(標(biāo)準(zhǔn)格式)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

1、遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書(shū)適用專業(yè)（農(nóng)學(xué)、園藝、中草藥等）1刖b遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)是為了配合遺傳學(xué)的教學(xué)而開(kāi)設(shè)的一門(mén)非獨(dú)立性設(shè)課的實(shí)驗(yàn)課程。要求學(xué)生 根據(jù)所掌握的理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)技能，獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)操作，并撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。本課程由驗(yàn)證性、操作性和綜合性等多層次實(shí)驗(yàn)內(nèi)容構(gòu)成，主要從個(gè)體、細(xì)胞、分子三 個(gè)水平揭示遺傳學(xué)的基木現(xiàn)象與規(guī)律。通過(guò)木課程的學(xué)習(xí)，使學(xué)生加深對(duì)遺傳學(xué)基礎(chǔ)理論和 原理、遺傳學(xué)試驗(yàn)技術(shù)和分析方法的理解和掌握、驗(yàn)證遺傳學(xué)理論，并通過(guò)綜合性、設(shè)計(jì)性 實(shí)驗(yàn)研究，培養(yǎng)學(xué)生的基本實(shí)驗(yàn)思想、實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)技能和綜合應(yīng)用能力和初步獨(dú)立進(jìn)行 科學(xué)研究的能力。本實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)包括各類(lèi)實(shí)驗(yàn)9個(gè)，共28學(xué)時(shí)，必做14學(xué)時(shí)，選做14

2、學(xué)吋，可以根據(jù)學(xué)時(shí) 數(shù)和具體情況，酌情選擇。此外述有附錄四個(gè)，供教師準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)吋參考。至于一些分子水平 上的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，限于時(shí)間而未收集，有待以后補(bǔ)充。實(shí)驗(yàn)要求一、實(shí)驗(yàn)前預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書(shū)并復(fù)習(xí)有關(guān)內(nèi)容；準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙、鉛筆、橡皮、尺子、鋼筆（或 圓珠筆）等；二、按實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)及教師的要求進(jìn)行觀察、記載，寫(xiě)好實(shí)驗(yàn)報(bào)告。字跡要整潔、清楚。繪圖一 律用鉛筆，解答用蘭色或黑色圓珠筆書(shū)寫(xiě)。三、愛(ài)護(hù)實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)備，注意節(jié)約藥品和齊種實(shí)驗(yàn)材料；按操作規(guī)程使用儀器，嚴(yán)禁私自 拆卸儀器及調(diào)整儀器附件，如有損壞，照價(jià)賠償。四、注意安全，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，如遇特殊情況應(yīng)及吋報(bào)告指導(dǎo)教師。五、保持實(shí)驗(yàn)室安靜，不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)喧

3、嘩。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)用品放冋原來(lái)位置,打掃衛(wèi) 生。實(shí)驗(yàn)一：植物細(xì)胞有絲分裂的制片與觀察4實(shí)驗(yàn)二：植物細(xì)胞減數(shù)分裂的制片及觀察6實(shí)驗(yàn)三：植物染色體組型分析8實(shí)驗(yàn)四：一對(duì)相對(duì)性狀的遺傳分析11實(shí)驗(yàn)五：兩對(duì)和對(duì)性狀的遺傳分析14實(shí)驗(yàn)六：植物多倍休的誘發(fā)及細(xì)胞學(xué)鑒定15實(shí)驗(yàn)七：數(shù)量性狀的遺傳分析17實(shí)驗(yàn)八：蛋口質(zhì)遺傳標(biāo)記分析21實(shí)驗(yàn)九：人類(lèi)性狀的遺傳分析2310、實(shí)驗(yàn)報(bào)告基木內(nèi)容要求2511、實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式26實(shí)驗(yàn)一：植物細(xì)胞有絲分裂的制片與觀察實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：3學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型：綜合實(shí)驗(yàn)要求：必做一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆罩参锛?xì)胞有絲分裂的制片方法，并通過(guò)植物細(xì)胞有絲分裂制片的觀察，熟悉有絲分 裂的全過(guò)程，以及各個(gè)時(shí)

4、期染色體的形態(tài)特征。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：植物細(xì)胞冇絲分裂的制片和觀察。三、實(shí)驗(yàn)原理、方法和手段：有絲分裂是工物體細(xì)胞增殖的主要方式。在有絲分裂過(guò)程中，細(xì)胞核內(nèi)染色體能準(zhǔn)確地復(fù)制，并能有 規(guī)律地均勻分配到每個(gè)子細(xì)胞中去，使子細(xì)胞遺傳組成與母細(xì)胞完全一樣，從而可以準(zhǔn)確地推斷牛物性狀 的遺傳與染色體的準(zhǔn)確復(fù)制和均等分配冇關(guān)，支配生物性狀的遺傳物質(zhì)主要存在于細(xì)胞核內(nèi)的染色體上。細(xì)胞有絲分裂是一個(gè)連續(xù)過(guò)程，可分為前期、中期、后期和末期。有絲分裂在整個(gè)細(xì)胞周期中約占10%的時(shí)間，而其余人部分時(shí)間是處于細(xì)胞連續(xù)兩次分裂之間的間期。有絲分裂各時(shí)期染色體變化的特征：前期：核內(nèi)染色質(zhì)逐漸濃縮為細(xì)長(zhǎng)而卷曲的染色體，每一染

5、色體含有兩個(gè)染色單體，它們具有一個(gè)共同的著絲點(diǎn)；核仁和核膜逐漸模糊不明顯。中期：核仁、核膜逐漸消失，各染色體排列在赤道板上，紡錘絲與染色體的著絲點(diǎn)相連，形成紡錘體。染色體分散，鑒定形態(tài)、數(shù)ho后期：各染色體著絲點(diǎn)分裂為二，其每條染色單體也相應(yīng)地分開(kāi)，并各口隨著紡錘絲的收縮聞移向兩 極,每極有一組染色體,數(shù)目和原來(lái)的相同。末期：分開(kāi)在兩極的染色體各自組成新的細(xì)胞核，在細(xì)胞質(zhì)中央赤道板處形成新的細(xì)胞壁，使細(xì)胞分 裂為二，形成二個(gè)子細(xì)胞。這時(shí)細(xì)胞進(jìn)入分裂間期。間期：在光洋顯微鏡下，只看到均勻一致的細(xì)胞核及許多的絲狀染色質(zhì)。實(shí)質(zhì)上間期的核是處于高度活躍 的牛理生化的代謝階段，為細(xì)胞分裂準(zhǔn)備條件。高等植

6、物有絲分裂主要發(fā)牛在根尖、莖牛長(zhǎng)點(diǎn)、幼葉等部位的分牛組織。根尖取材容易，操作和鑒定 方便，故一般釆用根尖作為觀察冇絲分裂的材料。四、實(shí)驗(yàn)組織運(yùn)行要求：主要通過(guò)教師講解或多媒體演示，學(xué)生自己實(shí)際操作進(jìn)行。五、實(shí)驗(yàn)條件1、實(shí)驗(yàn)材料：蠶豆（2n=12）、洋蔥（2n=16）根尖細(xì)胞永久制片蠶豆（2n=12） 洋蔥（2n=16）2、儀器用具:冰箱、生物顯微鏡、躡子、培養(yǎng)皿、酒精燈、解剖針、載玻片、蓋玻片等。3、試劑：卡諾氏液、酒精、鹽酸、酷酸洋紅。六、實(shí)驗(yàn)步驟1、取材:蠶豆根尖先將種子浸泡1天，待吸水膨脹后移到鋪有兒層吸水紙的培養(yǎng)1ul內(nèi)，上面蓋兩層濕紗布加少許水， 置于18-20°c （黑暗

7、）培養(yǎng)40-50小時(shí)。待根長(zhǎng)至l-2cm時(shí)，于上午10時(shí)左右剪取。2、預(yù)處理：tj的，獲得中期分裂相較多的細(xì)胞，使染色體縮短，分散，便于壓片觀察。預(yù)處理機(jī)理：阻止或破壞紡紡錘體微竹的形成，使冇絲分裂過(guò)程被抑制在分裂中期階段，以便累積較多的 處于分裂屮期的分裂相；導(dǎo)致染色體高度濃縮、變短，利于染色體的分散。方法1：冷凍處理根尖放入盛蒸憎水的指形管中，置于冰水共存的冰瓶中，然后把冰瓶放到0-3°c的冰箱中處理24小 吋。染色體數(shù)較多的實(shí)驗(yàn)材料可適延長(zhǎng)吋間（2040小時(shí)），但需注意勿使材料結(jié)冰。方法2:藥劑處理a. 0.01-0. 2%秋水仙素溶液處理2-4hb 對(duì)二氯苯飽和水溶液處理3-

8、4hc. 100ml對(duì)二氯苯飽和水溶液加1-2滴a -澳棊處理34hd. 0. 002m8-疑基唾咻處理3-4h藥劑處理時(shí)溫度不能過(guò)高，以10-15°c為宜。3、固定沖洗干凈處理的材料用卡諾氏液（冰乙酸：無(wú)水乙醇=1： 3或冰乙酸：氯仿：無(wú)水乙醇二1； 3： 6）固 定24h可立即使用。不立即使用，直于95%酒精30min厲置入80%酒精中30min后于70%酒精，4°c下保存, 若保存吋間較長(zhǎng)需要重新固尬后再用。以上三步實(shí)驗(yàn)員已做，我們從笫4步開(kāi)始做。4、解離1）從培養(yǎng)皿里取出4-5條根置于表面111l屮，川蒸憎水沖洗3-4次（廢水入塑料杯）。2）根洗凈后，加入數(shù)滴in鹽

9、酸于表而皿屮，以浸泡住根為準(zhǔn)。3）用躡子夾住表而皿邊緣在灑精燈上間歇式加熱2-4分鐘（發(fā)現(xiàn)鹽酸溶液有氣泡冒出時(shí)，立即遠(yuǎn)離火焰）, 用銀子尖夾根是否己經(jīng)變軟，若變軟，則說(shuō)明己解離好，否則繼續(xù)解離。（乳色，經(jīng)解離,變化為透明 狀）。5、染色1）將解離好的根用蒸憎水沖洗干凈后，加兒滴醋酸洋紅于表面皿內(nèi)，在燈上加熱，注意來(lái)冋快速往 返或加熱的同時(shí)，不要加熱到沸騰狀態(tài)，若沸騰馬上停止加熱。（增加根染色程度）2）取一根已染過(guò)色的根放在載玻片上，用銀子夾取根尖1.5儷長(zhǎng)度處，加一滴醋酸洋紅染料，在火 焰上來(lái)回烤幾下。3）再加一滴1%的醋酸洋紅溶液，蓋上蓋玻片用解剖針的反頭垂直輕敲蓋玻片，使根尖壓成一薄層。（

10、多余的染料用紙吸干）。壓片時(shí)注意不要再移蓋片，否則會(huì)造成更多細(xì)胞生重疊。反復(fù)加醋酸洋紅染料 -加熱-敲片，最厲形成薄霧狀。6、鏡檢：先用低倍鏡觀察，找到明顯的分裂相后，再用高倍鏡觀察，并繪圖。（注意對(duì)各時(shí)期的染色體行 為的觀察）。七、實(shí)驗(yàn)報(bào)告1、制出兒張好片子，當(dāng)堂驗(yàn)收，觀察到明顯的中期等分裂相。進(jìn)行繪圖，加以文字說(shuō)明。2、對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)的各種問(wèn)題進(jìn)行分析和討論。3、繪制有絲分裂各時(shí)期染色體的分裂相，實(shí)驗(yàn)二：植物細(xì)胞減數(shù)分裂的制片及觀察實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：3學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型：綜合實(shí)驗(yàn)要求：必做一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆罩参锬岱勰讣?xì)胞減數(shù)分裂的制片方法，并通過(guò)對(duì)植物尼粉母細(xì)胞減數(shù)分裂制片的觀 察，了解小也子形成過(guò)程

11、及減數(shù)分裂中染色體的變化情況，能夠區(qū)分減數(shù)分裂各時(shí)期，掌握各期特征。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：植物細(xì)胞減數(shù)分裂的制片和觀察。三、實(shí)驗(yàn)原理、方法和手段：減數(shù)分裂：是生物在性細(xì)胞成熟時(shí)配子形成過(guò)程中發(fā)生的一種特殊的冇絲分裂它包括連續(xù)兩次的細(xì) 胞分裂階段:第一次分裂為染色體數(shù)m的減數(shù)分裂;第二次分裂為染色體數(shù)h的等數(shù)分裂.兩次分裂可根據(jù) 染色體變化的特點(diǎn)分為：詢、中、后、末期，由于第一次分裂的前期較長(zhǎng)，染色體變化比較復(fù)雜，故其前 期乂可分為五個(gè)時(shí)期。在減數(shù)分裂的整個(gè)過(guò)程屮，同源染色體z問(wèn)發(fā)生聯(lián)會(huì)、交換、分離，非同源染色體 之間進(jìn)行自由組合。最終分裂為染色體數(shù)tj減半的的四個(gè)子細(xì)胞。從而發(fā)育為雌性或雄性配子（n）

12、,雌雄 配子通過(guò)受精又結(jié)合成為合子，發(fā)育為新的個(gè)休，這樣又恢復(fù)了原有的染色體數(shù)目（2n）。由于不同雌雄 配子染色體的重新組合，產(chǎn)牛了大量的遺傳變異，有利于牛物的適應(yīng)和進(jìn)化。減數(shù)分裂各時(shí)期染色體變化的特征簡(jiǎn)述如下：第一次分裂：前期i：可分為以下五個(gè)時(shí)期：1）細(xì)線期：核內(nèi)染色體呈細(xì)長(zhǎng)線狀，互相纏繞，難以辨別成雙的染色體。2）偶線期：同源染色體相互縱向靠攏配對(duì)，稱為聯(lián)會(huì)。這樣聯(lián)會(huì)了的一對(duì)同源染色體，稱為二價(jià)體。偶 線期所表現(xiàn)的這一特征的時(shí)間很短，一般難以觀察到。3）粗線期：配對(duì)后的染色體逐漸縮短變粗，含有兩條姐妹染色單體，這樣一個(gè)二價(jià)體包含了四條染色單 體，故乂稱為四合體。在此期間各同源染色體的非姐

13、妹染色單體間可能發(fā)生片段交換。4）雙線期：各對(duì)同源染色休開(kāi)始分開(kāi)，山于在粗線期非姐妹染色單體之間發(fā)生了交換，因而同源染色體 在一定區(qū)段間出現(xiàn)交叉，此期町清楚地觀察到交叉現(xiàn)彖。5）終變期：染色體更為濃縮粗短，交叉結(jié)向二價(jià)體的兩端移動(dòng)，核仁和核膜開(kāi)始消失。此時(shí)各二價(jià)體分 散在核內(nèi)，適于計(jì)數(shù)染色體的數(shù)1=1。中期i：核仁和核膜消失，所冇二價(jià)體排列在赤道板兩側(cè)，細(xì)胞質(zhì)里出現(xiàn)紡錘體，每個(gè)二價(jià)體的兩條染色 單體的著絲點(diǎn)分別趨向紡錘體的兩極，此時(shí)最適染色體計(jì)數(shù)、觀察形態(tài)特征。后期i：二價(jià)體中的一對(duì)同源染色體開(kāi)始分開(kāi)。在紡錘體的作用下分別向兩極移動(dòng)，完成染色體數(shù)目的減 半過(guò)程。此期，同源染色體的兩個(gè)成員必然分

14、離，非同源染色體間的各個(gè)成員以同等機(jī)會(huì)隨機(jī)結(jié)合，分別 移向兩極。注意此時(shí)染色體的著絲點(diǎn)尚未分裂，每條染色體含有兩條染色單體。末期i：染色體移到兩極，松開(kāi)變細(xì)，核仁核膜重新出現(xiàn)，形成兩個(gè)子核。細(xì)胞質(zhì)分裂，在赤道板處形成 細(xì)胞板，成為二價(jià)體。第二次分裂：前期ii：染色體又開(kāi)始明顯縮短，而其包含的兩條染色單體分得很開(kāi)，只是著絲點(diǎn)仍然沒(méi)冇分裂。中期ii：染色體整齊地排列在分裂細(xì)胞的赤道板上，出現(xiàn)紡錘體。后期ii：染色體的著絲點(diǎn)分裂為二，兩條姐妹染色單體在紡錘體的牽引下分別移向兩極。末期ii：染色體分別到兩極后，又重新出現(xiàn)核仁和核膜，同時(shí)細(xì)胞質(zhì)分裂為二，從而使一個(gè)母細(xì)胞分裂為 四個(gè)子細(xì)胞，稱為四分體（四

15、分抱子），每個(gè)子細(xì)胞內(nèi)只含有原來(lái)母細(xì)胞的半數(shù)的染色體（n）0減數(shù)分裂中染色體的行為變化與牛物的遺傳變異密切相關(guān)。染色體是遺傳物質(zhì)的載體，因此染色體在減數(shù)分裂中的行為對(duì)遺傳物質(zhì)的分配和重組產(chǎn)生了重大影響。高等植物的性母細(xì)胞（2n）在形成雌雄配子（n）過(guò)程中必須通過(guò)減數(shù)分裂。由于植物花藥取材容易, 操作和鑒定比較方便，故一般都采用花粉母細(xì)胞作為制片材料，在光學(xué)顯微鏡卜觀察其減數(shù)分裂過(guò)程中染 色體的行為變化。在植物花粉形成過(guò)程中，花藥內(nèi)的一些細(xì)胞分化成小孑包子母細(xì)胞（2n）,每個(gè)小砲子母細(xì)胞進(jìn)行二次連續(xù)的細(xì)胞分裂（第一次減數(shù)分裂和第二次減數(shù)分裂）。每一小抱子母細(xì)胞產(chǎn)生四個(gè)子細(xì)胞，每個(gè)子細(xì)胞就是一個(gè)小

16、孑包子。小也子內(nèi)的染色體數(shù)口是體細(xì)胞的一半（圖11）。偶線期粗線期雙線北細(xì)線期中期1（極面觀）夕 中期1（倒面觀）后期i末期i末期i前期ii中期【i后期ii末期ii四分抱子形成花粉粒四、實(shí)驗(yàn)組織運(yùn)行要求：主要通過(guò)教師講解或多媒體演示，學(xué)生白匕實(shí)際操作進(jìn)行。五、實(shí)驗(yàn)條件1、實(shí)驗(yàn)材料：玉米（2n=20）、洋蔥（2n=16）花粉母細(xì)胞永久制片玉米雄花序（2n=2x=20）2、儀器用具：生物顯微鏡、銀子、解剖針、載玻片、蓋玻片、大培養(yǎng)jiil、吸水紙等。3、試劑：卡諾氏液、酒精、鹽酸、醋酸洋紅。六、實(shí)驗(yàn)步驟1. 采集玉米雄花序（雄穗抽岀3cm時(shí)取材），將采集的雄穗侵入卡諾氏液中固定12-24小時(shí)后，用

17、95% 的灑精洗凈乙酸氣味后，保存在70%的酒精在備用。2. 制片。取一枚花藥放在一張載玻片上，并加一滴醋酸洋紅溶液（1%）,進(jìn)行染色。在此過(guò)程中，可 用解剖針將花藥夾碎，去掉可見(jiàn)殘?jiān)瑪?shù)分鐘（25分鐘）后蓋上蓋玻片，用解剖針的反頭輕敲蓋玻片， 使材料成為均勻薄層，之后可烤兒下片子（增加染色程度；使花粉母細(xì)胞膨人）。3. 鏡檢：先用低倍鏡觀察，找到明顯的分裂相后，再用高倍鏡觀察。（注意對(duì)各時(shí)期的染色體行為的 觀察）。七、實(shí)驗(yàn)報(bào)告1、提交兒張好片子，觀察到各種分裂相。2、寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告，對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)的各種問(wèn)題進(jìn)行討論分析。3、繪制減數(shù)分裂各時(shí)期染色體體的分裂相。實(shí)驗(yàn)三：植物染色體組型分析實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)

18、：4學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型：綜合實(shí)驗(yàn)要求：必做一、實(shí)9僉目的：學(xué)習(xí)顯微攝影技術(shù)，觀察分析細(xì)胞冇絲分裂中期染色體的長(zhǎng)度、臂比、隨體等形態(tài)特征, 掌握染色體纟r型分析的一般步驟和方法，并能夠繪制出染色體的模式圖。為進(jìn)行細(xì)胞遺傳子和遺傳育種洋 的研究奠定基礎(chǔ)。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：染色體組型分析。三、實(shí)驗(yàn)原理、方法和手段：各種生物的染色體數(shù)口是恒定的。大多數(shù)高等動(dòng)植物是二倍體（diploid）o也就是說(shuō)，每一個(gè)體細(xì)胞 含有兩組同樣的染色體，用2n表示。其中與性別直接有關(guān)的染色體，即性染色體，可以不成對(duì)。每一個(gè)配子帶有一組染色體，叫做單倍體（haploid）,用n表示。兩性配子結(jié)介后，具有兩組染色體，成為二 倍體的體細(xì)

19、胞。如蠶豆的體細(xì)胞2n=12,它的配子n=6,玉米的體細(xì)胞2n=20,配子n=10o水稻2n=24, n=12o有些高等植物述是多倍體。染色體在復(fù)制以后，縱向并列的兩個(gè)染色單體（chromatids）,往往通過(guò)著絲粒（centromere）聯(lián)在一 起。著絲粒在染色體上的位置是固定的。由于著絲粒位置的不同，可以把染色體分成相等或不等的兩臂 （arms）,造成中間著絲粒，亞屮間著絲粒、亞端部著絲粒和端部著絲粒等形態(tài)不同的染色體。此外，有 的染色體還含有隨體或次級(jí)縊痕。所有這些染色體的特異性構(gòu)成一個(gè)物種的染色體組型。染色體組型分析 是細(xì)胞遺傳學(xué)、現(xiàn)代分類(lèi)學(xué)和進(jìn)化理論的重要研究手段，也是一種簡(jiǎn)便的方法

20、。1、染色體組型：各種牛物染色體的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和數(shù)目都是相対穩(wěn)定的。每一細(xì)胞內(nèi)特定的染色體組成叫 染色體組型。2、染色體組型分析（核型分析）：就是研究一個(gè)物種細(xì)胞核內(nèi)染色體的數(shù)1=1及各種染色體的形態(tài)特征，如 對(duì)染色體的長(zhǎng)度、著絲點(diǎn)位置、臂比、隨體有無(wú)等觀測(cè)，從而描述和闡明該生物的染色體纟r成，為細(xì)胞遺 傳學(xué)、分類(lèi)學(xué)和進(jìn)化遺傳學(xué)等研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。3、染色體組型分析大都采用植物根尖等分牛組織中的細(xì)胞有絲分裂中期，因?yàn)榇似谌旧w具有較典型的 特征，且易于計(jì)數(shù)；在進(jìn)行核型分析時(shí)，染色體制片要求分裂相為當(dāng)構(gòu)體分散，互不重疊，能清楚顯示著 絲點(diǎn)位置。然后通過(guò)顯微攝影，測(cè)量放大照片上的每個(gè)染色體的氏度和其

21、它形態(tài)特征，依次配對(duì)排列，編 號(hào)，并對(duì)各對(duì)染色體的形態(tài)特征作出描述。四、實(shí)驗(yàn)組織運(yùn)行要求：通過(guò)教師講解或多媒體演示，在教師的指導(dǎo)下由學(xué)生自己動(dòng)手完成。五、實(shí)驗(yàn)條件1、實(shí)驗(yàn)材料：蠶豆、玉米、黑麥或水稻的根尖（或木本植物的莖尖）冇絲分裂中期臨時(shí)或永久制片。2、儀器用具：顯微鏡，攝影顯微鏡，測(cè)微尺，毫米尺，鍛子，剪刀，繪圖紙。六、實(shí)驗(yàn)步驟1、測(cè)量：依次測(cè)量染色休長(zhǎng)度，長(zhǎng)臂和短臂的長(zhǎng)度（分別量到著絲點(diǎn)中部），計(jì)算臂比時(shí)，長(zhǎng)臂長(zhǎng)度為分 子，短秤長(zhǎng)度為分母，并注意各染色體隨體的有無(wú)，隨體計(jì)入聘長(zhǎng)與否須注明（隨體和次縊痕長(zhǎng)度一般不 計(jì)算在染色體長(zhǎng)度內(nèi)）。染色體長(zhǎng)度表示方法冇兩種： 絕對(duì)氏度：即用測(cè)微尺直接在

22、顯微鏡下測(cè)量得到的實(shí)際長(zhǎng)度（wn）,或經(jīng)顯微攝影后在放大照片上的換 算長(zhǎng)度。 相對(duì)長(zhǎng)度：指單個(gè)染色體的長(zhǎng)度占單套染色體組（性染色休除外）總長(zhǎng)度的17分?jǐn)?shù)。染色體相對(duì)長(zhǎng)度= 單個(gè)染色體長(zhǎng)度禪一套染色體組全長(zhǎng)x 100%o2、配對(duì)將放人照片上剪下的同源染色體進(jìn)行配對(duì)，配對(duì)的根據(jù)是隨體的有無(wú)及人小、臂比是否相等。3、排列：將配對(duì)好的同源染色體按下列原則進(jìn)行排列，并正式編上序號(hào)。1）染色體長(zhǎng)的在前，具隨體染色體、性染色體排在最后2）若有二對(duì)以上具隨體染色體，則大隨體染色體在前，小隨體染色體在后3）異源的染色體要分別排列（如小麥的a、b、d染色體組）4、剪貼：把上述已經(jīng)排列的同源染色體按先后順序粘貼在繪

23、圖紙上。粘貼時(shí)，應(yīng)使著絲點(diǎn)處于同一水平 上，并一律短臂在上，長(zhǎng)臂在下。所得組型圖。5、分類(lèi)：臂比是反應(yīng)著絲點(diǎn)在染色體上的位置。根據(jù)此叮確定染色體所屬的形態(tài)類(lèi)型臂比（長(zhǎng)臂/短臂）形態(tài)類(lèi)型染色體形態(tài)類(lèi)型1 1.7m中著絲粒染色體1.71 3.0sm近中著絲粒染色體3.01 7.0st近端著絲粒染色體>7.01t端著絲粒染色體sat隨體染色體6、填表：測(cè)得數(shù)據(jù)經(jīng)整理后，按染色體的總長(zhǎng)度由大到小順序編號(hào)。若有兩根等長(zhǎng)染色體，習(xí)慣 上按短臂較氏的放在前面。將測(cè)量結(jié)果填入表內(nèi)。染色體序號(hào)絕對(duì)長(zhǎng)度（um）相對(duì)長(zhǎng)度長(zhǎng)臂長(zhǎng)度（um）短臂長(zhǎng)度（um）臂比（長(zhǎng)/短）染色體類(lèi)型123456789107、綜合描述

24、說(shuō)明供試材料的染色體總數(shù)，染色體組型的公式，如蠶豆的染色體組型公式為2n=2m（sat）+10t；染色體的 大小，染色體組型的分類(lèi)。1）染色體人小描述：規(guī)定lum以下為極小染色體；1 um為小染色體；4一12um為屮染色體；長(zhǎng)12um 以上的為人染色體。2）染色體組型的分類(lèi)：即核型的分類(lèi)、同一核型中染色體相對(duì)大小不一，一般可根據(jù)核型中染色體體臂 比及其比值大小，以及它們所具有的數(shù)目比例而劃分，rhm染色體組成的，稱為對(duì)稱型的；大多數(shù)rhm 染色體組成的叫基本對(duì)稱型;大多數(shù)由sm和st組成的稱為基本不對(duì)稱組型；由st組成的稱為不對(duì)稱組型。 核型類(lèi)型1a為最對(duì)稱型4c為最不對(duì)稱型最長(zhǎng)chr/最短c

25、hr臂比2： 1的染色體的白分比0.000.01-0.500.50-0.991.00<2:11a2a3a4a2:1 4:11b2b3b4b>4:11c2c3c4c8、翻拍和繪圖：將剪貼排列好的染色體組型圖進(jìn)行翻拍，用坐標(biāo)紙或繪圖紙繪成染色體模式圖。（略）七、思考題：對(duì)生物進(jìn)行染色體組型分析有何意義？八、實(shí)驗(yàn)報(bào)告對(duì)一 種生物的染色體進(jìn)行組型分析；1、填寫(xiě)染色體測(cè)量數(shù)據(jù)表2、繪制染色體組型圖：一般是將與模式照片同一細(xì)胞的染色體逐個(gè)剪下，參照染色體長(zhǎng)度和臂比值，進(jìn) 行同源染色體配對(duì)，然后按表格中的染色體序號(hào)排列該細(xì)胞的核型圖。九、其它說(shuō)明植物染色體組型分析方法分為兩大類(lèi)，一類(lèi)是分析體細(xì)胞

26、冇絲分裂時(shí)期的染色體數(shù)目和形態(tài)；另一類(lèi)是分析減數(shù)分裂時(shí)期的染色體數(shù)日和形態(tài)，均能得到染色體組型。實(shí)驗(yàn)四：一對(duì)相對(duì)性狀的遺傳分析實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型：驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)要求：必做一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^(guò)一對(duì)相對(duì)性狀的遺傳雜交實(shí)驗(yàn)，分析朵種后代的性狀表現(xiàn)，驗(yàn)證分離規(guī)律的方法， 掌握對(duì)植物材料雜種后代分離情況進(jìn)行分析的基本方法。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：一-對(duì)相對(duì)性狀的遺傳分析三、實(shí)驗(yàn)原理、方法和手段：1、分離規(guī)律：指具有完全顯隱性作用的一單位性狀，在其遺傳過(guò)程屮，如果有兩個(gè)基因型純介的相對(duì)性 狀的親木進(jìn)行雜交，其f1代全部表現(xiàn)為一個(gè)親本的性狀，而該一對(duì)基因的雜合體自交得到f2,會(huì)同時(shí)出 現(xiàn)雙親表現(xiàn)型的個(gè)體，其比例顯性：隱

27、性二3： 1。p aa x aaifl aa1a： la (配子)if2 1aa 2aa laa表現(xiàn)型 3a： la分離規(guī)律的實(shí)質(zhì)：雜合的等位基因分離形成等比例配子，不同的配子口市組合，f2代形成3： 1的顯性:隱性表型比例。玉米籽粒有胚、胚乳和果皮三部分。由于形成種子前雙重受精的結(jié)果，胚為二倍體(2n),胚乳為淀粉 層和糊粉層均為三倍體(3n),它們性狀發(fā)育的方向是由父母本的遺傳基礎(chǔ)共同決定的，當(dāng)代表現(xiàn)親本顯性 性狀。因此如父本花粉中含有顯性基因時(shí)，它所決定的性狀就能在當(dāng)代母本籽粒上表現(xiàn)出來(lái)，這種現(xiàn)象 叫“花粉直感”。果皮是rh子房壁及珠被發(fā)育而成，屬母本體細(xì)胞組織。它的性狀發(fā)育是rh母本的

28、遺傳型決定，與當(dāng)代授粉作用無(wú)關(guān)，不表現(xiàn)“花粉直感”。玉米胚乳中淀粉層的性狀有甜(su)與非甜(su),糯質(zhì)(wx)與非 糯質(zhì)(wx),凹陷(sh)與飽滿(sh)等，主要受一對(duì)基因的控制；純合 糯質(zhì)玉米(wxwx)產(chǎn)生的種子和花粉內(nèi)含有全部支鏈淀粉，與碘作 用呈紅棕色。純合非糯玉米(wxwx)產(chǎn)牛的種子和花粉則含有部分 直鏈淀粉，與碘作用呈蘭黑色，根據(jù)此顏色反應(yīng)可驗(yàn)證配子形成玉米非甜與甜分離3:1時(shí)發(fā)生的分離。這個(gè)分離結(jié)果可在wxwxxwxwx雜種fl植株在形成性細(xì) 胞時(shí)得到反映。此時(shí)，相對(duì)基因wx、wx發(fā)生分離，產(chǎn)生兩種類(lèi)型的配子 wx、wx,其數(shù)目相等，則蘭黑色和紅棕色的花粉粒比例為1 :

29、1。當(dāng)具有 隱性甜胚乳(su, su)性狀的個(gè)體授以顯性非甜(su, su)胚個(gè)體的花粉時(shí)，tl 于花粉直感作用，當(dāng)代就能得到非甜種子(su, su)o由它長(zhǎng)成的f1植株在 形成性細(xì)胞時(shí)，相對(duì)某因su、su發(fā)生分離，產(chǎn)生兩種類(lèi)型的配子su、su, 其數(shù)目相等。fl植株與隱性親本(su, su)測(cè)交得到的甜與非甜為1 : 1的分 離比例；口交則產(chǎn)生甜與非甜為3 ： 1的比例。糊粉層的顏色有色(c)對(duì)無(wú)色 (c)是顯性，止常胚乳(sh)對(duì)凹陷胚乳(sh)是顯性，均由一對(duì)基因控制，測(cè)交 得到1 : 1的分離比例；自交f2為3 ： 1的分離比例。2、符介度的測(cè)定方法卡方（屮）測(cè)驗(yàn)是使研究工作者能用來(lái)確

30、定實(shí)驗(yàn)所得的一組數(shù)值與一定的理論期待值之間的符合程度 的統(tǒng)計(jì)方法?？ǚ綔y(cè)驗(yàn)的公式為：式中：0是實(shí)測(cè)值；e是理論值，是總和的符號(hào)，是許多上述的比值的總和。從以上公式表明，所謂*值即是平均偏差的總和。從公式小可看出這樣的關(guān)系：（1）實(shí)際值偏離理論 值越人，產(chǎn)值也愈大，產(chǎn)值（誤差概率值）就越小，說(shuō)明由于偶然誤差造成的既定差異可能性越小。（2） 實(shí)驗(yàn)值偏離理論值越小，w也越小，p值則人，說(shuō)明偶然課差造成既定差異的可能性就人。在統(tǒng)計(jì)學(xué)中， 產(chǎn)值常以5% （0. 05）為標(biāo)準(zhǔn),p> 0.05說(shuō)明“差異不顯著”,p<0. 05說(shuō)明“差異顯著”,如果p<0. 01 說(shuō)明“差異極顯著”。有了

31、x，值和口市度（用df表示，df=k-l, k為類(lèi)型數(shù)），就可以通過(guò)下表查出p 值，確定實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否與理論預(yù)期值相符合。四、實(shí)驗(yàn)組織運(yùn)行要求：主要通過(guò)教師講解或多媒體演示，學(xué)生自己實(shí)際操作進(jìn)行。五、實(shí)驗(yàn)條件1、實(shí)驗(yàn)材料：玉米雄穗：糯質(zhì)（wx）與非糯質(zhì)（wx）f1植株的花粉；各種分離的玉米果穗標(biāo)本玉米不同雜交組合的f1自交果穗2、儀器用具：顯微鏡，銀子、解剖針、載玻片、蓋玻片、大培養(yǎng)川l、吸水紙等3、試劑：1%碘、碘化碘溶液六、實(shí)驗(yàn)步驟1、觀察玉米花粉拉：從糯（wx）與非糯（wx）f1植株的雄穗上取花藥一枚放在載玻片上，用銀子（或解剖針） 將花粉粒壓出，散開(kāi)，加1滴1%碘一碘化鉀液染色，蓋上蓋玻

32、片。在低倍鏡下觀察花粉粒的顏色反應(yīng)， 并記錄10個(gè)觀察數(shù)，計(jì)算起平均值并將統(tǒng)計(jì)數(shù)字填入一對(duì)性狀的的遺傳分析表，并進(jìn)行適合度測(cè)定，檢 查其是否符合一對(duì)某因的分離比例：2、觀察一對(duì)基因雜種，如：susu： cc等自交與測(cè)交果穗標(biāo)本并計(jì)數(shù)，將統(tǒng)計(jì)數(shù)字填入一對(duì)性狀的的遺傳 分析農(nóng)，并進(jìn)行適合度測(cè)定，檢查其是否符合一對(duì)基因的分離比例：七、實(shí)驗(yàn)報(bào)告將觀察結(jié)果填表，然后進(jìn)行x?測(cè)驗(yàn)驗(yàn)證。-對(duì)性狀的的遺傳分析表表現(xiàn)型花粉粒（fl）f2果穗果穗號(hào)顯性（非糯）隱性（糯）顯性（冇色或非甜）隱性（無(wú)色或甜）觀察數(shù)（0）預(yù)期數(shù)（e）偏差(d=o-e )差方 d2= (o-e)2x2=e=d2/edfp實(shí)驗(yàn)五：兩對(duì)相對(duì)性

33、狀的遺傳分析實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型：驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)要求：選做一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^(guò)兩對(duì)相対性狀的遺傳雜交實(shí)驗(yàn)，分析雜種后代的性狀表現(xiàn)，驗(yàn)證獨(dú)立分配規(guī)律。 并了解某因互作的現(xiàn)象。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：通過(guò)兩對(duì)相對(duì)性狀的遺傳雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果，分析雜種后代的性狀表現(xiàn)。三、實(shí)驗(yàn)原理、方法和手段：獨(dú)立分配規(guī)律：具有完全顯隱性作用的兩個(gè)獨(dú)立遺傳的單位性狀rtr兩對(duì)基因控制，在其遺傳過(guò)程中, 如果冇兩個(gè)基因型純合的相對(duì)性狀的親本進(jìn)行雜交，其f1代全部表現(xiàn)為一種表現(xiàn)型，而該兩對(duì)基因的雜 合體自交得到f2代，同時(shí)表現(xiàn)2種雙親類(lèi)型及2種重組類(lèi)型比例為9： 3： 3： k獨(dú)立分配規(guī)律的實(shí)質(zhì)：在減數(shù)分裂過(guò)程中,位于非同源染色體上的兩對(duì)等

34、位基因在形成配子時(shí)，每對(duì) 等位基因既隨同源染色體的分離而分離，又隨非同源染色體的重組而口山組合，形成四種等比例的配子。 因而兩對(duì)基因的雜合體在完全顯隱性的條件下，其口交子代的表現(xiàn)型分離比例為9： 3： 3； 1,測(cè)交子代的 表現(xiàn)型分離比例為1： 1： 1： 10基因互作用：不同某因間相互作用的結(jié)果。抑制作用：cc控制有色（c）、c控制無(wú)色、i為抑制基因，當(dāng)i存在時(shí)，c、c表現(xiàn)為無(wú)色，i存在時(shí), c表現(xiàn)有色，c農(nóng)現(xiàn)無(wú)色。p ccii（有色）x cell （無(wú)色）iflccli四、實(shí)驗(yàn)組織運(yùn)行要求：主要通過(guò)教師講解或多媒體演示，學(xué)生自己實(shí)際操作進(jìn)行。五、實(shí)驗(yàn)條件不同類(lèi)型的玉米品系（有色和無(wú)色，甜與

35、非甜，糯與非糯等）f1植株的口交、測(cè)交果穗，統(tǒng)計(jì)雜交后 代各性狀的籽粒。六、實(shí)驗(yàn)步驟1、確定自己桌面上的試驗(yàn)材料屬于何種材料測(cè)交=1： 1： 1： 1自交二9： 3： 3： 1i:無(wú)色:有色=13： 3（抑制作用）2、分別計(jì)數(shù)（按各材料要求）填表，x2測(cè)驗(yàn)驗(yàn)證。七、實(shí)驗(yàn)報(bào)告分析雜交結(jié)來(lái)，并對(duì)結(jié)來(lái)進(jìn)行x2測(cè)驗(yàn)，檢驗(yàn)是否符合遺傳沖的獨(dú)立分配規(guī)律，對(duì)各性狀的遺傳表現(xiàn) 做出解釋，并寫(xiě)出書(shū)面報(bào)告。將觀察結(jié)果填衣，然后進(jìn)行x?測(cè)驗(yàn)驗(yàn)證。兩對(duì)性狀的的遺傳分析表表現(xiàn)型觀察數(shù)（0）預(yù)期數(shù)（e）偏差(d=o-e)差方 d2= (o-e)2x2=e=d2/edfp實(shí)驗(yàn)六：植物多倍體的誘發(fā)及細(xì)胞學(xué)鑒定實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：4學(xué)時(shí)

36、實(shí)驗(yàn)類(lèi)型：綜合實(shí)驗(yàn)要求：必做一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)應(yīng)用秋水仙索誘導(dǎo)植物多倍體的方法和技術(shù)，觀察鑒定多倍體的形態(tài)及其細(xì)胞學(xué) 特征。學(xué)會(huì)利用染色體分析對(duì)多倍體細(xì)胞作出準(zhǔn)確判斷。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：植物多倍體的誘發(fā)及細(xì)胞學(xué)鑒定(用秋水仙素處理洋蔥根部，誘導(dǎo)多倍體的產(chǎn)生，制作 根尖的染色體玻片，觀察其特點(diǎn)并與止常二倍休細(xì)胞進(jìn)行比較。)三、實(shí)驗(yàn)原理、方法和手段：生物體的細(xì)胞核中都冇相對(duì)穩(wěn)定的染色體數(shù)11,這是物種的基本特征z。如玉米的體細(xì)胞具冇20條 染色體，人類(lèi)則具有46條染色體，但是這些細(xì)胞核內(nèi)的染色體并不是雜亂無(wú)序的，而是組成一個(gè)或多個(gè) 染色體纟ft (genome),或稱基因纟h.。每個(gè)染色體纟fl所包含

37、的染色體數(shù)口稱為基數(shù)(basic npmber),通常 以x衣示。例如玉米的20條染色體包含了 2個(gè)染色體組，x=10o兩組染色休之間有成對(duì)的同源染色休 (homologous chromosome ),在減數(shù)分裂過(guò)程中，每對(duì)同源染色體的2個(gè)成員分到2個(gè)子細(xì)胞中，因 此配子細(xì)胞只含冇體細(xì)胞中2組染色體中的1組。多倍體是指在細(xì)胞屮具有3個(gè)或3個(gè)以上的染色體組的生物體。自然界中有許多植物是多倍體的， 是變異發(fā)生的重要途徑之一。多倍體植物在形態(tài)上較二倍體的植物個(gè)體人，葉片上的氣孔也很人，因此很 容易辨認(rèn)。多倍體的研究在育種工作中非常重要，因?yàn)槔枚啾扼w可以改良作物的某些經(jīng)濟(jì)性狀，同時(shí)述 對(duì)利用多倍體

38、克服遠(yuǎn)緣雜交過(guò)程中的障礙。利用一些誘發(fā)因素可以人工誘導(dǎo)植物產(chǎn)牛多倍體。這些因素包 括物理的因素，如溫度的劇變、射線處理等，還冇化學(xué)因素，如植物堿、植物生長(zhǎng)激素等。在眾多的化學(xué) 藥吊中，秋水仙索是誘導(dǎo)多倍體形成最為有效和常用的藥品z-o在適宜濃度的秋水仙素的作用下，它既 可以有效地阻止紡錘體的形成，乂不至于對(duì)細(xì)胞發(fā)生較人的毒害。因此，當(dāng)細(xì)胞繼續(xù)分裂厲，可以使細(xì)胞 的染色體數(shù)加倍。如果用秋水仙素處理植物的根尖，則在根尖分生區(qū)內(nèi)可檢測(cè)到大量染色體加倍的細(xì)胞， 若處理植物幼苗的芽，則可以得到染色體加倍的植株。四、實(shí)驗(yàn)組織運(yùn)行要求：在教師指導(dǎo)下由學(xué)?？诩簞?dòng)手完成。五、實(shí)驗(yàn)條件仁實(shí)驗(yàn)材料：蠶豆、洋蔥、小麥

39、種子、小麥幼苗、2、儀器用具：搪瓷盤(pán)、躡子、剪刀、燒杯、培養(yǎng)皿、恒溫水浴鍋、紗布、試管、3、試劑：2.04.0g/l秋水仙素水溶液、改良苯酚品紅染液、carnoy固定液。六、實(shí)驗(yàn)步驟仁蠶豆材料的處理：在盛有蛭石和沙土的花盆內(nèi)埋入蠶豆種子，在盆內(nèi)澆適量清水。將花盆放在窗臺(tái)上 陽(yáng)光充足的地方進(jìn)行萌發(fā)。經(jīng)常進(jìn)行觀察，約46d蠶豆的主根長(zhǎng)40 3cm左右，側(cè)根長(zhǎng)到11.5cm時(shí), 將蠶豆収出。用淸水將蠶豆上的泥土沖凈，然后放入盛有4.0g/l的秋水仙素水溶液的小燒杯內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng) 34d,待觀察到根尖膨大時(shí)取材固定。與在水中培養(yǎng)的蠶豆做對(duì)照，進(jìn)行染色體分析。2、洋蔥的處理：將搪瓷盤(pán)的盤(pán)口用線繩編織成許多網(wǎng)

40、格，在盤(pán)內(nèi)注人清水。把洋蔥的鱗莖洗干凈，用刀片將鱗莖上的老根削除，再把其放在掘瓷盤(pán)的網(wǎng)格上，使其生根部位恰好接觸到水面，在25°c下培養(yǎng)兒口。 待新根剛剛長(zhǎng)出時(shí)，將搪瓷盤(pán)內(nèi)的清水換成4.0g/l的秋水仙素水溶液，用繼續(xù)在水中培養(yǎng)的洋蔥鱗莖作 對(duì)照。培養(yǎng)幾fi后，在處理液中培養(yǎng)的根尖明顯比對(duì)照根尖肥大，此時(shí)便對(duì)用解剖剪將根尖取下，長(zhǎng)度大 約在1.5cm左右，放入固定液中固定24h o然后可按照常規(guī)的壓片法進(jìn)行細(xì)胞學(xué)制片，用顯微鏡觀察并 計(jì)數(shù)。3、玉米種子的處理：把玉米2n=20種子浸在0.1%秋水仙素溶液24小時(shí)。用自來(lái)水沖洗23次。將 萌發(fā)種子移到盛有0.025%秋水仙素溶液潤(rùn)濕了吸

41、水紙的培養(yǎng)皿里。置入25°c培養(yǎng)箱，培養(yǎng)發(fā)芽。此時(shí)要 注意及時(shí)補(bǔ)充培養(yǎng)皿內(nèi)的處理液，保證處理液的濃度不變。當(dāng)長(zhǎng)出的根出現(xiàn)膨大時(shí)就應(yīng)及時(shí)取材固定。4、玉米幼苗的處理：以上玉米種子培養(yǎng)發(fā)芽48小時(shí)后取出幼苗。用口來(lái)水緩緩沖洗幼苗。把處理后的幼 苗栽種在大或盆缽內(nèi)。同期播種未經(jīng)處理的玉米種子作為對(duì)照。5、形態(tài)觀察和細(xì)胞學(xué)鑒定：1）比較處理植株與對(duì)照的外部形態(tài)有什么差異。2）觀察四倍體玉米、二倍體玉米表皮細(xì)胞氣孔的大小。將葉面的表皮撕下，在顯微鏡下進(jìn)行觀察，多倍 體植株的氣孔比二倍體大很多，葉片也比較肥厚。3）在四倍體玉米葉的背|何中部劃一切口，用尖頭躡子夾住切口部分，撕下一薄層下表皮，放在

42、載玻片的 水滴里，鋪平，蓋上蓋玻片，制成表皮裝片。按上述同樣方法制作一張二倍體玉米的表皮裝片，作為對(duì)照。七、實(shí)驗(yàn)報(bào)告將觀察結(jié)果寫(xiě)入實(shí)驗(yàn)報(bào)告。將鏡檢觀察結(jié)果列成一表，并分析記載結(jié)果。實(shí)驗(yàn)七：數(shù)量性狀的遺傳分析實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：2學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型：驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)要求：必做一、實(shí)9僉目的：通過(guò)實(shí)驗(yàn)，學(xué)習(xí)統(tǒng)計(jì)分析數(shù)量性狀遺傳實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)，掌握數(shù)量性狀的分析方法；估測(cè)數(shù) 量性狀的遺傳率，了解數(shù)量性狀遺傳參數(shù)的作用。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：統(tǒng)計(jì)分析數(shù)量性狀遺傳實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)，估測(cè)數(shù)量性狀的遺傳率。三、實(shí)驗(yàn)原理、方法和手段：生物界遺傳性狀的變異冇連續(xù)的和不連續(xù)的兩種。表現(xiàn)不連續(xù)的變異，稱為質(zhì)量性狀。質(zhì)量性狀在雜 種后代的分離群體中，對(duì)于各個(gè)

43、體所具相對(duì)性的差異，可以采用經(jīng)典遺傳學(xué)的分析方法，通過(guò)對(duì)群體屮各個(gè)體分組并求不同組間的比例，研究它們的遺傳動(dòng)態(tài)。表現(xiàn)連續(xù)變異的性狀，稱為數(shù)量性狀。數(shù)量性狀是生物界廣泛存在的重要性狀，例如，人的高、牲畜的體重、植株的生育期、果實(shí)的人小，以及種子產(chǎn) 量的多少等。這類(lèi)性狀在自然群體或雜種后代群體內(nèi)，很難對(duì)不同個(gè)體的性狀進(jìn)行明確的分組，不能采用 質(zhì)暈性狀的分析方法，通過(guò)對(duì)農(nóng)現(xiàn)型變界的分析推斷群體的遺傳變界，借助于數(shù)理統(tǒng)計(jì)的分析方法，可以 有效地分析數(shù)量性狀的遺傳規(guī)律。在對(duì)數(shù)量性狀進(jìn)行遺傳分析時(shí)，一般常用方差(v)來(lái)度量群體內(nèi)的變異程度。由于性狀的發(fā)育不僅 由某因型決定，同時(shí)也受到環(huán)境條件的影響，故群體

44、表型方差(vp)應(yīng)為基因型方差(vg)和環(huán)境方差(ve) 所組成。假定基因型與壞境之間沒(méi)有相關(guān)和互作，貝h vp=vg+ve因?yàn)榛蛐头讲钍怯杉有苑讲?vq,顯性方差(vq和非等位基因間的上位性方差(vi)所組成，故上式可 進(jìn)一步列為：vp二也+林+v i +ve根據(jù)f2、bl (f1xp1)、b2 (f1xp2)群體的方差組成分析為:比2= vj+vd+ve (1)vbi+vb2= vd+2vd+2ve (2)2x(1) (2)得:f2的基因加性方差為:va=2vf2-(vbi+vb2)多基因作用有二種：(1)加性效應(yīng)(多基因作用累加起來(lái)的)；(2)非加性效應(yīng)包括顯性作用(等位 基因間互作)

45、及上位效應(yīng)(非等位基因間的互作)。遺傳力就是遺傳方差(vg)在總的表型方差(vp)中的所占的tt分比。用公式表示：h=vg/vp x 100%(若觀察的群體為fn代群體：其中vg=vf2vfi，vp=vfn, vf1=1/2(vpi+vp2)因此遺傳力可用下述公式計(jì) 算：vf2-1(vp1+vp2)h =lxi00%vf2遺傳率分解為廣義遺傳率和狹義遺傳率，狹義遺傳率h2= va/vp二(2v曠(+vb2)/vp2四、實(shí)驗(yàn)組織運(yùn)行要求：主要通過(guò)教師講解，學(xué)生自己實(shí)際操作進(jìn)行。五、實(shí)驗(yàn)條件小麥不同株高品種間雜交組合的親本p1與p2, fl, f2回交子代b1和(f1xp1)和b2 (f1xp2)

46、的試驗(yàn)考種資料距 a' 組中備、1ka11t102.9i1ijs:*t士281500p98e97p1a11p052091ae3171ap2141p52119921xp331ap371aevpp2hefn922nehe3eeeklae2<1224 如 4一2 一6 319.f1prneeeen0-heh心634rf-h-&-a30201i877.b1enenehhhnff3f248匸49&be2p p-p 1x 11p83pej40t水稻生廳期資料表（二）水稻矮腳南特x蓮塘早六個(gè)世代生育日數(shù)資料（以某日為零值統(tǒng)計(jì)，浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)）世代樣本數(shù)（n）平均數(shù)（天）變量（v）

47、pl13838.364.6852p2一135仍jls "ga 0.0w0fl1532.134.8380 f247132.49 : & 9652bl10235.88：91740. .宀.b25630.965x3804六、實(shí)驗(yàn)步驟1、基本參數(shù)的計(jì)算（1）計(jì)算各世代的平均數(shù)（x）、方差（v）及標(biāo)準(zhǔn)差（s） =lx/n（2）計(jì)算環(huán)境方差（ve）f2的環(huán)境方差一般可根據(jù)不同情況采用下列估算v尸1/3 （vp1+vp2+vf1）（水稻口花授粉作物）=1/2 （vp1+vp2）（適用于無(wú)f1的數(shù)據(jù)）=vf1 （適用于異花授粉作物）2、遺傳率的估算 廣義遺傳率(h2 ) = vg/vp x1

48、00% = (vf2-ve) /vf2 xioo%二vf2 - (vp1+vp2+vn) / vf2 x100% 狹義遺傳率(h2 ) = va/vp x100% = 2vf2- (vbi+vb2) / vf2 xioo%3、雜種優(yōu)勢(shì)和顯性程度的估算雜種優(yōu)勢(shì)是指雜種一代(f1)在產(chǎn)量、生活力、生長(zhǎng)勢(shì)、抗逆性及適應(yīng)性等方面優(yōu)于雙親的現(xiàn)象，一 般用雜種優(yōu)勢(shì)率(rh),即平均優(yōu)勢(shì)、超親優(yōu)勢(shì)、或雜種優(yōu)勢(shì)指數(shù)(ih)進(jìn)行度量，并可用勢(shì)能比值和平 均顯性程度表示雜種一代與親本數(shù)量性狀之間的相互關(guān)系。優(yōu)勢(shì)率(rid f1平均值同雙親的平均值比較，用百分比表示.平均優(yōu)勢(shì)二 1/2 . ( pl + p2) x

49、100%超親優(yōu)勢(shì):f1平均值同較好的一個(gè)親本(hp)平均值比較，用百分比表示。超親優(yōu)勢(shì)二(fl-hp) / hp x100%(2) 優(yōu)勢(shì)指數(shù)(ih) f1平均值與雙親平均值之比為優(yōu)勢(shì)指數(shù),用下式估算:ih = 1/2(p1+p2)(3) 勢(shì)能比值：在多基因系統(tǒng)f，假定基因均朝同一方向(d或-d)分布，且作用相等；所有h增量 均有同等符號(hào)，且效應(yīng)相等，而且雙親均為純合體，具有k對(duì)基因，則中親值離f1的差數(shù)為：fl-1/2 . (p1+p2) =lh (顯性效應(yīng)總和)兩親本的差數(shù)平均為：1/2 . (pl+p2) =工d (加性效應(yīng))由于上述兩個(gè)假定不能證實(shí)，所以一般將f1離中親值的差數(shù)與其兩親本

50、差數(shù)平均的比值，稱為勢(shì)能比例 比值,用下式估算：f1-1/2(p1+p2)勢(shì)能比值(hp) = 1/2 . (pl - p2 ) = sh /ed實(shí)際應(yīng)用上，令hp二±0.05無(wú)顯性hp=±o. 06±0. 95正向(負(fù)向)部分顯性hp二±0.96±1.05正向(負(fù)向)完全顯性hp>+l05時(shí)或v-l05時(shí) 正向(或負(fù)向)超親優(yōu)勢(shì)4、最少基因數(shù)目的估算假定某數(shù)量性狀受k對(duì)基因控制，雙親均為極端類(lèi)型，一個(gè)親本中全為正向基因，另一個(gè)親本中全為負(fù)向 基因；各個(gè)基因效應(yīng)大小相同；無(wú)顯隱性關(guān)系和上位性作用；所有基因都無(wú)連鎖關(guān)系，貝'j： p

51、l-p2=kd-(- kd)二 2kd d二(pl-p2)/2kd= ed2 = kd2 k=d/d2故 k二 d/d2 二 4k2d2 / 4kd2 =( 2工d)2 / 4sd2 =(p1-p2)2 / 4d二(pl-p2)2 / d因此，控制某一數(shù)量性狀的最少基因數(shù)h (k)可用下式估算:k= (pl-p2)2 / d式中 d二4仏-2 (vb1+vb2)5、資料分析統(tǒng)計(jì)計(jì)算所給資料各lit代的穗長(zhǎng)平均數(shù)，農(nóng)現(xiàn)型方差，環(huán)境方差值；出廣義遺傳率、狹義遺傳率；平均優(yōu) 勢(shì)、超親優(yōu)勢(shì)、勢(shì)能比值；控制水稻果穗長(zhǎng)度的這一性狀的最少基因?qū)?shù)。七、實(shí)驗(yàn)報(bào)告根據(jù)上述群體方差的組成分析，要統(tǒng)計(jì)分析數(shù)量性狀遺

52、傳試驗(yàn)的數(shù)據(jù)，并按公式分別估算遺傳率、雜 種優(yōu)勢(shì)、優(yōu)勢(shì)指數(shù)、勢(shì)能比值、平均顯性度及控制所測(cè)性狀的最少基因?qū)?shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果寫(xiě)成報(bào)告，說(shuō)明玉米這一性狀的遺傳特點(diǎn)及各世代的表型特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)八：蛋白質(zhì)遺傳標(biāo)記分析實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：6學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型：綜合實(shí)驗(yàn)要求：選修一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)握聚內(nèi)烯酰胺凝膠電泳技術(shù)和蛋白質(zhì)遺傳標(biāo)記的分析方法二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：根據(jù)不同材料蛋白質(zhì)譜帶的差異，反映了基因產(chǎn)物的差異。三、實(shí)驗(yàn)原理、方法和手段：蛋白質(zhì)是基因的產(chǎn)物。蛋白分子不同，反映了為它們編碼基因的d7a的堿菇順序不同。蛋白質(zhì)按其電 荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)在聚丙烯酰胺凝膠的濃縮效應(yīng)下可被分離在凝膠的不同位管上，因此，利用凝膠區(qū)帶

53、電泳可以將不同的蛋白質(zhì)分離，并利用特異底物染色法使它們?cè)谀z上顯示出遷移率不同的活性區(qū)帶。這 樣基因的產(chǎn)物就直接反映出來(lái)了。蛋口質(zhì)作為生化遺傳標(biāo)記己廣泛應(yīng)用于基因作圖、發(fā)育遺傳學(xué)、群休遺 傳學(xué)、分類(lèi)學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。蛋白質(zhì)電泳分析是一種重耍而用途廣泛的分子牛物學(xué)方法。不同品種由于遺傳組成的不同，種子內(nèi)所含的蛋白質(zhì)種類(lèi)冇差異，這種差異可利用電泳圖譜加以分析, 從而對(duì)品種進(jìn)行遺傳分析。比較親代與子代的蛋白質(zhì)譜帶，就可以對(duì)控制它們的某因進(jìn)行遺傳分析。四、實(shí)驗(yàn)組織運(yùn)行要求：在教師指導(dǎo)下由學(xué)生自己動(dòng)手完成。五、實(shí)驗(yàn)條件1、實(shí)驗(yàn)材料：不同小麥、玉米種子2、儀器用具：電泳儀，電泳槽，離心機(jī)，冰箱，移液管、離心管

54、3、藥品試劑：丙烯酰胺、n.n，亞甲基雙丙烯酰胺、乳酸、乳酸鈉、甘氨酸、抗壞血酸、硫酸亞鐵、氯 化鈉、蔗糖、甲基綠、三氯乙酸、過(guò)氧化氫、考馬斯亮藍(lán)r250、無(wú)水乙醇、正丁醇、丙三醇等（所用試 劑均為分析純，所用水均為去離子水）。4、電泳試劑配制4.1電極緩沖液稱取卄氨酸6.00g,倒入2000ml燒杯中，加入約1800ml去離子水溶解，用2.0ml左右乳酸調(diào)至ph3.3, 加去離子水定容至2000ml,混勻。4.2樣品提取液稱取氯化鈉5.80g,蔗糖200g,甲基綠0.15g,倒入1000ml燒杯中,加去離子水約800ml溶解，加熱 至微沸、放冷，用新點(diǎn)過(guò)的去離子水定容至1000mlo放入4°c冰箱保存。4.3分離膠緩沖液取1.43ml乳酸鈉于1000ml燒杯中，加去離子水約980ml,用乳酸調(diào)至ph3.0,定容至1000ml,貯于 棕色瓶中。放入4°c冰箱保存。4.4分離膠溶液稱取丙烯酰胺112.5g, n.n，亞卬基（雙？）丙烯酰胺3.75g,抗壞血酸0.25g,硫酸亞鐵用 分離膠緩沖液溶解，定容至1000ml,定容至1000ml,過(guò)濾于棕色瓶屮。放入4