細胞分化與基因表達調(diào)控學(xué)習(xí)教案

1、會計學(xué)1第一頁，共95頁。第九章第九章核糖體核糖體第第 十十 章章細胞骨架細胞骨架第 十 一 章第 十 一 章細 胞 增 殖細 胞 增 殖(zngzh)及其調(diào)控及其調(diào)控第十二章第十二章細胞分化與基細胞分化與基因表達調(diào)控因表達調(diào)控第十三章第十三章細胞衰老與凋細胞衰老與凋亡亡第1頁/共95頁第二頁，共95頁。細胞分化(fnhu)與基因表達調(diào)控第2頁/共95頁第三頁，共95頁。l細胞分化細胞分化(cell differentiation)：在個體發(fā)育：在個體發(fā)育(fy)（ontogeny）中，由一）中，由一 種相同的種相同的l 細胞類型經(jīng)細胞分裂后逐漸在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上形成穩(wěn)定性差異，產(chǎn)生細胞類型

2、經(jīng)細胞分裂后逐漸在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上形成穩(wěn)定性差異，產(chǎn)生l 各不相同的細胞類群的過程。各不相同的細胞類群的過程。l每個人的一生中都在進行著細胞分化。每個人的一生中都在進行著細胞分化。l細胞分裂的不對稱性和細胞間的相互作用是細胞分化的兩個基本機制。細胞分裂的不對稱性和細胞間的相互作用是細胞分化的兩個基本機制。l細胞分化是多細胞生物發(fā)育細胞分化是多細胞生物發(fā)育(fy)的基礎(chǔ)與核心；的基礎(chǔ)與核心；l細胞分化的關(guān)鍵在于特異性蛋白質(zhì)合成；細胞分化的關(guān)鍵在于特異性蛋白質(zhì)合成；l合成特異性蛋白質(zhì)實質(zhì)在于組織特異性基因在時間和空間上的差異性表達合成特異性蛋白質(zhì)實質(zhì)在于組織特異性基因在時間和空間上的差異性表達l

3、差異性表達的機制是由于基因表達的組合調(diào)控。差異性表達的機制是由于基因表達的組合調(diào)控。l細胞癌變是正常細胞分化機制失控的表現(xiàn)細胞癌變是正常細胞分化機制失控的表現(xiàn) 第3頁/共95頁第四頁，共95頁。第4頁/共95頁第五頁，共95頁。分子雜交技術(shù)檢測基因(jyn)及其表達 細 胞 總D N A 細 胞 總RN A 輸 卵 管 細 胞 成 紅 細 胞 胰 島 細 胞 輸 卵 管 細 胞 成 紅 細 胞 胰 島 細 胞 卵 清 蛋 白 基 因 + + + + - - - - -珠 蛋 白 基 因 + + + - - + - - 胰 島 素 基 因 + + + - - - - + 實 驗 方 法 Sout

4、hern雜 交 N orthern雜 交 所以細胞分化的實質(zhì)是基因的差別表達（differential expression）。第5頁/共95頁第六頁，共95頁。第6頁/共95頁第七頁，共95頁。管家基因(house-keeping genes)： 是指所有細胞中均要表達的一類基因， 其產(chǎn)物是對維持細胞基本生命活動所必需的。組織特異性基因(tissue-specific genes)，或稱奢侈基因(luxury genes)：是 指不同的細胞類型進行特異性表達的基因，其產(chǎn) 物賦予各種類型細胞特 異的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征與特異的功能；調(diào)節(jié)基因（regulatory gene）：產(chǎn)物用于調(diào)節(jié)組織特異性基因

5、的表達，起 激活(j hu)或者起阻遏作用。細胞分化的實質(zhì)：是組織特異性基因在時間和空間上的差別表達（differential expression）。第7頁/共95頁第八頁，共95頁。第8頁/共95頁第九頁，共95頁。第9頁/共95頁第十頁，共95頁。第10頁/共95頁第十一頁，共95頁。第11頁/共95頁第十二頁，共95頁。第12頁/共95頁第十三頁，共95頁。1、植物(zhw)細胞具有全能性，在適宜的條件下可培育成正常的植株第13頁/共95頁第十四頁，共95頁。植物植物(zhw)(zhw)細胞的全能性細胞的全能性植物的枝、葉、根都有可能長成一株完整的植株，細胞培養(yǎng)植物的枝、葉、根都有可能

6、長成一株完整的植株，細胞培養(yǎng)(piyng)(piyng)的的結(jié)果也證明即使高度分化的植物細胞也可以培養(yǎng)結(jié)果也證明即使高度分化的植物細胞也可以培養(yǎng)(piyng)(piyng)成一個完整的成一個完整的植株，因此可以說絕多數(shù)植物細胞具有全能性。植株，因此可以說絕多數(shù)植物細胞具有全能性。第14頁/共95頁第十五頁，共95頁。Transplantation of frog red cell nucleus indicated the nucleus of animal is totipotency（全能性）（全能性）如蛙紅細胞核移植后發(fā)育(fy)成蝌蚪第15頁/共95頁第十六頁，共95頁。Dolly:

7、A lamb with no father The sheep star: DollyDolly 羊的誕生說明高度分羊的誕生說明高度分化化(fnhu)的哺乳動物體的哺乳動物體細胞核也具有發(fā)育全能性細胞核也具有發(fā)育全能性第16頁/共95頁第十七頁，共95頁。干細胞：是一類具有分裂和分化能力的細胞。干細胞：是一類具有分裂和分化能力的細胞。干細胞具有以下生物學(xué)特點：干細胞具有以下生物學(xué)特點：終生保持未分化或低分化特征；終生保持未分化或低分化特征；在機體的中的數(shù)目、位置相對恒定；在機體的中的數(shù)目、位置相對恒定；具有自我具有自我(zw)(zw)更新能力；更新能力；能無限制的分裂增殖；能無限制的分裂增殖；

8、具有多向分化潛能，能分化成不同類型的組織細胞，造血干細胞、骨具有多向分化潛能，能分化成不同類型的組織細胞，造血干細胞、骨 髓間充質(zhì)干細胞、神經(jīng)干細胞等成體干細胞具有一定的跨系、甚至跨髓間充質(zhì)干細胞、神經(jīng)干細胞等成體干細胞具有一定的跨系、甚至跨 胚層分化的潛能；胚層分化的潛能；分裂的慢周期性，絕大多數(shù)干細胞處于分裂的慢周期性，絕大多數(shù)干細胞處于G0G0期；期；通過兩種方式分裂，對成分裂和不對稱分裂前者形成兩個相同的干細胞，通過兩種方式分裂，對成分裂和不對稱分裂前者形成兩個相同的干細胞， 后者形成一個干細胞和一個祖細胞后者形成一個干細胞和一個祖細胞( (是能成長為具有專門功能的細胞的未成熟細胞是能

9、成長為具有專門功能的細胞的未成熟細胞) )。第17頁/共95頁第十八頁，共95頁。根據(jù)干細胞的分化能力，可分為全能干細胞、多能干細胞和單能干細胞。根據(jù)干細胞的分化能力，可分為全能干細胞、多能干細胞和單能干細胞。-全能干細胞（全能干細胞（totipotential stell cell）：可以分化為機體內(nèi)的任何一種細）：可以分化為機體內(nèi)的任何一種細 胞，直至形成一個復(fù)雜的有機體。胞，直至形成一個復(fù)雜的有機體。-多能干細胞（多能干細胞（pluripotential stem cell） ：可以分化為多種類型的細胞，：可以分化為多種類型的細胞， 但它不可能但它不可能(knng)分化出足以構(gòu)成完整個體

10、的所有細胞，所以多能干細胞的分化出足以構(gòu)成完整個體的所有細胞，所以多能干細胞的 分化潛能稱為多能性。如造血干細胞可以分化為分化潛能稱為多能性。如造血干細胞可以分化為12種血細胞。種血細胞。-單能干細胞（單能干細胞（monopotential stem cell） ：只能分化為一種類型的細胞，：只能分化為一種類型的細胞， 而且自我更新能力有限。來源于多能干細胞，具有向特定細胞系分化的而且自我更新能力有限。來源于多能干細胞，具有向特定細胞系分化的 能力，也稱為祖細胞（能力，也稱為祖細胞（progenitor）。）。根據(jù)個體發(fā)育過程中出現(xiàn)的先后次序不同，干細胞又可分為胚胎干細胞和根據(jù)個體發(fā)育過程中出

11、現(xiàn)的先后次序不同，干細胞又可分為胚胎干細胞和 成體干細胞。成體干細胞。-胚胎干細胞（胚胎干細胞（embryonic stem cells，ESC）：是指從胚胎內(nèi)細胞團或原）：是指從胚胎內(nèi)細胞團或原 始生殖細胞篩選分離出的具有多能性或全能性的細胞，此外也可以通過始生殖細胞篩選分離出的具有多能性或全能性的細胞，此外也可以通過 體細胞核移植技術(shù)獲得。體細胞核移植技術(shù)獲得。第18頁/共95頁第十九頁，共95頁。干細胞的分化干細胞的分化(fnhu)(fnhu)潛能潛能定型細胞第19頁/共95頁第二十頁，共95頁。第20頁/共95頁第二十一頁，共95頁。 Embryonic stem cells 胎兒(t

12、i r)原（始）生殖細胞第21頁/共95頁第二十二頁，共95頁。多能多能(du nn)干細胞（造血干細胞）干細胞（造血干細胞）第22頁/共95頁第二十三頁，共95頁。 單能干細胞（monopotential cell）第23頁/共95頁第二十四頁，共95頁。1 1、胞外信號分子對、胞外信號分子對 細胞分化的影響細胞分化的影響(yngxing),(yngxing), 如眼的發(fā)生如眼的發(fā)生近端組織的相互作用 視泡可誘導(dǎo)其外面(wimin)的外胚層 形成晶體，而晶體又可誘導(dǎo) 外胚層形成角膜。遠距離細胞間的相互作用外層視杯視泡晶狀體泡發(fā)育的角膜第24頁/共95頁第二十五頁，共95頁。2 2、細胞記憶、

13、細胞記憶(jy)(jy)與決定：與決定： 果蠅成蟲盤(imaginal disc)： 初級分化的細胞群。在幼蟲的變態(tài)過過程中，不同的成蟲盤發(fā)育成不同的器官。決定（determination）：隨著細胞的分裂和分化，細胞的發(fā)育方向逐漸被限定，當(dāng)尚未定向的細胞不可逆地轉(zhuǎn)變(zhunbin)為某種定向細胞的時刻，細胞的命運就被固定了。如哺乳動物桑椹胚的內(nèi)細胞團和外圍細胞，前者形成胚胎、后者形成滋養(yǎng)層。第25頁/共95頁第二十六頁，共95頁?？寺】寺?k ln)能給人類帶來什能給人類帶來什么？么？克隆克隆(k ln)動物是未來的制藥動物是未來的制藥廠廠克隆克隆(k ln)的愛因斯坦會懂的愛因斯坦會懂“

14、相對論相對論”嗎嗎第26頁/共95頁第二十七頁，共95頁。（106108種抗體）。種抗體）。4）DNA的甲基化與異染色質(zhì)化：胞嘧啶的甲基化使基因的甲基化與異染色質(zhì)化：胞嘧啶的甲基化使基因失活。失活。外因通過影響細胞的遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)揮作用，外因是分化的條件(tiojin)，內(nèi)因是分化的基礎(chǔ)。第27頁/共95頁第二十八頁，共95頁。第28頁/共95頁第二十九頁，共95頁。第29頁/共95頁第三十頁，共95頁。第30頁/共95頁第三十一頁，共95頁。第31頁/共95頁第三十二頁，共95頁。 同源異型基因（同源異型基因（homeotic selector gene，Hox gene）：）： 在發(fā)育中起關(guān)鍵

15、作用的基因群。在發(fā)育中起關(guān)鍵作用的基因群。 果蠅體節(jié)發(fā)育中起關(guān)鍵作用的基因群。果蠅體節(jié)發(fā)育中起關(guān)鍵作用的基因群。 含有高度保守的含有高度保守的 180 bp 組成的組成的 DNA 序列，稱同源框。編碼序列，稱同源框。編碼 60 個個氨基酸，形成氨基酸，形成 螺旋螺旋(luxun)-轉(zhuǎn)角轉(zhuǎn)角- 螺旋螺旋(luxun)結(jié)構(gòu)，與結(jié)構(gòu)，與 DNA 序列大溝相互作用，啟動基因表達。序列大溝相互作用，啟動基因表達。 同源異型基因在染色體上的排列與胚胎發(fā)育在時、空序列上是一同源異型基因在染色體上的排列與胚胎發(fā)育在時、空序列上是一致的。致的。第32頁/共95頁第三十三頁，共95頁。HOX mutant Ant

16、ennaleg左、正常果蠅的觸角左、正常果蠅的觸角(chjio)(chjio)為具芒觸角為具芒觸角(chjio)(chjio)，右、突變果蠅的觸角，右、突變果蠅的觸角(chjio)(chjio)發(fā)育為足發(fā)育為足第33頁/共95頁第三十四頁，共95頁。Bithorax mutant果蠅的雙胸突變果蠅的雙胸突變(tbin)(tbin)（兩節(jié)中胸，沒有后胸，因而沒有平衡棒）（兩節(jié)中胸，沒有后胸，因而沒有平衡棒）第34頁/共95頁第三十五頁，共95頁。THE CANCER CELLBreast Epithelial Tumor Cell第35頁/共95頁第三十六頁，共95頁。第36頁/共95頁第三十七

17、頁，共95頁。Benign tumor（良性腫瘤（良性腫瘤(lingxng zhngli)）Malignant tumor（惡性腫瘤（惡性腫瘤( xng zhng li)）第37頁/共95頁第三十八頁，共95頁。第38頁/共95頁第三十九頁，共95頁。第39頁/共95頁第四十頁，共95頁。第40頁/共95頁第四十一頁，共95頁。侵潤性和擴散性（侵潤性和擴散性（Invade and metastasize）第41頁/共95頁第四十二頁，共95頁。轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移(zhuny)（Metastasis）毛細血管(mo x xu un)第42頁/共95頁第四十三頁，共95頁。Have highly aberr

18、ant（異常（異常(ychng)） chromosome complements Aneuploidy（非正倍）（非正倍）Pancreas cancer（胰腺癌）（胰腺癌）第43頁/共95頁第四十四頁，共95頁。Lose Contact inhibition in vitro第44頁/共95頁第四十五頁，共95頁。第45頁/共95頁第四十六頁，共95頁。 惡性腫瘤的形成往往涉及多個基因的改變，與原癌基因、抑癌基因突變(j yn t bin)的逐漸積累有關(guān)。第46頁/共95頁第四十七頁，共95頁。第47頁/共95頁第四十八頁，共95頁。原癌基因 功能 相關(guān)腫瘤 sis 生長因子 Erwing 網(wǎng)

19、瘤 erb-B 受體酪氨酸激酶，EGF 受體 星形細胞瘤、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、胃癌、唾腺癌 fms 受體酪氨酸激酶，CSF-1 受體 髓性白血病 ras G-蛋白 肺癌，結(jié)腸癌，膀胱癌，直腸癌 src 非受體酪氨酸激酶 魯斯氏肉瘤 Abl-1 非受體酪氨酸激酶 慢性髓性白血病 raf MAPKKK，絲氨酸/蘇氨酸激酶 腮腺腫瘤 vav 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)連接蛋白 白血病 myc 轉(zhuǎn)錄因子 Burkitt 淋巴瘤、肺癌、早幼粒白血病 myb 轉(zhuǎn)錄因子 結(jié)腸癌 fos 轉(zhuǎn)錄因子 骨肉瘤 jun 轉(zhuǎn)錄因子 erb-A 轉(zhuǎn)錄因子 急性非淋巴細胞白血病 bcl-1 cyclinD1 B 細胞淋巴瘤 第48頁/共

20、95頁第四十九頁，共95頁。第49頁/共95頁第五十頁，共95頁。抑癌基因 功能 相關(guān)腫瘤 Rb 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 RB、成骨肉瘤、胃癌、SCLC、乳癌、結(jié)腸癌 p53 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 星狀細胞瘤、膠質(zhì)母細胞瘤、結(jié)腸癌、 乳癌、 成骨肉瘤、 SCLC、 胃癌、磷狀細胞肺癌 WT 負調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子 WT、橫紋肌肉瘤、肺癌、膀胱癌、乳癌、肝母細胞瘤 NF-1 GAP，ras GTP 酶激活因子 神經(jīng)纖維瘤、嗜鉻細胞瘤、雪旺氏細胞瘤、神經(jīng)纖維瘤 DCC 細胞粘附分子 直腸癌 p21 CDK 抑制因子 前列腺癌 p15 CDK4、CDK6 抑制因子 成膠質(zhì)細胞瘤 BRCA1 DNA 修復(fù)因子，與 RAD51

21、作用 乳腺癌、卵巢癌 BRCA2 DNA 修復(fù)因子，與 RAD51 作用 乳腺癌、胰腺癌 PTEN 磷酯酶 成膠質(zhì)細胞瘤 第50頁/共95頁第五十一頁，共95頁。Rb bind with E2F transcription factorRb基因基因(jyn)的作用的作用第51頁/共95頁第五十二頁，共95頁。散發(fā)性和遺傳性散發(fā)性和遺傳性RbRb功能喪失功能喪失(sngsh)(sngsh)的機理的機理視網(wǎng)膜第52頁/共95頁第五十三頁，共95頁。第53頁/共95頁第五十四頁，共95頁。第54頁/共95頁第五十五頁，共95頁。1 1、原癌基因、原癌基因(jyn)(jyn)與腫與腫瘤抑制基因瘤抑制基

22、因(jyn)(jyn)產(chǎn)物產(chǎn)物協(xié)調(diào)作用，避協(xié)調(diào)作用，避免細胞癌變免細胞癌變DNA修復(fù)修復(fù)(xif)因子因子第55頁/共95頁第五十六頁，共95頁。第56頁/共95頁第五十七頁，共95頁。第57頁/共95頁第五十八頁，共95頁。原癌基因激活原癌基因激活(j hu)(j hu)的可能途徑的可能途徑第58頁/共95頁第五十九頁，共95頁。Chart of the major signaling pathways relevant to cancer in human cells, indicating the cellular locations of some of the proteins mo

23、dified by mutation in cancers.第59頁/共95頁第六十頁，共95頁。Ras oncogene: Retain bind GTPBcl-2 oncogene: Prevent apoptosis顯性突變顯性突變(tbin)第60頁/共95頁第六十一頁，共95頁。第61頁/共95頁第六十二頁，共95頁。第62頁/共95頁第六十三頁，共95頁。第63頁/共95頁第六十四頁，共95頁。第64頁/共95頁第六十五頁，共95頁。第65頁/共95頁第六十六頁，共95頁。HIVHerpes VirusAdenovirusMouse Leukemia Virus愛滋病毒愛滋病毒皰疹

24、病毒皰疹病毒腺病毒腺病毒白血病毒白血病毒第66頁/共95頁第六十七頁，共95頁。第67頁/共95頁第六十八頁，共95頁。脫氨基(nj)作用第68頁/共95頁第六十九頁，共95頁。第69頁/共95頁第七十頁，共95頁。第70頁/共95頁第七十一頁，共95頁。Angiogenesis:Cancer cells growth factors endothelial （內(nèi)（內(nèi)皮）皮）cells form new vessels生長因子是一種蛋白質(zhì)，主要作用是與細胞表面的接受器結(jié)合后，刺激細胞產(chǎn)生一連串的細胞增殖(zngzh)與分化第71頁/共95頁第七十二頁，共95頁。第72頁/共95頁第七十三頁，共

25、95頁?；蜣D(zhuǎn)錄(zhun l)水平的控制錯綜復(fù)雜，受多種因素影響 TATA盒、CAAT盒和GC盒，TATA盒決定轉(zhuǎn)錄(zhun l)起始的位點，CAAT 盒和GC盒決定RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄(zhun l)基因的效率。這三種普遍的啟動子元 件的位置見圖第1行。缺失作圖法（deletion mapping）與DNA足跡技術(shù)（DNA footprinting） 是鑒定啟動子區(qū)域特殊位點功能的普遍采用的方法。轉(zhuǎn)錄(zhun l)因子結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄(zhun l)因子與DNA序列相互作用最常見的幾種結(jié)構(gòu)模式第73頁/共95頁第七十四頁，共95頁。皮質(zhì)醇糖皮質(zhì)激素第74頁/共95頁第七十五頁，共95頁。啟動子元件

26、啟動子元件(yunjin)(yunjin)第75頁/共95頁第七十六頁，共95頁。轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄(zhun l)(zhun l)因子結(jié)構(gòu)因子結(jié)構(gòu)第76頁/共95頁第七十七頁，共95頁。結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)(jigu)(jigu)模式模式第77頁/共95頁第七十八頁，共95頁。DNA甲基化（DNA methylation）與基因表達阻遏有關(guān)。 基因組印記（genomic imprinting） 是指來自父方和母方的等位基因在通過精子和卵子傳遞給子代時發(fā)生了修飾，使帶有親代印記的等位基因具有不同的表達特性(txng)，這種修飾常為DNA甲基化修飾，也包括組蛋白乙?；⒓谆刃揎?。在生殖細胞形成早期，來自父方和母方

27、的印記將全部被消除，父方等位基因在精母細胞形成精子時產(chǎn)生新的甲基化模式，但在受精時這種甲基化模式還將發(fā)生改變；母方等位基因甲基化模式在卵子發(fā)生時形成，因此在受精前來自父方和母方的等位基因具有不同的甲基化模式。 基因組印記是說明甲基化作用在基因表達中具有重要意義的最好例證，也是哺乳動物所特有的現(xiàn)象。第78頁/共95頁第七十九頁，共95頁。二氫葉酸次黃嘌呤核苷第79頁/共95頁第八十頁，共95頁。選擇性拼接是一種廣泛存在的RNA加工機制，通過這種方式，一個基因能編碼兩個或多個相關(guān)的蛋白質(zhì)。有兩種類型： 1、組成型剪接(constitutive splicing)：大多數(shù)前體mRNA都含有多 個內(nèi)含

28、子， 他們常被有序的逐一切除，形成一個由各外顯子連 接而成的成熟mRNA，這種剪接方式稱。一個基因只產(chǎn)生一 種成熟的 mRNA，一般(ybn)也只產(chǎn)生一種蛋白質(zhì)產(chǎn)物。 第80頁/共95頁第八十一頁，共95頁。 2、選擇性剪接（alternative splicing)：來自同一個基因的前體mRNA 中某個內(nèi)含子5端供點又可在特定條件下與另一個內(nèi)含子的3端受 點進行剪接，從而(cng r)刪除這兩個內(nèi)含子及其中間的全部外顯子和內(nèi)含 子。這樣，一個前體mRNA就可因剪接方式不同產(chǎn)生多種mRNA， 轉(zhuǎn)譯出多個不同蛋白質(zhì)，這樣的剪接方式稱之。 但這些蛋白質(zhì)是一套結(jié)構(gòu)相關(guān)、功能相似的蛋白質(zhì)異形體， 如纖

29、粘蛋白 的合成。某一特定的外顯子是否被包括在成熟 mRNA 內(nèi)，主要取決于它 的3和5 端剪接位點是否被拼接機器選擇為切割位點。第81頁/共95頁第八十二頁，共95頁。纖粘蛋白纖粘蛋白(dnbi)(dnbi)（fibronectinfibronectin）第82頁/共95頁第八十三頁，共95頁。第83頁/共95頁第八十四頁，共95頁。拼接拼接(pn ji)(pn ji)位點位點第84頁/共95頁第八十五頁，共95頁。第85頁/共95頁第八十六頁，共95頁。Drosophila 卵細胞細胞質(zhì)中mRNA的定位(dngwi)第86頁/共95頁第八十七頁，共95頁。第87頁/共95頁第八十八頁，共95

30、頁?！半[蔽”mRNA（masked mRNA）： 未受精卵細胞質(zhì)中貯存許多m RNA，它們在卵細胞質(zhì)中與抑制蛋白結(jié)合而失去活性，這些貯存在卵細胞中沒有翻譯活性的 m RNA 稱之。未受精海膽卵細胞放射性標記的氨基酸摻入到蛋白質(zhì)中的放射性活性很少。受精的海膽卵細胞放射性標記的氨基酸摻入到蛋白質(zhì)中放射性活性逐漸增加。 “隱蔽”m RNA從無活性到有活性狀態(tài)的轉(zhuǎn)變發(fā)生得相當(dāng)快，受精后蛋白質(zhì)的合成不能依靠新 m RNA 的合成。表明在受精之后，馬上就被翻譯的m RNA，在和精子接觸之前就已經(jīng)存在于卵細胞中。用 RNA 合成抑制劑放線菌素D（actinomycin D）存在的情況下受精并培養(yǎng)，則受精后的

31、蛋白質(zhì)合成的活性與對照培養(yǎng)的活性相同。因為在有放線菌素D存在的情況下不能產(chǎn)生新的 RNAs，所以蛋白質(zhì)必然是依賴預(yù)存的m RNA模板合成的，這些m RNA是在受精后被激活的。這些預(yù)存m RNA的激活與兩個(lin )不同的事件有關(guān)：一是結(jié)合的抑制蛋白被釋放，二是通過卵細胞質(zhì)中一種酶作用使m RNA多聚（A）尾巴長度增加。第88頁/共95頁第八十九頁，共95頁。海膽卵受精海膽卵受精(shu jng)后后“隱蔽隱蔽”mRNA（masked mRNA）的激活）的激活A(yù)：海膽未受精卵和受精卵對14C-亮氨酸的累積摻入實驗：0時間表示受精的時刻；經(jīng)短暫拖延之后，很快Pro合成速率呈現(xiàn)(chngxin)顯著提高。B：在有和沒有放線菌素D存在的情況下，海膽卵受精對14C-亮氨酸的累積摻入實驗：，在受精之后Pro的合成起始增加不被放線菌素D所抑制，結(jié)果表