藥物分析課件3

1、 藥物的雜質(zhì)檢查藥物的雜質(zhì)檢查2第一節(jié)第一節(jié) 概述概述第二節(jié)第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法一般雜質(zhì)的檢查方法3藥物的純度藥物的純度藥物的雜質(zhì)藥物的雜質(zhì)第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述4 1. 1. 藥物的純度：藥物的純度：指藥物純凈的程指藥物純凈的程 度。是判定藥品質(zhì)量優(yōu)劣的一個度。是判定藥品質(zhì)量優(yōu)劣的一個 重要指標。重要指標。 藥物純度綜合評價：藥物純度綜合評價： 外觀性狀外觀性狀 理化常數(shù)理化常數(shù) 雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查 含量測定含量測定一、藥物的純度一、藥物的純度5二、藥物的雜質(zhì)二、藥物的雜質(zhì) 概念：概念：指藥物中存在的無治療作用、指藥物中存在的無治療作用、 影響藥物的療效和穩(wěn)定性、甚影響藥物的療效和穩(wěn)定

2、性、甚 至對人體健康有害的至對人體健康有害的微量微量物質(zhì)。物質(zhì)。 檢查雜質(zhì)、控制純度是保證藥品質(zhì)檢查雜質(zhì)、控制純度是保證藥品質(zhì)量、確保用藥安全、有效的一個重要方量、確保用藥安全、有效的一個重要方面。面。62. 2. 雜質(zhì)的分類雜質(zhì)的分類(1)按來源分：按來源分：一般雜質(zhì)一般雜質(zhì)和和特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)一般雜質(zhì)：一般雜質(zhì)：指在自然界中分布較廣泛，在多種指在自然界中分布較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中容易引入的雜質(zhì)。如：藥物的生產(chǎn)和貯藏過程中容易引入的雜質(zhì)。如：H H+ +、OHOH- -、H H2 2O O、ClCl- -、SOSO4 42-2-、砷鹽、重金屬等、砷鹽、重金屬等特殊雜質(zhì)：特殊雜質(zhì)

3、：指在該藥物的生產(chǎn)或貯存過程中指在該藥物的生產(chǎn)或貯存過程中, ,根根據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件, ,有可能引有可能引入的雜質(zhì)入的雜質(zhì). . 7按結(jié)構(gòu)分：按結(jié)構(gòu)分：無機雜質(zhì)無機雜質(zhì)和和有機雜質(zhì)有機雜質(zhì)無機雜質(zhì)無機雜質(zhì) ClCl- -、S SO O4 42-2-、鐵鹽鐵鹽、AsAs、重金、重金屬。屬。有機雜質(zhì)有機雜質(zhì) 中間體、副產(chǎn)物、分解物、中間體、副產(chǎn)物、分解物、 異構(gòu)體、殘留溶劑異構(gòu)體、殘留溶劑. .8(3)按性質(zhì)分按性質(zhì)分:信號雜質(zhì)信號雜質(zhì)和和有害雜質(zhì)有害雜質(zhì)信號雜質(zhì)：信號雜質(zhì)：指本身一般無害指本身一般無害,但其含量但其含量多少可反映藥物純度水平多少可反

4、映藥物純度水平,指示生產(chǎn)工指示生產(chǎn)工藝是否合理藝是否合理. 如：如：氯化物、硫酸鹽氯化物、硫酸鹽等等.有害雜質(zhì)：有害雜質(zhì)：對人體有毒害的雜質(zhì)對人體有毒害的雜質(zhì).在質(zhì)在質(zhì)量標準中嚴加控制量標準中嚴加控制,以保證用藥安全以保證用藥安全.如：如：重金屬、砷鹽、氰化物、氟化物重金屬、砷鹽、氰化物、氟化物等等. 93. 3. 雜質(zhì)的來源雜質(zhì)的來源 藥物藥物生產(chǎn)生產(chǎn)過程引入過程引入 藥物藥物貯存貯存期間引入期間引入10（1）藥物）藥物生產(chǎn)生產(chǎn)過程引入過程引入a:a:原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物。原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物。 b:試劑、溶劑、催化劑類。試劑、溶劑、催化劑類。c: 生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置所帶來生產(chǎn)

5、中所用金屬器皿、裝置所帶來的雜質(zhì)。的雜質(zhì)。d:從植物原料中提取分離藥物時，引入從植物原料中提取分離藥物時，引入的結(jié)構(gòu)類似物及其他雜質(zhì)。的結(jié)構(gòu)類似物及其他雜質(zhì)。e:藥物在制成制劑的過程中產(chǎn)生新雜質(zhì)。藥物在制成制劑的過程中產(chǎn)生新雜質(zhì)。11H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2例例1 1 鹽酸普魯卡因注射劑鹽酸普魯卡因注射劑制劑生產(chǎn)制劑生產(chǎn) 過程中產(chǎn)生新雜質(zhì)過程中產(chǎn)生新雜質(zhì)高溫滅菌高溫滅菌鹽酸普魯卡因注射劑鹽酸普魯卡因注射劑對氨基苯甲酸對氨基苯甲酸水解進一步脫羧轉(zhuǎn)化進一步脫羧轉(zhuǎn)化苯胺苯胺引起毒性反應(yīng)引起毒性反應(yīng)（1）（2）12 （2）藥物）藥物貯藏貯藏過程引入過程引入a: 保管不善或貯存時間過長保

6、管不善或貯存時間過長水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶形轉(zhuǎn)變、聚水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶形轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等合、潮解和發(fā)霉等 b: 包裝不當包裝不當13例例2:麻醉乙醚在日光、空氣及濕氣作用下麻醉乙醚在日光、空氣及濕氣作用下,易氧化分解為醛及有毒的過氧化物易氧化分解為醛及有毒的過氧化物 CH3CH2OCH2CH3 CH3CHO + CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3 （二羥乙基過氧化物）（二羥乙基過氧化物） 藥典規(guī)定藥典規(guī)定: 起封后起封后24小時內(nèi)使用小時內(nèi)使用14例例 3：四環(huán)素在酸性條件下可發(fā)生差向：四環(huán)素在酸性條件下可發(fā)生差向異構(gòu)化反應(yīng)異構(gòu)化反應(yīng),生成差向四環(huán)素生成差向

7、四環(huán)素(毒性高、活毒性高、活性低性低)OHH3CHN(CH3)2OHCONH2OOOHOHOHABCDOHCONH2OOOHOHOH(CH3)2NOHH3CHABCDpH 26154. 4. 雜質(zhì)的限量檢查（雜質(zhì)的限量檢查（limit test) ) （1）雜質(zhì)限量：）雜質(zhì)限量：藥物中所含雜質(zhì)的最藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量大允許量. （2）限量表示方法）限量表示方法百分表示百分表示( %)百萬分表示百萬分表示( ppm) 16（3）雜質(zhì)檢查方法）雜質(zhì)檢查方法(限量檢查法限量檢查法)三種檢查方法三種檢查方法比較法比較法靈敏度法靈敏度法標準對照法標準對照法17標標準準對對照照法法原理：原理：取限度

8、量的待檢雜質(zhì)對照品溶液取限度量的待檢雜質(zhì)對照品溶液與一定量供試品溶液在相同條件下處理與一定量供試品溶液在相同條件下處理后后, 比較反應(yīng)結(jié)果比較反應(yīng)結(jié)果, 以確定雜質(zhì)含量是否以確定雜質(zhì)含量是否超過規(guī)定。超過規(guī)定。管管2（對照管）（對照管）管管1（樣品管）（樣品管）操作操作: :平行試驗平行試驗比較兩比比較兩比色管的顏色或濁度色管的顏色或濁度, ,判斷雜質(zhì)限量是否符判斷雜質(zhì)限量是否符合規(guī)定合規(guī)定. .18靈靈敏敏度度法法原理：原理：以檢測條件下反應(yīng)靈敏度以檢測條件下反應(yīng)靈敏度控制雜質(zhì)限量控制雜質(zhì)限量. .操作：操作：在供試品溶液中加入試劑在供試品溶液中加入試劑, ,在在試驗條件下反應(yīng)試驗條件下反應(yīng)

9、, ,不得出現(xiàn)正反應(yīng)。不得出現(xiàn)正反應(yīng)。 19不得發(fā)生渾濁、蒸餾水TSAgNOHNOml5033 如：蒸餾水中氯化物的檢查如：蒸餾水中氯化物的檢查 5滴滴（1mL）0.2mg Cl- /50mL 4g/mL 規(guī)定水中氯化物含量規(guī)定水中氯化物含量 4g/mL20比比較較法法操作：操作：取一定量供試品取一定量供試品,在規(guī)定條件下測在規(guī)定條件下測定待檢雜質(zhì)吸光度（旋光度）定待檢雜質(zhì)吸光度（旋光度）, 與規(guī)定與規(guī)定限量比較限量比較, 判斷供試品中雜質(zhì)限量。判斷供試品中雜質(zhì)限量。21 例：腎上腺素中腎上腺酮的檢例：腎上腺素中腎上腺酮的檢查查 鹽酸溶液鹽酸溶液供試品液供試品液(2.0mg/ml)樣品樣品 (

10、0.05m/L)A A310nm310nm規(guī)定：規(guī)定：0.0522（4）雜質(zhì)限量計算）雜質(zhì)限量計算雜質(zhì)限量% = = 供試品量供試品量雜質(zhì)最大允許量雜質(zhì)最大允許量100%100%L（%）=100%SC V注意注意: 單位是否統(tǒng)一單位是否統(tǒng)一 供試品是否有稀釋供試品是否有稀釋 表示方法表示方法%或或ppm23例例1. 對乙酰氨基酚中氯化鈉的檢查對乙酰氨基酚中氯化鈉的檢查樣品溶液樣品溶液: :-, Cl25ml100ml2.0g依法檢查樣品過濾溶解水 對照品溶液對照品溶液: : 標準NaCl溶液(10g/mlCl-)，取5.0ml同法操作比較,濁度不得更大.計算氯化物限量是多少(% )？24L=C

11、V=S100%10 10-6 5.02.0 25100100%=0.01%25例例2. 葡萄糖中重金屬的檢查葡萄糖中重金屬的檢查依法檢查樣品）（醋酸鹽水25ml.0g4 pH3.5buff,方法：方法：規(guī)定：規(guī)定：含重金屬 百萬分之五(5ppm)計算：應(yīng)取標準鉛溶液(10g/mlPb)多少ml？6101000401. 0V5)ml(0 . 21001. 0510004V6SVL（ppm）=106C26第二節(jié)第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法一般雜質(zhì)的檢查方法一般雜質(zhì)檢查包括：一般雜質(zhì)檢查包括： Cl-、SO2-4、 Fe3+ 、 砷鹽、酸堿度砷鹽、酸堿度、溶液澄清度與顏色、熾灼殘渣，干、溶液澄清度與顏

12、色、熾灼殘渣，干燥失重、有機溶劑殘留量檢查法等。燥失重、有機溶劑殘留量檢查法等。27一、氯化物檢查法一、氯化物檢查法1 1、來源：、來源：生產(chǎn)過程用到鹽酸或藥物呈生產(chǎn)過程用到鹽酸或藥物呈 鹽酸鹽。鹽酸鹽。2、目的：、目的：作為信號雜質(zhì)，反映藥物的作為信號雜質(zhì)，反映藥物的 純凈程度，及生產(chǎn)過程是否純凈程度，及生產(chǎn)過程是否 正常。正常。283 3、原理、原理 標準對照法標準對照法 3HNO3ClAgNOAgCl 藥物：藥物：3HNO3NaCl)AgNOAgCl （c,V對照：對照：白色渾濁白色渾濁白色渾濁白色渾濁HNO3HNO3294 4、操作方法、操作方法( (對照法對照法) )、水、水至樣品1

13、0mlHNO dil253ml比較渾濁程度暗處放置min5403TSAgNOml1.0mL用水稀釋至50mL樣品管樣品管0.60g對照管對照管同上標準液（一定量）6.0mL (濃度：濃度：10 gCl/ml)0.010%30暗處放置暗處放置5 min (避免光線使避免光線使 AgCl分解分解) 5 5、結(jié)果觀察方法、結(jié)果觀察方法 黑色的背景上黑色的背景上 自上而下的觀察自上而下的觀察316 6、注意事項及討論、注意事項及討論（1 1） 測定條件測定條件 氯化物的最適檢測濃度范圍：氯化物的最適檢測濃度范圍： 50ml供試液中含供試液中含50508080 g g的的ClCl- -所顯渾濁所顯渾濁梯

14、度明顯梯度明顯, ,相當于標準相當于標準NaClNaCl溶液溶液5.08.0ml。(10 gCl-/ml)32加稀硝酸的目的加稀硝酸的目的 a: 加速加速AgCl生成并產(chǎn)生較好的乳濁生成并產(chǎn)生較好的乳濁 b: 避免弱酸銀鹽如避免弱酸銀鹽如：Ag2CO3Ag3PO4 、Ag2O 的形成而干擾檢查。的形成而干擾檢查。33試劑：硝酸銀試劑：硝酸銀 稀釋到稀釋到40mL后加后加AgNO3試液的目的：試液的目的：使生成均勻的白色渾濁而非白色沉淀。使生成均勻的白色渾濁而非白色沉淀。 避光、暗處放置避光、暗處放置5 5分鐘后比濁的原因：分鐘后比濁的原因：氯化銀見光易分解。氯化銀見光易分解。平行操作平行操作3

15、4（2 2） 干擾及排除干擾及排除供試品溶液有色時的處理方法供試品溶液有色時的處理方法 a.a.內(nèi)消色法內(nèi)消色法如：枸櫞酸鐵銨（棕黃色）氯化物的檢查如：枸櫞酸鐵銨（棕黃色）氯化物的檢查b b. .外消色法外消色法向供試品溶液中加入某種試劑向供試品溶液中加入某種試劑,使溶液顏色使溶液顏色褪去后再依法檢查。褪去后再依法檢查。35 供試品溶液顯堿性的處理方供試品溶液顯堿性的處理方法法 先中和為中性后再檢查先中和為中性后再檢查 作用：作用：避免硝酸銀在堿性條件下生避免硝酸銀在堿性條件下生成氫氧化銀和氧化銀。成氫氧化銀和氧化銀。36二、硫酸鹽檢查法二、硫酸鹽檢查法1 1、原理、原理 標準對照法標準對照法

16、 藥物藥物：4HCl224BaSOBaClSO）、（對照對照：4HCl242BaSOBaClSOKVc白色渾濁白色渾濁白色渾濁白色渾濁HClHCl372 2、操作方法、操作方法( (對照法對照法) )樣品管樣品管對照管對照管同上標準液（一定量）樣品樣品比濁比濁K2SO4（0.1mgSO42-/mL)40mlHCl2mL42mL 水至、25%BaCl250mL5mL用水稀至383 3、注意事項及討論、注意事項及討論（1 1） 測定條件測定條件 SO42-的最適檢測濃度范圍：的最適檢測濃度范圍： 50ml溶液中含溶液中含0.10.5mg的的SO42-所顯渾濁梯度明顯，相當于標準所顯渾濁梯度明顯，相

17、當于標準K2SO4(0.1mgSO42-/mL)溶液溶液15ml。39加鹽酸的目的加鹽酸的目的 稀鹽酸：稀鹽酸：2mL/50mL防止防止BaCO3、Ba3(PO4)2等沉淀生成。等沉淀生成。 BaCl2的濃度為的濃度為25%呈現(xiàn)穩(wěn)定的渾濁度。呈現(xiàn)穩(wěn)定的渾濁度。40（一）硫氰酸鹽法（一）硫氰酸鹽法 1. 1. 原理原理標準對照法標準對照法 ()藥物藥物： 36SCNFeHCl6SCNFeFeFe3o23()() 、對照：對照：36HCl3SCNFe6SCNFeVc紅色紅色紅色紅色HClHCl三、鐵鹽檢查法三、鐵鹽檢查法412. 操作操作4ml25mld.HCl30%硫氰酸銨硫氰酸銨3ml過過硫酸

18、銨硫酸銨50mgH2O50mlH2O 樣品樣品標準溶液標準溶液比色方法：同置于比色方法：同置于白色白色背景上，自上向下觀察。背景上，自上向下觀察。 423. 討論討論（1 1） 測定條件測定條件 Fe3+的最適檢測濃度范圍：的最適檢測濃度范圍： 鐵標準溶液鐵標準溶液10 gFe3+/ml硫酸鐵銨加入硫酸配制硫酸鐵銨加入硫酸配制(防止鐵鹽水解）防止鐵鹽水解） 儀器分析線性范圍儀器分析線性范圍5 90 g Fe3+ /50ml 目視比色濃度范圍目視比色濃度范圍1050 g Fe3+ /50ml43加鹽酸的目的加鹽酸的目的（稀鹽酸：（稀鹽酸：4mL/50mL)防止防止Fe3+水解。水解。加入過硫酸銨

19、的目的加入過硫酸銨的目的a.a. 氧化劑：氧化劑：FeFe2+2+ OO Fe Fe3+3+b. b. 防止由于光線使硫氰酸鐵還原或防止由于光線使硫氰酸鐵還原或 分解褪色。分解褪色。44加入過量硫氰酸銨的目加入過量硫氰酸銨的目的的a.a.增加生成配離子的穩(wěn)定性增加生成配離子的穩(wěn)定性, ,提高提高 反應(yīng)靈敏度。反應(yīng)靈敏度。b.b.消除氯化物等與鐵鹽生成配位消除氯化物等與鐵鹽生成配位 化合物所引起的干擾?；衔锼鸬母蓴_。45（2 2） 干擾及排除干擾及排除 為了提高靈敏度或供試管與對照為了提高靈敏度或供試管與對照管色調(diào)不一致時，可用正丁醇提取后，管色調(diào)不一致時，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比

20、色。分取正丁醇層比色。 具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機藥物，需經(jīng)具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機藥物，需經(jīng)700800熾灼破壞處理后再依法檢熾灼破壞處理后再依法檢查。查。46干擾離子的影響：干擾離子的影響：Cl-，PO43-，SO42-a: 適當增加酸度適當增加酸度b: 適當增加硫氰酸銨的加入量適當增加硫氰酸銨的加入量C:正丁醇萃取后比色正丁醇萃取后比色47四、重金屬檢查法四、重金屬檢查法 重金屬重金屬指在實驗條件下能與硫代乙指在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬。酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬。 如：如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、 Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等等. 中國藥典（中國藥典（20052

21、005年版）共收載四法。年版）共收載四法。 48第一法第一法:硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法 適用于溶于水、稀酸、乙醇的藥物適用于溶于水、稀酸、乙醇的藥物最常用最常用第二法第二法:熾灼后檢查法熾灼后檢查法 適用在水、乙醇中難溶或能與重金屬離子形成配位適用在水、乙醇中難溶或能與重金屬離子形成配位化合物的有機藥物化合物的有機藥物.第三法第三法:硫化鈉法硫化鈉法 適用于難溶于稀酸但能溶于堿性溶液藥物適用于難溶于稀酸但能溶于堿性溶液藥物(巴比妥巴比妥類、磺胺類類、磺胺類)第四法第四法:微孔濾膜法微孔濾膜法 適用于重金屬限量低適用于重金屬限量低(2-5 g) 藥物藥物. 49第一法第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰

22、胺法1.1.原理原理 標準對照法標準對照法 pH3.5322322CH CSNHH OCH CONHH S 黃色棕黑色黃色棕黑色藥物藥物：PbSSHPbpH3.522 ()黃色棕黑色黃色棕黑色、對照：對照：PbSSHPbNOpH3.523 Vc適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。502. 2. 操作方法操作方法比色放置硫代乙酰胺水22ml TS25ml2ml )buff(pH3.5水、醋酸鹽樣品樣品管樣品管同上標準液（一定量） 對照管對照管513. 討論討論（1 1） 測定條件測定條件 Pb2+的最適檢測濃度范圍：的最適檢測濃度范圍： 目視比色的濃度范圍：目視比色的濃

23、度范圍：10 20 g/27ml 相當于相當于Pb2+標準溶液標準溶液12ml(10 g/ml)52 反應(yīng)試劑：硫代乙酰胺試液反應(yīng)試劑：硫代乙酰胺試液H2S試液：惡臭和毒性試液：惡臭和毒性,不穩(wěn)定不穩(wěn)定,易被空氣易被空氣氧化而析出硫氧化而析出硫,濃度難以控制。濃度難以控制。53 醋酸鹽緩沖液控制溶液醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為值為33.5pH在在3.03.5時時, 硫化鉛沉淀較完全硫化鉛沉淀較完全.酸度增大酸度增大, 呈色變淺甚至不呈色呈色變淺甚至不呈色.若樣品用強酸溶解若樣品用強酸溶解, 在加入硫代乙在加入硫代乙 酰胺前酰胺前, 加氨水至中性加氨水至中性.54（2 2） 干擾及排除干擾及排除

24、 供試品溶液有顏色供試品溶液有顏色a. 內(nèi)消色法內(nèi)消色法b. 外消色法外消色法55 無鉛雜質(zhì)無鉛雜質(zhì)相同顏色澄清液相同顏色澄清液樣品樣品pH3.5硫代乙酰胺硫代乙酰胺過濾過濾濾液濾液標準標準Pb液液對照管對照管樣品管樣品管除去除去PbS硫代乙酰胺硫代乙酰胺a. 內(nèi)消色法內(nèi)消色法56b. 外消色法外消色法 . . 稀焦糖溶液調(diào)節(jié)稀焦糖溶液調(diào)節(jié) . . 指示劑調(diào)節(jié)指示劑調(diào)節(jié)57第二法第二法 灼燒后檢查灼燒后檢查 適用于在水、乙醇中難溶或能與適用于在水、乙醇中難溶或能與重金屬離子形成配位化合物的有機物。重金屬離子形成配位化合物的有機物。581.1.原理原理 供試品熾灼破壞后，加硝酸加熱供試品熾灼破壞

25、后，加硝酸加熱處理，使有機物分解、破壞完全，而處理，使有機物分解、破壞完全，而重金屬游離，再按重金屬游離，再按第一法第一法檢查。檢查。59 緩緩熾灼緩緩熾灼 放冷放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供試品供試品 炭化炭化 加熱加熱 HNO3 500-600H2SO4 除盡除盡 放冷放冷 完全灰化完全灰化 蒸干蒸干HCl 2ml 水水15ml 中性中性 按第一法檢查按第一法檢查 蒸干蒸干 氨試液氨試液注意：做空白試驗注意：做空白試驗 放冷放冷2.2.操作操作 603. 3. 討論討論（1）HNO3處理后必須蒸干除盡氧化氮。處理后必須蒸干除盡氧化氮。（2）熾灼溫度嚴格控制）熾灼溫度嚴格控制500-

26、600。61第三法第三法 硫化鈉法硫化鈉法 適用于難溶于稀酸但能溶解于堿適用于難溶于稀酸但能溶解于堿性溶液的藥物中重金屬的檢查性溶液的藥物中重金屬的檢查. . 如：磺胺類與巴比妥類藥物如：磺胺類與巴比妥類藥物621.1.原理原理 標準對照法標準對照法 黃色棕黑色黃色棕黑色藥物：藥物：PbSSNaPbNaOH22 ()黃色棕黑色黃色棕黑色、對照：對照：PbSSNaPbNONaOH23 Vc632.2.操作操作 取供試品適量，加取供試品適量，加NaOH試液試液5ml和和水水 20ml使溶解后，置納氏比色管中，加使溶解后，置納氏比色管中，加Na2S試液試液5滴，搖勻，與一定量標準鉛溶滴，搖勻，與一定

27、量標準鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較液經(jīng)同法處理所呈顏色比較.3.3.討論討論 Na2S臨用新配。臨用新配。64第四法第四法 微孔濾膜法微孔濾膜法原理原理 標準對照法標準對照法 同第一法同第一法 使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜使重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜上，比較供試品和一定量的標準鉛溶液同上，比較供試品和一定量的標準鉛溶液同法處理產(chǎn)生的色斑深淺，確定重金屬是否法處理產(chǎn)生的色斑深淺，確定重金屬是否超過限量。超過限量。本法適用于重金屬限量低的藥物本法適用于重金屬限量低的藥物(2-5 g).65五、砷鹽檢查檢查法五、砷鹽檢查檢查法 (二二) 白田道夫法白田道夫法 (一一) 古蔡法古蔡法(CH

28、P) (三三) Ag-DDC法法(CHP)66(一一) 古蔡法（古蔡法（Gutzeit）1. 原原 理理標準對照法標準對照法3332AsHAsOHHClZn 遇遇HgBr2試紙生成黃色棕色的砷斑，與試紙生成黃色棕色的砷斑，與2ml標準砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較，標準砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較，不得更深。不得更深。672.2.裝置：裝置：檢砷瓶檢砷瓶A導(dǎo)氣管導(dǎo)氣管B具孔塞具孔塞C 導(dǎo)氣管導(dǎo)氣管B中裝入醋酸鉛棉球中裝入醋酸鉛棉球60mg3.3.操作操作 旋塞旋塞C的平面上放一片溴化汞試紙的平面上放一片溴化汞試紙 樣品、對照品分別置于檢砷瓶中樣品、對照品分別置于檢砷瓶中, 加加濃鹽酸濃鹽

29、酸5ml與與水水21ml, 再加再加2.5%碘化鉀試液碘化鉀試液5ml 與與0.3%酸性氯化亞錫酸性氯化亞錫試液試液5滴滴, 在室溫放置在室溫放置10分鐘分鐘 加鋅粒加鋅粒2g, 立即將裝妥的導(dǎo)氣管立即將裝妥的導(dǎo)氣管 B 密塞于密塞于A 瓶上瓶上, 置置25-40 水浴水浴, 反應(yīng)反應(yīng)45分鐘分鐘, 取出溴化汞取出溴化汞試紙試紙, 比較砷斑比較砷斑.6869供試品標準液KI T.S.酸性SnCl2T.S.As3+ZnHClAsH3過Pb(AC)2棉花遇HgBr2試紙砷斑 比較4. 討討 論論（1）KI的作用的作用OHIAsOHIAsO22333422還原劑還原劑As5+As3+以增大以增大As

30、H3的生成速度的生成速度.4.1 4.1 測定條件測定條件 70（2）酸性）酸性SnCl2的作用的作用 (3方面方面) 還原劑還原劑OHSnAsOH2SnAsO2433234. As5+As3+71. 將將KI被氧化生成的被氧化生成的I2再還原為再還原為I-SnIISn4222新生態(tài)氫H 2ZnH2Zn2233HH 2 AsHAs2424ZnIZnI進而促進進而促進AsH3不斷不斷生成生成：使：使I與與Zn+形形成穩(wěn)定的絡(luò)離子成穩(wěn)定的絡(luò)離子促進反應(yīng)正向進促進反應(yīng)正向進行行72 消除銻化氫干擾消除銻化氫干擾 SnCl2與與KI可抑制可抑制銻化氫的生成，銻化氫的生成， 100g銻存在下不干擾測定銻

31、存在下不干擾測定 73 SnCl2與與Zn粒表面形成粒表面形成Zn-Sn齊齊 起去極化作用起去極化作用,使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生H2阻礙酸與鋅粒反應(yīng)阻礙酸與鋅粒反應(yīng)SnCl2Zn74（3）PbAc2棉花的作用棉花的作用（黑色，干擾）HgSHgBrSHH2S222 排除硫化物的干擾排除硫化物的干擾(100gS2- ) 22PbAcH SPbS2HAc留在棉花上，不干擾結(jié)果。留在棉花上，不干擾結(jié)果。PbAcPbAc2 2棉花用量棉花用量60mg, 高度高度60-80mm 使砷化氫以適宜的速度通過。使砷化氫以適宜的速度通過。75（4）HgBr2試紙的作用試紙的作用 HgBr2試紙

32、與試紙與AsH3作用生成砷斑作用生成砷斑. HgBr2試紙較試紙較HgCl2試紙靈敏試紙靈敏 但生成砷斑不夠穩(wěn)定但生成砷斑不夠穩(wěn)定 保持干燥避光保持干燥避光,立即比較立即比較76（5）反應(yīng)的最佳條件）反應(yīng)的最佳條件 Zn粒的大小及用量粒的大小及用量 大?。耗芡ㄟ^大?。耗芡ㄟ^1號號（8502000 m） 用量：約用量：約2g 標準砷溶液標準砷溶液 2 ml (1 g /ml) 臨用新配根據(jù)限度不同改變?nèi)恿浚焊鶕?jù)限度不同改變?nèi)恿浚喝恿浚喝恿浚?L為為2ppm；S=1g L為為1ppm；S=2g21S=L10106 6 反應(yīng)溫度：反應(yīng)溫度： 2540 C、45min774.2 4.2 古蔡氏

33、法特點古蔡氏法特點優(yōu)點：優(yōu)點：靈敏度高靈敏度高(1 g As)缺點缺點：Sb干擾干擾 本法適用于不含本法適用于不含Sb或含或含Sb量小于量小于100 g的供試品。的供試品。78 (二二) 二乙基二硫代氨基甲酸銀法二乙基二硫代氨基甲酸銀法 (Ag-DDC法，法， silver diethyldithiocarbamate) AgSSCNC2H5C2H5砷鹽的限量檢查砷鹽的限量檢查, 微量砷鹽的含量測定。微量砷鹽的含量測定。 本法適用于含本法適用于含SbSb量小于量小于500500 g g的供試品。的供試品。791. 原原 理理 第二步第二步：第一步第一步：同：同古蔡氏法古蔡氏法生成砷化氫生成砷化

34、氫3332AsHAsOHHClZn 目視比色法目視比色法 儀器分析儀器分析 510nm 3AsH6Ag(DDC)3As(DDC)6AgHDDC6Ag紅色膠態(tài)銀紅色膠態(tài)銀802. Ag-DDC法的特點法的特點優(yōu)點：優(yōu)點： a. 靈敏度高靈敏度高 0.5 gAs/30mL. b.可限量還可定量（儀器測定）可限量還可定量（儀器測定） c. Sb干擾小干擾小81v與第一法相比，前者生成與溴化汞生與第一法相比，前者生成與溴化汞生成砷斑，后者則被吸收反應(yīng)。成砷斑，后者則被吸收反應(yīng)。l結(jié)果較穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。結(jié)果較穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。l本法適用于含本法適用于含SbSb量小于量小于500500 g g的供試品。的供

35、試品。82(三三) 白田道夫法白田道夫法 對對含銻藥物含銻藥物中砷鹽的檢查中砷鹽的檢查不能不能用古蔡法用古蔡法, ,需需用白田道夫法用白田道夫法.灰色銻斑（干擾）銻鹽 23HgBrSbHH83六、溶液顏色檢查法六、溶液顏色檢查法1 1、目的：、目的：控制藥物中有色雜質(zhì)限量。控制藥物中有色雜質(zhì)限量。第一法第一法 目視比色法目視比色法 即與標準比色液即與標準比色液比較的方法，全波長范圍定性觀察。比較的方法，全波長范圍定性觀察。顏色較深時顏色較深時平視平視顏色較顏色較淺淺時時從上向下從上向下 觀察方法觀察方法 84標準比色液的配制標準比色液的配制 不同量水稀釋不同量水稀釋22724K Cr OCoC

36、lCuSO 不同比例、溶液五種色調(diào)標準儲備液每種色調(diào)下10個色號標準比色液85第二法第二法 分光光度法分光光度法 單一波長定量單一波長定量第三法第三法 色差計法色差計法 全波長范圍定量全波長范圍定量86七、易碳化物檢查法七、易碳化物檢查法 1、目的：、目的：檢查藥物中遇檢查藥物中遇H2SO4易炭化易炭化 或易被氧化呈色的微量有機雜質(zhì)。或易被氧化呈色的微量有機雜質(zhì)。 2、操作：、操作：對照管：對照管：樣品管：樣品管：對照液對照液+供試品供試品H2SO4+供試品供試品振搖振搖振搖振搖溶液溶液溶液溶液白色背景，平視比色不得白色背景，平視比色不得更深更深87對照液對照液：（1）“溶液顏色檢查溶液顏色檢

37、查”項下的標準比色項下的標準比色液液（2）由）由CoCl2，K2Cr2O7，CuSO4液按規(guī)液按規(guī) 定方法配成的對照液定方法配成的對照液88八、澄清度檢查法八、澄清度檢查法1、目的：、目的：檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項檢查。用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項檢查。 2、檢查方法、檢查方法：對照法：對照法 比較比較供試品溶液供試品溶液供試品供試品規(guī)定級號的濁度標準液規(guī)定級號的濁度標準液3 3、判斷：、判斷： 供供澄清度澄清度= = 溶劑溶劑澄清度澄清度， 供供濁度濁度 0.5 0.5號濁度標準液。號濁度標準液。澄清澄清894、討論：、討論：

38、濁度標準液的配制濁度標準液的配制1.001.00硫酸肼溶液硫酸肼溶液+10+10烏洛托品溶液烏洛托品溶液( (等量等量) ) 濁度標準液濁度標準液 （5 5個級號：）個級號：） 濁度標準原液濁度標準原液 稀釋稀釋 (151000(151000） 稀釋稀釋 濁度標準儲備液濁度標準儲備液烏洛托品烏洛托品H+水解水解甲醛甲醛+ +肼肼縮合縮合甲醛腙甲醛腙（白色渾濁）白色渾濁）配制原理：配制原理：90九、熾灼殘渣檢查法九、熾灼殘渣檢查法 1 1、目的：、目的：檢查有機藥物中混入的各種無機檢查有機藥物中混入的各種無機雜質(zhì)雜質(zhì)( (金屬氧化物或鹽類金屬氧化物或鹽類) )。樣品炭化后樣品炭化后+ H2SO4

39、濕潤濕潤700800 灼燒灼燒 熾灼殘渣熾灼殘渣（硫酸灰分）（硫酸灰分）限量一般為限量一般為0.1%0.2%2 2、原理：、原理：熾灼殘渣量一般為熾灼殘渣量一般為12mg.913. 3. 操作方法操作方法殘渣（恒重）殘渣（恒重）蒸氣除盡蒸氣除盡至放冷放冷至全部黑色、無煙霧，至全部黑色、無煙霧，熾灼至恒重的坩堝熾灼至恒重的坩堝樣品樣品高溫灼燒濕潤，直火加熱直火緩緩加熱8007004215 . 0SOHSOH42ml%100% 供試品重供試品重空坩堝重空坩堝重殘渣及坩堝重殘渣及坩堝重熾灼殘渣熾灼殘渣92 4. 4. 討論討論 （1 1）若殘渣需留作重金屬檢查，則）若殘渣需留作重金屬檢查，則500500600600熾灼至恒重。熾灼至恒重。 （2 2）加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸）加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機物炭化。鹽，并幫助有機物炭化。93十、干燥失重測定法十、干燥失重測定法1 1、干燥失重：、干燥失重：是指藥物在規(guī)定條件下，經(jīng)是指藥物在規(guī)定條件下