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文檔簡介

1、基因工程(2011年江蘇卷)33(8分)請回答基因工程方面的有關(guān)問題:(1)利用PCR技術(shù)擴增目的基因,其原理與細胞內(nèi)DNA復制類似(如下圖所示)。 圖中引物為單鏈DNA片段,它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。從理論上推測,第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為 。在第 輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。(2)設計引物是PCR技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學設計的兩組引物(只標注了部分堿基序列)都不合理(如下圖),請分別說明理由。 第1組: ; 第2組: 。(3) PCR反應體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶,下面的表達式不能正確反映DNA聚合酶的 功能,這是因為 。(4)用限制酶Ec

2、oRV、Mbol單獨或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒,得到的DNA片段長度如下圖(1 kb 即1000個堿基對),請在答題卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、Mbol的切割位點。 33(8分) (1)15/16 三 (2)引物I和引物局部發(fā)生堿基互補配對而失效 引物I自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對而失效(3) DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連續(xù)結(jié) 合到雙鏈DNA片段的引物鏈上(4)見右圖(11年北京卷)31.(16分)T-DNA可能隨機插入植物基因組內(nèi),導致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導擬南芥產(chǎn)生突變體的過程如下:種植野生型擬南芥,待植物形成花蕾時,將地上部分浸入農(nóng)桿菌(其中的T-DNA上帶有抗除草劑

3、基因)懸浮液中以實現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng),收獲種子(稱為T1代)。(1)為促進植株側(cè)枝發(fā)育以形成更多的花蕾,需要去除 ,因為后者產(chǎn)生的 會抑制側(cè)芽的生長。(2) 為篩選出已轉(zhuǎn)化的個體,需將T代播種在含 的培養(yǎng)基上生長,成熟后自交,收獲種子(稱為T代)。(3) 為篩選出具有抗鹽性狀的突變體,需將T代播種在含 的培養(yǎng)基上,獲得所需個體。(4)經(jīng)過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起,需將該突變體與 植株進行雜交,再自交 代后統(tǒng)計性狀分離比。(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失,從該突變體的表現(xiàn)型可以推測野生型基因的存在導致植物的抗鹽性 。(6)根據(jù)T-

4、DNA的已知序列,利用PCR技術(shù)可以擴增出被插入的基因片段。其過程是:提取 植株的DNA,用限制酶處理后,再用 將獲得的DNA片段連接成環(huán)(如右圖)以此為模板,從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取 作為引物進行擴增,得到的片斷將用于獲取該基因的全序列信息。答案:31(16分)(1)頂芽 生長素(2)(一定濃度的)除草劑(3)(一定濃度的)鹽(4)野生型 1(降低(6)突變體 DNA連接酶 B、C(2011年安徽卷)31.(21分).(9分)家蠶細胞具有高效表達外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。(1)進行轉(zhuǎn)基因操作前,需用_酶短時處理幼蠶組織,

5、以便獲得單個細胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達,需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的_和_之間。(3)采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導入家蠶細胞。改PCR反應體系的主要成分應該包含:擴增緩沖液(含Mg2+)、水,4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_和_。(4)利用生物反應器培養(yǎng)家蠶細胞時,的細胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中,這樣可以_增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量,也有利于空氣交換。答案:(1)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) (2)啟動子 終止子 (3)TaqDNA聚合酶 對干擾素基因特異性的DNA引物對 (4)增大細胞貼壁生長的附著面積解析:考查

6、的知識點為動物細胞培養(yǎng)和基因工程.(1)為了使組織分散開為單個細胞通常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶。(2)啟動子位于目的基因的首端,終止子位于目的基因的尾端。(3)PCR反應體系的主要成分應擴增緩沖液(含Mg2+)、水,4種脫氧核糖苷酸、模板DNA 、TaqDNA聚合酶、兩種引物。(4)細胞離體培養(yǎng)時通常表現(xiàn)出:貼壁生長和接觸抑制,多孔的中空薄壁小玻璃珠能增大貼壁生長的附著面積,增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量.(11天津理綜卷)6、某致病基因h位于X染色體上,該基因和正常基因H中的某一特定序列BclI酶切后,可產(chǎn)生大小不同的片段(如圖1,bp表示堿基對),據(jù)此可進行基因診斷。圖2為某家庭病的遺傳系譜。下列敘述錯

7、誤的是A h基因特定序列中Bcl 1酶切位點的消失是堿基序列改變的結(jié)果B II-1的基因診斷中只出現(xiàn)142bp片段,其致病基因來自母親C II-2的基因診斷中出現(xiàn)142bp,99bp和43bp三個片段,其基因型為XHXhD II-3的丈夫表現(xiàn)型正常,其兒子的基因診斷中出現(xiàn)142bp片段的概率為1/2.答案:D(11年四川卷)5.北極比目魚中有抗凍基因,其編碼的抗凍蛋白具有11個氨基酸的重復序列,該序列重復次數(shù)越多,抗凍能力越強,下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖,有關(guān)敘述正確的是A過程獲取的目的基因,可用于基因工程和比目魚基因組測序B多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達的新基因,不能得到抗

8、凍性增強的抗凍蛋白,C過程構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標記基因,需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進行篩選D應用DNA探針技術(shù),可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達答案:B解析:過程1獲得的目的基因已不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子,因此不能用于比目魚基因組測序,因此A錯。導入農(nóng)桿菌是為了擴增和更易導入蕃茄細胞,C錯。DNA探針技術(shù)不能檢測基因是否完全表達,目的基因的完全表達應該檢測表達產(chǎn)物蛋白質(zhì),D錯。(2011年浙江卷)6、ada(酸脫氨酶基因)通過質(zhì)粒pET28b導入大腸桿菌并成功表達腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯誤的是 A. 每個大腸桿菌細胞至少含一個重組質(zhì)粒 B. 每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位

9、點 C. 每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點至少插入一個ada D. 每個人的ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子答案:C(11年重慶卷)31. (16分)擬南芥是遺傳學研究的模式植物,某突變體可用于驗證相關(guān)的基因的功能。野生型擬南芥的種皮為深褐色(TT),某突變體的種皮為黃色(tt),下圖是利用該突變體驗證油菜種皮顏色基因(Tn)功能的流程示意圖。(1)與擬南芥t基因的mRNA相比,若油菜Tn基因的mRNA中UGA變?yōu)?,其末端序列成為“”,則Tn比多編碼個氨基酸(起始密碼子位置相同,、為終止密碼子)。()圖中應為。若不能在含抗生素的培養(yǎng)基上生長,則原因是 .若的種皮顏色為 ,則說明油菜基因與擬南芥T

10、基因的功能相同。(3)假設該油菜基因連接到擬南芥染色體并替換其中一個t基因,則中進行減數(shù)分裂的細胞在聯(lián)會時的基因為 ;同時,的葉片卷曲(葉片正常對葉片卷曲為顯性,且與種皮性狀獨立遺傳),用它與種皮深褐色、葉片正常的雙雜合體擬南芥雜交,其后代中所占比列最小的個體表現(xiàn)為 ;取的莖尖培養(yǎng)成16顆植珠,其性狀通常 (填 不變或改變)。(4)所得的轉(zhuǎn)基因擬南芥與野生型擬南芥 (填是或者不是)同一個物種。答案:31.(16分)(1)2(2)重組質(zhì)粒(重組DNA分子) 重組質(zhì)粒未導入 深褐色(3)TnTntt; 黃色正常、黃色卷曲; 不變(4)是解析:通過對基因工程和遺傳知識相結(jié)合來考查學生對該部分知識的掌

11、握,屬中檔題,較難。油菜Tn基因的mRNA中UGA變?yōu)锳GA,而末端序列為“AGCGCGACCAGACUCUAA”,在擬南芥中的UGA本是終止密碼子不編碼氨基酸,而在油菜中變?yōu)锳GA可編碼一個氨基酸,而CUC還可編碼一個氨基酸,直到UAA終止密碼子不編碼氨基酸。假設油菜Tn基因連接到擬南芥染色體并替換其是一個t基因,注意擬南芥是指實驗有的突變體tt,所以轉(zhuǎn)基因擬南芥基因型為Tnt,減數(shù)分裂聯(lián)會時形成四分體是由于染色體進行了復制,基因也進行了復制,因而基因型為TnTnt t。設轉(zhuǎn)基因擬南芥的葉片卷曲與正常葉是由B、b基因控制,正常葉為顯性,而該對性狀與種皮性狀為獨立遺傳,則這兩對性狀遵循基因的分

12、離與自由組合定律。則:轉(zhuǎn)基因擬南芥 雙雜合擬南芥Tntbb TtBb進行逐對分析:TntTt 1/4TnT 、 1/4Tnt、1/4 Tt 、1/4tt由于Tn和T的功能相同,所以表示為3/4T-(深褐色)、1/4tt(黃色)bbBb 1/2 Bb(正常葉)、1/2 bb(卷曲葉)所以后代中有四種表現(xiàn)型;3/8種皮深褐色正常葉;3/8種皮深褐色卷曲葉1/8種皮黃色正常葉;1/8種皮黃色卷曲葉取轉(zhuǎn)基因擬南芥的莖尖培養(yǎng)為植物組織培養(yǎng)為無性生殖,所以后代性一般不變。(排除基因突變)由上可知所得轉(zhuǎn)基因擬南芥Tnt和野生型擬南芥TT兩個品種相當于發(fā)生基因突變,沒有隔離,能雜交產(chǎn)生可育后代,因此是同一個種

13、。此套題難度不大,考查識記的偏多,理解推理分析較少,而填空題中類似判斷題型的填空又多,降低了難度,而不能很好考查學生能力,區(qū)分度不明顯。(11年廣東卷)27.(16分) 登革熱病毒感染蚊子后,可在蚊子唾液腺中大量繁殖,蚊子在叮咬人時將病毒傳染給人,可引起病人發(fā)熱、出血甚至休克。科學家用以下方法控制病毒的傳播。(1)將S基因轉(zhuǎn)入蚊子體內(nèi),使蚊子的唾液腺細胞大量表達S蛋白,該蛋白可以抑制登革熱病毒的復制。為了獲得轉(zhuǎn)基因蚊子,需要將攜帶S基因的載體導入蚊子的 細胞。如果轉(zhuǎn)基因成功,在轉(zhuǎn)基因蚊子體內(nèi)可檢測出 、 和 。(2)科學家獲得一種顯性突變蚊子(AABB)。A、B基因位于非同源染色體上,只有A或

14、B基因的胚胎致死。若純合的雄蚊(AABB)與野生型雌蚊(aabb)交配,F(xiàn)1群體中A基因頻率是 ,F(xiàn)2群體中A基因頻率是 。(3)將S基因分別插入到A、B基因的緊鄰位置(如圖11),將該純合的轉(zhuǎn)基因雄蚊釋放到野生群體中,群體中蚊子體內(nèi)病毒的平均數(shù)目會逐代 ,原因是 。27、答案:(1)受精卵 S基因、由S基因轉(zhuǎn)錄的mRNA S蛋白 (2)50% 60% (3)減少 S基因表達的S蛋白會抑制登革熱病毒復制(11年山東卷)35.(8分)【生物現(xiàn)代生物科技專題】 人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型常用于致病機理的探討及治療藥物的篩選。利用正常大鼠制備遺傳性高血壓轉(zhuǎn)基因模型大鼠的流程如圖所示。(1)卵母細胞除從活體輸卵管中采集外,還可以從處死的雌鼠_中獲取。(2)圖中的高血壓相關(guān)基因作

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