蛋白質(zhì)綜合實(shí)驗(yàn)

1、會(huì)計(jì)學(xué)1蛋白質(zhì)綜合實(shí)驗(yàn)蛋白質(zhì)綜合實(shí)驗(yàn)作圖作圖以以O(shè)D650為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)蛋白含量為橫坐標(biāo)，在坐標(biāo)為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)蛋白含量為橫坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪制一條過(guò)原點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。紙上繪制一條過(guò)原點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。求算標(biāo)本血清中的蛋白質(zhì)濃度求算標(biāo)本血清中的蛋白質(zhì)濃度 查圖：利用測(cè)定管讀數(shù)在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出蛋白量查圖：利用測(cè)定管讀數(shù)在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出蛋白量（X），最后如下算出標(biāo)本的蛋白含量：），最后如下算出標(biāo)本的蛋白含量：gX*（100/0.002）*10-6 以標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管的吸光數(shù)，按下列公式計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管的吸光數(shù)，按下列公式計(jì)算：g（OD測(cè)定測(cè)定/OD標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)*標(biāo)準(zhǔn)管蛋白量）標(biāo)準(zhǔn)管蛋白量）*（100/0.

2、002）注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)1）加入酚試劑時(shí)動(dòng)作要快并立即搖勻，不應(yīng)出現(xiàn)混）加入酚試劑時(shí)動(dòng)作要快并立即搖勻，不應(yīng)出現(xiàn)混濁濁2）標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：）標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：至少要有五個(gè)點(diǎn)以上。一條理想的標(biāo)準(zhǔn)至少要有五個(gè)點(diǎn)以上。一條理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)該是斜率接近曲線應(yīng)該是斜率接近l，且通過(guò)原點(diǎn)的直線，其范圍應(yīng)在被，且通過(guò)原點(diǎn)的直線，其范圍應(yīng)在被測(cè)物濃度的一半到二倍之間。吸光度在測(cè)物濃度的一半到二倍之間。吸光度在0.050.8之間。如之間。如果待測(cè)樣品濃度超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍，應(yīng)將樣品稀釋再果待測(cè)樣品濃度超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍，應(yīng)將樣品稀釋再測(cè)。測(cè)。臨床意義臨床意義總蛋白增加：血液濃縮（嚴(yán)重腹瀉、嘔吐、高熱、休克）總蛋白

3、增加：血液濃縮（嚴(yán)重腹瀉、嘔吐、高熱、休克）；合成增多（多發(fā)性骨髓瘤；合成增多（多發(fā)性骨髓瘤G）總蛋白減少：總蛋白減少：血液稀釋（補(bǔ)水過(guò)多、水鈉潴留）血液稀釋（補(bǔ)水過(guò)多、水鈉潴留）各種原因所至的白蛋白減少，如：各種原因所至的白蛋白減少，如：合成不足（肝臟功能下降）合成不足（肝臟功能下降）合成原料不足（饑餓、腹瀉、消化道腫瘤）合成原料不足（饑餓、腹瀉、消化道腫瘤）去路增多去路增多(腎病綜合癥、大量胸腹水、燒傷、大出血腎病綜合癥、大量胸腹水、燒傷、大出血)消耗過(guò)多（糖尿病、甲亢、腫瘤等）消耗過(guò)多（糖尿病、甲亢、腫瘤等）基本實(shí)驗(yàn)步驟基本實(shí)驗(yàn)步驟 分離膠和濃縮膠配制分離膠和濃縮膠配制 10%分離膠(l

4、) 4%濃縮膠(l)H2O 4200 305030.8%Acr/Bis 3250 6501.5Tris-HCL PH8.8 2500 0.5Tris-HCL PH6.8 125010%APS 100 50TEMED 10 4.5電泳條帶電泳條帶 聚丙烯酰胺凝膠電泳血聚丙烯酰胺凝膠電泳血清蛋白質(zhì)區(qū)帶分布圖清蛋白質(zhì)區(qū)帶分布圖作圖作圖以以O(shè)D650為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)蛋白含量為橫坐標(biāo)，在坐標(biāo)為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)蛋白含量為橫坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪制一條過(guò)原點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。紙上繪制一條過(guò)原點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。求算標(biāo)本血清中的蛋白質(zhì)濃度求算標(biāo)本血清中的蛋白質(zhì)濃度 查圖：利用測(cè)定管讀數(shù)在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出蛋白量查圖：利用測(cè)定管讀數(shù)在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出蛋白量（X），最后如下算出標(biāo)本的蛋白含量：），最后如下算出標(biāo)本的蛋白含量：gX*（100/0.002）*10-6 以標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管的吸光數(shù)，按下列公式計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管