臨床常見細(xì)菌地手工鑒定和結(jié)果判斷

1、實用標(biāo)準(zhǔn)文案臨床常見細(xì)菌的手工鑒定和結(jié)果判斷一.細(xì)菌的鑒定步驟1、鑒定的概念：將一個未知的菌株按其生物學(xué)特性，經(jīng)過與所有 已知菌種進行比較后劃歸到一個已知菌種的分析過程。2、對待鑒定的菌種要明確已經(jīng)獲得純化培養(yǎng)或者該菌種在血平板 上生長良好，有單個菌落可以進行生化試驗。（我們這里一般都 是預(yù)先純化培養(yǎng)）3、對待鑒定的菌種進行革蘭染色，觀察形態(tài)（G+c, Gb, Gc, G+b）, 做觸酶，氧化酶實驗，然后按科，屬，種逐步鑒定。要注意對待 鑒定的菌種選擇一個合適的鑒定系統(tǒng)，臨床常見細(xì)菌的快速簡單 的鑒定系統(tǒng)我們都已經(jīng)設(shè)計好，參考鑒定質(zhì)控單。4、按鑒定質(zhì)控單的要求填寫好病人姓名，年齡，性別；標(biāo)本類

2、型， 標(biāo)本編號，送檢日期等。另外最重要的是要填寫好該菌種的菌落 形態(tài)以及有無溶血。5、復(fù)習(xí)革蘭染色，觸酶實驗，氧化酶實驗。.革蘭染色：是細(xì)菌鑒定過程中最常用最基本最重要的染色 方法。首先要將待鑒定的細(xì)菌涂片，固定（目的：殺死細(xì)菌，改變細(xì)菌對染料的通透性）。第一步：以結(jié)晶紫初染（染色液I）第二步：以點戈氏碘液媒染（染色液n）第三步：用95%!享脫色（染色液田）文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案第四步：最后用稀釋復(fù)紅復(fù)染（染色液IV）.觸酶實驗（H2Q實驗）：a.原理：具有過氧化氫酶的細(xì)菌能催化雙氧水生成水和初生態(tài)氧，繼而形成氧分子出現(xiàn)氣泡。b.方法：一般用玻片法，就是挑取菌落在潔凈的玻片上涂開， 滴加3%氧化氫數(shù)

3、滴，觀察結(jié)果（立即有大量氣泡產(chǎn)生者為陽 性，不產(chǎn)生氣泡者為陰性）。要注意不能在血平板上進行實驗， 這樣易出現(xiàn)假陽性；另外陳舊菌落要是進行實驗可能會導(dǎo)致假 陰性結(jié)果；還有不能在接種針或環(huán)上進行實驗。c.陽性對照用金黃色葡萄球菌，陰性對照用鏈球菌；試劑要 避光置4 c冰箱保存。d.應(yīng)用：絕大多數(shù)含細(xì)胞色素的需氧和兼性厭氧細(xì)菌觸酶實 驗陽性，鏈球菌屬陰性。臨床常見細(xì)菌鑒定實驗中我們一般用 于區(qū)別葡萄球菌屬（+）,微球菌屬（+）,鏈球菌屬（）。 .氧化酶實驗（Kovac實驗）：a.原理：氧化酶又稱細(xì)胞色素酶，是細(xì)胞色素呼吸酶系統(tǒng)的最終呼吸酶。酶并不直接與試劑（1魅酸四甲基對苯二 胺）起反應(yīng)，而是首先使

4、細(xì)胞色素c氧化，然后氧化型細(xì) 胞色素c使對苯二胺氧化，出現(xiàn)深蘭色反應(yīng)。b.方法（濾紙法，菌落法，試劑紙片法）：一般我們采用濾紙法，取白色潔凈濾紙條，沾取菌落少許， 加試劑一滴，陽性者立即呈粉紅色，繼而出現(xiàn)深蘭色。結(jié)文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案果讀取在10秒鐘時為最佳，60秒內(nèi)讀取可靠。本實驗避 免接觸含鐵物質(zhì)（假陽性），也不能在含糖培養(yǎng)基上生長 的菌落進行實驗（假陰性）。c. 陽性對照用銅綠假單胞菌，陰性對照用大腸埃希菌。d. 應(yīng)用：奈瑟氏屬的菌種均陽性，也用于區(qū)別假單胞菌 屬和腸桿菌，前者陽性，后者陰性。二.葡萄球菌屬的鑒定葡萄球菌屬主要的種有金黃色葡萄球菌， 表皮葡萄球菌，腐生葡萄 球菌。1、形態(tài)與染

5、色：葡萄球菌直徑 0.51.5 pm,菌體圓形，呈單個， 成雙以及不規(guī)簇狀排列。染色呈紫色，為革蘭陽性球菌。2 .與鏈球菌的區(qū)別：觸酶實驗為陽性，而鏈球菌陰性；菌體形態(tài) 鏈球菌小于葡萄球菌，呈成雙和鏈狀排列的卵圓形的革蘭陽性球 菌。3 .與微球菌的區(qū)別：觸酶實驗同為陽性，但微球菌的菌體呈四聯(lián) 狀，要大于葡萄球菌，微球菌葡萄糖氧化發(fā)酵實驗（操作方法同 甘露醇OF試驗）為氧化型；而葡萄球菌為發(fā)酵型。另外吠喃噪 酮（即痢特靈50 pg/片）敏感實驗微球菌為耐藥，而金黃色葡 萄球菌為敏感。4 .葡萄球菌屬的種間鑒定：文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案.菌落色素與溶血毒素：金黃色葡萄球菌在血平板上呈金黃 色，檸檬色或者淡

6、黃色，而其他葡萄球菌則在血平板上菌落 大多數(shù)為白色，也有部分為檸檬色或深黃色。.溶血毒素：金黃色葡萄球菌有、B、丫、s溶血毒素， 各毒素的區(qū)別是對動物紅細(xì)胞的溶血范圍、抗原性及溶血 時的溫度等。其中以口溶血毒素為主。而其他葡萄球菌大多 數(shù)不產(chǎn)生溶血毒素，只有表葡有極少能產(chǎn)生溶血毒素。.血漿凝固酶實驗：用與區(qū)別金黃色葡萄球菌（陽性），表 皮葡萄球菌（陰性），腐生葡萄球菌（陰性）。血漿凝固酶 是金葡菌所產(chǎn)生的，有結(jié)合凝固酶和游離凝固酶兩種。血漿 凝固酶檢測有兩種方法，為玻片法和試管法，我們一般采用 玻片法。a.操作方法：挑取少許金黃色葡萄球菌菌落在玻片上與血 漿乳化，結(jié)合凝固酶能作用于血漿中的纖維

7、蛋白原，從而在 金黃色葡萄球菌表面發(fā)生凝集，所以我們?nèi)庋勰芸匆娔w 粒。玻片法主要由結(jié)合凝固酶作用產(chǎn)生；游離凝固酶是金黃 色葡萄球菌產(chǎn)生的胞外酶，能與血漿中的血漿凝固反應(yīng)因子（類似凝血酶的一種物質(zhì)）作用，形成復(fù)合物再使纖維蛋白 原轉(zhuǎn)化成纖維蛋白而發(fā)生凝集。試管法主要由游離凝固酶作 用產(chǎn)生。b.注意事項：菌落不能太多，否則會影響結(jié)果觀察；凝固 酶陽性要做自凝陰性對照（用生理鹽水代替血漿），只有在文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案陰性對照也不凝集才能認(rèn)為是真正的陽性，有一部分葡萄球菌有自凝現(xiàn)象。.新生霉素敏感實驗：金黃色葡萄球菌，表皮葡萄球菌對新 生霉素紙片（5pg/片）敏感；而腐生葡萄球菌，微球菌則 對之耐藥。

8、抑菌環(huán)直徑16mnffl為新生霉素敏感。.甘露醇氧化發(fā)酵實驗：a.操作方法：取兩支甘露醇微量生化管，在微量管內(nèi)接種待檢細(xì)菌，然后一支加兩滴石臘密封，另外一支則不加，放 3 7 c孵箱內(nèi)1824h后觀察結(jié)果。b.結(jié)果觀察：微量生化管變黃色為陽性，也就是能利用甘露 醇。若兩管都變黃色則說明是發(fā)酵型；其中加石蠟管不變色， 沒加石蠟管變黃色則為氧化型；如果兩管都不變色則說明該 細(xì)菌是不利用甘露醇（產(chǎn)堿型）。c.應(yīng)用：金黃色葡萄球菌在需氧和厭氧的條件下都能利用甘 露醇（即兩管都變黃色）；表皮葡萄球菌需氧部分產(chǎn)酸，厭 氧條件下不利用甘露醇（即沒加石蠟管有部分會變黃色，加 石蠟管不變黃色）；腐生葡萄球菌與表

9、皮葡萄球菌類似。三.微球菌屬的種間鑒定微球菌屬主要的種有易變微球菌，藤黃微球菌，玫瑰微球菌。鑒 定生化見下表文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案微球菌屬的種間鑒定色素產(chǎn)生粉紅色易變微球菌藤黃微球菌玫瑰微球黃色黃色需氧葡萄糖產(chǎn)酸硝酸鹽還原月尿素酶氧化酶（弱）新生霉素敏感S/Rd :不定 S :敏感 R :耐藥四.鏈球菌屬1. 形態(tài)和染色：鏈球菌的直徑為0.51.0 pmi呈成雙和鏈狀排列的卵圓形革蘭陽性球菌，菌體小于葡萄球菌，無鞭毛, 沒有芽胞，但有些菌株會形成莢膜。肺炎鏈球菌呈矛頭狀，寬 端相對，尖端向外。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案2. 根據(jù)鏈球菌在血平板上溶血現(xiàn)象的不同分為三種：甲型（%-）溶血，即菌落周圍出現(xiàn)較窄的草綠

10、色溶血環(huán)；乙型 （B-）溶血，即菌落周圍出現(xiàn)較寬的透明溶血環(huán)； 丙型（丫-）溶血，即菌落周圍無溶血環(huán)。3. 根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)（C多糖抗原）的不同可分為A、B、C、D、E、F、G、H、K、L、M、N、O、P、Q、R、S、T等 18 個群，對人 類有致病者90漏于A群，偶見其他群鏈球菌致病。4. 鏈球菌屬的種間鑒定.乙型溶血鏈球菌的鑒定：a. 對桿菌肽（0.04U/片）（抑菌圈直徑n 10mm敏感： A群鏈球菌（主要為化膿性鏈球菌）。b. 對桿菌肽不敏感，膽汁七葉甘實驗陰性，但馬尿酸鈉水解實驗、CAMP;驗陽性：B群鏈球菌（主要為無乳 鏈球菌）。c. 對桿菌肽不敏感，膽汁七葉甘實驗陰性，馬尿酸鈉水解實

11、驗陰性，CAM映驗陰性：主要為馬鏈球菌、類馬 鏈球菌、獸疫鏈球菌；對三者的區(qū)別實驗要加做海藻糖 和山梨醇實驗。d. CAMP實驗：將能產(chǎn)生（3 -溶血的金黃色葡萄球菌在 血平板上劃一橫線接種，再將待鑒定菌于金黃色葡萄球 菌3mn#垂直種一短線，若在有CO條件下培養(yǎng)56小文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案時，或無CO條件下培養(yǎng)1824小時，在兩細(xì)菌連接處 出現(xiàn)一個半月型的加強溶血區(qū)即為 CAM映驗陽性。.甲型溶血鏈球菌的鑒定：a. 草綠色鏈球菌：對桿菌肽敏感，對奧普托欣( Optochin)不敏感，膽汁溶菌實驗陰性，膽汁七葉甘實驗陰 性，在高鹽中不生長。主要有變異鏈球菌，輕型鏈球菌， 血鏈球菌，唾液鏈球菌等。b.

12、 肺炎鏈球菌：菌體呈矛頭狀，成雙排列，鈍端相對， 尖端相背，較葡萄球菌，其他鏈球菌略大；在血平板上 菌落細(xì)小、圓形、表面光滑、灰白色、半透明， 開始時 菌落呈扁平狀，以后中心塌陷，呈臍窩狀。與草綠色鏈 球菌的主要區(qū)別是膽汁溶菌實驗陽性，對奧普托欣( Op tochin )敏感。奧普托欣(Optochin )含量為5區(qū)g/片， 抑菌環(huán)18mn：fe敏感，15mmfe不敏感，1518mmz重 復(fù)實驗。.腸球菌(D群鏈球菌)的鑒定：溶血不定，主要是 -、丫-溶血；對桿菌肽不敏感，但其 特異性實驗是膽汁七葉甘實驗陽性；若能在6.5%NaCl的心 浸液肉湯中生長即為D群腸球菌，不能生長為D群非腸球.鏈球

13、菌屬鑒定的系統(tǒng)生化結(jié)果判斷a. 1%美蘭牛乳文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案b. 膽汁七葉甘實驗：變黑為陽性。c. PH9.6肉湯實驗：變渾濁為能在堿性環(huán)境中生長 （陽性）。d. 6.5%NaCl心浸液肉湯：由紫變黃為能在高鹽環(huán)境中生長（陽性）。e. 精氨酸雙水解酶實驗：變紅色（對照不變色，仍為黃色）為性五.奈瑟氏菌屬和布蘭漢菌屬奈瑟氏菌屬主要有腦膜炎奈瑟氏菌和淋病奈瑟氏菌；布蘭漢氏 菌屬只有卡他布蘭漢氏菌。兩者系需氧革蘭陰性球菌。奈瑟氏菌的生物學(xué)特性：革蘭陰性球菌，需氧，卵圓形或腎形，無動力，氧化酶及觸酶均陽性。培養(yǎng)時對營養(yǎng)要求高，能在巧克力平板或有豐富營養(yǎng)的血平板上，在 51 0%C所境中生長。.鑒定過程

14、：a. DNA酶實驗陽性為布蘭漢氏菌，陰性則為奈瑟氏菌。b. 能在普通血平板上生長的為其他奈瑟氏菌，在巧克力平板上生長的主要為腦膜炎奈瑟氏菌和淋病奈瑟氏菌。c. 能使麥芽糖氧化分解產(chǎn)酸的是腦膜炎奈瑟氏菌，不利用麥芽糖的是淋病奈瑟氏菌。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案.幾種主要細(xì)菌對葡萄糖、麥芽糖、蔗糖的氧化分解產(chǎn)酸結(jié)果如下：氧化分解產(chǎn)酸麥芽糖菌種 葡萄糖蔗糖淋病奈瑟氏菌十一腦膜炎奈瑟氏菌十一粘液奈瑟氏菌十十卡他布蘭漢菌-DNA酶實驗：a. 方法：將待鑒定細(xì)菌點種于含 0.2%DNA勺DN堿脂平 板上，培養(yǎng)后用1mmol/LHCl覆蓋平板，菌落周圍出現(xiàn)透 明環(huán)者為陽性。b. 原理：某些細(xì)菌能產(chǎn)生DNAS,可使D

15、N張鏈水解成 由幾個單核甘酸組成的寡核甘酸鏈；長鏈DNA可被酸沉（腸淀，而水解后形成后的寡核甘酸鏈則可溶于酸，故在 DNA 瓊脂平板加鹽酸，可在菌落周圍形成透明的溶血環(huán)文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案桿菌科中只有沙雷氏菌和變形桿菌可產(chǎn)生 DNAS,陽性球 菌中只有金葡菌能產(chǎn)生DNA1。）六.腸桿菌科腸桿菌科是一大群生物學(xué)性狀相似的革蘭陰性桿菌，其中對人致病性較強的鼠疫耶爾森菌（現(xiàn)已基本沒有流行）和傷寒沙門菌；4類常引起腹瀉和腸道感染的細(xì)菌（埃希氏菌、志賀氏菌、沙門氏菌、耶 爾森氏菌）和8種常導(dǎo)致院內(nèi)感染的細(xì)菌（枸椽酸桿菌屬、克雷伯菌 屬、腸桿菌屬、多源菌屬、沙雷菌屬、變形桿菌屬、普羅威登菌屬 和摩根菌屬）。另

16、外還有很多細(xì)菌是腸道的正常菌群，但在一定條件 下也可致病（條件致病菌）。實驗過程中對于革蘭陰性桿菌首先要做氧化酶實驗，陰性為腸桿菌科細(xì)菌；陽性的為非發(fā)酵菌（我們實驗室還沒有簡單的系統(tǒng)鑒定方 法，一般要儀器上卡檢測）或弧菌科細(xì)菌。1. 腸桿菌科的系統(tǒng)生化.KIA試驗（克氏雙糖鐵）組成：乳糖/葡萄糖=10/1 （斜面/高層，其長度最好是都是2CM結(jié)果判斷：斜面或高層變黃色：陽性；不變色（紅色）： 陰性高層中出現(xiàn)裂隙：產(chǎn)氣陽性高層中出現(xiàn)黑色（FeS）：產(chǎn)H2S陽性文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案.苯丙氨酸脫竣酶試驗細(xì)菌產(chǎn)生的苯丙氨酸脫竣酶使苯丙氨酸氧化脫竣后生成苯丙酮酸，再與10%勺FeCl3試劑產(chǎn)成深綠色反應(yīng)。（

17、變 形桿菌屬、普羅威登菌屬和摩根菌屬為陽性，其他為陰 性）.枸椽酸鹽試驗（碳源利用實驗）在枸椽酸鹽培養(yǎng)基中細(xì)菌能利用的碳源只有枸椽酸鹽， 分 解后生成碳酸鈉，使培養(yǎng)基變堿性， pH指示劑澳麝香草 酚藍(lán)由淡綠色變?yōu)樯钐m色，即為枸椽酸鹽試驗陽性。 （埃 希氏菌屬，志賀氏菌屬，愛德華菌屬為陰性，其他為陽性） 注意：接種時不能被糖，蛋白月東污染，要單獨接種）.甲基紅（MR試驗細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸進一步分解為甲酸、乙酸、乳酸和琥珀酸等，使培養(yǎng)基的 pH下降至4.5以下 時，加入甲基紅指示劑由桔黃色變桔紅色為弱陽性； 變紅 色為陽性。培養(yǎng)基成分：葡萄糖蛋白月東水試劑：甲基紅0.1g,酒精300

18、ml,水200ml主要用于大腸埃希菌（十 ）和產(chǎn)氣腸桿菌（）的鑒別； 常與V-P實驗聯(lián)合使用，一般情況下兩者結(jié)果正好相反， 但也有例外如奇變兩者同為陽性。.MIU （動力靛基質(zhì)尿素）試驗文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案.動力：在半固體培養(yǎng)基中穿刺接種細(xì)菌培養(yǎng)后，若穿 刺線周圍有細(xì)菌擴散生長，則為動力（+）;清晰則 為動力（一）。.靛基質(zhì)試驗（呻噪試驗）：某些細(xì)菌有色氨酸酶，能 分解培養(yǎng)基中的色氨酸生成呻噪。呻噪再與試劑對位 二氨基苯甲醛作用形成玫瑰呻噪而呈紅色。.尿素試驗：某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶，分解尿素產(chǎn)生大量的氨，使培養(yǎng)基變堿，再使培養(yǎng)基中的指示劑（0.4嫩紅）變紅色即為陽性。.硝酸鹽還原試驗NO NO-（

19、大腸）NO NHfNO- - N （沙雷氏菌屬）試劑甲：對氨基苯磺酸試劑乙：0c -蔡胺觀察結(jié)果時甲液和乙液要等量加入， 立即或10min內(nèi)出現(xiàn) 紅色為陽性。若不變色，則要加入鋅粉：變紅色，說明 硝還試驗為真陰性仍不變色， 說明硝還試驗真陽性，但 原先還原產(chǎn)物不是NO一。陰性結(jié)果出現(xiàn)時有三種可能：細(xì)菌不能還原硝酸鹽亞 硝酸鹽繼續(xù)分解生成氨或氮培養(yǎng)基不適合細(xì)菌生長 腸桿菌科細(xì)菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案.氨基酸脫竣試驗細(xì)菌產(chǎn)生脫竣酶分解氨基酸使其脫竣生成胺和 CO,雖 然各種細(xì)菌所產(chǎn)生的脫竣酶不一定相同，但最后都能生 成胺（賴氨酸一尸胺，鳥氨酸一腐胺，精氨酸一精胺） 和CO。然后胺

20、能使培養(yǎng)基變堿性，通過指示劑（澳甲 酚紫）由黃變紫即為陽性。對照管（無氨基酸）為黃色。注意：微量管接種好后要加石蠟，使培養(yǎng)基造成厭氧 環(huán)境。（生成的胺更穩(wěn)定，還能誘導(dǎo)氨基酸脫竣酶的產(chǎn) 生）對照管如果不顯黃色，則結(jié)果不能判斷。應(yīng)用：除傷寒沙門氏菌，雞沙門氏菌外，其他沙門氏菌鳥AA,賴AA均為陽性；除宋氏和鮑氏志賀菌外其他志 賀菌也菌為陽性。.葡萄糖酸鹽試驗微量管在培養(yǎng)1824h后，加班氏試劑，水浴煮沸10 min,由蘭色變黃綠色到磚紅色即為陽性， 不變?yōu)殛幮浴?. 腸桿菌的鑒定流程.根據(jù)苯丙氨酸脫竣酶實驗：（十 ）：變形桿菌屬，普羅威登斯菌屬，摩根氏菌屬（-）:埃希氏菌屬，志賀氏菌屬，沙門氏菌屬

21、，枸椽酸 桿菌屬，愛德華菌屬；克雷伯菌屬，腸桿菌屬， 沙雷氏菌屬，哈夫尼亞菌屬。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案.苯丙氨酸脫竣酶實驗陰性，加做葡萄糖酸鹽實驗（十 ）:克雷伯菌屬，腸桿菌屬，沙雷氏菌屬，哈夫尼亞 菌屬a. 動力（一）：克雷伯菌屬，屬內(nèi)種的鑒定主要 根據(jù)呻噪試驗（肺克呻噪實驗陰性，三個亞種鑒別 試驗IMViC:肺炎H + ,臭鼻I d,鼻硬結(jié)I）b. 動力（+ ） , DNAB （ + ）:沙雷氏菌屬動力（+ ） , DNA酶（），枸椽酸鹽（+ ）:腸 桿菌屬（主要是陰溝腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌，前者賴 氨酸陰性，而后中為陽性）動力（+ ） , DNA酶（），枸椽酸鹽（-）:哈 夫尼亞菌屬（）：加做IM

22、ViC （靛基質(zhì)-甲基紅-VP胸椽酸鹽）試驗a. IMViC （H I ）:大腸埃希國（H2S ）或 愛德華菌屬（HS+）。b. IMViC/ + + + ）:枸椽酸桿菌屬.苯丙氨酸脫竣酶實驗陽性，根據(jù)產(chǎn) H2S可分（十 ）:變形桿菌屬屬內(nèi)主要鑒定試驗如下普變奇變產(chǎn)粘變潘尼氏文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案尿素酷十十十十鳥氨酸一十一一靛基質(zhì)十一一一麥芽糖一一十十木糖十十一十（-）:普羅威登氏菌屬，摩根氏菌屬普羅威登氏菌屬：鳥氨酸：；枸椽酸鹽：+ （屬 內(nèi)鑒定尿素酶及一些碳水化合物的產(chǎn)酸試驗， 如甘露醇、阿拉伯糖、海藻糖等）摩根氏菌屬：鳥氨酸：+;枸椽酸鹽：（只有 一個種：摩氏摩根氏菌）.志賀氏菌屬和沙門氏菌屬

23、這兩種菌屬在腸道選擇性培養(yǎng)基（SS麥康凱）形成 不發(fā)酵乳糖的透明或半透明的無色菌落， 但一些沙門氏能 產(chǎn)H2S就會形成中心黑色的菌落，鑒定時在選擇性培養(yǎng)基 上挑選可疑菌落進行鑒定。a.志賀氏菌屬主要系統(tǒng)生化：KIA: K/A （只有福氏6型能產(chǎn)氣），H2s （ 一） ; MIUJ: -+/-苯丙：；枸椽酸鹽：。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案報告結(jié)果時要根據(jù)其血清學(xué)的結(jié)果鑒定到種，即A群（痢疾志賀氏菌）、B群（福氏志賀氏菌）、C群（鮑氏 志賀氏菌）、D群（宋氏志賀氏菌）；我國主要以 B群和 D群為主。b.沙門氏菌屬主要系統(tǒng)生化：KIA: K/AG, H2S （+/-） ; MIU: + 苯丙：；枸椽酸鹽：。傷

24、寒沙門氏菌的抗原結(jié)構(gòu)：菌體抗原（O抗原），鞭毛 抗原（H抗原），包膜抗原（主要是 Vi抗原）根據(jù)系統(tǒng)生化鑒定到沙門氏菌屬后，在根據(jù)其抗原結(jié)構(gòu)的 特點，用血清學(xué)凝集分到種即可報告結(jié)果。血清凝集步驟如下：A-F 多價 0（ + ）:0 2, Ha（ +） : A群（甲型副傷寒沙門氏菌）04, Hb（ +） : B群（乙型副傷寒沙門氏菌）0 6 7, Hc, Vi （ + ） : C群（丙型副傷寒沙門氏菌）0 9, Hd, Vi （ + ） : D群（傷寒沙門氏菌）0 3.10, Hehi（ +） : E群0 is Hi （ + ） : F 群A-F多價0 （一）,做Vi血清因子凝集：（+ ）濃菌液

25、 沸水煮沸30min,再用A-F多價0血清定群；（）繼續(xù) 以A-F以外的多價0血清凝集分型。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案血清凝集注意：確定O群后，一定要用H因子再做凝集;最終結(jié)果要以凝到H相后才能報告。七.非發(fā)酵革蘭陰性桿菌非發(fā)酵革蘭陰性桿菌是指一群不利用葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖、需氧或兼性厭氧、無芽胞的革蘭陰性桿菌。 氧化酶試驗 一般陽性，除不動桿菌屬和嗜麥芽假單胞菌外。非發(fā)酵菌按下列試驗進行初步分屬菌屬況 觸酶氧化酶O-F試驗動力MaCC生長情假單胞菌屬十十0/一+ / 一生長無色桿菌屬十十0/一+ / 一生長不動桿菌屬十一0/一一生長產(chǎn)堿桿菌屬十十一十生長摩拉菌屬十十一一不生長金氏菌屬十F（弱

26、）一不定文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案黃桿菌屬+ F （弱）不生長十下面主要講一下銅綠假單胞菌：在血平板上形成的菌落大而扁平、 濕潤、有金屬光澤，有生姜味的灰綠色或蘭綠色的菌落，并有明顯 的溶血環(huán)。常有色素產(chǎn)生（綠膿素，青膿素，紅膿素，黑膿素等）， 在MHF板上更加明顯。銅綠假單胞菌的最低鑒定標(biāo)準(zhǔn)：動力+氧化酶+枸椽酸鹽+ 氧化分解GLU木糖不利用麥芽糖賴、鳥氨酸脫竣酶試驗- 精氨酸雙水解酶試驗+HS。八.棒狀桿菌屬棒狀桿菌屬是一群革蘭陽性桿菌。菌體大小長短不一，常一端 或兩端膨大呈棍棒狀。大多數(shù)存在于水和土壤中，其中有的是人和 動物粘膜上的正常菌群，若是從無菌部位分離到棒狀桿菌，應(yīng)予以 鑒定（如宮頸拭子）

27、。在血平板上能生長，但生長不良好，菌落細(xì)小，濕潤。鑒定：根據(jù)觸酶和有無溶血，可分：.HQ+ ,無溶血：白喉、假白喉、潰瘍、干燥、假結(jié)核、 馬棒、牛棒；文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案.H2O,有溶血：溶血棒、化膿棒、陰道棒.加做葡萄糖，麥芽糖，蔗糖產(chǎn)酸試驗，結(jié)合和標(biāo)本類型，基本上可以鑒定到是哪一種棒狀桿菌。藥敏試驗方法： 一、K-B 法：1、從孵育了 16-24小時的瓊脂平板上（血平板），挑出單個菌落，直 接用生理鹽水制成0.5麥?zhǔn)蠁挝弧?、在15分鐘內(nèi)，用無菌棉拭子蘸取調(diào)好的菌液，在液面上方管壁處 旋轉(zhuǎn)并用力擠壓幾次，以從中擠出過多的菌液。3、用棉拭子在無菌的M-H培養(yǎng)基表面化線接種，再重復(fù)操作兩次，每次將

28、平板轉(zhuǎn)動60度，每次接種都應(yīng)保證接種物均勻分布，最后用 棉拭子涂抹平板的邊緣。4、將確定好的藥敏紙片分貼到平板表面。每個紙片都應(yīng)壓一下，以 保證與平板表面完全接觸。每個紙片中心間距24mm紙片一旦與平板接觸，不應(yīng)再移動。5、貼完紙片后，應(yīng)在15分鐘內(nèi)放入35度孵箱。嗜血桿菌屬，鏈球 菌屬放入3%-5%勺CO洲缸。6、孵育24小時以后，測量各藥敏紙片抑菌圈直徑，與 NCCL舜冊比 較，作出結(jié)果判斷。說明：細(xì)菌藥敏結(jié)果的判斷以NCCLS1標(biāo)準(zhǔn)，所以藥敏試驗的每一步 都應(yīng)嚴(yán)格按照NCCLSI作，否則將失去意義。鏈球菌、奈瑟菌屬、流 感嗜血桿菌、除銅綠假單抱菌和不動桿菌外的假單胞菌屬不用K-B法.文檔

29、實用標(biāo)準(zhǔn)文案肺炎鏈球菌膠乳凝集測定法1、在一干凈玻片上分別滴兩滴生理鹽水。2、從冰箱取出鑒定試劑（Slidex pneumo-kit）于室溫。3、在其中一滴生理鹽水上滴加 R1試劑，在另外一滴上滴加R2試劑, 用攪拌棒混勻。4、輕輕晃動玻片2分鐘，觀察結(jié)果。5、2分鐘內(nèi)，如R1出現(xiàn)凝集為陽性；如 R1、R2均未出現(xiàn)凝集為陰 性。注：R3為陽性對照。二、藥敏紙片的選擇1、革蘭陰性桿菌（腸桿菌科）頭抱唾腸（CTX0頭抱口林（CZ0頭抱他定（CAZ氨節(jié)西林（AM哌拉西林（PIP）阿米卡星（AN）頭抱曝吩（CF）環(huán)丙沙星（CIP）頭抱他定/克拉維酸（CAZ/CA 哌拉西林/三晚巴坦（PIP/TZ）竣節(jié)

30、青霉素（CB亞安培南頭抱匹腸（FEB 頭抱克羅（CEC慶大霉素（GM2、銅綠假單抱菌妥布霉素（TM頭抱哌酮（CFP頭抱唾腸（CTX頭抱吠辛（CXM頭抱曝肪/棒酸（CTX/CA 奧格門?。?AMX/CA安曲南（AZT）頭抱匹歷頭抱他定（CAZ/不動桿菌阿米卡星（AN哌拉西林（PIP）環(huán)丙沙星（CIP）文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案左旋氧氟沙星（OFL 亞安培南哌拉西林/三晚巴坦3、金黃色葡萄球菌 苯嘎西林（OX 青霉素G （P）頭抱噪林（CZ 阿米卡星（AN紅霉素（E）頭抱唾肪（CTR 環(huán)丙沙星（CIP）頭抱曝吩（CF）萬古霉素 奧格門?。?AMX/CA哌拉西林/三晚巴坦4、腸球菌氨節(jié)西林（AM萬古霉素環(huán)丙沙

31、星（CIP）慶大霉素（GM紅霉素（E）氧氟沙星（OFD5、除肺炎鏈球菌外鏈球菌氨節(jié)西林（AM頭抱唾腸（CTX萬古霉素紅霉素（E）氧氟沙星（OFD克林霉素（CM）肺炎克雷伯菌產(chǎn)酸克雷伯菌和大腸桿菌 ESBLs的檢測MH培養(yǎng)基上貼頭抱他定，頭抱他定/克拉維酸，頭抱曝肪/棒酸，安 曲南。如頭抱他定的抑菌圈22mm安曲南27mm頭抱嚷腸27mm意味可 能有ESBL同生。如頭抱他定/克拉維酸與頭抱他定，頭抱曝肪/棒酸與頭抱唾歷的差值A(chǔ) 5mm則確證ESBL同生。耐藥機制。一代頭抱對普通變形桿菌、枸椽酸桿菌、腸球菌、假單抱菌屬、沙雷 氏菌屬、擬桿菌屬無效。第二代頭抱對假單抱菌屬、不動桿菌屬、沙雷氏菌屬、腸

32、球菌無效；腸球菌對頭抱類天然耐藥。氨基糖苴類抗生文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案素阿米卡星與慶大霉素不完全交叉耐藥。 紅霉素類、四環(huán)素類等抗生素內(nèi)部有相互交叉耐藥。金黃色葡萄球菌耐萬古霉素、無乳鏈球菌耐青霉素和氨節(jié)青霉素、無 乳鏈球菌和D群鏈球菌耐萬古霉素和替拉考寧為不可能的表型。洋蔥伯克霍德菌對氨基糖苴類、亞安培南天然耐藥。除表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌外，替拉考寧耐藥的凝固酶陰性的葡萄球菌不常見。金黃色葡萄球菌對復(fù)方新諾明耐藥為罕見表型。氨節(jié)青霉素對非發(fā)酵類不宜應(yīng)用。對于葡萄球菌，苯嘎西林耐藥，青霉素敏感是不可能的。NCCL供于細(xì)菌藥敏實驗的說明總評論：1、頭抱嚷吩可以代表頭抱嚷吩、頭抱匹林、頭抱拉定、頭抱

33、氨節(jié)、頭抱克洛、和頭抱羥氨節(jié)。但是，頭抱噪林、頭抱吠辛、頭抱泊歷、頭抱丙烯應(yīng)單獨測試，因為某些對這些藥物敏感的菌株對頭抱嚷吩是耐藥的。2、利福平不能單獨用于化療。腸桿菌科1、對于沙門菌屬和志賀菌屬只有氨節(jié)西林、唾諾酮、和甲氧節(jié)咤/磺胺甲惡噪可用于常規(guī)試驗與報告。 初此之外，對于沙門菌屬和志賀 菌屬的腸道外分離株，應(yīng)測試并報告氯霉素和一種三代頭抱菌素。2、克雷伯菌屬和大腸艾希菌的產(chǎn) ESBLSft對青霉素、頭抱菌素類或文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案安曲南臨床治療可顯耐藥性，盡管在體外藥敏試驗對其中某些抗生素 敏感。對于所有產(chǎn)ESBL麻，應(yīng)報告為耐所有青霉素類、頭抱菌素及 安曲南。3、隨著3代頭抱菌素的治療，腸

34、桿菌屬、枸椽酸菌屬和沙雷菌屬可 發(fā)展其耐藥性。最易敏感的菌株在開始治療3-4天就可變?yōu)槟退帲?此要反復(fù)測試這些菌株。葡萄球菌1、青霉素敏感的葡萄球菌對 FDA批準(zhǔn)的用于葡萄球菌感染的其他青 霉素類、頭抱菌素和碳青烯類也是敏感的。青霉素耐藥而苯口坐西林敏 感的菌株對B -內(nèi)酰胺酶不穩(wěn)定的青霉素是耐藥的，但對其他B-內(nèi)酰 胺酶穩(wěn)定的青霉素、B -內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合藥、相關(guān)的頭抱類和卡 巴陪南是敏感的。苯嘎西林耐藥的葡萄球菌對現(xiàn)在可用的所有（3-內(nèi)酰胺類抗生素是耐藥的。因此僅測試青霉素和苯噪西林就可以推知一 大批B -內(nèi)酰胺類抗生素的敏感性與耐藥性，不必常規(guī)測試其他青霉 素類、B -內(nèi)酰胺類抑制劑

35、復(fù)合藥、頭抱類和卡巴陪南類。2、絕大多數(shù)的MRS寸多種抗生素而t藥。包括（3 -內(nèi)酰胺類、氨基糖苴 類、大環(huán)內(nèi)酯類、克林霉素和四環(huán)素。觀察到多重耐藥應(yīng)該是對甲氧 西林可能耐藥的線索。3、長期應(yīng)用唾諾酮類治療的過程中葡萄球菌可發(fā)展其耐藥性，因此 應(yīng)重復(fù)測試耐藥性。腸球菌1、對于腸球菌屬，頭抱菌素、氨基糖苴類（除了篩選高水平耐藥性）、文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案克林霉素和甲氧節(jié)咤/磺胺甲惡噪在體外可能有活性，但臨床無效， 因此不能報告細(xì)菌對這些藥物敏感。2、青霉素敏感性可以用于不產(chǎn)B -內(nèi)酰胺酶的腸球菌對氨節(jié)西林、 阿 莫西林、?；惫?jié)西林、氨節(jié)西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉維酸、哌 拉西林以及哌拉西林/三晚巴

36、坦的敏感性3、氨節(jié)西林是氨節(jié)西林和阿莫西林類的代表藥。氨節(jié)西林的結(jié)果可 用來判斷不產(chǎn)（3 -內(nèi)酰胺酶的腸球菌對阿莫西林/克拉維酸和氨節(jié)西 林/舒巴坦的敏感性。4、青霉素的結(jié)果可預(yù)測不產(chǎn)B -內(nèi)酰胺酶的腸球菌對氨節(jié)西林、 阿莫 西林、氨節(jié)西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/三晚巴坦 的敏感性。5、對于血和腦脊液分離株需用頭抱硝唾吩（3-內(nèi)酰胺酶試驗，陽性提示對青霉素耐藥，同時對酰胺基、竣基和月尿基青霉素耐藥。細(xì)菌鑒別要點：1、革蘭陽性球菌所有革蘭陽性球菌第一步為觸酶試驗。通常觸酶陽性為葡萄球菌和微球菌，陰性為鏈球菌科。但不排除 例外，氣球菌為弱陽性。糞腸球菌偶有陽性。操作觸酶試驗應(yīng)盡量避

37、 免用鉗金取菌環(huán)（針）在H2O2上涂菌，而應(yīng)先涂菌，在滴H2Q,步驟 不能顛倒。因為鉗金可以和 H2Q產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。H2Q必須新鮮，若 放置過久或暴露于光線下容易分解，必須保存于 4 c冰箱。實驗所用 菌須大量，不可挑到瓊脂，會產(chǎn)生假陽性。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案對觸酶陽性的革蘭陽性球菌，應(yīng)繼續(xù)做玻片法血漿凝固酶試驗，此為檢出葡萄球菌，如陽性一般為金黃色葡萄球菌；如陰性應(yīng)做試管 法凝固酶實驗確證，玻片法僅為篩選實驗。血漿凝固酶實驗用血漿須 用兔或豬血漿，新鮮血漿不穩(wěn)定，可能發(fā)生自我凝集或形成顆粒產(chǎn)生 渾濁或產(chǎn)生沉淀而導(dǎo)致判度錯誤；不可使用人血漿，其含有抑制物質(zhì) 回干擾實驗結(jié)果。觸酶陰性為鏈球菌科，根

38、據(jù)菌落溶血進行下一步鑒定：a溶血：草綠色鏈球菌；肺炎鏈球菌；腸球菌b溶血：A群鏈球菌；B群鏈球菌，部分D群鏈球菌腸球菌也有不溶血菌落，不能根據(jù)溶血判斷腸球菌。鏈球菌主要實驗： 膽汁七葉甘，七葉甘，菊糖，CAMP桿菌肽，高鹽，奧樸托辛，膽鹽 溶解。腸球菌為致病菌，且腸球菌與非腸球菌耐藥機制不同， 應(yīng)進行鑒 別，腸球菌分為糞腸球菌和屎腸球菌； 非腸球菌分為牛鏈球菌和馬鏈 球菌。腸球菌對青霉素耐藥，非腸球菌對青霉素敏感。腸球菌的藥敏 注意高耐氨基糖苴的細(xì)菌，如高耐氨基糖苴則意味氨基糖苴與b內(nèi)酰 胺類藥物合用無協(xié)同作用。肺炎鏈球菌與草綠色鏈球菌鑒別：肺炎鏈球菌奧樸托辛、菊糖、膽鹽 溶解實驗皆為陽性。但

39、這3個實驗都非特異，需聯(lián)合應(yīng)用方為最佳。 肺炎鏈球菌的青霉素藥敏實驗應(yīng)注意，當(dāng)青霉素（K-B法）的抑菌圈 直徑大于或等于19mm寸為敏感，當(dāng)小于19mm寸不能確定是否中敏或 耐藥，應(yīng)做MIC稀釋確證。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案2、革蘭陰性桿菌包括腸桿菌科、非發(fā)酵菌和弧菌科。第一步實驗為氧化酶實驗。氧化酶陰性為腸桿菌科；陽性為非發(fā)酵菌和弧菌科。腸桿菌科包括大腸桿菌、變形桿菌、普羅菲登斯菌及摩根菌屬、克雷 伯菌屬、腸桿菌屬、多源菌屬、沙雷菌屬、耶爾森菌屬。非發(fā)酵菌包 括銅綠假單抱菌、黃單抱菌、不動桿菌等。氧化酶實驗注意事項：需用銅綠假單抱菌做陽性對照。60秒內(nèi)判讀結(jié)果有效，而以10秒內(nèi)最佳。不要用含微量鐵的

40、取 菌環(huán)或針，可用棉棒替代。革蘭陰性桿菌的鑒定以API系列為國標(biāo)，其他生化管僅為常規(guī)鑒定。標(biāo)準(zhǔn)化的微生物采集方法（一）基本原則1、發(fā)現(xiàn)感染應(yīng)及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查，二、三級醫(yī)院微生物標(biāo)本送檢率不應(yīng)低于70%2、盡量在抗菌藥物使用之前采集標(biāo)本。3、標(biāo)本采集時應(yīng)嚴(yán)格無菌操作，減少或避免機體正常菌群及其它雜 菌污染。4、標(biāo)本采集后應(yīng)立即送至細(xì)菌室。床旁接種可提高病原菌檢出率。5、以棉拭子采集的標(biāo)本如咽拭子、肛拭或傷口拭子，宜插入運送培 養(yǎng)基送檢。6、送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康模辜?xì)菌室能正確選用相應(yīng)的培文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案養(yǎng)基和適宜的培養(yǎng)環(huán)境。（二）血液與骨髓的送檢方法1、通常采血部位為肘靜脈

41、。疑似細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時，以肘動脈或股動脈采血為宜，切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本。2、采血部位的局部皮膚應(yīng)嚴(yán)格消毒。將采集的血液注入血培養(yǎng)瓶前， 應(yīng)更換針頭或過火消毒針頭。3、每次采血量成人510ml,嬰幼兒12ml,培養(yǎng)基與血液之比以 10: 1為宜，以稀釋血液中的抗生素。4、懷疑菌血癥因盡早采血，體溫上升階段采血可提高陽性率，但要 防止因等待而延誤時機。對已用抗菌藥物而不能停藥者，可在下次用 藥前采血。5、對疑為細(xì)菌性骨髓炎或傷寒病人，在病灶或骼前（后）上棘處嚴(yán) 格消毒后抽取骨髓1ml作細(xì)菌培養(yǎng)。（三）尿液的送檢方法1、中段尿：女性采樣前應(yīng)先用肥皂水或 0.1%高鎰酸鉀溶液沖洗外陰

42、部及尿道口 ；男性須翻轉(zhuǎn)包皮沖洗，用0.1%新潔爾滅消毒尿道口，滅菌紗布擦干后，收集標(biāo)本。2、導(dǎo)尿管導(dǎo)尿采樣可減少污染。對留置導(dǎo)尿者，可用碘酒消毒尿道 口處的導(dǎo)尿管壁，用聯(lián)空針筒的細(xì)針斜穿管壁抽吸尿液；或拔去閉式 引流的集尿袋，棄取導(dǎo)尿管前段尿液，留無污染的膀胱內(nèi)尿液數(shù)毫升 送檢。不可從集尿袋的下端管口留取標(biāo)本。3、送檢標(biāo)本以晨起第一次尿為宜。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案4、室溫下尿標(biāo)本擔(dān)擱稍久可導(dǎo)致尿內(nèi)細(xì)菌濃度明顯增加而影響病原菌與污染菌的區(qū)分。不能立即送檢者，可暫存 4 c冰箱。（四）痰標(biāo)本的送檢方法1、咳痰：清水反復(fù)漱口后用力咳痰，從呼吸道深部咳出新鮮痰液于無菌容器送檢。痰量極少者可用 45 c 1

43、0%K化鈉溶液霧化吸入導(dǎo)痰。2、對咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管經(jīng)鼻腔或口抵達(dá)氣管腔內(nèi)吸引痰液。用纖維支氣管鏡可直接在病灶部位采集高濃度的感染病原菌，但不能完全避免咽喉部正常菌群感染。3、雙側(cè)肺部感染伴人工氣道如氣管切開或氣管插管患者，可用吸痰管經(jīng)人工氣道估插至葉支氣管水平吸引痰液。4、痰標(biāo)本不能及時送檢者，可暫存 4c冰箱。室溫下?lián)鷶R數(shù)小時定植于口咽部的非致病菌呈過度生長而肺炎鏈球菌、 葡萄球菌和流感嗜血桿菌檢出率明顯降低（五）手術(shù)創(chuàng)口、燒傷創(chuàng)面于膿液1、無菌生理鹽水擦洗病灶表面后，用棉拭子采取病灶深部的膿液和分秘物，置運送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。2、對未潰瘍的膿腫宜用碘酒、酒精消毒皮膚后，以無菌注射

44、器抽取膿液送檢；也可于切開膿腫時用無菌棉拭子采樣。3、采樣前病灶局部應(yīng)避免用抗菌藥物或消毒劑。（六）糞便的送檢方法1、排便后，挑取有膿血、黏液部分的糞便23g （液狀糞便則取絮狀物），盛于蠟紙袋內(nèi)送檢。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案2、對不易獲取糞便者或嬰幼兒，可用肛拭采集。將拭子前端用無菌 甘油水濕潤。然后插入肛門約 45cm （幼兒約23cm）處，輕輕旋 轉(zhuǎn)擦取直腸表面黏液后退出，置運送普及內(nèi)送檢。（七）咽拭、口腔拭子的送檢1、病人清水漱口后，由檢查者將其舌外拉時懸幽垂盡可能向外牽 引，棉拭子越過舌根到咽后壁或懸幽垂的后側(cè)，反復(fù)擦拭數(shù)次，插入 運送培養(yǎng)基。棉拭子應(yīng)避免觸及舌、口腔黏膜和唾液。對化膿性扁桃

45、體炎或口腔念珠菌病，用棉拭臨床標(biāo)本的處理1、血標(biāo)本1.1 常見細(xì)菌革蘭陽性菌：肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血 性 鏈球菌、糞腸球菌、類白喉棒狀桿菌、產(chǎn)單核李斯特菌等。革蘭陰性菌：腦膜炎奈瑟菌、卡他布蘭漢菌、傷寒沙門菌、流感嗜血 桿菌、大腸艾希菌、變形桿菌、產(chǎn)汽腸桿菌、銅綠假單抱菌、肺炎克 雷伯菌等。1.2 臨床意義血液培養(yǎng)應(yīng)用于傷寒、副傷寒、化膿性細(xì)菌和其他革蘭陰性桿菌引起 的敗血癥的診斷。目前引起敗血癥的細(xì)菌多為金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌。疥、癰和膿腫繼發(fā)的敗血癥主要是金黃色葡萄球菌和溶血性鏈球菌引 起。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案尿道、膽、胃腸黏膜損傷引起的敗血癥以大腸埃希菌多見，其次

46、為變 形桿菌、產(chǎn)汽腸桿菌、葡萄球菌。急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎以金黃色葡萄球菌、 溶血性鏈球菌、腦膜炎奈瑟 菌常見；亞急性心內(nèi)膜炎以草綠色鏈球菌多見，偶見腸球菌；化膿性 心包炎以金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌多見。血液病、肝硬化引起的敗血癥金黃色葡萄球菌和銅綠假單抱菌為主。彌漫性血管內(nèi)凝血以革蘭陰性桿菌為主。燒傷后敗血癥以銅綠假單抱菌為主。3、痰標(biāo)本常見細(xì)菌： 肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、結(jié)核分 枝桿菌；腦膜炎奈瑟菌、卡他布蘭漢菌、肺炎克雷伯菌、大腸艾希菌、 銅綠假單抱菌、沙雷菌、流感嗜血桿菌。痰標(biāo)本：須接種2個血平板，一個放普通孵箱，另一個放CO孵箱.痰標(biāo) 本接種于血平板、麥

47、康凱平板、巧克力平板。巧克力平板是用來篩選 流感嗜血桿菌。肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌的檢出率是衡量一個細(xì)菌 室水平的重要依據(jù)，因此對于包括以上兩種菌在內(nèi)的苛養(yǎng)菌的鑒定應(yīng) 引起重視。痰標(biāo)本接種時，第一區(qū)劃完線后，接種環(huán)必須過火消毒， 否則將達(dá)不到分區(qū)的效果。痰標(biāo)本建議接種2個血平板、一個巧克力平板、一個麥康凱平板。痰 標(biāo)本于咽標(biāo)本的處理基本相同。4、尿標(biāo)本常見細(xì)菌：大腸艾希菌、葡萄球菌、變形桿菌。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案注意事項：尿標(biāo)本不能離心，離心將使污染菌也集中于沉淀部分，導(dǎo) 致錯誤結(jié)果。一般而言，菌落大于 105/ml代表真正感染，103/ml以 下表示污染，104105/ml為懷疑污染，如病人的排

48、尿速度太快或接 受藥物治療或尿的pH小于5.0,比重小于1.003時，細(xì)菌的數(shù)目可 能降低。因此病人若已服用抗生素，104/ml菌落即需進行鑒定和抗 生素藥敏試驗。加強微生物實驗室與臨床科室的聯(lián)系、密切合作，確保標(biāo)本的質(zhì)量： 微生物學(xué)檢驗的標(biāo)本大多數(shù)都是由臨床科室有關(guān)人員或患者留取的，而留取的標(biāo)本的質(zhì)量是否符合要求就是一個非常重要的問 題，因此要與臨床合作，確保標(biāo)本的質(zhì)量，主要有以下幾個方面：1、血液（骨髓）標(biāo)本的留取1 ）應(yīng)在給患者使用抗菌藥物之前留取標(biāo)本。2 ）應(yīng)在患者發(fā)熱初起或發(fā)熱高峰時留取。3 ）應(yīng)盡量留取兩次標(biāo)本。4）留取標(biāo)本時應(yīng)盡量避免污染，如有可能污染時應(yīng)注明。5 ）如考慮有厭氧

49、菌感染時應(yīng)同時作需氧菌及厭氧菌培養(yǎng)。6）如已給予患者抗菌藥物治療則應(yīng)使用樹脂培養(yǎng)瓶并在給藥之 前留取。7 ）兒童患者則應(yīng)使用兒童培養(yǎng)瓶。8）如考慮有L型菌感染的可能則應(yīng)使用L型培養(yǎng)瓶。文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案2、下呼吸道分泌物標(biāo)本的留取1 ）清晨留取。2）留取前用清水漱口三次。3）囑患者用力咳出。4 ）如患者做纖維支氣管鏡檢查則可同時抽取分泌物。5）昏迷患者可作氣管穿刺吸取。3、尿液標(biāo)本的留取1 ）留取清晨第一次尿液。2）留取中段尿，女性患者則應(yīng)清洗會陰部后留取中段尿。3 ）必要時可導(dǎo)尿留取標(biāo)本。4 ）不應(yīng)從留置導(dǎo)尿管中抽取尿標(biāo)本。5 ）必要時可做恥骨聯(lián)合上膀胱穿刺抽取尿液標(biāo)本。4、化膿性感染及外傷標(biāo)本的留取1）用無菌棉拭子蘸取分泌物，如分泌物較多可先用滅菌生理鹽 水沖洗后留取，標(biāo)本留取后應(yīng)將拭子插入運送培養(yǎng)基中。2）如為慢性感染可取感染壞死組織與健康組織之間的少許組織 作為培養(yǎng)標(biāo)本。3 ）如