沉降菌碟暴露時(shí)間驗(yàn)證方案

1、1沉降菌碟暴露時(shí)間驗(yàn)證文件沉降菌碟暴露時(shí)間驗(yàn)證文件驗(yàn)證項(xiàng)目驗(yàn)證項(xiàng)目沉降菌碟暴露時(shí)間沉降菌碟暴露時(shí)間驗(yàn)證文件驗(yàn)證文件驗(yàn)證方案編號驗(yàn)證方案編號驗(yàn)證報(bào)告編號驗(yàn)證報(bào)告編號驗(yàn)證證書編號驗(yàn)證證書編號0目錄目錄一、驗(yàn)證方案起草、審批一、驗(yàn)證方案起草、審批.1二、驗(yàn)證報(bào)告起草審查及會審二、驗(yàn)證報(bào)告起草審查及會審.1三、驗(yàn)證證書的批準(zhǔn)三、驗(yàn)證證書的批準(zhǔn).1四、引言四、引言.2五、菌種及培養(yǎng)基五、菌種及培養(yǎng)基.2六、菌液制備六、菌液制備.2七、驗(yàn)證方法七、驗(yàn)證方法.2八、回收率計(jì)算八、回收率計(jì)算.3九、結(jié)果判斷九、結(jié)果判斷.3十、驗(yàn)證結(jié)果和記錄（附后）十、驗(yàn)證結(jié)果和記錄（附后）.3十一、驗(yàn)證報(bào)告（附后）十一、驗(yàn)證

2、報(bào)告（附后）.3十二、驗(yàn)證證書（附后）十二、驗(yàn)證證書（附后）.30沉降碟暴露時(shí)間驗(yàn)證方案沉降碟暴露時(shí)間驗(yàn)證方案一、驗(yàn)證方案起草、審批 1、驗(yàn)證方案起草、驗(yàn)證方案起草 驗(yàn)證項(xiàng)目沉降碟暴露時(shí)間驗(yàn)證 使用部門中心檢驗(yàn)室 驗(yàn)證方案編號 YZ-13580-1 起草部門中心檢驗(yàn)室 起草人簽名 日 期 2、驗(yàn)證方案會審、驗(yàn)證方案會審 審核人 日 期3、驗(yàn)證方案批準(zhǔn)、驗(yàn)證方案批準(zhǔn)批準(zhǔn)人驗(yàn)證委員會主任簽名日 期二、驗(yàn)證報(bào)告起草審查及會審1、驗(yàn)證報(bào)告起草、驗(yàn)證報(bào)告起草驗(yàn)證項(xiàng)目沉降碟暴露時(shí)間驗(yàn)證使用部門中心化驗(yàn)室 驗(yàn)證報(bào)告編號 起草部門 中心化驗(yàn)室 起草人簽名日 期2、驗(yàn)證報(bào)告會審、驗(yàn)證報(bào)告會審審核人日 期 三、驗(yàn)

3、證證書的批準(zhǔn)驗(yàn)證項(xiàng)目沉降碟暴露時(shí)間驗(yàn)證使用部門中心化驗(yàn)室 驗(yàn)證證書編號 批準(zhǔn)人驗(yàn)證委員會主任簽名日 期1四、引言1、驗(yàn)證目的：驗(yàn)證我公司沉降碟的暴露時(shí)間為 4 小時(shí)，依據(jù)中國藥典2010 年版附錄無菌檢查法和微生物限度檢查法下靈敏度檢查項(xiàng)進(jìn)行驗(yàn)證，以證明沉降碟中培養(yǎng)基在空氣暴露時(shí)間可以達(dá)到 4 小時(shí)。2、概述：我公司沉降碟為普通的培養(yǎng)皿（90mm15mm） ，所采用的培養(yǎng)基為大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA） ，每個(gè)培養(yǎng)皿含培養(yǎng)基 20ml，根據(jù)培養(yǎng)基特性制訂檢驗(yàn)方法，按制定的方法進(jìn)行試驗(yàn)，根據(jù)驗(yàn)證結(jié)果判斷是否符合驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)。3、驗(yàn)證組織組長：彭偉添組員：陳杰輝，黃玉妍五、菌種及培養(yǎng)基1、菌種金黃色

4、葡萄球菌【CMCC（B）26003】 、銅綠假單胞菌【CMCC（B）10104】 、枯草芽孢桿菌【CMCC（B）63501】 、生孢梭菌【CMCC（B）64941】 、白色念珠菌【CMCC（F）98001】 。2、培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基、硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基3、無菌檢驗(yàn)儀器及相關(guān)設(shè)備 無菌室、凈化工作臺、恒溫培養(yǎng)箱（3035） 、生化培養(yǎng)箱（2328） 、高壓蒸汽滅菌器、電子天平、電冰箱、電熱干燥箱、玻璃器皿。六、菌液制備接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng) 1824 小時(shí)；接種生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物至硫乙醇酸鹽流體

5、培養(yǎng)基中培養(yǎng)1824 小時(shí)；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中，培養(yǎng) 2448 小時(shí)；上述培養(yǎng)物用 0.9%無菌氯化鈉溶液制成每 1ml 含菌數(shù)小于 100cfu 的菌懸液。菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在 2 小時(shí)內(nèi)使用；若保存在 28，可在 24 小時(shí)內(nèi)使用。七、驗(yàn)證方法1、取配制好的沉降碟 32 個(gè)，同時(shí)滅菌后，取 16 個(gè)沉降碟，每 3 個(gè)分別接種小于100 cfu 的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌，2另一個(gè)不接種作為空白對照，置 3035培養(yǎng) 3 天，逐日觀察結(jié)果。2、把滅菌后的沉降碟 16 個(gè)放置在無菌檢查時(shí)的超凈潔凈臺上暴露 4 小時(shí)后，

6、每3 個(gè)分別接種小于 100 cfu 的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一個(gè)不接種作為空白對照，置 3035培養(yǎng) 3 天，逐日觀察結(jié)果。八、回收率計(jì)算供試品組各的菌回收率（%）=100%驗(yàn)證加菌數(shù)樣品本底菌數(shù)供試品組菌數(shù)-九、結(jié)果判斷1、暴露前試驗(yàn)組的菌回收率應(yīng)不低于 70%。暴露 4 小時(shí)后試驗(yàn)組的菌回收率應(yīng)不低于 70%。2、若暴露前試驗(yàn)組的菌回收率應(yīng)不低于 70%，說明加入的培養(yǎng)基能滿足微生物生長，若暴露后試驗(yàn)組的菌回收率應(yīng)不低于 70%，說明培養(yǎng)皿暴露 4 小時(shí)后，培養(yǎng)基仍能滿足微生物生長，3、若任一次試驗(yàn)中試驗(yàn)組的菌回收率低于 70%，應(yīng)采用增加培

7、養(yǎng)基，降低暴露時(shí)間，并重新進(jìn)行方法驗(yàn)證，使試驗(yàn)組菌回收率大于 70%。十、驗(yàn)證結(jié)果和記錄（附后）十一、驗(yàn)證報(bào)告（附后）十二、驗(yàn)證證書（附后）3沉降碟暴露時(shí)間驗(yàn)證報(bào)告沉降碟暴露時(shí)間驗(yàn)證報(bào)告 編號：20 年 月 日至 20 年 月 日，驗(yàn)證小組根據(jù)批準(zhǔn)的 “YZ-13580-1 號”驗(yàn)證方案，對沉降碟的暴露時(shí)間進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果試驗(yàn)組的菌回收率均符合規(guī)定。通過驗(yàn)證，證明沉降碟的暴露時(shí)間可以達(dá)到 4 小時(shí)。驗(yàn)證小組： 20 年 月 日4沉降碟暴露時(shí)間驗(yàn)證合格證書沉降碟暴露時(shí)間驗(yàn)證合格證書 編號： 經(jīng)審核， “xxx”驗(yàn)證方案合理，驗(yàn)證結(jié)果符合規(guī)定要求，特此發(fā)給驗(yàn)證合格證書，沉降碟的暴露時(shí)間可以達(dá)到 4

8、小時(shí)。 XX 藥業(yè)股份有限公司 驗(yàn)證委員會（蓋章）20 年 月 日5沉沉降降碟碟暴暴露露時(shí)時(shí)間間驗(yàn)驗(yàn)證證記記錄錄細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢品名稱沉降碟配制部門中心檢驗(yàn)室檢驗(yàn)依據(jù)中國藥典2010 年版附錄檢驗(yàn)日期：20 年 月 日報(bào)告日期20 年 月 日驗(yàn)證方法取 16 個(gè)沉降碟，每 3 個(gè)分別接種小于 100 cfu 的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一個(gè)不接種作為空白對照，置 3035培養(yǎng) 3 天。菌種名稱菌種代數(shù)驗(yàn)證加菌數(shù)（cfu）樣品本底菌數(shù)試驗(yàn)組（樣品+驗(yàn)證加菌數(shù)）回收率（%）金黃色葡萄球菌 1金黃色葡萄球菌 2金黃色葡萄球菌 3銅綠假單胞菌 1銅綠假

9、單胞菌 2銅綠假單胞菌 3枯草芽孢桿菌 1枯草芽孢桿菌 2枯草芽孢桿菌 3生孢梭菌 1生孢梭菌 2生孢梭菌 3白色念珠菌 1白色念珠菌 2白色念珠菌 3供試品組各的菌回收率（%）=100%驗(yàn)證加菌數(shù)樣品本底菌數(shù)供試品組菌數(shù)-6 檢驗(yàn)人：復(fù)核人：沉沉降降碟碟暴暴露露時(shí)時(shí)間間驗(yàn)驗(yàn)證證記記錄錄細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)檢品名稱沉降碟配制部門中心檢驗(yàn)室檢驗(yàn)依據(jù)中國藥典2010 年版附錄檢驗(yàn)日期：20 年 月 日報(bào)告日期20 年 月 日驗(yàn)證方法取 16 個(gè)沉降碟，暴露 4 小時(shí)后，每 3 個(gè)分別接種小于 100 cfu 的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一個(gè)不接種作為空白對照，置 3035培養(yǎng) 3天。菌種名稱菌種代數(shù)驗(yàn)證加菌數(shù)（cfu）樣品本底菌數(shù)試驗(yàn)組（樣品+驗(yàn)證加菌數(shù)）回收率（%）金黃色葡萄球菌 1金黃色葡萄球