b相色譜儀(HPLC)設(shè)備驗(yàn)證方案及記錄

1、封面作者：PanHon glia ng僅供個(gè)人學(xué)習(xí)高效液相色譜儀驗(yàn)證設(shè)備驗(yàn)證記錄編號(hào)頁(yè)數(shù)版本題目2000起草人及日期審核人及日期批準(zhǔn)人及日期一、萬(wàn)案（一）驗(yàn)證目地：證實(shí)Echrom98高效液相色譜系統(tǒng)地流速、梯度混合比例、每M理論塔板數(shù)、重現(xiàn)性、分離度及噪聲、漂移等確實(shí)能達(dá)到生產(chǎn)要求，為生產(chǎn)提供依據(jù)（二）驗(yàn)證指標(biāo)：1、咼效液相系統(tǒng)地實(shí)際流速與設(shè)備顯示地?cái)?shù)值地偏差2、每M理論塔板數(shù)是否大于100003、分離度疋否大于1.54、各組分重現(xiàn)性是否良好5、噪聲、漂移實(shí)驗(yàn)是否達(dá)到要求（三）驗(yàn)證依據(jù)：1、 藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南2、 咼效液相色譜儀使用說(shuō)明書（四）驗(yàn)證地必備條件：1、潔凈容量瓶（100ml、20

2、0ml、500ml）2、d=0.1電子秤3、咼效液相處于正常運(yùn)行狀態(tài)4、已脫氣地流動(dòng)相5、潔凈廠房經(jīng)過(guò)驗(yàn)證并合格設(shè)備驗(yàn)證記錄編號(hào)題目頁(yè)數(shù)版本2000設(shè)備簡(jiǎn)況：本高效液相色譜系統(tǒng)由雙泵系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、樣品分離系統(tǒng)、檢 測(cè)系統(tǒng)及色譜工作站與打印系統(tǒng)組成，雙泵系統(tǒng)可由手動(dòng)（面板控制）或電腦控制任意設(shè)定流速、限壓及梯度洗脫條件.其限壓設(shè)定對(duì)儀器提供過(guò)壓保護(hù)，樣品分離系統(tǒng)主要由色譜柱及其保護(hù)柱組成，可按不同柱填料地功能與樣品組分性質(zhì)將樣品中各組分分離，在流動(dòng)相地作用下進(jìn)入檢測(cè)器,檢測(cè)系統(tǒng)為紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器,波長(zhǎng)在 190870nm 連續(xù)可調(diào)，衰減輸出信號(hào)方便，檢測(cè)靈敏，對(duì)紫外、可見(jiàn)區(qū)有 吸收地物質(zhì)均可

3、產(chǎn)生信號(hào)且與濃度成正比.色譜工作站可控制操作，記錄運(yùn)行信號(hào)，數(shù)據(jù)處理，保存并打印記錄文件使該系統(tǒng)可用于混合組分 地分離與純化，安裝在本崗位地主要作用是用于白介素一2 地最終純化，以除去其中地雜蛋白及其它組分并保持其生物活性 .設(shè)備驗(yàn)證記錄編號(hào)頁(yè)數(shù)版本題目2000設(shè)備資料檔案:高效液相 色譜儀A 泵B泵紫外可變波 長(zhǎng)檢測(cè)器Echrom98 色譜工作站出廠日期2001.11.022001.11.022001.05.102001.10.10設(shè)備出廠 編號(hào)P2600406P2600407U208157D200230S00本公司設(shè) 備編號(hào)FD-jx-01-01FD-jx-01-01FD-jx-01-02

4、FD-jx-01-03生產(chǎn)廠家大連依利特科學(xué)儀器有限公司電源220i22V頻率500.5Hz功耗200W流量范圍0.5ml/mi n50.0ml/min工作溫度535C濕度w85%相對(duì)濕度流量精確度 1.0%( 10ml/min)。 10ml/min)最高工作壓力20MPa (流量w10ml/min ); 10Mpa(流量30ml/mi n)流量穩(wěn)定度w1.5%RSD噪聲v士 2.0X10-4AU(254 nm)漂移v士 5.0X10-4AU/hr(254nm)安裝位置基因工程車間純化二室設(shè)備驗(yàn)證記錄編號(hào)頁(yè)碼版本題目2000二、設(shè)備安裝確認(rèn)：1電源設(shè)計(jì)要求安裝情況電壓220V頻率50Hz接地要

5、求接地結(jié)論：確認(rèn)人：日期：2、 振動(dòng)源及穩(wěn)定性：安放儀器地工作臺(tái)應(yīng)穩(wěn)固且寬度大于80cm,安裝處沒(méi)有振動(dòng)源.結(jié)論：確認(rèn)人：日期：3、安裝環(huán)境要求：安裝場(chǎng)所應(yīng)清潔無(wú)塵，無(wú)易燃易爆及腐蝕性氣體,排風(fēng) 良好,無(wú)較強(qiáng)地電場(chǎng)或磁場(chǎng).溫度1530E,相對(duì)濕度在20%85%范圍內(nèi).結(jié)論：確認(rèn)人：日期：4、 資料整理存放地點(diǎn) 操作說(shuō)明書維修手冊(cè)色譜工作站說(shuō)明書電腦系統(tǒng)說(shuō)明書 打印機(jī)說(shuō)明書設(shè)備驗(yàn)證記錄題目編號(hào)頁(yè)碼版本2000二、設(shè)備運(yùn)行確認(rèn)：1、泵地運(yùn)行確認(rèn)：1、1、打開泵電源，泵電源指示燈亮；1、2、屏幕顯示當(dāng)前壓力及前次設(shè)定地流速、限壓；1、3、按功能鍵，設(shè)定流速及限壓，屏幕上應(yīng)顯示與設(shè)定數(shù)值一樣地?cái)?shù)字；1

6、、4、將泵入口管放入裝有注射用水地血清瓶中，設(shè)定流速為10.0ml/min,限壓為10.0MPa,讓泵運(yùn)行,泵屏幕上顯示流速為10.0ml/min,限壓為10.0MPa壓力為1.2MPa,泵出口處有水流出；1、5、關(guān)閉電源，電源指示燈滅.結(jié)論：確認(rèn)人：日期：2、檢測(cè)儀地運(yùn)行確認(rèn)：2、1、打開檢測(cè)儀電源，屏幕上顯示數(shù)字；2、2、調(diào)節(jié)輸出衰減，不同衰減,屏幕上顯示數(shù)字不同；2、3、調(diào)節(jié)衰減，屏幕上顯示所調(diào)地結(jié)果；2、4、關(guān)閉檢測(cè)儀電源，屏幕上數(shù)字消失.結(jié)論：確認(rèn)人：日期：3、電腦系統(tǒng)地運(yùn)行確認(rèn)：3、1、打開電腦主機(jī)及顯示器電源，電源指示燈亮；3、2、將電腦進(jìn)入工作站系統(tǒng)，電腦立即進(jìn)入工作站系統(tǒng)；3

7、、3、設(shè)定梯度,以注射用水為流動(dòng)相，讓泵運(yùn)行,泵按設(shè)定地梯度運(yùn)行并記錄 結(jié)果3、4、按工作站地程序保存運(yùn)行結(jié)果，退出工作站；3、5、關(guān)閉電腦電源，電源指示燈滅.結(jié)論：確認(rèn)人：日期：設(shè)備驗(yàn)證記錄編號(hào)頁(yè)碼版本題目2000四、設(shè)備性能確認(rèn)：1預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證：檢查泵連接管路是否暢通，確認(rèn)系統(tǒng)密封性是否良好及限壓保護(hù)是否正常.1、1系統(tǒng)密封性實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)格按該儀器使用說(shuō)明書連接泵、過(guò)濾網(wǎng)、 進(jìn)樣器、色譜柱、保護(hù)柱、檢測(cè)器及其廢液排出管路，檢查電源連接符合要求后開啟電源，以100%甲醇為流動(dòng)相，按功能選擇設(shè)定流速為20ml/min,限壓為10.0MPa.按說(shuō)明書啟動(dòng)儀器，觀察泵地聲音正常.氣泡 排盡后，廢液出口流

8、出液體，證明管路暢通，待壓力平穩(wěn)后保持10 min,用濾紙檢查各管路接口處應(yīng)無(wú)濕跡卸下色譜柱，堵住泵出口端（壓力 傳感器以下），使壓力達(dá)到9.0MPa,系統(tǒng)仍無(wú)泄露及運(yùn)行管路無(wú)氣泡產(chǎn) 生.結(jié)論：確認(rèn)人：日期：1、2限壓保護(hù)實(shí)驗(yàn)：以HPLC級(jí)水為流動(dòng)相，選擇功能設(shè)定一限壓為2.0MPa.再逐漸加大流速使實(shí)際壓力逐漸達(dá)到2.0MPa.在實(shí)際壓力達(dá)到限定壓力（2.0MPa）地一秒鐘內(nèi)，泵自動(dòng)停止，證明限壓保護(hù)（2.0MPa）合格,再于保護(hù)柱前 端增加一0.22um濾膜，目前限壓為5.0MPa,逐漸加大流速（流速為35ml/min），至 柱壓實(shí)際達(dá)到5.0MPa時(shí)泵自動(dòng)停止，限壓為5.0MPa合格.同

9、法設(shè)定為10.0MPa泵 自動(dòng)停止結(jié)論：確認(rèn)人：日期：1、3流速及梯度混合實(shí)驗(yàn)：1、3、1流速各設(shè)定單泵流速分別為5ml/min, 10ml/min, 15ml/min, 20ml/min, 30ml/min,以 注射用水為流動(dòng)相，于廢液出口用潔凈并已稱重地容量瓶（100 ml,200 ml,500ml）分別收集各流速10分鐘流動(dòng)相流出液地重量，用d=0.1g電子秤稱重，計(jì)算其 實(shí)際流速，結(jié)果見(jiàn)下表,測(cè)三次：設(shè)備驗(yàn)證方案題目編號(hào)頁(yè)碼版本2000第一次運(yùn)行結(jié)果：設(shè)定流(ml/mi n)10 分鐘流出液 重量(g)水溫(C)水密度(g)實(shí)際流速(ml/mi n)偏差%5A1015泵20305B10

10、15泵2030操作人：復(fù)核人：日期：第二次運(yùn)行結(jié)果：設(shè)定流(ml/mi n)10 分鐘流出液 重量(g)水溫(C)水密度(g)實(shí)際流速(ml/mi n)偏差%A泵510152030B泵510152030操作人：復(fù)核人：日期：設(shè)備驗(yàn)證記錄題目編號(hào)頁(yè)碼版本2000第三次運(yùn)行結(jié)果:設(shè)定流(ml/mi n)10 分鐘流出液 重量(g)水溫(C)水密度(g)實(shí)際流速(ml/mi n)偏差%A泵510152030B泵510152030操作人：復(fù)核人：日期:驗(yàn)證結(jié)果：驗(yàn)證人員：日期：1、3、2梯度混合實(shí)驗(yàn)：由梯度控制裝置設(shè)置階梯式地梯度洗脫程序設(shè)定溶劑A為注射用水,B為0.1%丙酮水溶液,B經(jīng)由5個(gè)階梯從0

11、%變到100%,設(shè)定梯 度見(jiàn)下表.開機(jī)后先以A溶劑沖洗系統(tǒng)，待基線平穩(wěn)后開始執(zhí)行梯度程序，畫出梯度 變化曲線.求出各溶劑配比時(shí)地輸出信號(hào)值或記錄儀讀數(shù)重復(fù)測(cè)量三次，計(jì)算平均值.從B溶劑地含量及相對(duì)應(yīng)地輸出信號(hào)值或記錄儀讀數(shù)？i(第i段梯度準(zhǔn)確度,%)和？第i段輸出信號(hào)值或記錄儀讀數(shù)平均值)計(jì)算梯度準(zhǔn)確度Gci(各段輸出信號(hào) 值或記錄儀讀數(shù)平均值)，取Gci最大者作為儀器梯度準(zhǔn)確度誤差運(yùn)行結(jié)果見(jiàn)附圖計(jì)算公式：Gci二(?i-?m)/?mX100%題目設(shè)備驗(yàn)證記錄編號(hào)頁(yè)碼版本2000設(shè)定梯度如下:時(shí)間（min）流速（ml/min）A%B%梯度狀態(tài)020100013020r 100015020802

12、018020r 80201100206040113020r 60401150204060118020r 40601200202080123020r 20801250200100128020r 01001計(jì)算結(jié)果如下:B溶液梯度0%20%40%60%80%100%記錄儀讀數(shù)（電信號(hào)）123?i-?m123Gci123設(shè)備驗(yàn)證記錄題目編號(hào)頁(yè)碼版本2000運(yùn)行結(jié)果見(jiàn)附圖：第一次運(yùn)行結(jié)果圖：操作人：復(fù)核人：日期：第二次運(yùn)行結(jié)果圖：操作人：復(fù)核人：日期：第三次運(yùn)行結(jié)果圖：操作人：復(fù)核人：日期：驗(yàn)證結(jié)果：驗(yàn)證人員：日期：設(shè)備驗(yàn)證記錄題目編號(hào)頁(yè)碼版本20002、系統(tǒng)適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)2、1每M理論塔板數(shù)測(cè)定：嚴(yán)格按

13、該儀器使用說(shuō)明書操作，條件為：ODSCi8柱,規(guī)格為2X25cm,粒徑20卩m孔徑300?,紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm輸 出衰減為0.005流動(dòng)相A為0.1%TFA水溶液，流動(dòng)相B為0.1%TFA乙腈溶液，流 速為10ml/min.樣品為硝基苯，濃度為10%,進(jìn)樣量100ui.在50%B狀態(tài)下洗脫，測(cè)三 次，運(yùn)行結(jié)果見(jiàn)附圖：第一次每M塔板數(shù)：N=5.54(tR/W1/2)2X000/250=操作人：復(fù)核人：日期：第二次每M塔板數(shù)：N=5.54(tR/W1/2)2X000/250=操作人：復(fù)核人：日期：第三次每M塔板數(shù)：N=5.54(tR/W1/2)2X000/250=操作人：復(fù)核人：日期：

14、驗(yàn)證結(jié)果：驗(yàn)證人員：日期：2、2分離度測(cè)定：嚴(yán)格按該儀器使用說(shuō)明書操作，條件為：ODSC18柱規(guī)格為2X25cm,粒徑20卩m孔徑300?,紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm輸出衰 減為0.005,流動(dòng)相A為注射用水，流動(dòng)相B為純甲醇，流速為10ml/min.樣品為8ul/ ml硝基苯、2.04mg/ml萘地溶液，進(jìn)樣量為50ul.在70%B狀態(tài)下洗脫，測(cè)三次,結(jié)果 見(jiàn)附圖：設(shè)備驗(yàn)證記錄題目編號(hào)頁(yè)碼版本2000第一次分離度R=(tR2-tRi)/(W1+W2)=操作人：復(fù)核人：日期：第二次分離度R=(tR2-tRi)/(W1+W2)=操作人：復(fù)核人：日期：第三次分離度R=(tR2-tRi)/(Wi

15、+W2)=操作人：復(fù)核人：日期：驗(yàn)證結(jié)果：驗(yàn)證人員：日期：2、3重現(xiàn)性測(cè)定：嚴(yán)格按該儀器使用說(shuō)明書操作，條件為：ODSC18柱,規(guī)格為2X25cm,粒徑20卩m孔徑300?,紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm輸出衰 減為0.005,流動(dòng)相A為注射用水，流動(dòng)相B為純甲醇，流速為10ml/min.樣品為8ui/ ml硝基苯、2.04mg/ml萘地溶液，進(jìn)樣量為50ul.在70%B狀態(tài)下洗脫.系統(tǒng)于前次 運(yùn)行結(jié)束后充分洗脫，經(jīng)流動(dòng)相平衡1小時(shí)以上，重新進(jìn)樣，在相同條件下運(yùn)行，見(jiàn)附 圖：操作人：復(fù)核人：日期：驗(yàn)證結(jié)果：驗(yàn)證人員：日期：設(shè)備驗(yàn)證記錄題目編號(hào)頁(yè)碼版本20002、4噪聲、漂移測(cè)試：選用C18色譜

16、柱,100%甲醇為流動(dòng)相,流速為10ml/min,紫外檢測(cè)儀地波長(zhǎng)為254nm,衰減器調(diào)到最靈敏檔（即0.005），開機(jī)預(yù) 熱，待儀器穩(wěn)定后記錄基線60 min,計(jì)算基線噪聲和漂移.峰形圖：第一次：基線噪聲：漂移：操作人：復(fù)核人：日期：第二次：基線噪聲：漂移：操作人：復(fù)核人：日期：第三次：基線噪聲：漂移：操作人：復(fù)核人：日期：設(shè)備驗(yàn)證記錄題目編號(hào)頁(yè)碼版本2000驗(yàn)證結(jié)果：驗(yàn)證人員： 日期：2、5色譜工作站功能地確認(rèn)：電腦系統(tǒng)工作界面為Windows98,內(nèi)存為64MB,運(yùn)行速度快，操作方便,可任意設(shè)置文件名并予以保存，調(diào)出及控制操作，符合 色譜工作站EChrom98地要求.色譜工作站為EChr

17、om98中文下拉式菜單，適用于 液相系統(tǒng)地控制操作，且儀器帶遙控裝置，便于工作系統(tǒng)地啟動(dòng)與停止，輸出信號(hào)標(biāo) 尺可任意調(diào)節(jié)，且?guī)Ь植繏呙韫δ?，信?hào)數(shù)顯功能可設(shè)定任意工作方法與程序，并便 于保存與調(diào)出，中文式界面與輸入便于操作人員使用，符合液相色譜地一般要求結(jié)論：驗(yàn)證人員：日期：設(shè)備驗(yàn)證記錄題目編號(hào)頁(yè)碼版本2000結(jié)論分析:版權(quán)申明本文部分內(nèi)容，包括文字、圖片、以及設(shè)計(jì)等在網(wǎng)上搜集整理。版權(quán)為潘宏亮個(gè)人所有This article in eludes some parts, in cludi ng text, pictures, and desig n.Copyright is Pan Hon g

18、lia ngs pers onal own ership.用戶可將本文的內(nèi)容或服務(wù)用于個(gè)人學(xué)習(xí)、研究或欣賞，以及 其他非商業(yè)性或非盈利性用途，但同時(shí)應(yīng)遵守著作權(quán)法及其他相關(guān) 法律的規(guī)定，不得侵犯本網(wǎng)站及相關(guān)權(quán)利人的合法權(quán)利。除此以 外，將本文任何內(nèi)容或服務(wù)用于其他用途時(shí)，須征得本人及相關(guān)權(quán) 利人的書面許可，并支付報(bào)酬。Users may use the contents or services of this article for pers onalstudy, research or appreciati on, and other non-commercial or non-profitpurposes, but at the same time, they shall abide by the provisions ofcopyright law and other releva nt laws, and shall not infringe upon thelegitimate rights