產(chǎn)淀粉酶的芽孢桿菌篩選

1、從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的 芽孢桿菌芽孢桿菌鞏固微生物分離純化、細(xì)菌保藏等技能，對所學(xué)習(xí)過的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行綜合技能訓(xùn)練培養(yǎng)綜合利用微生物學(xué)、生物化學(xué)等相關(guān)知識，自行設(shè)計、實(shí)施并判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果的能力學(xué)習(xí)掌握從環(huán)境中分離產(chǎn)淀粉酶菌株以及菌株初步鑒定的方法目的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?獲得產(chǎn)淀粉酶的菌株并對其進(jìn)行初步的鑒定 1、富集培養(yǎng)基： 10g的可溶性淀粉，蛋白胨10g， 酵母膏 3g/L、Nacl 2g、蒸餾水1000ml (2倍濃縮100ml/500ml錐形瓶)2、淀粉培養(yǎng)基：可溶性淀粉2g/L蛋白胨10g/L 牛肉膏3-5g/L NaCl5g/L PH7.27.4 培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)

2、驗(yàn)前選取淀粉密集的地方（面粉廠附近）取樣品土壤，用塑料袋將樣品保存好，留做實(shí)驗(yàn)之用。試驗(yàn)樣品處理實(shí)驗(yàn)材料玻璃器皿 燒杯（500ml）錐形瓶（250ml）培養(yǎng)皿涂布棒移液槍試管超凈工作臺、生化培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌鍋、水浴鍋、培養(yǎng)接種器具，等其他設(shè)備及儀器一產(chǎn)淀粉酶的芽孢桿菌含量在不同土壤中含量也不同，實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行預(yù)埋工作，能使土壤中產(chǎn)淀粉酶的細(xì)菌含量增加。待實(shí)驗(yàn)前取樣即可二在只用淀粉充當(dāng)碳源的選擇培養(yǎng)基中，只有能產(chǎn)生淀粉酶利用淀粉的菌體能成為優(yōu)勢菌種，從而得到富集實(shí)驗(yàn)原理五在已確定的芽孢桿菌情況下，在菌落處滴加碘夜來觀察透明圈情況。三細(xì)菌富集一段時間后，生長環(huán)境不利，會產(chǎn)生芽孢，再在80-90 溫

3、度下殺死菌體，可使芽孢得到富集 配無菌水，并將其分裝 到7個試管中,每只9ml。（7個管）1、取10g土壤加入250ml燒杯中，再加入90ml無菌水,充分震蕩，制成土壤混懸液。2、在37攝氏度搖床（200r/min）培養(yǎng)箱中培養(yǎng)23個小時，使菌體充分?jǐn)U散到無菌水中。3、在80 水浴鍋中加熱1015分鐘，殺滅菌體，使芽孢得到富集.4、靜置，取上清至富集培養(yǎng)基的錐形瓶中。在37攝氏度搖床（200r/min）培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一天，使菌體富集且產(chǎn)生大量芽孢。 將富集后的芽孢菌液上清分別稀釋 101、102、103、104、105 、106、107倍，分別取102 、104 、105 、106、107菌液0.1ml均勻涂布在10個淀粉培養(yǎng)基上，在37攝氏度培養(yǎng)箱培養(yǎng)2天，平板培養(yǎng)基表面便形成了若干分散的單菌落。210-在單菌落處滴加碘液，挑取有透明圈的單菌落劃線分離，在37的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2天。 初篩鑒定 1、將單菌落點(diǎn)種落接到淀粉平板上純培養(yǎng)，在37攝氏度培養(yǎng)2天。 2、在培養(yǎng)后的平板上滴加碘液，用直尺測量透明圈的大小。實(shí)驗(yàn)材料玻璃器皿 燒杯（500ml）錐形瓶（