于較大的組織片，可用兩片細(xì)銅

18、絲網(wǎng)放在其內(nèi)外兩面系好，再行固定。6）選取的組織材料，厚度約為1-1.5cm,面積1.5-3cm.對于較小的器官和取材較大的組織，如鴨的脾、腦，可縱切一刀（但末端不切斷）然后整塊投入固定液，這樣既有利于固定后組織的識別有利于固定液的滲透。1.2注意事項1）選取病理材料時，切勿擠壓或損傷組織。2）切取組織塊所用的刀要鋒利，切取組織塊時必須迅速而準(zhǔn)確，不能來回挫。3）對柔軟菲薄或易變形的組織如胃、腸、膽囊、肺，以及水腫的組織等的切取，應(yīng)十分小心。4）組織塊取下后即開投入固定液，最好不要用水沖洗，非洗不可只能用生理鹽水輕輕沖洗。2固定2.1原理1）使組織細(xì)胞中蛋白質(zhì)沉淀或凝固迅速防止組織細(xì)胞的死后變

19、化和組織的自溶和腐敗，從而保持組織和細(xì)胞與正常生活時的形態(tài)相似。2）使組織中的各種物質(zhì)沉淀和凝固起來而產(chǎn)生不同的折射率造成光學(xué)上的差異，便于染色后鑒別和觀察。3）硬化作用增加組織硬度，便與組織切片。4）使組織對染料產(chǎn)生不同的親和力著色清晰，便于辨認(rèn)。2.2注意事項1）組織取出后應(yīng)及時固定，以免發(fā)生死后變化影響診斷，固定的組織越新鮮越好。2）固定時間不宜過長或過短，固定液的量相當(dāng)于組織塊總體積的5-10倍。3）為避免材料的擠壓和扭轉(zhuǎn)，盛裝固定液的容器最好用廣口瓶。4）肺臟組織含氣多易漂浮與液面，要蓋上薄片脫脂棉花，借棉花的虹吸作用，不斷浸濕標(biāo)本。2 實驗方法和步驟（鴨）依次從肝、腸（橫切取一段）

20、、腎、腔上囊（橫切取盲端的一段）、心、肺上取適當(dāng)大小的1-2塊組織投入固定液；脾和大小腦縱切一刀后整個投入固定液。三 器官組織病變的識別1 肺臟肺臟表面密布有針尖到芝麻大小的鮮紅色點，且隨著時間的延長，點的顏色越來越紅，邊緣逐漸模糊，可以判斷這些病變是屠宰過程中造成的，屠宰時由于環(huán)境溫度較低，導(dǎo)致血凝不良，出場后由于溫度升高，血液又漸漸溶解于周圍液體中，所以邊緣越來越模糊。肺表面分布有暗紅色斑塊，其顏色不隨與外界接觸時間的延長而改變?？梢耘袛嘣摬∽兪窃谏霸斐傻?，所以血液凝固完全?？赡苁怯捎诟邿岢鲅斐傻某鲅邏K。小結(jié)：若病灶鮮紅，則可能是屠宰中的造成；若病灶暗紅，則是在屠宰前動物本身的器官病

21、變。擴(kuò)展：糞便帶血，若顏色鮮紅，則可判斷直腸出血；若顏色發(fā)黑，則可判斷胃或十二指腸出血。檢查肺臟膨脹度和彈性較好，說明死前氣體交換正常。肺臟有一定程度的肉變（以紅細(xì)胞滲出為主，纖維素滲出較少），與肝樣變（紅細(xì)胞和纖維素均大量滲出）和胰樣變區(qū)分。2 淋巴結(jié)腫大呈暗紅色，切面濕潤隆起，切口外翻，呈大理石樣外觀（白色為淋巴濾泡，紅色為富含血管的被膜和小梁，出血沿血管分布，所以形成花紋狀）。判斷為出血性淋巴結(jié)炎，見于烈性、發(fā)熱性、急性敗血型淋巴結(jié)炎后期。注意與漿液性淋巴結(jié)炎（腫大呈灰黃色；切面隆起、多汁；見于急性淋巴結(jié)炎早期）、化膿性淋巴結(jié)炎（壞死性淋巴結(jié)炎的一種；淋巴結(jié)腫大；切面可見大小不一的膿腫，

22、周圍有充血和出血；嚴(yán)重時淋巴結(jié)內(nèi)充滿膿液，似一個結(jié)締組織膜包裹的膿腫；見于化膿菌感染或繼發(fā)于其他組織的化膿性炎）、壞死性淋巴結(jié)炎（腫大，灰紅或暗紅；切面濕潤、隆起，散在大小不一的灰黃色或磚紅色壞死灶，周圍有充血和出血；被膜及周圍組織成膠樣浸潤；見于化膿性淋巴結(jié)炎后期等）。另外，若病理過程較短，則同一淋巴結(jié)可能有不同的病變，其表面可能有一部分為紅色，另一部分為黃白色。3肝 表面可見三個黃白色病灶，但外觀并不都一樣。黃白色或乳白色病灶實質(zhì)可能是結(jié)締組織、化膿灶、腫瘤、囊腫、瘢痕。其中兩個黃白色病灶，稍突出于表面，近似圓形，邊界清楚，觸之較硬；切開可見為一囊狀病灶，中央有腔，囊壁為乳白色，有清亮液體

23、和乳白色物質(zhì)（實質(zhì)為組織壞死碎屑）流出；見于囊腫或化膿后壞死物質(zhì)的吸收過程中。另一個黃白色病灶，不突出于表面，邊界不清，近似于放射狀，觸之較硬；切開發(fā)現(xiàn)病灶深入到器官實質(zhì)，其切面近似圓形，較硬；判斷為乳斑肝，病灶實質(zhì)為增生的結(jié)締組織；乳斑肝見于藥物中毒、豬蛔蟲感染等。膈肌和肝以一乳白色膜狀結(jié)構(gòu)相黏連，強(qiáng)行分離膈肌和肝則在肝表面留下膜狀結(jié)構(gòu)，撕開的肝組織表面粗糙，光澤暗淡；還有的地方粘連過緊，將膜狀結(jié)構(gòu)和部分肝組織一同撕下。胸腔器官粘連是由于器官纖維素性炎癥，血液中的纖維蛋白滲出后凝固而將器官相互粘連在一起；見于放線桿菌引起的豬傳染性胸膜肺炎中后期和副豬嗜血桿菌病；臨床表現(xiàn)為病豬食量減少，不愛運

24、動。4腎病變的腎臟與正常的腎相比，顏色較深（呈黑紅色，可能是剖檢之前已經(jīng)死亡或屠宰時放血不全），薄而柔軟，缺乏彈性；切開可見中央腎盂擴(kuò)大而皮髓質(zhì)銳?。慌袛酁榘螂啄I，發(fā)生原因為輸尿管疾患等使尿的排出受阻，導(dǎo)致腎中央積尿，充盈尿液，不斷壓迫皮髓質(zhì)使皮髓質(zhì)變薄。注意與腎囊腫區(qū)分，腎囊腫是因為腎小管阻塞，尿酸鹽在腎內(nèi)沉積而導(dǎo)致周圍組織發(fā)生壞死而形成囊腫。5心心包表面粗糙有絨毛，為大量纖維素和炎性成分的堆積。心包與心臟粘連無法剝離；判斷為纖維素性心包炎。正常心臟的橫徑和縱徑之比為1:1.5，而該心臟橫徑明顯增加；判斷為肌源性擴(kuò)張。6脾脾臟為重要的免疫器官，在臨床診斷上有重要意義，如脾的出血性梗死是豬瘟的

25、診斷依據(jù)之一，其典型病理變化為脾表面有暗紅色至黑紅色的病灶，病灶為圓錐體狀，錐頂指向器官實質(zhì)的中央，錐頂連于器官表面，切面扇形；梗死灶內(nèi)有血液蓄積，邊緣組織上有紅色小顆粒，是脾組織增生形成的正常結(jié)構(gòu)。有黃白色物質(zhì)突出于表面，判斷為被膜增生。四、病理組織切片的制作和染色（一）實驗?zāi)康慕M織切片技術(shù)是病理學(xué)中不可缺少的一個組成部分。通過實驗了解和掌握病理組織切片的基本方法之一即石蠟包埋的組織切片法。（二） 過程1固定組織的取材和準(zhǔn)備1.1目的將已固定好的病料修整成適當(dāng)大小和形狀的組織塊，以利于下面的脫水、透明、透蠟、包埋等等。1.2 材料盛裝于廣口瓶內(nèi)已固定好的病料、燒杯、解剖刀、鑷子、脫水籃 蠟板

26、、一次性手套、杯蓋1.3 實驗方法和步驟1）將廣口瓶內(nèi)的固定液倒入燒杯中，再把病料倒入蠟板上，將燒杯中的固定液倒回廣口瓶，蓋上瓶蓋。2）蠟板上相同的組織放在一起，依次進(jìn)行取材和修整后放入脫水籃中相應(yīng)的格子中；脫水籃內(nèi)的格子從焊接處開始由外向內(nèi)順時針編號，每一格子對應(yīng)一種組織，做好記錄。3）全部修好后，將脫水籃放入盛有蒸餾水的杯蓋中，使修好的組織塊浸入蒸餾水中。1 腸管（單層）2 肝3 心4 肺5 腸管（管狀）123451.4注意事項1）取材時時應(yīng)盡量保持原病料的固有形狀，如肝的病料為三角錐狀，則可直接切下一三角形薄片，既有利于組織的識別又可以保留組織表面的膜結(jié)構(gòu)，不必刻意修整為長方形。2）對于

27、單層的腸管組織，可沿原腸管方向縱向切一窄帶，這樣可使組織包埋時長邊朝下立于蠟塊中，切完片后可以看到腸管的結(jié)構(gòu)。3）修整完的組織塊長寬約1cm,厚度為3mm，最多不超過5mm。2脫水2.1 目的除去組織中的水分，以利于透明和透蠟。2.2材料70%、80%、95%、100%酒精 脫水籃 脫水缸2.3步驟依次經(jīng)過70%-80%-95%-100%酒精脫水，各級酒精2-4小時，視材料的大小、厚薄而定。2.4 注意事項100%酒精有硬化組織的作用，時間不宜太長，一般不超過3小時。3 透明3.1目的便于透蠟包埋。3.2材料冬青油、脫水缸、脫水籃3.3步驟脫水后組織置于冬青油中過夜。4 透蠟4.1目的使石蠟透

28、入組織內(nèi)部，為下一步包埋做準(zhǔn)備。4.2材料不同熔點的石蠟、蠟缸、脫水籃4.3步驟先經(jīng)低熔點石蠟再經(jīng)高熔點石蠟。一般設(shè)置熔點為50-52為第一缸蠟，52-54為第二缸蠟，54-56為第三缸蠟（第三缸蠟的熔點根據(jù)季節(jié)可進(jìn)行調(diào)節(jié)，本季節(jié)（夏天）使用熔點56-58或58-60的石蠟）5包埋5.1目的把軟組織變?yōu)檫m當(dāng)硬度的包埋塊，以便切成薄片。5.2 材料脫水籃、石蠟、金屬包埋框、鑷子、蠟壺、刀片、圓珠筆、標(biāo)簽紙5.3 方法和步驟1）將液態(tài)石蠟倒入金屬包埋框中，再將浸好蠟的組織塊平放于底部，注意切面方向朝下。2）待石蠟?zāi)毯笕サ舭窨颉?）石蠟完全冷卻變硬后切取包埋有組織的蠟塊，每個蠟塊長寬約為2cm,

29、高為1.5cm，蠟塊背面貼上標(biāo)有組別和組織名稱的標(biāo)簽紙。6修塊6.1材料蠟塊、刀片、報紙6.2方法石蠟切片是以石蠟作為組織的支持媒介。1）應(yīng)先將包埋的每塊組織周圍過多的石蠟切去四周留約2mm的石蠟邊。留得過少，使連續(xù)切片分片困難且易破壞組織；留得過多，徒占地方，同時使標(biāo)本之間的距離過遠(yuǎn)而鏡檢不便。2）蠟塊兩邊必須切成平行的直線，否則切下的蠟條彎曲，也不可修成圓角，致蠟帶容易分開不能成條。7玻片處理7.1材料新玻片、蛋白甘油新玻片必須擦洗干凈，否則染色時容易使切片脫落。將洗凈的玻片上均勻涂抹薄薄的一層蛋白甘油（防止組織脫片），然后放于冰箱備用。8 切片8.1材料蠟塊、毛筆、紗布、石蠟切片、切片刀

30、片8.2方法和步驟1）將預(yù)冷的蠟塊固定在石蠟切片機(jī)上，使蠟塊的切面與刀口呈平行方向，刀的傾斜度通常為15°；轉(zhuǎn)動輪轉(zhuǎn)推進(jìn)器，調(diào)節(jié)切片厚度為6m。2）右手勻速旋動切片機(jī)轉(zhuǎn)把，開始切片，直至切到包埋在蠟塊里的完整組織塊。3）廢棄的蠟帶和蠟渣用毛筆和紗布掃去，方向是自下向上，切勿從刀口處向下掃。8.3 注意事項1）切片刀刀片應(yīng)盡量使用新刀片，若刀片不鋒利，切片時蠟帶會自行卷起或皺起。切片刀有缺口易造成切片斷裂、破碎、有刀痕，影響切片以后的鏡檢。2）切片機(jī)各個零件和螺絲應(yīng)旋緊，切片刀應(yīng)固定好，否則產(chǎn)生震動會使切片厚薄不勻、出現(xiàn)橫皺褶。9展片9.1材料蠟帶、展片箱、鑷子、毛筆9.2 方法微微轉(zhuǎn)

31、動毛筆，將切得較好的蠟帶卷起，用眼科鑷輕鑷蠟片，以正面放入水溫40-43的展片箱中。10撈片10.1材料玻片、鉛筆、展片箱鑷子10.2 方法待蠟片在溫水中平整展開后，用鑷子小心從蠟條中分選出1-3張較好的蠟片，選取一張玻片，用鉛筆在毛玻璃處記下組別和組織名稱，大拇指和食指夾住毛玻璃端的兩邊，垂直插入水中，以涂有蛋白甘油的一面去貼附選好的切片，從其水中撈出。11 烘片和烤片11.1材料 烘片箱、染色架、烘箱、玻片11.2方法將貼附好切片的玻片放在烘片箱上晾干后烤片，直至切片上的蠟溶解。然后將烤好的所有玻片整理到染色架上，放于60的烘箱內(nèi)過夜。12染色12.1目的了解和掌握病理組織切片染色的基本方

32、法之一，即石蠟包埋的組織切片的H.E染色法。12.2原理染色是染色劑和組織細(xì)胞的結(jié)合過程，使組織和細(xì)胞的成分被染上不同的顏色，產(chǎn)生不同的折射率，便于在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察。不同的染色方法其原理有差別。蘇木素伊紅染色法為病理組織切片最常用的染色方法。由于它對組織細(xì)胞的各種成分都可染出，便于對組織成分的全面觀察，且以任何固定液固定的材料，各種切片法都可適用。用H.E染色的標(biāo)本，不易褪色，可以長期保存。在常規(guī)的蘇木素伊紅染色中，蘇木素經(jīng)過氧化變成酸性染料蘇木紅，而蘇木紅和鋁結(jié)合形成一種帶正電荷的藍(lán)色色精，帶正電荷的藍(lán)色色精和帶負(fù)電荷的脫氧核糖核酸酸根，通過正負(fù)電荷的極性吸著來完成結(jié)合，使細(xì)胞核染成藍(lán)紫色。伊紅是一種酸性紅色細(xì)胞質(zhì)染料，它們的染色可能是通過滲透作用或彌散作用而完成的，使細(xì)胞質(zhì)染成紅色。12.3材料H.E染色全套試劑、染色缸（臥式）、蓋玻片、中性樹膠、顯微鏡、鑷子、漏斗、攤片盤、塑料槍頭12.4方法和步驟12.4.1脫蠟至水二甲苯 20min二甲苯 10-15min無水乙醇 2min95%乙醇 2min80%乙醇 2min70%乙醇 2min自來水洗 5min12.4.2染色 Harris蘇木素液 3min自來水洗 5min1%鹽酸溶液分化 10-30s自來水洗 10-15min95%乙醇 2mi