人教版高中生物選修3全套課件

1、基因工程操作環(huán)境操作環(huán)境操作對象操作對象操作水平操作水平基本過程基本過程結(jié)果結(jié)果生物體外生物體外基因基因分子水平分子水平剪切剪切拼接拼接導(dǎo)入導(dǎo)入表達表達人類需要的基因產(chǎn)物人類需要的基因產(chǎn)物一、基因工程一、基因工程 DNADNA重組技術(shù)重組技術(shù)實質(zhì)：實質(zhì)：基因重組基因重組二、基因操作的工具2 2、基因的的針線基因的的針線DNA連接酶連接酶連接的部位：連接的部位： 磷酸二酯鍵（在磷酸二酯鍵（在“梯子梯子”的扶手處），的扶手處）， 不是氫鍵（在不是氫鍵（在“梯子梯子”的踏板處）。的踏板處）。結(jié)果：結(jié)果：兩個相同的黏性末端的連接。兩個相同的黏性末端的連接。思考思考（）用（）用DNADNA連接酶連接兩個

2、相同的黏性末端要連接連接酶連接兩個相同的黏性末端要連接幾個磷酸二酯鍵？幾個磷酸二酯鍵？（）用限制酶切一個特定基因要切斷幾個磷酸二（）用限制酶切一個特定基因要切斷幾個磷酸二酯鍵？酯鍵？個個個個、基因的運輸工具、基因的運輸工具運載體運載體作用：作用：具備的條件具備的條件種類：種類：將外源基因送入受體細(xì)胞。將外源基因送入受體細(xì)胞。能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保存能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保存具有多個限制酶切點具有多個限制酶切點具有某些標(biāo)記基因具有某些標(biāo)記基因質(zhì)粒、噬菌體的衍生物和動植物病毒。質(zhì)粒、噬菌體的衍生物和動植物病毒。使用運載體的目的：使用運載體的目的：用它作為運載工具，將目的基用它作為運載工具

3、，將目的基因送到宿主細(xì)胞中去。因送到宿主細(xì)胞中去。 質(zhì)粒上會存在某些標(biāo)記基因，標(biāo)記基因有什么用途？質(zhì)粒上會存在某些標(biāo)記基因，標(biāo)記基因有什么用途？（鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因并篩選含目的基因的受（鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因并篩選含目的基因的受體細(xì)胞）體細(xì)胞） 思考思考三、基因操作的基本步驟1 1、目的基因的獲取、目的基因的獲取( (一一) )、目的基因主要是、目的基因主要是_編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因（二）、獲取目的基因的常用方法有哪些（二）、獲取目的基因的常用方法有哪些? ?（1 1）從基因文庫中獲?。幕蛭膸熘蝎@?。? 2）利用）利用PCRPCR技術(shù)擴增技術(shù)擴增（3 3）

4、人工合成）人工合成（1）、從基因文庫中獲取目的基因 將含有某種生物不同基因的許多將含有某種生物不同基因的許多DNADNA片斷，導(dǎo)片斷，導(dǎo)入到入到受體菌的群體受體菌的群體中，各個受體菌分別含有這種生中，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫物的不同基因，稱為基因文庫. .基因文庫基因文庫 基因組文庫基因組文庫部分基因文庫部分基因文庫（如（如:cDNA文庫）文庫）基因文庫基因文庫: : 概念：概念：PCRPCR全稱為全稱為_，是一項，是一項 在生物在生物_復(fù)制復(fù)制_的核酸合成技術(shù)的核酸合成技術(shù) 條件：條件：_、_、_ _ 、 _ . . 原理：原理：_多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外體

5、外特定特定DNADNA片段片段DNADNA雙鏈復(fù)制雙鏈復(fù)制模板模板DNA DNA 四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸DNADNA引物引物熱穩(wěn)定熱穩(wěn)定DNADNA聚合酶聚合酶利用利用PCRPCR擴增目的基因擴增目的基因過程：過程：a a、DNADNA變性變性（90-9590-95）：雙鏈）：雙鏈DNADNA模板模板 在熱作用下，在熱作用下，_斷裂，形成斷裂，形成_b b、退火、退火（復(fù)性復(fù)性55-6055-60）：系統(tǒng)溫度降低，引）：系統(tǒng)溫度降低，引 物與物與DNADNA模板結(jié)合，形成局部模板結(jié)合，形成局部_。 c c、延伸、延伸（70-7570-75）：在）：在TaqTaq酶的作用下，酶的作用下，合

6、成與模板互補的合成與模板互補的_。 D D、循環(huán)、循環(huán)氫鍵氫鍵單鏈單鏈DNADNA雙鏈雙鏈DNADNA鏈鏈人工合成：人工合成：根據(jù)已知的氨基酸序列合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA DNA 蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNAmRNA的核苷酸序列的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測推測推測推測目的基因目的基因化學(xué)合成化學(xué)合成2 2 基因表達載體的構(gòu)建：基因表達載體的構(gòu)建：它們有什么作用？它們有什么作用？a、目的基因、目的基因b、啟動子、啟動子c、終止子、終止子d、標(biāo)記基因、標(biāo)記基因位于基因的首端位于基因的首端,是是RNA聚聚合酶識別和結(jié)合位點合酶識別和結(jié)合位點位于基

7、因的末端位于基因的末端,終終止轉(zhuǎn)錄止轉(zhuǎn)錄鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因并篩鑒別受體細(xì)胞是否含有目的基因并篩選含目的基因的受體細(xì)胞選含目的基因的受體細(xì)胞3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（1）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法基因槍法花粉管通道法花粉管通道法（2 2）將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞）將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)：將基因表達載體提純，用顯微儀：將基因表達載體提純，用顯微儀注射到注射到受精卵受精卵中中（3 3）導(dǎo)入微生物細(xì)胞）導(dǎo)入微生物細(xì)胞原核生物特點：繁殖快、原核生物特點：繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少

8、用用CaCa2+2+處理細(xì)胞處理細(xì)胞 感受態(tài)細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞 表達載體與感受態(tài)細(xì)胞混合表達載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 感受態(tài)細(xì)感受態(tài)細(xì)胞吸收胞吸收DNADNA分子分子方法：方法：四四、目的基因的檢測與鑒定目的基因的檢測與鑒定檢測檢測導(dǎo)入檢測：目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞導(dǎo)入檢測：目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞DNADNADNADNA DNADNA分子雜交分子雜交表達檢測表達檢測轉(zhuǎn)錄檢測轉(zhuǎn)錄檢測分子雜交分子雜交翻譯檢測翻譯檢測抗原抗體抗原抗體雜雜交交分分子子檢檢測測法法鑒定鑒定抗蟲鑒定抗蟲鑒定抗病鑒定抗病鑒定活性鑒定等活性鑒定等個體水平的鑒定個體水平的鑒定小 結(jié)蛋白質(zhì)工程 蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)

9、構(gòu)規(guī)律及其是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ), ,通過通過基因修飾或基因合基因修飾或基因合成成, ,對現(xiàn)有對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造蛋白質(zhì)進行改造, ,或制造一種新的蛋白質(zhì)或制造一種新的蛋白質(zhì), ,以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。 蛋白質(zhì)工程流程圖1.從預(yù)期的蛋白質(zhì)從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能功能出發(fā)出發(fā)2.設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)3.推測應(yīng)用的推測應(yīng)用的氨基酸氨基酸序列序列4.找到相應(yīng)的找到相應(yīng)的脫氧核苷酸脫氧核苷酸序列序列比較：基因工程和蛋白質(zhì)工程基因工程基因工程蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程相同點相同點都要改造基因，都屬于分子

10、水平都要改造基因，都屬于分子水平產(chǎn)生新的產(chǎn)生新的基因型，無新基因基因型，無新基因基因（型）基因（型）產(chǎn)生的蛋白質(zhì)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)原有的原有的新的新的聯(lián)系聯(lián)系蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ)，蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ)，是基因工程的應(yīng)用和延伸是基因工程的應(yīng)用和延伸32用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV的的煙草，主要流程如圖煙草，主要流程如圖-21所示。所示。l l（1）經(jīng)過程獲得的目的基因兩側(cè)除應(yīng)含有相關(guān) 的酶切位點外，目的基因的兩端還必須有 。l（2）由圖分析，構(gòu)建的重組質(zhì)粒上含有的標(biāo)記基因是 基因。l（3）過程采用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營養(yǎng)成分外，

11、還必須添加 ，以保證受體細(xì)胞能培養(yǎng)再生成植株。限制酶限制酶l啟運子和終止子啟運子和終止子卡那霉素抗性卡那霉素抗性植物激素植物激素l21（6分，每空分，每空1分）分）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖甲、圖乙中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：l （1）一個圖甲所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma 切割前后，分別含有 、 個游離的磷酸基團。 （2）若對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的Sma酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越 。l（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Srna 切割，原因是 。l （4）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入 酶。l （5）重組質(zhì)粒中

12、抗生素抗性基因的作用是為了 。l21(6分，每空分，每空1分分) l（1）0、2l（2）高l（3）Sma會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因l（4）DNA連接l（5）鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞專題專題2 細(xì)胞工程細(xì)胞工程細(xì)細(xì)胞胞工工程程應(yīng)用的原理和方法應(yīng)用的原理和方法研究的水平研究的水平研究的目的研究的目的細(xì)胞生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)分子生物學(xué)細(xì)胞整體水平細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平或細(xì)胞器水平按照人們的意愿按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品細(xì)胞產(chǎn)品概念概念分類分類植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)是：

13、植物細(xì)胞工程的理論基礎(chǔ)是： 植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)是植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)是 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交全能性高低：全能性高低： 受精卵受精卵胚胎干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞生殖細(xì)胞體細(xì)胞生殖細(xì)胞體細(xì)胞植物細(xì)胞植物細(xì)胞動物細(xì)胞動物細(xì)胞2.1.1植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) 植物組織培養(yǎng)的條件植物組織培養(yǎng)的條件 1）離體細(xì)胞、組織或器官）離體細(xì)胞、組織或器官 2）適宜的外界環(huán)境條件，例如無菌、適宜的溫度、適宜的外界環(huán)境條件，例如無菌、適宜的溫度、濕度、光照等濕度、光照等 3）培養(yǎng)基）培養(yǎng)基（一定的營養(yǎng)物質(zhì)，一定

14、的營養(yǎng)物質(zhì)，植物激素植物激素） 植物組織培養(yǎng)的過程植物組織培養(yǎng)的過程離體的植物器官、組織或細(xì)胞離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化（又叫去分化）脫分化（又叫去分化）愈傷組織愈傷組織（排列疏松而無規(guī)則，高度液泡（排列疏松而無規(guī)則，高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞）化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞）再分化再分化根或芽等器官根或芽等器官植物體植物體植物植物A A細(xì)胞細(xì)胞植物植物B B細(xì)胞細(xì)胞去壁去壁原生質(zhì)體原生質(zhì)體A A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B B原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合融合體融合體再生壁再生壁雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞細(xì)胞分裂細(xì)胞分裂愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株去壁的常用方法：去壁的常用方法：酶解法（纖維素酶、果膠酶

15、等）酶解法（纖維素酶、果膠酶等） 原生質(zhì)體融合方法原生質(zhì)體融合方法：物理法：離心、振動、電刺激等物理法：離心、振動、電刺激等 化學(xué)法：聚乙二醇（化學(xué)法：聚乙二醇（PEGPEG） 植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交概念：概念：應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)，快速繁殖植物（也叫應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)，快速繁殖植物（也叫快速繁殖技術(shù)快速繁殖技術(shù)）原理：原理：植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性優(yōu)點：優(yōu)點：繁殖率高，可大批量生產(chǎn)繁殖率高，可大批量生產(chǎn) 取材少取材少 培養(yǎng)周期短培養(yǎng)周期短 保持優(yōu)良性狀保持優(yōu)良性狀2.1.2植物細(xì)胞工程的實際應(yīng)用作物脫毒作物脫毒l病毒在作物體內(nèi)逐年積累，會導(dǎo)致作物產(chǎn)量病毒在作物體內(nèi)逐年積累，會導(dǎo)致作物

16、產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差降低，品質(zhì)變差l分生區(qū)附近（莖尖、根尖）的病毒極少，甚分生區(qū)附近（莖尖、根尖）的病毒極少，甚至沒有至沒有l(wèi)采用莖尖進行植物組織培養(yǎng)采用莖尖進行植物組織培養(yǎng)人工種子人工種子l結(jié)構(gòu)：結(jié)構(gòu)：l人工薄膜人工薄膜+ +胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽l技術(shù)：技術(shù)：l植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)l原理：原理：l植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性單倍體育種單倍體育種l方法：方法：l花藥離體培養(yǎng)（植物組織培養(yǎng)）花藥離體培養(yǎng)（植物組織培養(yǎng)） l技術(shù)：技術(shù)：l組織培養(yǎng)獲得單倍體組織培養(yǎng)獲得單倍體l秋水素處理單倍體的幼苗，使染色體加倍秋水素處理單倍體的幼苗，使染色體加倍l優(yōu)點：優(yōu)點：l明

17、顯縮短了育種年限明顯縮短了育種年限l后代穩(wěn)定遺傳后代穩(wěn)定遺傳2.1.2植物細(xì)胞工程的實際應(yīng)用植物細(xì)胞工程的實際應(yīng)用l繁殖植物的新途徑繁殖植物的新途徑l微型育種微型育種l作物脫毒作物脫毒l人工種子人工種子l育種新方法育種新方法l單倍體育種單倍體育種l誘導(dǎo)突變體誘導(dǎo)突變體l細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)紅豆杉與紫杉醇紅豆杉與紫杉醇人參皂甘的生產(chǎn)人參皂甘的生產(chǎn)2.2動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合單克隆抗體技術(shù)單克隆抗體技術(shù)核移植核移植動物動物細(xì)胞細(xì)胞工程工程常用常用技術(shù)技術(shù)2、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程：動物胚胎或幼齡動動

18、物胚胎或幼齡動物的組織、器官物的組織、器官細(xì)胞懸液細(xì)胞懸液胰蛋白酶胰蛋白酶10代細(xì)胞代細(xì)胞原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)50代細(xì)胞代細(xì)胞傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞株無限傳代無限傳代細(xì)胞系細(xì)胞系單個細(xì)胞單個細(xì)胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)未改變未改變遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)已改變已改變動物組織細(xì)胞間隙中動物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織定彈性和韌性的組織和器官。和器官。（分解彈性纖維）（分解彈性纖維）細(xì)胞貼壁過程細(xì)胞貼壁過程植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項目比較項目植

19、物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理原理植物細(xì)胞的全能植物細(xì)胞的全能性性細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特有成分蔗糖蔗糖 植物激素植物激素葡萄糖葡萄糖 動物血清動物血清培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果植物體植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的快速繁殖、培育快速繁殖、培育無病毒植株無病毒植株獲得細(xì)胞或細(xì)胞獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白分泌蛋白2.2.21、動物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）、動物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）2個或多個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程細(xì)胞細(xì)胞A細(xì)胞細(xì)胞B雜交細(xì)胞雜交細(xì)胞滅活的病毒滅

20、活的病毒物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法仙臺病毒仙臺病毒皰疹病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒新城雞瘟病毒一、動物細(xì)胞融合一、動物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較比較項目比較項目植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜一定流動性、細(xì)胞膜一定流動性、 細(xì)胞膜一定流動細(xì)胞膜一定流動性性細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法物理（離心、振蕩、物理（離心、振蕩、電刺激）電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）化學(xué)（聚乙二醇）物理、化學(xué)方法物理

21、、化學(xué)方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒用途用途獲得雜種植株獲得雜種植株制備單克隆抗體制備單克隆抗體單克隆抗體單克隆抗體 由單個由單個B B淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖淋巴細(xì)胞經(jīng)過無性繁殖（克?。纬苫蛐拖嗤募?xì)胞群，（克?。?，形成基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體異性強的抗體稱為單克隆抗體。稱為單克隆抗體。 特點：特點：特異性強、靈敏度高、能大量制備、特異性強、靈敏度高、能大量制備、 如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？l利用利用B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能l利用腫瘤細(xì)胞無限增殖的特性利用腫瘤細(xì)

22、胞無限增殖的特性l利用細(xì)胞融合的技術(shù)將利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融兩種細(xì)胞融合合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的性的雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞l利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞交瘤細(xì)胞 單克隆抗體制備過程單克隆抗體制備過程 注射抗原注射抗原B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群胞群體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體 1 下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計的生產(chǎn)破下圖為某同

23、學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實驗方案傷風(fēng)桿菌抗體的實驗方案2、該方案能達到預(yù)期效果嗎？為什么？、該方案能達到預(yù)期效果嗎？為什么？4、圖中、圖中B為為_過程，常用過程，常用_作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承承_的遺傳特性，既能的遺傳特性，既能_,又能又能_。1、該實驗方案的目的是、該實驗方案的目的是_3、A是從小鼠的脾臟中取得是從小鼠的脾臟中取得_,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生該細(xì)胞能夠產(chǎn)生_5、C過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括_培養(yǎng)和培養(yǎng)和_培養(yǎng)兩個階段。培養(yǎng)兩個階段。制備單克隆抗體制備單克隆抗體B細(xì)胞細(xì)胞抗體抗體細(xì)胞融合細(xì)胞融合滅活病毒滅活病毒雙親細(xì)胞

24、雙親細(xì)胞分泌特異分泌特異性抗體性抗體無限增殖無限增殖原代原代傳代傳代50B體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC2 2、下圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此圖回答、下圖是動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請據(jù)此圖回答 (1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自_。(2)容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是_，然后用 酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開來。這樣做的目的是_. (3)培養(yǎng)首先在B瓶中進行。瓶中的培養(yǎng)基成分有_ _等。(4)為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中，用_處理，然后配置成_，再分裝。(5)在

25、C瓶中正常培養(yǎng)了一段時間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡。原因是_。幼齡動物的器官或組織、動物胚胎幼齡動物的器官或組織、動物胚胎剪碎剪碎 胰蛋白胰蛋白 使每個細(xì)胞能與培養(yǎng)液接觸使每個細(xì)胞能與培養(yǎng)液接觸 葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清動物血清 胰蛋白酶胰蛋白酶 細(xì)胞懸液細(xì)胞懸液細(xì)胞沒有發(fā)生瘤癌變細(xì)胞沒有發(fā)生瘤癌變l22(11分，每空分，每空1分分) 下圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答：l(1)若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已處理，一般用 法除去 ；A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的化學(xué)方法是用 加以誘導(dǎo)。融合完成的標(biāo)志是 。l(2)若A、B是植物細(xì)胞，則形成的D細(xì)

26、胞一般應(yīng)用 技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。l(3)若A、B是動物細(xì)胞，一般取自 ，然后用 處理使其分散開來。l(4)若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠B淋巴細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已被注射了 ，圖中B為 。在A、B到C的過程中，所形成的C有 種，用來培養(yǎng)的D細(xì)胞應(yīng)該是 。l22(11分，每空分，每空1分分) l（1）酶解 細(xì)胞壁 聚乙二醇 形成新的細(xì)胞壁l （2）植物組織培養(yǎng) l（3）幼齡動物組織或胚胎 胰蛋白酶 l （4）相應(yīng)的抗原 骨髓瘤細(xì)胞 3 雜交瘤細(xì)胞l操作對象：操作對象：早期胚胎和配子早期胚胎和配子l技術(shù)手段技術(shù)手段：胚胎移植、體外受精、：胚胎移植、體外受精、 胚胎分割、胚胎干細(xì)胞

27、培養(yǎng)等胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等l理論基礎(chǔ)理論基礎(chǔ)：哺乳動物的受精卵和早期胚胎：哺乳動物的受精卵和早期胚胎 的發(fā)育規(guī)律的發(fā)育規(guī)律實例實例1：l1.下列不屬于胚胎工程技術(shù)的是（下列不屬于胚胎工程技術(shù)的是（ ）lA.體外受精體外受精 lB.胚胎分割、胚胎移植胚胎分割、胚胎移植lC.胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞培養(yǎng) lD.轉(zhuǎn)基因鯉魚的培育轉(zhuǎn)基因鯉魚的培育精原細(xì)胞精原細(xì)胞有絲分裂有絲分裂初級精母細(xì)胞初級精母細(xì)胞次級精母細(xì)胞次級精母細(xì)胞精細(xì)胞精細(xì)胞精子精子M第一階段第一階段第二階段第二階段第三階段第三階段M精精子子發(fā)發(fā)生生的的過過程程多個精原細(xì)胞多個精原細(xì)胞染色體復(fù)制染色體復(fù)制變形變形精子細(xì)胞變形中的主要變

28、化：精子細(xì)胞變形中的主要變化：1.1.細(xì)胞核細(xì)胞核2.2.高爾基體高爾基體3.3.中心體中心體4.4.線粒體線粒體5.5.細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)精子頭的主要部分精子頭的主要部分頭部的頂體頭部的頂體精子的尾精子的尾線粒體鞘線粒體鞘( (尾的基部尾的基部) )原生質(zhì)滴原生質(zhì)滴( (球狀球狀, ,最后脫落最后脫落) )2.2.卵子的發(fā)生卵子的發(fā)生l(1)(1)發(fā)生部位：卵巢發(fā)生部位：卵巢l(2)(2)時間：減數(shù)第一次分裂是在雌性動物排卵前時間：減數(shù)第一次分裂是在雌性動物排卵前后完成；減數(shù)第二次分裂是在精子和卵子結(jié)合后完成；減數(shù)第二次分裂是在精子和卵子結(jié)合的過程完成的。的過程完成的。卵原細(xì)胞卵原

29、細(xì)胞有絲分裂有絲分裂多個卵原細(xì)胞多個卵原細(xì)胞染色體復(fù)制染色體復(fù)制初級卵母細(xì)胞初級卵母細(xì)胞M第一極體第一極體次級卵母細(xì)胞次級卵母細(xì)胞兩個第二極體兩個第二極體第二極體第二極體卵子卵子退化消失退化消失（3 3）卵子發(fā)生過程）卵子發(fā)生過程M排卵前后排卵前后完成完成在受精在受精過程完過程完成成被卵泡細(xì)胞包圍被卵泡細(xì)胞包圍, ,形成卵泡形成卵泡胎兒時期完成胎兒時期完成1.1.一個卵泡中能形成幾個成熟的卵子？一個卵泡中能形成幾個成熟的卵子？2.2.排卵是指卵子從卵泡中排出，還是指卵泡從排卵是指卵子從卵泡中排出，還是指卵泡從卵巢中排出？卵巢中排出？3.3.剛排出的卵是成熟的卵子嗎？它在母體的什剛排出的卵是成熟

30、的卵子嗎？它在母體的什么部位與精子受精？么部位與精子受精？ 答：剛排出的卵子尚未完全成熟，僅完成第一次答：剛排出的卵子尚未完全成熟，僅完成第一次減數(shù)分裂，需要在輸卵管內(nèi)進一步成熟，直到減數(shù)分裂，需要在輸卵管內(nèi)進一步成熟，直到減數(shù)第二減數(shù)第二次分裂的中期次分裂的中期才能與精子結(jié)合完成受精過程。排出的卵才能與精子結(jié)合完成受精過程。排出的卵 子是在子是在輸卵管輸卵管內(nèi)與精子受精的。內(nèi)與精子受精的。 答：正常情況下，一個卵泡只能形成答：正常情況下，一個卵泡只能形成一個一個成熟的成熟的卵子。卵子。 答：是指答：是指卵子卵子從卵泡中排出。從卵泡中排出。二二) )受精階段受精階段: :1)1)精子穿越放射冠

31、和透明帶精子穿越放射冠和透明帶 頂體反應(yīng)頂體反應(yīng)使頂體內(nèi)的頂體酶釋放出來并溶解放射冠使頂體內(nèi)的頂體酶釋放出來并溶解放射冠內(nèi)的卵丘細(xì)胞內(nèi)的卵丘細(xì)胞 透明帶反應(yīng)透明帶反應(yīng)是防止多精入卵受精的是防止多精入卵受精的第一道屏障第一道屏障2)2)精子進入卵細(xì)胞膜精子進入卵細(xì)胞膜 卵細(xì)胞膜反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)是防止多精入卵受精的是防止多精入卵受精的第二道屏障第二道屏障3)3)原核形成：原核形成： 雄原核形成和雌原核形成雄原核形成和雌原核形成4)4)配子結(jié)合：配子結(jié)合： 雌雄原核雌雄原核融合融合形成合子形成合子( (受精卵受精卵) )受精受精穿過放射冠：穿過放射冠：在卵子外圍集聚有幾十個精子，它在卵子外圍集聚有幾

32、十個精子，它們首先穿放射冠。們首先穿放射冠。受精卵受精卵卵裂期卵裂期桑椹胚桑椹胚囊胚（內(nèi)含囊胚腔）囊胚（內(nèi)含囊胚腔）原腸胚（內(nèi)含原腸腔）原腸胚（內(nèi)含原腸腔）胎兒形成胎兒形成：在：在透明帶內(nèi)透明帶內(nèi)進行有絲分裂，細(xì)胞數(shù)量不斷進行有絲分裂，細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積并不增加，或略有減少。增加，但胚胎總體積并不增加，或略有減少。：由具有全能性細(xì)胞構(gòu)成，細(xì)胞數(shù)在由具有全能性細(xì)胞構(gòu)成，細(xì)胞數(shù)在3232個左右，個左右，排列緊密，形似桑椹排列緊密，形似桑椹內(nèi)細(xì)胞團：發(fā)育成胎兒各組織內(nèi)細(xì)胞團：發(fā)育成胎兒各組織滋養(yǎng)層細(xì)胞：發(fā)育成胎膜和胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞：發(fā)育成胎膜和胎盤：最初發(fā)育在輸卵管進行有絲分裂最初發(fā)育在輸卵管進行有絲分裂三三. .胚胎發(fā)育胚胎發(fā)育滋養(yǎng)層滋養(yǎng)層外胚層外胚層中胚層中胚層內(nèi)胚層內(nèi)胚層原腸腔原腸腔試管動物技術(shù)試管動物技術(shù) 是指通過人是指通過人工操作使工操作使卵子卵子和和精子精子在體外條件在體外條件下成熟和受精，下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后，成早期胚胎后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。代的技術(shù)。試管動物技術(shù)過程：試管動物技術(shù)過程：第一步：第