八動物模型 免疫缺陷動物PPT課件

1、第二次實驗課通知第二次實驗課通知時間：第一批第一批1 15 5.12.12.3 3 13:30-15:50 13:30-15:50第二批第二批1 15 5.12.12.1 10 0 13:30-15:50 13:30-15:50地點：四號樓二樓實驗室備注：（1）帶實驗指導(dǎo)（2）穿實驗服（3）簽到。第1頁/共71頁足球場六號樓五號樓四號樓三號樓老紅樓（一號樓）新教樓（二號樓）北哦，還是老地方!第2頁/共71頁15碩士C班醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)實驗二（上）安排時時 間間人數(shù)人數(shù)四號樓四號樓2 2樓樓序序 號號教教 師師 15.12.3星期四星期四13:30-15:50252號實驗室號實驗室1-25嚴國鋒嚴

2、國鋒253號實驗室號實驗室26-50姚一康姚一康254號實驗室號實驗室51-75周周 勇勇第3頁/共71頁13碩士C班醫(yī)學(xué)實驗動物學(xué)實驗二（下）安排時時 間間人數(shù)人數(shù)四號樓四號樓2 2樓樓序序 號號教教 師師 15.12.10星期四星期四13:30-15:50254號實驗室號實驗室76-100嚴國鋒嚴國鋒255號實驗室號實驗室101-125姚一康姚一康256號實驗室號實驗室126-150周周 勇勇第4頁/共71頁1.1.生命科學(xué)研究平臺生命科學(xué)研究平臺2.2.人類疾病動物模型人類疾病動物模型第5頁/共71頁第一節(jié)第一節(jié)人類疾病動物模型的定義和意義第6頁/共71頁一、定 義 人類疾病動物模型人類

3、疾病動物模型(animal model of human disease)是指是指醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立起來的模擬人類疾病表現(xiàn)的動物或?qū)嵔⑵饋淼哪M人類疾病表現(xiàn)的動物或?qū)嶒灢牧向灢牧稀?或：或：在醫(yī)學(xué)研究中，在動物身上建立在醫(yī)學(xué)研究中，在動物身上建立或形成類似人類疾病的動物或形成類似人類疾病的動物。 通過動物模型可以直接或間接反映疾病的發(fā)生和發(fā)展過程，在了解疾病的基礎(chǔ)通過動物模型可以直接或間接反映疾病的發(fā)生和發(fā)展過程，在了解疾病的基礎(chǔ)上上開創(chuàng)、改進和優(yōu)化開創(chuàng)、改進和優(yōu)化疾病的治療。疾病的治療。 第7頁/共71頁 二、使用人類疾病動物模型的意義 1. 1.避免直接實驗可能造成的危險避

4、免直接實驗可能造成的危險。 赫爾辛基宣言：“只有在動物實 驗的基礎(chǔ)上確認有效果，才能以人作為無危 害的受試者?！钡?頁/共71頁 2. 2.提供發(fā)病率低、潛伏期長和提供發(fā)病率低、潛伏期長和病程長的疾病資料病程長的疾病資料 。 3. 3.增加方法學(xué)上的可比性增加方法學(xué)上的可比性。 4. 4.模型模型容易得到容易得到（制作）。（制作）。 如放射性疾病、毒氣中毒、烈性傳染病、原發(fā)性高血壓等。第9頁/共71頁三、動物疾病模型具有的特點動物疾病表現(xiàn)應(yīng)與人類疾病相類似；動物能重復(fù)產(chǎn)生該疾病，最好能在2種以上動物體復(fù)制該病；實驗動物合格，動物背景資料完整，生命周期要滿足實驗需要；動物要價廉、來源充足；盡可能

5、選用體型小的動物。 如：SHR(自發(fā)性高血壓大鼠)麻風病模型：犰狳、非洲綠猴第10頁/共71頁第二節(jié)人 類 疾 病 動 物模 型 的 分 類 第11頁/共71頁一一.醫(yī)學(xué)動物模型基本分類醫(yī)學(xué)動物模型基本分類 1誘發(fā)性動物疾病模型 是指以物理、化學(xué)、生物學(xué)等致病是指以物理、化學(xué)、生物學(xué)等致病手段，人為導(dǎo)致動物組織、器官或整體手段，人為導(dǎo)致動物組織、器官或整體產(chǎn)生病變，成為人類疾病動物模型。產(chǎn)生病變，成為人類疾病動物模型。 即人為地誘發(fā)動物產(chǎn)生類似人類即人為地誘發(fā)動物產(chǎn)生類似人類疾病模型。疾病模型。 第12頁/共71頁2自發(fā)性動物模型 是指是指- 不加任何人工誘發(fā)，在自然條件下不加任何人工誘發(fā)，在

6、自然條件下自然產(chǎn)生自然產(chǎn)生疾病疾病的動物的動物; ; 由于基因突變的異常表現(xiàn)，通過遺由于基因突變的異常表現(xiàn)，通過遺傳育種保留下來的動物傳育種保留下來的動物疾病疾病模型。其中模型。其中包括近交系的腫瘤包括近交系的腫瘤疾病疾病模型和突變系的模型和突變系的遺傳性遺傳性疾病疾病模型。模型。 第13頁/共71頁3 3抗疾病型動物模型抗疾病型動物模型 是指特定的疾病不會在某是指特定的疾病不會在某種動物身上發(fā)生。種動物身上發(fā)生。 可借以探討何種因素使動可借以探討何種因素使動物對該疾病有天然的抵抗力。物對該疾病有天然的抵抗力。 第14頁/共71頁4生物醫(yī)學(xué)動物模型 是指以動物正常的生物是指以動物正常的生物學(xué)特

7、征來提供人類疾病相似表學(xué)特征來提供人類疾病相似表現(xiàn)現(xiàn) 的疾病模型。的疾病模型。 第15頁/共71頁二、按系統(tǒng)范圍分類二、按系統(tǒng)范圍分類1反映疾病基本病理過程動物模型 是指致病因素在一定條件下作用于動是指致病因素在一定條件下作用于動物后，在功能、代謝和形態(tài)結(jié)構(gòu)等方面出物后，在功能、代謝和形態(tài)結(jié)構(gòu)等方面出現(xiàn)的某些共同性改變的動物?，F(xiàn)的某些共同性改變的動物。 第16頁/共71頁2各系統(tǒng)疾病動物模型 是指與人類各系統(tǒng)疾病是指與人類各系統(tǒng)疾病相應(yīng)的動物模型，如神經(jīng)、心相應(yīng)的動物模型，如神經(jīng)、心血管、呼吸、消化、泌尿等系血管、呼吸、消化、泌尿等系統(tǒng)疾病相對應(yīng)的動物模型。統(tǒng)疾病相對應(yīng)的動物模型。 第17頁/

8、共71頁 A.神經(jīng)系統(tǒng) 1 1大鼠囊狀腦動脈瘤大鼠囊狀腦動脈瘤 結(jié)結(jié)扎大鼠頸總動脈，同時佐以脫氧扎大鼠頸總動脈，同時佐以脫氧皮質(zhì)酮和高滲鹽水處理，飼喂含皮質(zhì)酮和高滲鹽水處理，飼喂含有有氨基丙睛的飼料，復(fù)制而成。氨基丙睛的飼料，復(fù)制而成。為研究人類腦動脈瘤與血液動力為研究人類腦動脈瘤與血液動力學(xué)的關(guān)系，病變的發(fā)展及發(fā)病機學(xué)的關(guān)系，病變的發(fā)展及發(fā)病機理提供有益的幫助。理提供有益的幫助。 第18頁/共71頁 2 2結(jié)扎大鼠中動脈的結(jié)扎大鼠中動脈的大鼠大鼠卒中模型卒中模型 結(jié)扎大鼠大腦中動結(jié)扎大鼠大腦中動脈，復(fù)制中風模型其優(yōu)點是能脈，復(fù)制中風模型其優(yōu)點是能產(chǎn)生非致命性的孤立性病灶損產(chǎn)生非致命性的孤立性

9、病灶損害，可提供長期的行為學(xué)和生害，可提供長期的行為學(xué)和生物化學(xué)的研究。物化學(xué)的研究。第19頁/共71頁 3.3.維生素維生素A A缺乏引起的缺乏引起的兔腦積兔腦積水模型水模型 選用雌性幼兔，飼以限選用雌性幼兔，飼以限制維生素制維生素A A飼料，誘發(fā)兔腦積水。飼料，誘發(fā)兔腦積水。該模型優(yōu)點是易復(fù)制，易收集胎該模型優(yōu)點是易復(fù)制，易收集胎兔和新生兔的標本樣品，通過血兔和新生兔的標本樣品，通過血清維生素清維生素A A的監(jiān)測，可控制血清中的監(jiān)測，可控制血清中維生素維生素A A的濃度，有利進行生化和的濃度，有利進行生化和形態(tài)學(xué)的研究形態(tài)學(xué)的研究。第20頁/共71頁 4 4大鼠癲癇大鼠癲癇模型模型 雌性雌

10、性WISTARWISTAR大鼠腹腔注射氯化鋰大鼠腹腔注射氯化鋰3mmol/kg3mmol/kg。2424小時后按小時后按30mg/kg30mg/kg體重分體重分3 3次腹腔注次腹腔注射匹魯卡品（射匹魯卡品（0.1%0.1%，每次間隔，每次間隔1010分分鐘）?？沙霈F(xiàn)癲癇發(fā)作，持續(xù)發(fā)作鐘）?？沙霈F(xiàn)癲癇發(fā)作，持續(xù)發(fā)作1 1小時后，給予小時后，給予10mg/kg10mg/kg安定注射即可安定注射即可終止。終止。第21頁/共71頁B.心血管疾病動物模型 1.1.動脈粥樣硬化動脈粥樣硬化 兔、大鼠飼兔、大鼠飼以高脂肪以高脂肪、高膽固醇飼料誘發(fā)動脈、高膽固醇飼料誘發(fā)動脈粥樣硬化的動物模型。給小型豬飼粥樣硬

11、化的動物模型。給小型豬飼喂高脂肪、膽固醇飼料誘發(fā)動脈粥喂高脂肪、膽固醇飼料誘發(fā)動脈粥樣硬化病變，其解剖部位，病理特樣硬化病變，其解剖部位，病理特點均與人類相似，有時還伴有心肌點均與人類相似，有時還伴有心肌梗塞。梗塞。 第22頁/共71頁 2 2心肌缺血和心肌梗塞心肌缺血和心肌梗塞 電刺激法：雄性成年免麻醉后，用弱、強刺激電刺激法：雄性成年免麻醉后，用弱、強刺激( (弱為弱為0.80.81.61.6毫安，強為毫安，強為4 46 6毫毫安安) )交替刺激右側(cè)下丘腦背側(cè)核，復(fù)制心肌缺血動物模型；交替刺激右側(cè)下丘腦背側(cè)核，復(fù)制心肌缺血動物模型； 藥物法；給大鼠、兔注射異丙腎上腺素，犬靜脈給予麥角新鹼制

12、備冠狀動脈痙攣藥物法；給大鼠、兔注射異丙腎上腺素，犬靜脈給予麥角新鹼制備冠狀動脈痙攣模型；模型； 冠狀動脈阻斷法：應(yīng)用大鼠、犬麻醉后冠狀動脈阻斷法：應(yīng)用大鼠、犬麻醉后, ,分離冠狀動脈套上自制的冠狀動脈壓迫環(huán)，分離冠狀動脈套上自制的冠狀動脈壓迫環(huán)，制備心肌缺血和心肌梗死模型。制備心肌缺血和心肌梗死模型。 第23頁/共71頁 3 3自發(fā)性自發(fā)性高血壓大鼠高血壓大鼠 目前，應(yīng)目前，應(yīng)用最廣泛的是日本學(xué)者培育的突變用最廣泛的是日本學(xué)者培育的突變系系SHRSHR( (S Spontaneous pontaneous H Hypertension ypertension R Ratat) )大鼠。該鼠大

13、鼠。該鼠自發(fā)性高血壓的變化與人類原發(fā)性自發(fā)性高血壓的變化與人類原發(fā)性高血壓相似，并且可產(chǎn)生腦血栓、高血壓相似，并且可產(chǎn)生腦血栓、梗塞、出血、腎硬化、心肌梗死和梗塞、出血、腎硬化、心肌梗死和纖維化等變化。纖維化等變化。第24頁/共71頁 在在SHRSHR的基礎(chǔ)上，又培育了兩個亞的基礎(chǔ)上，又培育了兩個亞系系SHRSPSHRSP和和SHRSRSHRSR，前者出生后，除，前者出生后，除出現(xiàn)嚴重高血壓外出現(xiàn)嚴重高血壓外,90,90以上患腦卒以上患腦卒中中( (腦出血和腦栓塞腦出血和腦栓塞) )；SHRSRSHRSR則是抗則是抗腦卒中的自發(fā)性高血壓大鼠。而腦卒中的自發(fā)性高血壓大鼠。而WKYWKY為為SHR

14、SHR二品系最好的對照品系動物二品系最好的對照品系動物 。第25頁/共71頁 WISTAR( from USA) Kyoto(Japan) Yamari SHRSR SHRSPSHRSR 抗卒中高血壓大鼠SHRSP 高卒中高血壓大鼠WKY 對照品系第26頁/共71頁 4.4.飲食誘導(dǎo)大鼠高血壓飲食誘導(dǎo)大鼠高血壓模型模型 體重體重160-180g SD160-180g SD大鼠大鼠, ,飼喂含飼喂含66%66%果糖、果糖、12%12%脂肪、脂肪、22%22%蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的高果糖飼料，飲水為的高果糖飼料，飲水為10%10%蔗糖蔗糖水。水。4 4周后可誘導(dǎo)高血壓。周后可誘導(dǎo)高血壓。第27頁/共71頁

15、C.C.呼吸系統(tǒng)呼吸系統(tǒng) 1 1慢性支氣管炎和肺炎慢性支氣管炎和肺炎 應(yīng)用應(yīng)用SOSO2 2、煙霧、甲醛蒸氣、煙霧、甲醛蒸氣、辣性氣體等制備誘發(fā)性猴、兔、辣性氣體等制備誘發(fā)性猴、兔、大鼠、小鼠的慢性支氣管炎動大鼠、小鼠的慢性支氣管炎動物模型。物模型。 第28頁/共71頁 D.D.消化系統(tǒng)消化系統(tǒng) 1 1先天性高膽紅素血癥模型先天性高膽紅素血癥模型：已發(fā)現(xiàn)非洲嚙齒類胃潰瘍、地鼠的已發(fā)現(xiàn)非洲嚙齒類胃潰瘍、地鼠的肝淀粉樣變、羊和大鼠的先天性高肝淀粉樣變、羊和大鼠的先天性高膽 紅 素 血 癥 動 物 模 型 。 尤 其 是膽 紅 素 血 癥 動 物 模 型 。 尤 其 是South-downeSout

16、h-downe變種羊，因其先天性肝變種羊，因其先天性肝臟攝取有機陰離子缺陷臟攝取有機陰離子缺陷( (膽紅素膽紅素) )，造成血中未結(jié)合的膽紅素增高。造成血中未結(jié)合的膽紅素增高。 第29頁/共71頁 E.E.泌尿系統(tǒng)泌尿系統(tǒng) 1. 1.誘發(fā)性腎小球腎炎模型誘發(fā)性腎小球腎炎模型： 給兔、貓、狗注射異種抗腎給兔、貓、狗注射異種抗腎血清、細菌抗原與腎組織復(fù)合抗血清、細菌抗原與腎組織復(fù)合抗原，以及抗原抗體誘發(fā)動物腎小原，以及抗原抗體誘發(fā)動物腎小球腎炎模型。球腎炎模型。 第30頁/共71頁F.F.內(nèi)分泌與代謝內(nèi)分泌與代謝 (1) (1)手術(shù)糖尿病模型手術(shù)糖尿病模型 ： 自從德國的自從德國的Won Meni

17、ngWon Mening將犬作將犬作胰腺全切除術(shù)，造成糖尿病后，陸胰腺全切除術(shù)，造成糖尿病后，陸續(xù)報道貓、大鼠、兔、豬、猴等切續(xù)報道貓、大鼠、兔、豬、猴等切除除8080一一9090胰腺，并受到高糖飲胰腺，并受到高糖飲食刺激后，引起永久性糖尿病。食刺激后，引起永久性糖尿病。 第31頁/共71頁 (2)(2)遺傳性及自發(fā)性糖尿病遺傳性及自發(fā)性糖尿?。簁kkk小鼠由日本雜種小鼠交配得來的小鼠由日本雜種小鼠交配得來的遺傳性糖尿病小鼠，其生物特性類似遺傳性糖尿病小鼠，其生物特性類似obob小鼠，屬先天遺傳缺陷性小鼠。小鼠，屬先天遺傳缺陷性小鼠。C57BLC57BLksks小鼠是一種具有小鼠是一種具有db

18、db基因基因的近交小鼠，其表現(xiàn)多食肥胖及血糖的近交小鼠，其表現(xiàn)多食肥胖及血糖升高，類似人類中年肥胖合并糖尿病。升高，類似人類中年肥胖合并糖尿病。第32頁/共71頁中國地鼠中國地鼠( (黑線倉鼠黑線倉鼠) )有有5050自發(fā)產(chǎn)生糖尿病，屬多基因遺自發(fā)產(chǎn)生糖尿病，屬多基因遺傳，病鼠耐糖曲線類似人類傳，病鼠耐糖曲線類似人類型非胰島素依賴性糖尿病。型非胰島素依賴性糖尿病。第33頁/共71頁 腫瘤動物模型腫瘤動物模型 1.1.自發(fā)性腫瘤模型自發(fā)性腫瘤模型: :近交系小鼠近交系小鼠：129/terSv 129/terSv 睪丸畸胎瘤發(fā)病率睪丸畸胎瘤發(fā)病率30%30%。AKR AKR 淋巴性白血病發(fā)病率淋巴

19、性白血病發(fā)病率76-90%76-90%；68-90%68-90%。C3H C3H 乳腺癌發(fā)病率乳腺癌發(fā)病率97%97%，乳汁中有乳腺癌致病因子。，乳汁中有乳腺癌致病因子。BALB/c BALB/c 肺癌發(fā)病率肺癌發(fā)病率29% %；26%26%。近交系大鼠：近交系大鼠：F344 F344 乳腺癌發(fā)病率乳腺癌發(fā)病率41%,41%,23%;23%;白血病白血病24%24%；甲；甲狀腺瘤狀腺瘤22%22%；睪丸間質(zhì)細胞瘤；睪丸間質(zhì)細胞瘤85%85%。LOU/C 8LOU/C 8月齡以上自發(fā)漿細胞瘤月齡以上自發(fā)漿細胞瘤30%,30%,16%16%。ACI ACI 雄性自發(fā)腫瘤：睪丸瘤雄性自發(fā)腫瘤：睪丸瘤

20、46%46%；腎上腺瘤；腎上腺瘤16%16%；腦腫瘤腦腫瘤11%11%。第34頁/共71頁 腫瘤動物模型腫瘤動物模型 2.2.誘發(fā)性腫瘤模型誘發(fā)性腫瘤模型 甲基芐基亞硝胺誘發(fā)甲基芐基亞硝胺誘發(fā)大鼠食管癌大鼠食管癌； 甲基硝基亞硝基胍誘發(fā)甲基硝基亞硝基胍誘發(fā)大鼠腺胃癌大鼠腺胃癌； 硝基哌嗪等誘發(fā)大鼠鼻咽癌；硝基哌嗪等誘發(fā)大鼠鼻咽癌； 二甲肼誘發(fā)小鼠大腸癌。二甲肼誘發(fā)小鼠大腸癌。第35頁/共71頁 腫瘤動物模型腫瘤動物模型 3.3. 將人類腫瘤移植到動物體內(nèi)，經(jīng)傳代后，將人類腫瘤移植到動物體內(nèi)，經(jīng)傳代后，成活率、生長速度、荷瘤壽命、侵襲和轉(zhuǎn)移等成活率、生長速度、荷瘤壽命、侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)特性穩(wěn)定

21、。生物學(xué)特性穩(wěn)定。 原位移植原位移植肺、肝臟、腎臟、肺、肝臟、腎臟、 卵巢等卵巢等 第36頁/共71頁四、設(shè)計動物模型的注意事項四、設(shè)計動物模型的注意事項1 1盡可能重視盡可能重視“類似于人類疾病類似于人類疾病”的模型的模型 。2 2注意選用標準化和實用價值高的動物。注意選用標準化和實用價值高的動物。 生活在標準化的環(huán)境內(nèi)，有清楚的遺傳背景和微生物學(xué)質(zhì)量控制標準，具有較強生活在標準化的環(huán)境內(nèi)，有清楚的遺傳背景和微生物學(xué)質(zhì)量控制標準，具有較強的敏感性、較好的重復(fù)性和反應(yīng)均一性的特點。的敏感性、較好的重復(fù)性和反應(yīng)均一性的特點。 有嚴格的飼養(yǎng)規(guī)程。有嚴格的飼養(yǎng)規(guī)程。 易獲取大樣本實驗和觀察。易獲取大

22、樣本實驗和觀察。 第37頁/共71頁 3 3慎重選用近交系慎重選用近交系 。 4 4注意環(huán)境因素對模型動注意環(huán)境因素對模型動物的影響。物的影響。第38頁/共71頁第三節(jié)第三節(jié)免疫缺陷動物模型 第39頁/共71頁實驗動物遺傳學(xué)分類回顧實驗動物遺傳學(xué)分類回顧 近交系動物（近交系動物（INBRED STRAIN） 封閉群動物（封閉群動物（CLOSED COLONY） 突變系動物突變系動物（MUTANT STRAIN） 雜交雜交F1動物（動物（HYBRID ANIMAL） 雜種動物（雜種動物（MONGRAL ANIMAL）第40頁/共71頁人類疾病動物模型分類回顧人類疾病動物模型分類回顧誘發(fā)性動物模型

23、誘發(fā)性動物模型自發(fā)性動物模型自發(fā)性動物模型抗疾病型動物模型抗疾病型動物模型生物醫(yī)學(xué)動物模型生物醫(yī)學(xué)動物模型第41頁/共71頁一、免疫缺陷動物的定義一、免疫缺陷動物的定義 免疫缺陷動物是指由于先天性免疫缺陷動物是指由于先天性遺傳突變，或用人工方法，培育一遺傳突變，或用人工方法，培育一種或多種免疫功能缺陷的動物。種或多種免疫功能缺陷的動物。 免疫缺陷動物開創(chuàng)了腫瘤學(xué)、免疫缺陷動物開創(chuàng)了腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、細胞生物學(xué)的新的里程碑。免疫學(xué)、細胞生物學(xué)的新的里程碑。第42頁/共71頁二、免疫功能缺陷動物的分類二、免疫功能缺陷動物的分類按免疫功能缺陷的種類常分為按免疫功能缺陷的種類常分為: :1.T-1.T-

24、淋巴細胞功能缺陷動物：淋巴細胞功能缺陷動物：裸小鼠裸小鼠、裸大鼠、裸牛、裸豚鼠等。、裸大鼠、裸牛、裸豚鼠等。2.B-2.B-淋巴細胞功能缺陷動物：淋巴細胞功能缺陷動物：CBA/NCBA/N小鼠、小鼠、ArabinArabin馬和馬和QuarterQuarter馬等馬屬動馬等馬屬動物。物。3.NK3.NK細胞功能缺陷動物：細胞功能缺陷動物：BeigeBeige小鼠小鼠。4.4.聯(lián)合免疫缺陷動物：聯(lián)合免疫缺陷動物：SCIDSCID小鼠小鼠等人工定向培育的多種免疫功能缺陷動物。等人工定向培育的多種免疫功能缺陷動物。 第43頁/共71頁按免疫缺陷程度分為:1.1.單缺陷動物：裸小鼠、裸大鼠、裸牛、裸豚

25、鼠、單缺陷動物：裸小鼠、裸大鼠、裸牛、裸豚鼠、CBA/NCBA/N小鼠、小鼠、BeigeBeige小鼠等。小鼠等。2.2.雙缺陷動物：雙缺陷動物：T T、B B淋巴細胞缺陷小鼠（淋巴細胞缺陷小鼠（SCIDSCID小鼠）等。小鼠）等。3.3.多重缺陷動物：三缺陷動物。多重缺陷動物：三缺陷動物。 第44頁/共71頁三、免疫缺陷動物歷史三、免疫缺陷動物歷史裸小鼠： 1919世紀世紀5050年代先后發(fā)現(xiàn)無毛小鼠，并知其后代也屬無毛遺傳；年代先后發(fā)現(xiàn)無毛小鼠，并知其后代也屬無毛遺傳； 19071907年年CampbellCampbell證實無毛性狀為隱性突變；證實無毛性狀為隱性突變； 19621962年

26、年FlanaganFlanagan用全同胞用全同胞B BS S近交（近交（Nu/+Nu/+ Nu/+ Nu/+ ）繁殖后代，形）繁殖后代，形成了最早的裸鼠群體；成了最早的裸鼠群體；第45頁/共71頁 19681968年年P(guān)antelourisPantelouris首次報告無胸首次報告無胸腺，即先天缺陷腺，即先天缺陷T T淋巴細胞。至此受到廣淋巴細胞。至此受到廣泛重視；泛重視； 19751975年首臺無菌隔離器問世，裸小鼠年首臺無菌隔離器問世，裸小鼠能夠正常生長和繁殖；能夠正常生長和繁殖； 同年，丹麥人同年，丹麥人RygaardRygaard首次將人結(jié)腸首次將人結(jié)腸癌移植到裸鼠癌移植到裸鼠； 1

27、9731973年起，每隔三年舉行一次裸鼠年起，每隔三年舉行一次裸鼠國際會議。后改名為國際會議。后改名為“免疫缺陷動物實免疫缺陷動物實驗國際會議驗國際會議”。 第46頁/共71頁四、常見的免疫缺陷動物四、常見的免疫缺陷動物1.1.裸小鼠裸小鼠 是指先天性無胸腺，且無被毛的小鼠是指先天性無胸腺，且無被毛的小鼠, ,簡稱為裸小鼠。其突變基因為裸基因簡稱為裸小鼠。其突變基因為裸基因, ,符號為符號為, ,是一個隱是一個隱性突變基因性突變基因, ,位于小鼠的第位于小鼠的第1111號染色體上。目前，此基因已導(dǎo)入到不同品系的小鼠中號染色體上。目前，此基因已導(dǎo)入到不同品系的小鼠中, ,常見的有常見的有BALB

28、/c-nuBALB/c-nu、C3H-nuC3H-nu、C57BL/6-nuC57BL/6-nu等。等。 第47頁/共71頁第48頁/共71頁第49頁/共71頁第50頁/共71頁裸鼠的解剖生理特點： 毛囊發(fā)育不良，外觀上看幾乎沒有被毛，故稱毛囊發(fā)育不良，外觀上看幾乎沒有被毛，故稱“裸鼠裸鼠”（無毛）（無毛）。 無胸腺，僅有胸像殘跡或異常的胸腺上皮。故不能分泌胸腺素，不能使無胸腺，僅有胸像殘跡或異常的胸腺上皮。故不能分泌胸腺素，不能使T T細胞細胞正常分化，而正常分化，而T T細胞是移植排異的主要細胞。有較高的細胞是移植排異的主要細胞。有較高的NKNK細胞數(shù)量和活性細胞數(shù)量和活性。 因為因為Ig

29、GIgG的產(chǎn)生需要的產(chǎn)生需要T T細胞和巨噬細胞的參與，其細胞和巨噬細胞的參與，其，只有，只有極少量的極少量的IgGIgG。第51頁/共71頁 自發(fā)腫瘤現(xiàn)象罕見，可能與自發(fā)腫瘤現(xiàn)象罕見，可能與NKNK細胞的細胞的活性高有關(guān)活性高有關(guān)（無自發(fā)腫瘤）（無自發(fā)腫瘤）。 裸鼠易患鼠肝炎和病毒性肺炎裸鼠易患鼠肝炎和病毒性肺炎（易感（易感染）染）。 純合裸鼠母性極差，且受孕率低，乳純合裸鼠母性極差，且受孕率低，乳房發(fā)育不良。通常以純合雄鼠與帶有房發(fā)育不良。通常以純合雄鼠與帶有nunu基基因的雜合雌鼠（因的雜合雌鼠（nu/+nu/+ nu/nunu/nu）可獲）可獲1/21/2裸鼠裸鼠（雌性不育）（雌性不育

30、）。 裸鼠需飼養(yǎng)在屏障環(huán)境中裸鼠需飼養(yǎng)在屏障環(huán)境中（生活環(huán)境（生活環(huán)境要求高）要求高）。第52頁/共71頁 裸鼠的應(yīng)用 （1 1）腫瘤學(xué)。）腫瘤學(xué)。 （2 2）微生物學(xué)。）微生物學(xué)。 （3 3）免疫學(xué)。）免疫學(xué)。 （4 4）寄生蟲學(xué)。）寄生蟲學(xué)。 （5 5）遺傳學(xué)。）遺傳學(xué)。 （6 6）皮膚病。）皮膚病。 （7 7）臨床醫(yī)學(xué)。）臨床醫(yī)學(xué)。 第53頁/共71頁 裸鼠的繁育方式 （1）nu/nunu/nu？ （2）nu/+ nu/nu？ （3）nu/+ nu/+?! （4）nu/nu nu/+!第54頁/共71頁 nu+nunu /nunu / +nu / + / + nu+nunu /nunu

31、/ +nunu /nunu / +nu/+ nu/+nu/nu nu/+ 第55頁/共71頁 近交系裸鼠的保持和生產(chǎn)過程 （1）保持原種近交系（ B S） （2）導(dǎo)入裸基因。 （3）反復(fù)自交+回交。 （4）約8-10代獲得與原近交系背景一致的裸鼠。 （5） nu/nu nu/+ ！第56頁/共71頁舉例：BALB/cBALB/c-nu:1.BALB/c BS(+/+/+);2.BALB/cnu/nu : + /+ nu/nu 3. 反復(fù)自交、回交： nu /+ nu /+(自交） （回交） nu/nu nu /+ + /+4.約8-10代后獲得與BALB/c 背景一致的BALB/c-nu。此時

32、裸鼠繁育采用: nu/nu nu/+第57頁/共71頁 封閉群裸鼠的保持和生產(chǎn)過程 第58頁/共71頁 2.裸大鼠 19531953年，英國科學(xué)家首次在大鼠年，英國科學(xué)家首次在大鼠中發(fā)現(xiàn)一種外觀與裸小鼠相似，只中發(fā)現(xiàn)一種外觀與裸小鼠相似，只是被毛不像裸小鼠那樣全無，通過是被毛不像裸小鼠那樣全無，通過解剖和免疫學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)解剖和免疫學(xué)檢查發(fā)現(xiàn): :無胸腺、無胸腺、缺乏缺乏T T細胞功能，細胞功能，B B細胞功能正常，細胞功能正常，NKNK細胞活力增強，繁殖方式與裸小細胞活力增強，繁殖方式與裸小鼠相同，且能接受異種組織和細胞鼠相同，且能接受異種組織和細胞移植?；蚍枺阂浦??；蚍枺?Rnu-Rn

33、u第59頁/共71頁3.Beige（bg）小鼠 為為NKNK細胞活性缺陷的突變系小鼠，細胞活性缺陷的突變系小鼠，bgbg是隱性突變基因，位于第是隱性突變基因，位于第1313號染色號染色體上。純合的小鼠（體上。純合的小鼠（bg/bgbg/bg）被毛完整，但毛色變淺，耳廓和尾尖色素很淡。）被毛完整，但毛色變淺，耳廓和尾尖色素很淡。這種小鼠其內(nèi)源性這種小鼠其內(nèi)源性NKNK細胞功能缺陷。純合細胞功能缺陷。純合bgbg基因降低殺菌活性?；蚪档蜌⒕钚?。 bgbg對化膿對化膿性細菌感染非常敏感，對各種病原因子也都較敏感，性細菌感染非常敏感，對各種病原因子也都較敏感， bgbg小鼠必須在屏障環(huán)小鼠必須在屏

34、障環(huán)境中才能較好的生存。繁殖時可采用純合子的親本。境中才能較好的生存。繁殖時可采用純合子的親本。 第60頁/共71頁 4.SCID小鼠 SCIDSCID小鼠的全稱為小鼠的全稱為“重癥聯(lián)合免疫重癥聯(lián)合免疫缺陷缺陷 ( (S Severeevere C Combinedombined I Immuno mmuno D Deficiency Mice)eficiency Mice)”小鼠。其突變點在小鼠。其突變點在1616號染色體上，為單號染色體上，為單基因突變，突變基因符號為基因突變，突變基因符號為- -scidscid，當其，當其純合時，性狀表現(xiàn)為淋巴細胞抗原受體純合時，性狀表現(xiàn)為淋巴細胞抗原受

35、體基因編碼順序異常，造成基因編碼順序異常，造成T T、B B淋巴細淋巴細胞胞不能分化為特異性的淋巴細胞，目前不能分化為特異性的淋巴細胞，目前已有多種不同品系的已有多種不同品系的SCIDSCID小鼠。小鼠。 第61頁/共71頁 SCID小鼠的生物學(xué)特征： 外觀與普通小鼠無異樣，但其外觀與普通小鼠無異樣，但其胸腺、脾、淋巴結(jié)等免役器官胸腺、脾、淋巴結(jié)等免役器官的重量不到正常小鼠的的重量不到正常小鼠的30%30%。其。其胸腺多為脂肪組織包圍，沒有胸腺多為脂肪組織包圍，沒有皮質(zhì)結(jié)構(gòu)，僅殘存的髓質(zhì)。外皮質(zhì)結(jié)構(gòu)，僅殘存的髓質(zhì)。外周白細胞較少，淋巴細胞僅占周白細胞較少，淋巴細胞僅占總數(shù)的總數(shù)的10-20%10-20%（正常小鼠為（正常小鼠為70%70%）。）。第62頁/共71頁