原料藥分析方法開(kāi)發(fā)流程

1、原 料 藥 分析方 法 開(kāi) 發(fā)流程分析方法在藥物的研發(fā)過(guò)程中起到的是“燈塔”的作用，是原料藥及制劑開(kāi)發(fā)、質(zhì)量控制的標(biāo)尺及眼睛，因此分析方法在藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中起到了領(lǐng)航員的作用。下面簡(jiǎn)單的介紹一下原料藥分析方法的開(kāi)發(fā)流程。原料藥的分析方法開(kāi)發(fā)一般分為兩大部分：1、起始物料的分析方法開(kāi)發(fā)；2、中間體及API的分析方法開(kāi)發(fā)。按照正常的邏輯順序，應(yīng)該是起始物料的分析方法開(kāi)發(fā)先行，但是一般在實(shí)際操作過(guò)程中，往往是中間體及 API的分析方法先行開(kāi)發(fā)。 主要是因?yàn)?，在打通工藝路線(xiàn)時(shí)期或者是文 獻(xiàn)調(diào)研的階段，主要是針對(duì)中間體及 API的分析方法的工作。只有在工藝優(yōu)化的中期或者中后期， 對(duì)起始物料廠(chǎng)家基本選定時(shí)才

2、會(huì)有針對(duì)性的啟動(dòng)起始物料的分析方法開(kāi)發(fā)工作。雖然如此，考慮到邏輯順序，還是按照起始物料、中間體、API這樣的順序進(jìn)行逐一介紹。一、起始物料1、合成路線(xiàn)的獲取在啟動(dòng)分析方法開(kāi)發(fā)工作之前，一定要獲得起始物料廠(chǎng)家提供的合成路線(xiàn)，需要包括以下幾點(diǎn)：起始物料、中間體、反應(yīng)溶劑、后處理溶劑及關(guān)鍵催化劑等。如果廠(chǎng)家提供反應(yīng)步驟過(guò)長(zhǎng)，一般選擇3-5步即可。2、雜質(zhì)分析結(jié)合起始物料廠(chǎng)家提供的工藝路線(xiàn)，對(duì)可能存在或者產(chǎn)生的各種雜質(zhì)進(jìn)行詳細(xì)的分析，為分析方法開(kāi)發(fā)的方向奠定一個(gè)基礎(chǔ)，也好對(duì)所需要的儀器耗材有提前的準(zhǔn)備。一般涉及雜質(zhì)如下:雜質(zhì)種類(lèi)雜質(zhì)主要來(lái)源一般檢測(cè)手段一般所需耗材普通雜質(zhì)起始物料、中間體、副產(chǎn)物、 降

3、解產(chǎn)物HPLC普通C18柱、氨基柱手性雜質(zhì)含手性中心的化合物、引入 手性的反應(yīng)HPLG旋光儀手性柱GTI起始物料、中間體、副產(chǎn)物HPLC LC-MS GC-MS普通C18柱、毛細(xì)管柱重金屬催化劑原子吸收、ICP-MS、藥典通用方法空心陰極燈、鉛標(biāo)準(zhǔn)溶 液溶劑殘留反應(yīng)溶劑、后處理溶劑、副 產(chǎn)物GC細(xì)管柱無(wú)機(jī)鹽縛酸劑、干燥劑、調(diào)節(jié)pH的試劑比濁法、熾灼殘?jiān)⒈壬ㄏ鄳?yīng)的分析溶劑3、分析方法的開(kāi)發(fā)起始物料路線(xiàn)中所涉及的雜質(zhì)種類(lèi)，進(jìn)行對(duì)應(yīng)分析方法的開(kāi)發(fā)。以廠(chǎng)家COA及提供的分析方 法為基礎(chǔ)，結(jié)合自身工藝對(duì)起始物料質(zhì)量的要求，建立適合自己的起始物料內(nèi)控方法。4、分析方法的驗(yàn)證在API工藝進(jìn)行逐級(jí)放大前，

4、取得起始物料供應(yīng)商提供的不小于 3批的中試生產(chǎn)批量樣品, 使用一批次進(jìn)行分析方法驗(yàn)證工作， 其余批次進(jìn)行分析方法重現(xiàn)工作， 同時(shí)也是為了驗(yàn)證廠(chǎng)家提 供起始物料質(zhì)量的穩(wěn)定和可控。5、雜質(zhì)限度制定的依據(jù)根據(jù)多批次起始物料的檢測(cè)結(jié)果，以及API雜質(zhì)限度的要求，結(jié)合工藝路線(xiàn)對(duì)雜質(zhì)的清除能力，制定起始物料中雜質(zhì)的限度。需重點(diǎn)關(guān)注基因毒性雜質(zhì)及毒性較大的試劑溶劑。物料名稱(chēng)制定依據(jù)起始物料1、結(jié)合自身工藝対雜質(zhì)的清除效率；2、結(jié)合自身工藝所涉及溶劑；3、相關(guān)起始物料所涉及 GTI及手性雜質(zhì)的引入；中間體1、結(jié)合自身工藝対雜質(zhì)的清除效率2、結(jié)合之后反應(yīng)對(duì)水分及溶劑殘留的要求3、GTI及手性雜質(zhì)的引入4、API

5、中關(guān)鍵雜質(zhì)的要求API1、結(jié)合反應(yīng)體系中較大雜質(zhì)和清除率較低的雜質(zhì)情況2、結(jié)合指導(dǎo)原則要求3、結(jié)合所涉及溶劑及催化劑的情況、中間體中間體分為過(guò)程控制及質(zhì)量控制，過(guò)程控制主要監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)行的程度，質(zhì)量控制是制定中間體的中控標(biāo)準(zhǔn)。1、過(guò)程控制方法1）過(guò)程控制方法的開(kāi)發(fā)根究反應(yīng)液的具體情況以及涉及物料自身的性質(zhì)，中間體的過(guò)程控制方法可以選擇TLC或者HPLC的手段進(jìn)行控制。一般在反應(yīng)過(guò)程中主要關(guān)心的是原料的剩余及產(chǎn)物的生成情況，所以確 保在原料及產(chǎn)物峰周?chē)鷽](méi)有干擾。如果有需要特殊關(guān)注的雜質(zhì)，也需確保雜質(zhì)的分離度、峰純度等。2）過(guò)程控制方法的驗(yàn)證如果過(guò)程控制的方法只是定性的檢測(cè)，在方法驗(yàn)證時(shí)一般只需進(jìn)行

6、：專(zhuān)屬性、檢測(cè)限、耐用 性等方面的驗(yàn)證工作。如果涉及定量檢測(cè)的方法，則需要進(jìn)行全面的分析方法驗(yàn)證工作。2、質(zhì)量控制方法1）質(zhì)量控制方法的開(kāi)發(fā)對(duì)中間體的質(zhì)量控制， 一方面根據(jù)工藝優(yōu)化的結(jié)果制定質(zhì)量控制的限度，另一方面需要根據(jù)API質(zhì)量的要求對(duì)中間體所涉及雜質(zhì)的限度進(jìn)行定量的控制。當(dāng)然，質(zhì)量控制方面不只是雜質(zhì)限 度的控制，如果接下來(lái)的反應(yīng)是無(wú)水反應(yīng)，上一步的中間體依然需要對(duì)水分的限度進(jìn)行嚴(yán)格的控制。中間體的制備過(guò)程中，也會(huì)涉及 GTI、手性雜質(zhì)及重金屬等雜質(zhì)的研究。一般情況，此類(lèi)雜 質(zhì)最好放在中間體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中進(jìn)行， 如果控制有難度或者在之后的反應(yīng)過(guò)程中仍然會(huì)又引入及 生成，放在之后的步驟控制或者

7、 API控制均可。2）質(zhì)量控制方法的驗(yàn)證一般情況下，中間體的質(zhì)量控制均會(huì)涉及雜質(zhì)的定量檢測(cè)，因此中間體質(zhì)控方法的驗(yàn)證均需要按照定量檢測(cè)的方法進(jìn)行全面的分析方法驗(yàn)證工作。三、API同起始物料分析方法開(kāi)發(fā)基本一致，在API分析方法的開(kāi)發(fā)前期， 首先需要進(jìn)行有關(guān)化合物或者相似化合物分析方法的調(diào)研工作，其次進(jìn)行雜質(zhì)的分析工作。 針對(duì)不同類(lèi)型的雜質(zhì)選擇有針對(duì)性的文獻(xiàn)報(bào)道的方法為方法開(kāi)發(fā)的基礎(chǔ)，結(jié)合工藝本身，對(duì)分析方法進(jìn)行逐步的優(yōu)化。有關(guān)物質(zhì)的制定，可以根據(jù)靠近終反應(yīng)步驟的雜質(zhì)譜以及最后一步反應(yīng)的雜質(zhì)體系進(jìn)行制定。溶劑殘留的制定需要結(jié)合起始物料所涉及的溶劑，如果有與起始物料有差異的溶劑，那么差異溶劑需要在

8、起始物料中進(jìn)行控制；若能包含起始物料所涉及溶劑，可以將所用溶劑在終產(chǎn)品中進(jìn)行控制，起始物料中只需進(jìn)行干燥失重的檢測(cè)。同時(shí)，還需要關(guān)注一些潛在的溶劑，例如：反 應(yīng)中涉及苯的衍生物，也需要關(guān)注苯的殘留控制等。3、分析方法的開(kāi)發(fā)根據(jù)不同的雜質(zhì)種類(lèi)，API的分析方法涉及到普通雜質(zhì)、手性雜質(zhì)、殘留溶劑、基因毒性雜質(zhì)、重金屬等。普通雜質(zhì)：一般采用HPLC法,在進(jìn)行分析方法開(kāi)發(fā)之前， 首先要進(jìn)行充分的文獻(xiàn)調(diào)研工作， 查詢(xún)各國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)、文獻(xiàn)、專(zhuān)利中是否收載了相同或同類(lèi)化合物，以此為基礎(chǔ)進(jìn)行分析方法的開(kāi)發(fā)，結(jié)合API的理化性質(zhì)以及對(duì)各步反應(yīng)機(jī)理的分析，進(jìn)行分析方法的逐步優(yōu)化。 在分析方法優(yōu)化過(guò)程中，應(yīng)同時(shí)對(duì) A

9、PI進(jìn)行強(qiáng)制降解實(shí)驗(yàn)，評(píng)估分析方法對(duì)潛在降解產(chǎn)物的分離能力。手性雜質(zhì)：采用HPLC法，選用手性色譜柱或手性流動(dòng)相。對(duì)有多個(gè)手性中心的，對(duì)映異構(gòu) 體需采用手性色譜進(jìn)行分析，非對(duì)映異構(gòu)體，一般可與普通雜質(zhì)采用同一方法進(jìn)行控制。殘留溶劑：殘留溶劑采用 GC法，根據(jù)溶劑的種類(lèi)，選擇不同極性的色譜柱進(jìn)行分離。除要 關(guān)注合成工藝中使用的溶劑外，還需要關(guān)注潛在的殘留溶劑，如使用了甲苯，需要對(duì)苯進(jìn)行檢測(cè)與控制，使用了甲基叔丁基醚，需要關(guān)注叔丁醇的殘留，酯鍵斷裂過(guò)程中產(chǎn)生的醇類(lèi)等?；蚨拘噪s質(zhì)： 由于基因毒性雜質(zhì)的限度較低，對(duì)方法的靈敏度要求較高，一般要用到HPLC-MS或GC-MS在分析方法開(kāi)發(fā)中，需重點(diǎn)關(guān)注檢測(cè)限是否能滿(mǎn)足質(zhì)量控制的要求。重金屬：對(duì)于一般的重金屬，采用藥典通則的檢測(cè)方法即可，對(duì)于pd等重金屬需要特殊研究。4、分析方法的驗(yàn)