水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定_第1頁(yè)
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1、水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定生物制藥二班 五組實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解和學(xué)習(xí)水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定原理和測(cè)定意義2、學(xué)習(xí)和掌握用稀釋平板計(jì)數(shù)法測(cè)定水中細(xì)菌總數(shù)的方法實(shí)驗(yàn)儀器和用具1、純凈水、自來水樣品,牛肉膏、蛋白胨、Nacl、瓊脂、水、滅菌的錐形瓶、移液槍、槍頭、燒杯、玻璃棒、試管、培養(yǎng)皿、瓷缸、微波爐、高壓蒸汽滅菌鍋、酒精燈實(shí)驗(yàn)原理 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用平板計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)測(cè)定水中細(xì)菌總數(shù),由于水中細(xì)菌種類繁多,它們對(duì)營(yíng)養(yǎng)和其他生長(zhǎng)條件的要求差別很大,不可能找到一種培養(yǎng)基在一種條件下使水中所有的細(xì)菌均能生長(zhǎng)繁殖。因此,從一定的培養(yǎng)基平板上生長(zhǎng)出來的菌落計(jì)算出來的水中細(xì)菌總數(shù)僅是一種近似值,目前一般是采用普遍牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)

2、內(nèi)容與步驟一、制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:(1)稱量:牛肉膏1g、蛋白胨2g、Nacl1g、瓊脂4g、自來水500mL(2)溶解(3)加熱煮沸:用瓷缸盛裝溶解后的溶液,放在微波爐上加熱,并不斷攪拌,直至煮沸為止(4)裝瓶:用錐形瓶盛培養(yǎng)基,用棉塞塞住瓶口,再用報(bào)紙包住瓶口(5)滅菌:將裝好的培養(yǎng)基放入高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)滅菌二、倍比稀釋(1)編號(hào):取4支滅菌試管分別標(biāo)記純凈水原液、純凈水10倍、自來水原液、自來水10倍。另取12個(gè)培養(yǎng)皿分別標(biāo)記純凈水原液、純凈水10倍、自來水原液、自來水10倍各三個(gè)培養(yǎng)皿。(2)取樣:取10mL的純凈水放入純凈水原液的試管中,另取10mL的自來水放入自來水原液的試管中。(3)倍比稀釋:用滅菌的移液槍吸取純凈水原液1mL,放入純凈水10倍的試管內(nèi)(注:每吸取一次液體,需要更換移液槍的槍頭)然后吸取無菌水9mL放入純凈水10倍的試管內(nèi)。自來水的倍比稀釋也是同理。(4)倒平板:分別取1mL純凈水原液、純凈水0.1、自來水原液、自來水0.1放入編號(hào)號(hào)的無菌平皿內(nèi),并混合均勻,每個(gè)稀釋度做3個(gè)平板,然后在酒精燈周圍往每個(gè)平皿內(nèi)倒入融化后并冷卻至4550左右的牛肉膏

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