促黃體生成素檢測(cè)試劑

1、附件 1促黃體生成素檢測(cè)試劑（膠體金免疫層析法） 注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則本指導(dǎo)原則的編寫目的是指導(dǎo)和規(guī)范促黃體生成素檢測(cè)試 劑（膠體金免疫層析法） 產(chǎn)品注冊(cè)申報(bào)過程中審查人員對(duì)注冊(cè)資 料的技術(shù)審評(píng)，同時(shí)也可指導(dǎo)申請(qǐng)人的產(chǎn)品注冊(cè)申報(bào)。本指導(dǎo)原則是對(duì)促黃體生成素檢測(cè)試劑（膠體金免疫層析 法）的一般要求， 申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是 否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù) 產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。本指導(dǎo)原則是供申請(qǐng)人和審查人員使用的指導(dǎo)文件， 不涉及 注冊(cè)審批等行政事項(xiàng)， 亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行， 如有能夠滿足法 規(guī)要求的其他方法， 也可以采用，

2、 但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn) 證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、 標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定 的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展， 本 指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。一、適用范圍本指導(dǎo)原則適用于采用雙抗體夾心膠體金免疫層析技術(shù)原 理對(duì)人體尿液中促黃體生成素進(jìn)行定性或半定量體外檢測(cè)的產(chǎn) 品。根據(jù)體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法 （國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號(hào)）、食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分 類子目錄的通知 （食藥監(jiān)械管 2013242 號(hào)），促黃體生成素 檢測(cè)試劑（膠體金免疫層析法）屬于二類醫(yī)療器械， 分類代碼為 6840。

3、二、注冊(cè)申報(bào)資料要求（一）綜述資料 促黃體生成素（ Luteinizing Hormone ）是促性腺激素的一種 糖蛋白激素， 簡(jiǎn)稱促黃體生成素， 亦稱促間質(zhì)細(xì)胞激素 （ICSH ）。 是由腦垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的一種大分子糖蛋白，由a和B兩個(gè)亞基非共軛結(jié)合形成， 其中B亞基具有決定其分子特異性的 構(gòu)型特征，可以識(shí)別適當(dāng)?shù)陌薪M織， 并與特定的受體結(jié)合， 進(jìn)而 發(fā)揮其生理功能， 主要作用是刺激卵巢內(nèi)成熟卵子的釋放。 正常 女性體內(nèi)保持有微量的促黃體生成素， 在月經(jīng)中期促黃體生成素 激素的分泌量快速增加， 形成一個(gè) “促黃體生成素峰 ”，并在此后 2460 小時(shí)內(nèi)刺激卵巢內(nèi)成熟卵的釋放。因此，“

4、促黃體生成素峰”前后 13 天內(nèi)婦女最易受孕。1. 預(yù)期用途：通過定性或半定量檢測(cè)女性尿液中促黃體生成 素的水平， 以預(yù)測(cè)排卵時(shí)間， 用于指導(dǎo)育齡女性選擇最佳受孕時(shí) 機(jī)或指導(dǎo)安全期避孕。2. 產(chǎn)品描述2.1 產(chǎn)品原理：本試劑運(yùn)用雙抗體夾心膠體金免疫層析技術(shù) 定性或半定量檢測(cè)人體尿液中的促黃體生成素。 檢測(cè)時(shí)， 當(dāng)待測(cè) 樣本中的促黃體生成素濃度等于或高于臨界值時(shí)， 將與膠體金標(biāo) 記的抗?fàn)t促黃體生成素單克隆抗體反應(yīng)形成復(fù)合物，在層析作用下反應(yīng)復(fù)合物沿著硝酸纖維素膜向前移動(dòng)， 被硝酸纖維素膜上檢 2 測(cè)區(qū)（T）預(yù)先包被的抗 a促黃體生成素單克隆抗體捕獲，最終 在檢測(cè)區(qū)（T）有紅色條帶出現(xiàn)即為陽性，

5、提示 促黃體生成素峰” 出現(xiàn)。 當(dāng)待測(cè)樣本中促黃體生成素濃度低于臨界值時(shí)，在檢測(cè)區(qū)（T）形成一條顏色淺于質(zhì)控區(qū)（ C）的紅色反應(yīng)線或無紅色反 應(yīng)線出現(xiàn)，此時(shí)檢測(cè)結(jié)果為陰性，表示非 “促黃體生成素峰 ”。無 論待測(cè)樣本中是否含有促黃體生成素，質(zhì)控區(qū)（C）都會(huì)形成一條肉眼可見的紅色反應(yīng)線， 這是判斷樣本量是否足夠、 層析過程 是否正常的標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)也作為本試劑的內(nèi)控。膠體金法半定量試劑的顯示指示系統(tǒng)則是在此基礎(chǔ)上， 對(duì)結(jié) 果判斷的方法有所不同。 半定量試劑主要是通過樣本檢測(cè)線的實(shí) 際色度與試劑盒配套的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)線色度卡進(jìn)行色度對(duì)比，記錄相應(yīng)的色度數(shù)值， 繪制促黃體生成素曲線， 從而得到使用者自己的 “

6、促黃體生成素峰”值。2.2 主要原材料及來源：應(yīng)明確產(chǎn)品主要原材料（如所用抗 體，硝酸纖維素膜）的生產(chǎn)廠家和純度級(jí)別。2.3 工藝流程：生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)詳細(xì)明確產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝流程， 明確工藝流程中的關(guān)鍵工藝、 特殊過程， 明確需在潔凈環(huán)境中生 產(chǎn)的工藝以及對(duì)應(yīng)的環(huán)境級(jí)別。3. 有關(guān)生物安全性的說明：人源性材料須對(duì)有關(guān)傳染?。?HIV 、HBV 、HCV 、TP 等）病原體檢測(cè)予以說明，并提供相 關(guān)的證明文件。 其他動(dòng)物源及微生物來源的材料， 應(yīng)當(dāng)提供相應(yīng) 的說明文件， 證明其在產(chǎn)品運(yùn)輸、 使用過程中對(duì)使用者和環(huán)境是 安全的，并對(duì)上述原材料所采用的滅活等試驗(yàn)方法予以說明。4. 有關(guān)產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總

7、結(jié)和評(píng)價(jià)：總結(jié)主要原材料研 究、主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究、 分析性能的評(píng)估及產(chǎn)品穩(wěn) 3 定性研究等驗(yàn)證的情況5. 同類產(chǎn)品上市情況介紹。包括同類產(chǎn)品在國(guó)內(nèi)外批準(zhǔn)上市的情況。 相關(guān)產(chǎn)品所采用的 技術(shù)方法及臨床應(yīng)用情況， 申請(qǐng)注冊(cè)產(chǎn)品與國(guó)內(nèi)外同類產(chǎn)品的異 同等。 對(duì)于新研制的體外診斷試劑產(chǎn)品， 需要提供被測(cè)物與預(yù)期 適用的臨床適應(yīng)證之間關(guān)系的文獻(xiàn)資料。（二）主要原材料的研究資料（如需提供）1. 試劑所用抗體的制備、篩選、純化以及鑒定等詳細(xì)試驗(yàn)資 料。如抗體為申請(qǐng)人自制， 其工藝必須相對(duì)穩(wěn)定， 應(yīng)詳述抗體的 名稱及生物學(xué)來源，申請(qǐng)人對(duì)該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求（如外觀、 純度、蛋白濃度、效價(jià)等） ，確

8、定該抗體作為主要原材料的依據(jù)； 若購(gòu)買，其供應(yīng)商要求相對(duì)固定， 不能隨意變更供應(yīng)商，如果供 應(yīng)商有變更， 應(yīng)依據(jù)國(guó)家相關(guān)法規(guī)的要求進(jìn)行變更申請(qǐng)； 應(yīng)詳述 抗體的名稱及生物學(xué)來源， 外購(gòu)方名稱， 提交外購(gòu)方出具的抗體 性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書， 詳述申請(qǐng)人對(duì)該抗體技術(shù)指標(biāo)的要求以及 申請(qǐng)人確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)。2. 其他主要原輔料的選擇及驗(yàn)證資料， 如硝酸纖維素膜 /醋酸 纖維膜、膠體金、反應(yīng)緩沖液、在生產(chǎn)過程中作為蛋白保護(hù)劑用 途的一類生物原料（如：牛血清白蛋白等） ，申請(qǐng)人應(yīng)詳述每一 原輔料技術(shù)指標(biāo)的要求以及確定該原輔料作為主要原輔料的依 據(jù)。若為外購(gòu)， 應(yīng)詳述每一原輔料的外購(gòu)方名稱并提

9、交外購(gòu)方出 具的每一原輔料性能指標(biāo)及檢驗(yàn)證書。 應(yīng)參照 金標(biāo)類檢測(cè)試劑 注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則 （食藥監(jiān)辦械函 2013 3 號(hào)）原材料 質(zhì)量控制的內(nèi)容進(jìn)行相關(guān)研究。3. 企業(yè)內(nèi)部參考品的原料選擇、 制備、定值過程及試驗(yàn)資料。 4 （三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）1. 主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡(jiǎn)要說明主 要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。 企業(yè)應(yīng)采用經(jīng)過驗(yàn)證， 能夠保證產(chǎn)品質(zhì) 量的生產(chǎn)工藝。2. 產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。3. 抗體包被工藝研究，申請(qǐng)人應(yīng)考慮如包被液量、濃度、時(shí) 間等指標(biāo)對(duì)產(chǎn)品性能的影響，通過試驗(yàn)確定上述指標(biāo)的最佳組 合。4. 實(shí)驗(yàn)體系反應(yīng)條件確定：申請(qǐng)人應(yīng)考慮

10、反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)溫 度、膜孔徑大小（或移行速度）等條件對(duì)產(chǎn)品性能的影響，通過 試驗(yàn)確定上述條件的最佳組合。5. 體系中反應(yīng)時(shí)間的確定：申請(qǐng)人應(yīng)考慮產(chǎn)品加樣端浸入樣 本液時(shí)間、 樣本加樣后觀察時(shí)間對(duì)產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果的影響， 通過實(shí) 驗(yàn)確定最佳的加樣時(shí)間、觀察時(shí)間。6. 半定量產(chǎn)品可包括比色卡的相關(guān)生產(chǎn)內(nèi)容。（四）分析性能評(píng)估資料 企業(yè)應(yīng)提交在產(chǎn)品研制階段對(duì)試劑進(jìn)行的所有性能驗(yàn)證的 研究資料，包括具體研究方法、內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)分析 等詳細(xì)資料。 對(duì)于促黃體生成素檢測(cè)試劑， 建議著重對(duì)以下性能 進(jìn)行分析研究。1. 定性產(chǎn)品1.1 臨界值的確定用空白對(duì)照液和含有 10mIU/mL 、25mIU/mL

11、 、50mIU/mL 促 黃體生成素標(biāo)準(zhǔn)品的樣品液分別測(cè)定同批號(hào)試紙， 每個(gè)濃度測(cè)定 3 條，結(jié)果顯示臨界值應(yīng)為 25mIU/mL 。1.2分析特異性1.2.1交叉反應(yīng)用于促黃體生成素定性檢測(cè)試劑交叉反應(yīng)驗(yàn)證的激素種類 及濃度主要考慮為：200mlU/mL的促卵泡激素（FSH）標(biāo)準(zhǔn)品樣 品液和250 pIU/mL的促甲狀腺素（TSH ）標(biāo)準(zhǔn)品樣品液。1.2.2干擾物質(zhì)潛在的干擾物質(zhì)主要包括：乳糜尿、血尿、膽紅素陽性、渾 濁的尿液以及相關(guān)藥物。1.3陽性/陰性參考品企業(yè)內(nèi)部陽性/陰性參考品應(yīng)可溯源到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品。1.4.鉤狀（HOOK ）效應(yīng)目前，促黃體生成素檢測(cè)試劑大多采用夾心法的原理檢測(cè)樣 本

12、，考慮到方法學(xué)的缺陷，有必要對(duì)鉤狀（HOOK ）效應(yīng)進(jìn)行考慮，如圖1所示。圖1免疫復(fù)合物（IC）沉淀量與抗原抗體量的關(guān)系建議采用高濃度的促黃體生成素抗原參考品進(jìn)行梯度稀釋 后由低濃度至高濃度開始檢測(cè)， 每個(gè)梯度的抗原稀釋液重復(fù) 35 份，將顯色深度隨濃度升高反而變淺時(shí)的濃度作為出現(xiàn)鉤狀效應(yīng) 時(shí)促黃體生成素抗原的最低濃度， 建議產(chǎn)品說明書上明示出現(xiàn)鉤 狀效應(yīng)時(shí)促黃體生成素抗原的最低濃度。1.5 重復(fù)性建議選取包括臨界值在內(nèi)的多個(gè)濃度樣品進(jìn)行多次檢測(cè)， 不 同濃度樣本的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)一致， 顯色度應(yīng)均一。 在分析試劑重復(fù) 性時(shí)， 不應(yīng)使用強(qiáng)陽性樣品或明顯陰性的樣品， 否則無法客觀地 評(píng)價(jià)其檢測(cè)效果。1

13、.6 批間差建議選取臨界值附近的樣品， 用三個(gè)批號(hào)的促黃體生成素檢 測(cè)試劑，每個(gè)批號(hào)抽取相同數(shù)量， 按照說明書步驟操作，對(duì)重復(fù) 性進(jìn)行檢測(cè)，三個(gè)批號(hào)的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)一致，顯色度均一。1.7 人抗鼠抗體（ HAMA ）效應(yīng) 如果用到的抗體來源為鼠抗， 則應(yīng)考慮人抗鼠抗體 （ HAMA ） 效應(yīng)。 鼠源性單抗對(duì)人體具有異種蛋白的免疫原性， 在人體內(nèi)半 衰期較短，多次使用可引起人抗鼠抗體（ HAMA ）的產(chǎn)生，從而 使其應(yīng)用受到限制。注：可參考文件 EP7-A2 臨床生化干擾測(cè)試 。1.8 校準(zhǔn)品溯源及質(zhì)控品賦值（如涉及）校準(zhǔn)品、 質(zhì)控品應(yīng)提供詳細(xì)的量值溯源資料， 包括定值試驗(yàn) 資料和溯源性文件等。應(yīng)參

14、照 GB/T 21415 2008體外診斷醫(yī) 療器械 生物樣品中量的測(cè)量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性的要求，提供企業(yè)（工作）校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品 定值及不確定度計(jì)算記錄， 提供質(zhì)控品賦值及其靶值范圍確定的 記錄。1.9 其他需要注意的問題如注冊(cè)申請(qǐng)中包括不同適用機(jī)型， 需要提交在不同機(jī)型上進(jìn) 行上述項(xiàng)目評(píng)估的試驗(yàn)資料及總結(jié)。如注冊(cè)申請(qǐng)中包含不同的包裝規(guī)格， 需要對(duì)不同包裝規(guī)格之 間的差異進(jìn)行分析或驗(yàn)證。 如不同的包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差 異，需要提交采用每個(gè)包裝規(guī)格產(chǎn)品進(jìn)行的上述項(xiàng)目評(píng)估的試驗(yàn) 資料及總結(jié)。 如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異， 需要提交包 裝規(guī)格之間不存在性能差異的

15、詳細(xì)說明， 具體說明不同包裝規(guī)格 之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。2. 半定量產(chǎn)品建議申報(bào)產(chǎn)品至少具備以下性能指標(biāo)， 具體指標(biāo)要求及實(shí)驗(yàn) 方法則由申報(bào)單位根據(jù)自己產(chǎn)品的特性制定及驗(yàn)證。2.1 準(zhǔn)確度。2.2 最低檢出量。2.3 重復(fù)性。2.4 批間差。2.5 特異性（應(yīng)包括尿液的本底影響） 。2.6 校準(zhǔn)品溯源及質(zhì)控品賦值（如涉及） 。校準(zhǔn)品、 質(zhì)控品應(yīng)提供詳細(xì)的量值溯源資料， 包括定值試驗(yàn) 資料和溯源性文件等。 半定量產(chǎn)品所用到的標(biāo)準(zhǔn)比色卡， 應(yīng)提供 相應(yīng)的溯源性資料。 8 2.7 其他需要注意的問題（五）陽性判斷值或參考區(qū)間確定資料 應(yīng)當(dāng)詳細(xì)說明陽性判斷值確定的方法或依據(jù)， 說明確定陽性 判斷

16、值所采用的樣本來源， 并提供陽性判斷值確定的詳細(xì)試驗(yàn)資 料及總結(jié)。 半定量產(chǎn)品則應(yīng)根據(jù)醫(yī)學(xué)上促黃體生成素的不同分泌 期分別進(jìn)行參考區(qū)間的研究。應(yīng)明確研究采用的樣本來源、 詳細(xì)的試驗(yàn)資料、 統(tǒng)計(jì)方法等。 參考值范圍可參考公認(rèn)的權(quán)威資料 / 臨床比對(duì)試劑，但應(yīng)當(dāng)進(jìn)行 驗(yàn)證。驗(yàn)證樣本數(shù)量應(yīng)不低于 120 例。不同樣本類型（隨機(jī)尿、 晨尿等）應(yīng)分別進(jìn)行研究。研究結(jié)論應(yīng)與產(chǎn)品說明書 【參考區(qū)間】 的相應(yīng)描述保持一致。（六）穩(wěn)定性研究資料 穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容： 考核試劑的穩(wěn)定性和 適用樣本的穩(wěn)定性研究。 前者主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、 高溫加速破 壞穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性及開封穩(wěn)定性（如涉及）等研究，

17、樣本穩(wěn) 定性則應(yīng)考慮尿液標(biāo)本的受影響因素， 如收集尿液的時(shí)間、 方法、 類型（隨機(jī)尿、晨尿等） 、不同促黃體生成素的分泌期、飲水等 諸多影響因素。 申請(qǐng)人可根據(jù)自身產(chǎn)品的實(shí)際情況需要選擇合理 的穩(wěn)定性研究方案并進(jìn)行驗(yàn)證。 穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法 的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。 對(duì)于 實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究， 應(yīng)提供至少三批成品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至 成品有效期后的研究資料。（七）臨床評(píng)價(jià)資料 臨床評(píng)價(jià)資料應(yīng)符合 關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù) 9 指導(dǎo)原則的通告 （國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2014 年第 16 號(hào)）要求，同時(shí)研究資料的形式應(yīng)符合體外診斷試劑注冊(cè) 管理

18、辦法（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第 5 號(hào)）和關(guān)于公 布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告 （國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2014 年第 44 號(hào)）臨床研究 資料有關(guān)的規(guī)定。下面僅對(duì)臨床試驗(yàn)中的基本問題進(jìn)行闡述。1.研究方法 選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市的性能不低于考核試劑、 預(yù)期用途一致 的同類產(chǎn)品作為對(duì)比試劑， 與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究， 證明考核試 劑與已上市產(chǎn)品等效。2.臨床研究單位的選擇2.1 第二類產(chǎn)品申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)選定不少于 2 家（含 2 家）臨床 試驗(yàn)機(jī)構(gòu)，按照有關(guān)規(guī)定開展臨床試驗(yàn)。2.2 臨床試驗(yàn)樣品的生產(chǎn)應(yīng)當(dāng)符合醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系的 相關(guān)要求。3. 臨床試驗(yàn)方案臨床試

19、驗(yàn)實(shí)施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、 統(tǒng)計(jì)學(xué)、 臨床醫(yī) 學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等多方面考慮， 設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床研究方案。 臨 床研究方案應(yīng)符合倫理學(xué)的相關(guān)要求。 各研究單位選用的對(duì)比試 劑應(yīng)一致，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。另外，考核試劑的樣本 類型不應(yīng)超越對(duì)比試劑對(duì)樣本類型的檢測(cè)要求， 如果選擇了對(duì)比 試劑適用樣本類型以外的樣本，則應(yīng)采用其他方式進(jìn)行驗(yàn)證。各臨床研究機(jī)構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)一致， 且保證在整個(gè)臨床試驗(yàn) 過程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動(dòng)。 10 4. 研究對(duì)象的選擇4.1 臨床試驗(yàn)樣本量的確定：申請(qǐng)人 /臨床研究者應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品 臨床使用目的，與該產(chǎn)品相關(guān)疾病的臨床發(fā)生率確定臨床研究的 樣本量。在

20、符合指導(dǎo)原則有關(guān)最低樣本量要求的前提下，還應(yīng)符 合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。4.1.1 臨床試驗(yàn)的總樣本數(shù)至少為 200 例。4.1.2 應(yīng)考慮樣本量的分布。樣本量的選擇應(yīng)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)及 相關(guān)指導(dǎo)原則的要求。 半定量產(chǎn)品所選樣本則應(yīng)在促黃體生成素 醫(yī)學(xué)不同分泌期內(nèi)均勻分布。4.1.3 入選樣本應(yīng)包含陽性、陰性樣本，樣本應(yīng)盡可能均勻 分布，盡可能收集 /獲取臨界值的樣本，并考慮弱陽性樣本。其 中，不低于 25 mIU/mL 的樣本應(yīng)不少于總樣本的 30% 。4.2 應(yīng)明確臨床樣本的采集要求。4.2.1 盡可能采用新鮮樣品，避免貯存。4.2.2 明確具體的收集樣本的方法、時(shí)間等要求。4.2.3 對(duì)檢測(cè)結(jié)果有明顯干

21、擾作用的樣本，如乳糜尿、血尿、 膽紅素陽性或渾濁的尿液樣本盡量避免使用。4.3 試驗(yàn)方案中應(yīng)確定病例或樣本納入 /排除標(biāo)準(zhǔn)，已經(jīng)入選的 病例或樣本再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。4.4 變更事項(xiàng)相關(guān)的臨床試驗(yàn)：涉及產(chǎn)品檢測(cè)條件優(yōu)化、增 加與原樣本類型具有可比性的其他樣本類型等變更事項(xiàng)， 產(chǎn)品臨 床試驗(yàn)總樣本數(shù)至少為 100 例，并在至少 2 家（含 2 家）臨床試 驗(yàn)機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)；變更抗原、抗體等主要原材料的供應(yīng)商、 陽性判斷值或參考區(qū)間的變化及增加臨床適應(yīng)證等變更事項(xiàng)， 應(yīng) 根據(jù)產(chǎn)品具體變更情況，酌情增加臨床試驗(yàn)總樣本數(shù)。5. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析建議統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

22、進(jìn)行分析， 統(tǒng)計(jì)分 析應(yīng)可以證明兩種試劑的檢測(cè)結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異， 即考核試劑與 對(duì)比試劑基本等效。5.1 定性試劑 應(yīng)分析考核試劑的陽性符合率、陰性符合率、總體符合率、 考核試劑和對(duì)比試劑的一致性 （如 kappa 值） 以驗(yàn)證兩種試劑定 性結(jié)果的一致性。5.2 半定量試劑 應(yīng)分析考核試劑的陽性符合率、陰性符合率、總體符合率， 并按照促黃體生成素不同的分泌期對(duì)樣本的檢測(cè)結(jié)果分別進(jìn)行 匯總， 采用合理的統(tǒng)計(jì)方法對(duì)其進(jìn)行分析， 以驗(yàn)證考核試劑與對(duì) 比試劑整體檢測(cè)不同分泌期促黃體生成素樣本時(shí)結(jié)果的等效性（如RXC卡方分析）。6. 結(jié)果差異樣本的驗(yàn)證在數(shù)據(jù)收集過程中， 對(duì)兩種試劑檢測(cè)結(jié)果不一致的樣本，

23、 應(yīng) 采用“金標(biāo)準(zhǔn) ”或其他合理的方法進(jìn)行復(fù)核， 以便對(duì)臨床試驗(yàn)結(jié)果 進(jìn)行分析。 如無需復(fù)核，應(yīng)詳細(xì)說明理由。 同時(shí)結(jié)合患者的臨床 病情對(duì)差異原因及可能結(jié)果進(jìn)行分析。（八）產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析資料對(duì)體外診斷試劑產(chǎn)品生命周期的各個(gè)環(huán)節(jié)， 從預(yù)期用途、 可 能的使用錯(cuò)誤、 與安全性有關(guān)的特征、 已知和可預(yù)見的危害等方 面的判定以及對(duì)患者風(fēng)險(xiǎn)的估計(jì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析、 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)和相應(yīng) 的風(fēng)險(xiǎn)控制基礎(chǔ)上， 形成風(fēng)險(xiǎn)管理報(bào)告。 應(yīng)當(dāng)符合相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 的要求。主要參考 YY/T 0316 2016醫(yī)療器械 風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī) 12 療器械的應(yīng)用 。風(fēng)險(xiǎn)管理活動(dòng)要貫穿產(chǎn)品設(shè)計(jì)、生產(chǎn)、上市后 使用及產(chǎn)品處理的整個(gè)生命周期。 要體

24、現(xiàn)申請(qǐng)人風(fēng)險(xiǎn)管理活動(dòng)計(jì) 劃的完整性， 尤其上市管理的風(fēng)險(xiǎn)分析與評(píng)價(jià)過程。 對(duì)于上市前 風(fēng)險(xiǎn)管理中尚未認(rèn)知的風(fēng)險(xiǎn)， 應(yīng)在上市后開展信息收集， 一旦發(fā) 現(xiàn)異常及時(shí)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)，采取控制措施，更新風(fēng)險(xiǎn)管理文件。（九）產(chǎn)品技術(shù)要求 申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下， 根據(jù)申 請(qǐng)人產(chǎn)品研制、前期臨床評(píng)價(jià)等結(jié)果， 依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 及有關(guān)文獻(xiàn)， 按照關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原 則的通告（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2014 年第 9號(hào)）的 有關(guān)要求， 編寫產(chǎn)品技術(shù)要求， 內(nèi)容主要包含產(chǎn)品性能指標(biāo)和檢 驗(yàn)方法。下面就目前與促黃體生成素檢測(cè)試劑（膠體金免疫層析法） 相關(guān)的常用

25、文件和主要性能指標(biāo)等相關(guān)內(nèi)容做簡(jiǎn)要敘述。1. 產(chǎn)品適用的相關(guān)文件：GB/T 18990 2008 促黃體生成素檢測(cè)試紙（膠體金免疫 層析法）注：以上標(biāo)準(zhǔn)使用最新版本。注冊(cè)申請(qǐng)人應(yīng)關(guān)注相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的有效性。 申請(qǐng) 人亦可根據(jù)自身產(chǎn)品的特點(diǎn)補(bǔ)充引用其他標(biāo)準(zhǔn)。2. 主要技術(shù)指標(biāo)本章列舉了促黃體生成素檢測(cè)試劑 （膠體金免疫層析法） 的 基本技術(shù)指標(biāo)， 企業(yè)可參考相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)， 根據(jù)企業(yè)自身產(chǎn)品的技 術(shù)特點(diǎn)和用途制定相應(yīng)的性能指標(biāo)。 技術(shù)要求應(yīng)包括但不限于以 下內(nèi)容：2.1 定性產(chǎn)品2.1.1 物理性狀a. 外觀應(yīng)整潔完整、無毛刺、無破損、無污染；材料附著牢固。b. 寬度寬度應(yīng)2.5mm。c.

26、移行速度液體移行速度應(yīng)不低于 10mm/min 。2.1.2 臨界值用空白 對(duì)照液和含有 10mIU/mL 、25mIU/mL 、50mIU/mL 促 黃體生成素標(biāo)準(zhǔn)品的樣品液分別測(cè)定同批號(hào)試紙， 每個(gè)濃度測(cè)定 3 條，結(jié)果顯示臨界值應(yīng)為 25mIU/mL 。注：該產(chǎn)品有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，應(yīng)使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品。2.1.3 特異性a. 與促卵泡激素（hFSH）的交叉反應(yīng)檢測(cè)濃度為 200 mIU/mL 的 FSH 標(biāo)準(zhǔn)品樣本液， 結(jié)果應(yīng)均為 陰性。b. 與促甲狀腺激素（hTSH ）的交叉反應(yīng)檢測(cè)濃度為250 pIU/mL的TSH標(biāo)準(zhǔn)品樣本液，結(jié)果應(yīng)均為 陰性。2.1.4 重復(fù)性用濃度依次為 10mIU/m

27、L 、25mIU/mL 和 50mIU/mL 的促黃 體生成素樣品液，分別測(cè)定同批號(hào)試紙，每個(gè)濃度測(cè)定 10 次， 每個(gè)濃度的反應(yīng)結(jié)果應(yīng)一致，顯色應(yīng)均一。 14 2.1.5 穩(wěn)定性在37C放置20天后，分別檢測(cè)2.1 2.4項(xiàng)，結(jié)果應(yīng)符合各 項(xiàng)目的要求。2.1.6 批間差取三個(gè)批號(hào)的促黃體生成素試紙， 檢測(cè)濃度為 25mIU/mL 的 促黃體生成素樣品液，反應(yīng)結(jié)果應(yīng)一致，顯色應(yīng)均一。2.2 半定量產(chǎn)品建議申報(bào)產(chǎn)品的性能應(yīng)不低于以下指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)方法， 具體要 求及方法由申報(bào)單位根據(jù)自身產(chǎn)品的特性制定及驗(yàn)證。2.2.1 物理性狀a. 外觀應(yīng)整潔完整、無毛刺、無破損、無污染；材料附著牢固。b. 寬度寬

28、度應(yīng)2.5mm。c. 移行速度液體移行速度應(yīng)不低于 10mm/min 。2.2.2 準(zhǔn)確性可參照 YY/T 04782011尿液分析試紙條中“準(zhǔn)確度”的 描述：檢測(cè)結(jié)果與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后配置的各濃度相差同向應(yīng)不 超過一個(gè)量級(jí)， 不得出現(xiàn)反向相差。 陽性參考溶液不得出現(xiàn)陰性 結(jié)果，陰性參考溶液不得出現(xiàn)陽性結(jié)果。用最 低檢 出量樣本作 為陽性參考液， 促 黃 體 生 成 素 0mIU/mL 作為陰性參考液。具體要求及方法由申報(bào)單位根據(jù)自身產(chǎn)品的特性制定及驗(yàn) 證，且標(biāo)準(zhǔn)比色卡應(yīng)具有明確的溯源性。注：該產(chǎn)品有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，應(yīng)使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品。2.2.3 最低檢出量 應(yīng)符合生產(chǎn)企業(yè)聲稱的要求，但不得高于 2

29、5 mIU/mL 。2.2.4 重復(fù)性隨機(jī)抽取同批試劑 10 份，檢測(cè)至少三個(gè)濃度水平的促黃體 生成素重復(fù)性參考品， 檢測(cè)線顯色應(yīng)均與對(duì)應(yīng)濃度色標(biāo)顏色深度 一致，顯色度均一。2.2.5 批間精密度隨機(jī)抽取三批試劑， 選取醫(yī)學(xué)決定水平處濃度的促黃體生成 素重復(fù)性參考品進(jìn)行檢測(cè)，重復(fù)檢測(cè) 10 次，檢測(cè)線顯色應(yīng)均與 對(duì)應(yīng)濃度色標(biāo)顏色深度一致，顯色度均一。（十）注冊(cè)檢驗(yàn)報(bào)告 根據(jù)關(guān)于公布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明 文件格式的公告 （國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2014 年第 44 號(hào)）要求，注冊(cè)檢驗(yàn)報(bào)告及產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評(píng)價(jià)意見應(yīng)由具 有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗(yàn)資質(zhì)和承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出

30、具。 該產(chǎn)品有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品， 應(yīng)當(dāng)使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行注冊(cè)檢驗(yàn)， 并符 合相關(guān)要求。（十一）產(chǎn)品說明書 說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、標(biāo)本采集及處理、實(shí)驗(yàn)方法、 檢測(cè)結(jié)果解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息， 是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員 正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依 據(jù)。因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)最重要的文件之一。結(jié)合關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告 16 （國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2014 年第 17號(hào)）的要求，下 面對(duì)促黃體生成素檢測(cè)試劑 （膠體金免疫層析法） 說明書的重點(diǎn) 內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明。1【產(chǎn)品名稱】1.1 試劑名稱由三部分組成。被測(cè)物質(zhì)的名稱、用途、

31、方法 或者原理。如：促黃體生成素檢測(cè)試劑（膠體金免疫層析法） 。1.2 英文名稱：英文名稱應(yīng)當(dāng)正確、完整，不宜只寫縮寫。2.【包裝規(guī)格】2.1 應(yīng)注明可測(cè)試的樣本數(shù)或裝量：如1 條 /袋（為最典型的包裝規(guī)格）：10 條 /盒。（1）應(yīng)與產(chǎn)品技術(shù)要求包裝規(guī)格一致； （2）如不同型號(hào)產(chǎn)品的包裝規(guī)格不同，應(yīng)分別進(jìn)行描述。3. 【預(yù)期用途】應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：3.1 第一段內(nèi)容詳細(xì)說明產(chǎn)品的預(yù)期用途，如定性或半定量 檢測(cè)等， 樣本類型和被測(cè)物等， 具體表述形式根據(jù)產(chǎn)品特點(diǎn)做適 當(dāng)調(diào)整。 如： 用于體外定性或半定量檢測(cè)女性尿液中的促黃體生 成素水平。3.2 第二段內(nèi)容說明與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)證

32、及背景情 況，說明相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法等。4. 【檢驗(yàn)原理】應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要成分詳細(xì)說明檢驗(yàn)原理、 方法， 必要時(shí)可采 用圖示方法描述。5. 【主要組成成分】5.1 說明試劑包含組成、數(shù)量等信息。 17 5.2 建議對(duì)所包被抗體的相關(guān)信息進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹。5.3 如試劑中包含耗材，應(yīng)列明耗材名稱、數(shù)量等信息。如 尿杯、自封袋等。6. 【儲(chǔ)存條件及有效期】對(duì)試劑盒的效期穩(wěn)定性、 開封穩(wěn)定性、 運(yùn)輸穩(wěn)定性等信息做 詳細(xì)介紹。 并對(duì)開封后未使用產(chǎn)品允許暴露于空氣中的溫度、 濕 度及期限等條件予以明確。7. 【樣本要求】重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：7.1 重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：樣本類型、處理、保存期限及保存 條件（

33、短期、長(zhǎng)期） ，運(yùn)輸條件等。冷藏 /冷凍樣本檢測(cè)前是否須 恢復(fù)室溫，可凍融次數(shù)。 特殊體液標(biāo)本還應(yīng)詳細(xì)描述對(duì)采集條件、 保存液、 容器等可能影響檢測(cè)結(jié)果的要求。 應(yīng)對(duì)已知的干擾物進(jìn) 行說明，同時(shí)列出干擾物的具體濃度。7.2 樣本是否受留樣時(shí)間、臨床癥狀、用藥情況等因素的影響，女口：采集尿樣前2小時(shí)應(yīng)避免大量喝水及其他水分?jǐn)z入以 免影響“促黃體生成素峰”值的檢測(cè)。建議收集尿液的時(shí)間是 XXXX 。7.3 如不能采用新鮮樣本應(yīng)注明樣本保存條件及期限。7.4 當(dāng)促黃體生成素濃度超過一定濃度時(shí)，可能發(fā)生鉤狀效 應(yīng)，若樣本稀釋后可再測(cè)，應(yīng)明確具體稀釋方法和比例。申報(bào)單位應(yīng)根據(jù)自身產(chǎn)品的特點(diǎn)研究制定樣本要求， 并對(duì)各 項(xiàng)要求進(jìn)行分析驗(yàn)證。8. 【檢驗(yàn)方法】詳細(xì)說明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟 18 8.1 實(shí)驗(yàn)環(huán)境：溫、濕度條件要求。8.2 試劑使用方法、 注意事項(xiàng)， 試劑條 /卡 /筆開封后注意事項(xiàng) 等。8.3 明確樣本加樣時(shí)間、觀察時(shí)間及加樣方法。8.4 為了更準(zhǔn)確地找到使用者個(gè)人的“促黃體生成素”峰值， 建議說明檢測(cè)頻率。如：開始檢測(cè)時(shí)，每天應(yīng)至少檢測(cè) 1 次。8.5 對(duì)于半定量產(chǎn)品，應(yīng)明確說明上樣量，以保證半定量結(jié) 果的準(zhǔn)確性。9. 【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】9.1