黃精檢驗操作規(guī)程

1、 黃精檢驗標準操作規(guī)程文件編碼：S0P-QC-ZJ-3047-02 題 目 黃精檢驗標準操作規(guī)程制定部門：質量檢驗中心頒發(fā)部門：質量管理部分發(fā)部門：質量管理部、質量檢驗中心制定人： 日期: 年 月 日 審核人： 日期: 年 月 日批準人： 日期： 年 月 日生效日期: 年 月 日變更歷史：1.2003年3月制定； 2.2005年7月執(zhí)行中國藥典2005年版第一次修訂； 3.2010年10月執(zhí)行中國藥典2010年版第二次修訂。目 的：建立黃精檢驗標準操作規(guī)程。規(guī)范檢驗操作，確保黃精質量。適用范圍：適用于黃精檢驗。責 任 者：質量管理部經(jīng)理、質檢中心主任、質量檢驗員。內 容： 1品名：黃精 2取樣

2、：按藥材和飲片取樣標準操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6065）取樣 3檢驗依據(jù)：黃精內控質量標準（STP-QS-ZJ-3047） 4性狀：大黃精 取本品，在明亮處用肉眼觀察，呈肥厚肉質的結節(jié)狀，結節(jié)長可達10cm以上，尺量，寬36cm，厚23cm。表面淡黃色至黃棕色，具環(huán)節(jié)，有皺紋及須根痕，結節(jié)上側莖痕呈現(xiàn)圓盤狀，圓周凹入，中部突出。質硬而韌，不易折斷，斷面角質，淡黃色至黃棕色。鼻聞氣微，口嘗少許味甜，嚼之有黏性。 雞頭黃精 呈結節(jié)狀彎柱形，長310cm，直徑0.51.5cm。結節(jié)長24cm，略呈圓錐形，常有分枝；表面黃白色或灰黃色，半透明，有縱皺紋，莖痕圓形，直徑58mm。 姜形黃精 呈長條

3、結節(jié)塊狀，長短不等，常數(shù)個塊狀結節(jié)相連。表面灰黃色或黃褐色，粗糙，結節(jié)上側有突出的圓盤狀莖痕，直徑0.81.5cm。5鑒別5.1儀器：顯微鏡、電子恒溫水浴鍋、薄層噴霧氣壓泵、鼓風電熱恒溫干燥箱、電子天平5.2試劑與試液 5.2.1試劑：正丁醇、甲醇、石油醚（60900C）、乙酸乙酯、甲酸5.2.2試液水合氯醛試液：取水合氯醛5g，加水15ml與甘油10ml使溶解，即得。甘油乙醇試液：取甘油、稀乙醇各1份，混合，即得。5%香草醛硫酸溶液：取香草醛5g，加硫酸至100ml，搖勻，即得5.3對照藥材：黃精對照藥材 5.4操作方法5.4.1按顯微鑒別法標準操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6034）檢查。

4、 取本品2根放入250 ml燒杯中，加水100ml，用水潤30分鐘使之軟化后，取中上部，用刀片徒手切片，切成20µm的薄片，選取平整的薄片置載玻片上，滴加水合氯醛試液2滴，將載玻片置酒精燈火焰上方2cm處往返擺動加熱至邊緣起小泡，即停止加熱，補充試液后再加熱，直至透化完全。透化后放冷，加甘油乙醇2滴，蓋上蓋玻片。置顯微鏡下下觀察，大黃精 表皮細胞外壁較厚。薄壁組織間散有多數(shù)大的黏液細胞，內含草酸鈣針晶束。維管束散列，大多為周木型。 雞頭黃精、姜形黃精，維管束多為外韌型。 5.4.2取本品適量置高速粉碎機內粉碎成粉末，稱取過四號篩（65目）粉末1g，置小具塞錐形瓶中加70%乙醇20ml

5、，加熱回流1小時，抽濾，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中加正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并上層正丁醇液，蒸發(fā)皿中蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，置具塞小試管中，作為供試品溶液。另取黃精對照藥材1g，置小具塞錐形瓶中加70%乙醇20ml，加熱回流1小時，抽濾，濾液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中加正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并上層正丁醇液，蒸發(fā)皿中蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，置具塞小試管中，同法制成對照藥材溶液。按薄層色譜法標準操作規(guī)程(SOP-QC-ZJ-6039)試驗，吸取上述兩種溶液各10l，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60900C）-乙酸乙

6、酯-甲酸（5：2：0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，置預熱至1050C的電熱恒溫箱中加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。 6檢查 6.1水分：按水分測定法標準操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6020）甲苯法測定，不得過18.0%。6.1.1儀器：水分測定儀、500ml短頸圓底燒瓶、水分測定管、外管長40cm的直形冷凝管、電熱套、玻璃珠或瓷片碎片、電子天平6.1.2操作方法：接通電子天平電源，啟動電子天平，使電子天平預熱30分鐘。取供試品適量粉碎，稱取最粗粉（全部通過一號篩，混有能通過3號篩不超過20%）約1040g（約相當于

7、含水量14ml），精密稱定，置500ml圓底燒瓶中，加甲苯約200ml，（必要時加入干燥的玻璃珠數(shù)粒）將儀器各部分連接，開啟冷凝水，自冷凝管頂端加入甲苯，至充滿水分測定管的狹細部分。將圓底燒瓶置電熱套中緩緩加熱，待甲苯開始沸騰時，調節(jié)溫度，使每秒鐘餾出2滴，待水分完全餾出，（即測定管刻度部分的水量不再增加時）將冷凝管內部先用甲苯?jīng)_洗，再用飽蘸甲苯的長刷，將管壁上附著的甲苯推下，繼續(xù)蒸餾5分鐘，放冷至室溫。如有水粘附在水分測定管管壁上，可用蘸甲苯的銅絲推下，放置，使水分與甲苯完全分離（可加入亞甲藍粉末少量，使水染成藍色，以便分離觀察）， 檢讀水量。 6.2總灰分：按灰分測定法標準操作規(guī)程（SOP

8、-QC-ZJ-6016)總灰分測定法測定，不得過4.0%。6.2.1儀器：節(jié)能電阻爐、電子天平、坩鍋。6.2.2操作方法：接通電子天平電源，啟動電子天平，使電子天平預熱30分鐘。取潔凈的坩堝，置節(jié)能電阻爐內，將坩堝蓋斜蓋于坩堝上，經(jīng)加熱至600熾灼約1小時，停止加熱，待節(jié)能電阻爐溫度冷卻至約300，取出坩堝，置干燥器內，蓋好坩堝蓋，放冷至室溫，精密稱定重量，再以同樣條件重復操作，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在0.3mg以下為止。取本品適量粉碎，稱取能通過二號篩并混合均勻的粉末23g，置熾灼至恒重的坩堝中，在電子天平上精密稱定，放入節(jié)能電阻爐內，緩緩熾熱，至完全炭化呈黑色，逐漸升高溫度至5006

9、00，熾灼30分鐘后，停止加熱，待節(jié)能電阻爐溫度冷卻至約300，取出觀察 ，直至完全灰化，取出坩堝，置干燥器內，蓋好坩堝蓋，放冷至室溫，精密稱定重量，再以同樣條件重復操作，直至連續(xù)兩次熾灼后稱重的差異在0.3mg以下為止。并記錄數(shù)據(jù)。根據(jù)殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量。 6.3浸出物：按浸出物測定法標準操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6015）項下的熱浸法測定，用稀乙醇作溶劑，不得少于45.0%。6.3.1儀器：鼓風電熱恒溫干燥箱、電子天平、電子恒溫水浴鍋6.3.2 試劑稀乙醇：取乙醇53ml，加水制成100ml即得。 6.3.3操作方法：接通電子天平電源，啟動電子天平，使電子天平預熱30分

10、鐘。取潔凈的蒸發(fā)皿，置烘箱內100105干燥1小時，取出，置干燥器中室溫放置30分鐘，精密稱定重量；再置烘箱內100105干燥1小時，取出置干燥器中室溫放置30分鐘，精密稱定重量，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在0.3mg以下為止。取能通過二號篩并混合均勻的供試品約4g，置250ml的錐形瓶中，精密加稀乙醇100ml，密塞，稱定重量，靜置1小時后連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1小時。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于100105干燥3小時 ，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密

11、稱定重量。并記錄數(shù)據(jù)。除另有規(guī)定外，以干燥品計算供試品浸出物的含量。 6.4二氧化硫殘留量：按二氧化硫殘留量測定法標準操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6062）測定，不得過150mg/kg。6.4.1儀器：SO2測定裝置（1000ml）、電熱套、10ml棕色滴定管、250ml錐形 瓶、磁力攪拌器、100ml量筒 6.4.2試液6mol/L鹽酸溶液：取鹽酸54ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻。淀粉指示液：本液應臨用新制。取可溶性淀粉0.5g，加水5ml攪勻后，緩慢傾入100ml沸水中，隨加隨攪拌繼續(xù)煮沸2分鐘，放冷，傾取上層清液，即得。 0.01mol/L碘滴定液： 6.4.3 儀器裝置

12、：A為1000ml兩頸圓底燒瓶；B為豎式回流冷凝管；C 為（帶刻度)分液漏斗；D 為連接氮氣流入口；E 為二氧化硫氣體導出口； 6.4.4操作方法： 取藥材細粉約10g，精密稱定W，置兩頸圓底燒瓶中， 加水300400ml（應加水至沒過氮氣導氣管的下端），取6mol/L鹽酸溶液10ml加入帶刻度分液漏斗中。錐形瓶里加入水125ml和淀粉指示液1ml作為吸收液，置于磁力攪拌器上不斷攪拌。打開冷凝管，將冷凝管的上端口處連接一橡膠導氣管置于錐形瓶內液面以下。連接導氣管入口。開通氮氣，調節(jié)適宜的氣體流量（氮氣流速約為0.2L/min,至蒸餾瓶內有氣泡均勻排出）。打開帶刻度分液漏斗的活塞，使鹽酸溶液10

13、ml流入燒瓶中。給兩頸燒瓶內的溶液加熱至沸，并保持微沸約3分鐘后開始用碘滴定液（0.01mol/L）滴定，吸收液置于磁力攪拌器上不斷攪拌，至吸收液顯藍色或藍紫色持續(xù)30秒鐘不完全消褪，記錄樣品消耗滴定液體積A；并用空白試驗校正，記錄消耗滴定液體積B。每1ml的碘滴定液（0.01mol/L）相當于0.6406mg的SO2。C為碘滴定液濃度的校正因子 7含量測定 ：按紫外-可見分光光度法標準操作規(guī)程（SOP-QC-ZJ-6035）測定。7.1儀器：紫外可見分光光度計、電子天平、電子恒溫水浴鍋 7.2試劑與試液 7.2.1試劑：乙醇 7.2.2試液 0.2%蒽酮-硫酸溶液 取蒽酮0.2g，緩緩加入硫

14、酸使溶解成100ml。 7.3對照品：無水葡萄糖對照品 7.4操作方法：對照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)105干燥至恒重的無水葡萄糖對照品33mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為C對(每1ml中含無水葡萄糖0.33mg）。標準曲線的制備 精密量取對照品溶液0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml，分別置10ml具塞刻度試管中，各加水至2.0ml，搖勻，在冰水浴中緩緩滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度，混勻，放冷后置水?。?8-100）中保溫10分鐘，取出，立即置冰水浴中冷卻10分鐘，取出，以相應試劑為空白。按紫外-可見分光光度法標準操作規(guī)程（

15、SOP-QC-ZJ-6035）測定，在582nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。葡萄糖溶液取量0.1ml0.2ml0.3ml0.4ml0.5ml0.6ml對照液濃度mg/ml0.1×0.33÷100.2×0.33÷100.3×0.33÷100.4×0.33÷100.5×0.33÷100.6×0.33÷100.00330.00660.00990.01320.01650.0198吸收度A對測定法 取本品適量，置高速粉碎機內粉碎成細粉（能全部通過五號

16、篩，至少95%能通過六號篩），取細粉1-2g，置干燥電熱恒溫干燥箱中， 60干燥2小時，取出置干燥器中，室溫放置30分鐘后精密稱定；再置烘箱內60干燥1小時，取出置干燥器中室溫放置30分鐘，精密稱定重量，直至連續(xù)兩次干燥后稱重的差異在5mg以下為止。取上述干燥至恒重的本品細粉約0.25g，精密稱定W樣，置具塞圓底燒瓶中，加80%乙醇150ml，連接冷凝裝置，置水浴中回流1小時，趁熱濾過，殘渣用80%熱乙醇洗滌3次，每次10ml，將殘渣及濾紙置燒瓶中，加水150ml，置水浴中加熱回流1小時，趁熱濾過，殘渣及燒瓶用熱水洗滌4次，每次10ml，合并濾液與洗液，放冷，轉移至250ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取1ml，置10ml干燥具塞刻度試管中，加水至2.0