微生物檢驗標(biāo)本采集運(yùn)送程序

1、微生物檢驗標(biāo)本采集運(yùn)送程序1目的規(guī)范微生物檢驗標(biāo)本采集、運(yùn)送，保證實驗檢測前標(biāo)本質(zhì)量。2范圍微生物檢驗標(biāo)本。3職責(zé)3.1 醫(yī)護(hù)人員和檢驗人員負(fù)責(zé)指導(dǎo)病人如何正確留取標(biāo)本。3.2 門診抽血人員和病房護(hù)理人員負(fù)責(zé)臨床標(biāo)本的采集，特殊標(biāo)本由臨床醫(yī)師采集。3.3 標(biāo)本運(yùn)送人員負(fù)責(zé)及時送到檢驗科細(xì)菌室， 急診檢驗標(biāo)本和值班采集的標(biāo)本由臨床科室 相關(guān)人員直接送到細(xì)菌室 （備注： 周一至周五 8：00AM 5：30PM、節(jié)假日 8：00AM-12：00AM 送細(xì)菌室，余下時間送門診檢驗室） 。4程序4.1 采集標(biāo)本前， 采樣人員根據(jù)檢驗項目的要求， 確認(rèn)采樣計劃并進(jìn)行適當(dāng)?shù)臏?zhǔn)備工作。 包 括核對醫(yī)囑， 打印

2、條形碼， 選擇合適的標(biāo)本容器， 粘貼條形碼及指導(dǎo)病人做好采樣前的準(zhǔn)備 工作等。4.2 認(rèn)真核對病人、標(biāo)本容器和檢驗申請是否一致，嚴(yán)防差錯。4.3 選擇正確的解剖部位， 采用適當(dāng)?shù)募夹g(shù)和設(shè)備來采集標(biāo)本， 注意避免自身正常菌群的污 染，各標(biāo)本采集技術(shù)、設(shè)備和方法參見微生物標(biāo)本采集指南。4.4 采集厭氧菌培養(yǎng)標(biāo)本時一般情況下不要使用拭子， 最好選擇活檢或抽吸物； 厭氧菌培養(yǎng) 標(biāo)本的運(yùn)輸應(yīng)避免接觸空氣， 立即送檢， 切不可冷藏； 厭氧標(biāo)本采集與需氧標(biāo)本采集均參見 微生物標(biāo)本采集指南。4.5 收集足夠量的標(biāo)本，量少可能導(dǎo)致假期陰性結(jié)果。4.6 在每份標(biāo)本容器上貼上條形碼標(biāo)識， 標(biāo)識中包含有病人基本信息與

3、檢驗項目， 有時還需 標(biāo)明標(biāo)本來源、采集部位、采集時間。4.7 將標(biāo)本放置于合適的密封容器中。4.8 采集樣品所用材料需按照廢棄物處理程序處置，參見廢棄物處理程序 ）。4.9 采集標(biāo)本后，運(yùn)送人員及時送到檢驗科細(xì)菌室。4.10 標(biāo)本運(yùn)送人員收集標(biāo)本時，需核對標(biāo)本數(shù)，用硬質(zhì)、密閉防泄漏的二級容器將標(biāo)本安 全送抵細(xì)菌室，參見微生物標(biāo)本采集指南。4.11 標(biāo)本送達(dá)細(xì)菌室后，運(yùn)送人員需與細(xì)菌室標(biāo)本接收人員對標(biāo)本進(jìn)行核收登記并簽名。4.12 標(biāo)本采集和運(yùn)輸中的生物安全防護(hù)參見二級生物安全防護(hù)程序 。4.13 采樣人員需培訓(xùn)合格后方可進(jìn)行采樣，病人自行留取標(biāo)本時，需受專業(yè)人員的指導(dǎo)。4.14 所有標(biāo)本必須

4、記錄采樣時間并立即送檢，一般不得超過 2 小時。4.15 組織標(biāo)本如果在厭氧轉(zhuǎn)動系統(tǒng)中存放，不能超過2024 小時。4.16 志賀菌（應(yīng)立即處理） 、淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌和流感嗜血桿菌對環(huán)境溫度敏感， 因此腦脊液、生殖系統(tǒng)、眼或內(nèi)耳標(biāo)本不能冷藏。4.17 標(biāo)本采集后無論運(yùn)送距離的遠(yuǎn)近都應(yīng)按要求進(jìn)行標(biāo)本的包裝和標(biāo)識。4.18 微生物標(biāo)本采集指南詳見下表。微生物標(biāo)本采集指南（一）標(biāo)本類型采集時間溫度轉(zhuǎn)運(yùn)報告時間（工作日）采樣限制注意事項原則裝置和 最小量血液骨髓1、培養(yǎng)瓶消毒：用 75%乙醇消毒橡膠塞 30s 2、靜脈穿刺消毒： 嚴(yán)格按皮膚消毒步 驟操作（酒精 -碘酊 - 酒精） 3、血液培養(yǎng)

5、需特別 注意消毒， 因許多微 生物、尤其葡萄球菌 屬通常存在皮膚表 面或近表層處， 易造 成污染 4、采血時機(jī)：在寒 戰(zhàn)出現(xiàn)時或發(fā)熱初 期采集血培養(yǎng)最佳血培養(yǎng)瓶有 兩種規(guī)格，采 血量不一樣。 成人瓶： 5 8ml/ 瓶 小兒瓶： 1 3ml/ 瓶2h 常溫 禁止冷藏陰性： 5d 陽性：隨時報 告危急值， 最 終報告及時 發(fā)出建議從不同 部 位各采 1 瓶，共 2 瓶同 時送檢。病人信息標(biāo)識不 可覆 蓋血培 養(yǎng)瓶 的條形碼； 標(biāo)本采 集后立即送檢， 如 不能立即送檢， 應(yīng) 置于室溫， 禁止放 置冰箱腦脊液同血液、骨髓同血液、骨髓1h 常溫 禁止冷藏陰性： 3 5d 陽性：隨時報 告危急值， 最

6、終報告及時 發(fā)出無病人信息標(biāo)識不 可覆 蓋血培 養(yǎng)瓶 的條形碼； 標(biāo)本采 集后立即送檢， 如 不能立即送檢， 應(yīng) 置于室溫， 禁止放 置冰箱微生物標(biāo)本采集指南（二）標(biāo)本類型采集時間溫度轉(zhuǎn)動報告時間（工作日）采樣限制說明原則裝置和最小量膿腫傷口1、采集前用無鹽水或 75%酒精清創(chuàng)，以去除 表面細(xì)菌。2、用無菌針穿刺法抽 吸深部膿液， 或用無菌 拭子從傷口深處采集 滲出物。無菌容器1ml常溫1h陰性： 3d 陽性：隨時報 告危急值， 最 終報告及時 發(fā)出1/d #組織或抽吸物標(biāo)本優(yōu)于拭子標(biāo)本組織1、用無菌容器呈送2、小樣本應(yīng)滴加幾滴 無菌鹽水保持濕潤 3、不能使組織干涸無菌容器，需要加一些鹽水無呈

7、送組織的量盡 可能多， 不要呈送 表面簡單摩擦的 拭子靜脈導(dǎo)管1、用 75%酒精消毒導(dǎo) 管周圍的皮膚 2、將導(dǎo)管未端約 5 移入無菌管無菌試管1/d#穿刺液、 心包液、 胸腹水、 關(guān)節(jié)液、 等1、注意徹底消毒，因 許多微生物， 尤其葡萄 球菌屬通常存在皮膚 表面或近表層處， 易造 成污染 2、盡量留取多量標(biāo)本同血液、骨髓無引流液1、用 75%酒精消毒導(dǎo) 管采集部分 2、用注射器從引流管 無菌采集 2 3ml無菌容器1ml常溫2h陰性： 2d 陽性：及時發(fā) 送報告標(biāo)本不能直接從 引流袋放出， 因引 流液在袋中潴留 時間太長容易孳 生細(xì)菌微生物標(biāo)本采集指南（三）標(biāo)本類型采集時間溫度轉(zhuǎn)動報告時間（工

8、作日）采樣限制說明原則裝置和最小量眼結(jié)膜1、用無菌鹽水預(yù) 濕的拭子繞每一 個結(jié)膜取標(biāo)本 2、采集完即接種 培養(yǎng)基無菌試管常溫（需要時保溫），立即送檢陰性： 3d 陽性：隨時報 告危急值， 最 終報告及時 發(fā)出無1、采集時，需避 免感染蔓延至眼 部臨近區(qū)域 2、需標(biāo)明左眼、 右眼的標(biāo)本肺泡灌 洗液、氣 管 抽 吸 物、痰、 等1、用溫開水清洗 或漱口去除口腔 表面菌 2、指導(dǎo)病人從肺 深部咳出痰液， 采 集到無菌容器內(nèi)無菌容器1ml2h 常溫陰性： 2d 陽性：及時發(fā) 送報告1/d#對不能咳痰的病 人，應(yīng)經(jīng)抽吸獲得 標(biāo)本，最好的標(biāo)本 應(yīng) 10 個鱗狀細(xì) 胞/LPF鼻用被無菌鹽水濕 潤的拭子插入鼻

9、 孔約 2 ，對鼻黏 膜用力旋轉(zhuǎn)無菌試管咽1、用無菌鹽水濕 潤的拭子經(jīng)鼻輕 輕插入鼻咽后部 2、慢慢旋轉(zhuǎn)拭子 5s，吸收分泌物喉1、用壓舌板壓舌2、用無菌鹽水濕 潤的試子從咽后、 扁桃體和發(fā)炎區(qū) 采樣喉拭子培養(yǎng)不能用于會厭發(fā)炎的病人1/d#表示一天中僅需送檢 1 次，無需多次重復(fù)送檢相同標(biāo)本。微生物標(biāo)本采集指南（四）標(biāo)本 類型采集時間 溫度 轉(zhuǎn)動報告時間 （工作日）采樣限制說明原則裝置和 最小量糞便1、取有膿血、黏液部分的 糞便 1 3g 2、液體糞便取 13ml無菌容器1、住院超過 3d 或 入院診斷不是胃 腸炎的病人， 不做 常規(guī)糞便培養(yǎng)直腸拭子1、小心插入拭子超越肛門 括約肌， 輕輕旋轉(zhuǎn)

10、拭子， 在 肛門隱窩取樣 2、用于檢測病原的拭子應(yīng) 能見到糞便無菌試管常溫2h陰性： 2d 陽性：及時 發(fā)出#1/d#褥瘡潰瘍1、一般不選擇拭子標(biāo)本2、無菌鹽水清洗表面 3、如得不到活檢標(biāo)本或抽 吸物，則用拭子用力采集損 傷底部1、由于褥瘡潰瘍 拭子提供不了什 么臨床信息， 一般 選擇組織活檢或 針頭抽吸標(biāo)本中 段 尿1、在未使用抗生素之前采 集標(biāo)本，注意避免消毒劑污 染標(biāo)本2、最好留取早晨清潔中段 尿，采集前先用中性肥皂和 水清潔外陰及尿道口周圍 留取時將前段尿排去， 截留 中段尿 5 10ml 病人睡前 少飲水無菌容 器 3ml導(dǎo)尿1、用 75% 酒精消毒導(dǎo)管采 集部分2、用注射器從導(dǎo)尿管

11、無菌 采集 5 10ml不能直接從導(dǎo)尿 袋放出，因尿液在 袋中潴留時間太 長，容易孳生細(xì)菌1/d #表示一天中僅需送檢 1 次，無需多次重復(fù)送檢相同標(biāo)本。涂 片 抗 酸 染 色痰量多為宜無菌容器無1h 出報告至少連續(xù)送 3d，每日 1 次尿（24h 尿沉淀或12h 全夜尿沉淀）10ml無菌管留取 24h尿或 12h全夜尿于潔 凈容器中，必須靜止 2h 后， 棄上清液，收集沉渣約 10ml 于無菌容器送檢腦脊液1 2ml體液（胸腹水、 關(guān)節(jié) 液等）5 10ml胃沖洗液或灌洗液5 10ml無菌容器膿液、傷口、抽取液1 5ml無菌容器支氣管刷片載玻片細(xì)菌室標(biāo)本接收處理操作規(guī)程1目的規(guī)范細(xì)菌室標(biāo)本接收

12、處理操作規(guī)程，保證實驗室不誤檢、漏檢。2范圍適用于細(xì)菌室所有標(biāo)本。3職責(zé)細(xì)菌室標(biāo)本接收、處理崗位人員應(yīng)遵守本程序。4程序4.1 微生物標(biāo)本送至細(xì)菌室后， 接收人員與標(biāo)本運(yùn)送人員共同核對標(biāo)本及標(biāo)本信息， 并記錄， 包括接收標(biāo)本數(shù)、接收人與接收日期。4.2 細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本需抄寫培養(yǎng)記錄單，包括患者姓名、性別、年齡、科室、床號、 ID 號、 標(biāo)本種類、檢驗申請條碼號、接收日期，并在醫(yī)院信息系統(tǒng)上記費(fèi)，記費(fèi)時只收細(xì)菌培養(yǎng)、 鑒定費(fèi)用，藥敏費(fèi)用先不記，如果標(biāo)本中分離到致病菌后做藥敏試驗時再收藥敏費(fèi)用。4.3 涂片染色鏡檢標(biāo)本先編號后在記錄本上登記， 內(nèi)容包括姓名、 性別、 年齡、 科室、 床號、 ID 號

13、、檢驗申請條碼號、標(biāo)本種類、接收日期。5相關(guān)文件及記錄表格5.1 中國合格評定國家認(rèn)可委員會 .CNAS-CL31:2007 醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨 床微生物學(xué)檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用說明 .20075.2 中國合格評定國家認(rèn)可委員會 .CNAS-CL02:2008 醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則 (ISO15189:2007).2008備注： 值班人員按 4.1 進(jìn)行。細(xì)菌檢驗標(biāo)本處理完后不能丟棄， 交班時需將貼有檢驗條形碼 的原始標(biāo)本與其它涂片及培養(yǎng)物一起交細(xì)菌室！ ！細(xì)菌室標(biāo)本拒收程序1目的規(guī)范標(biāo)本拒收程序。2范圍適用于細(xì)菌室所有標(biāo)本。3職責(zé)細(xì)菌室所有工作人員應(yīng)遵守本程序。4程序4.1 細(xì)

14、菌室檢驗人員應(yīng)根據(jù)各類標(biāo)本的送檢要求評估標(biāo)本的合格性， 具體參見 標(biāo)本采集運(yùn) 送程序。4.2 必須嚴(yán)格執(zhí)行標(biāo)本的接收、拒收制度和標(biāo)準(zhǔn)，拒收所有可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果的標(biāo)本。4.3 下表中列舉了常見微生物標(biāo)本拒收原因及處理方式。拒絕原因處理方式無標(biāo)識送檢延遲（超過規(guī)定時間）容器不合適或標(biāo)本泄漏標(biāo)本運(yùn)送條件不合適（例如厭氧條件送檢的標(biāo)本卻用需氧條件送檢）同一天內(nèi)同一檢測條件的重復(fù)標(biāo)本（血除外）標(biāo)本污染標(biāo)本量不夠1、非損傷方法獲得的標(biāo)本 （例如： 痰、糞便等標(biāo)本）， 重新送檢。2、損傷方法獲得的標(biāo)本 （例如血、 腦脊液或組織等） ， 與取樣醫(yī)師協(xié)商后，再處理標(biāo)本。并在檢驗記錄單 上注明問題所在，記錄所采取

15、的措施。 提示送檢者拒收原因，并要求重新送檢，在拒收標(biāo) 本記錄本上登記“標(biāo)本送檢延遲” 。 通知送檢者，并要求重新送檢，在拒收標(biāo)本記錄本 上登記。與送檢者聯(lián)系，闡明檢測要求，指出不符合之處， 并要求重新送檢，在拒收標(biāo)本記錄本上登記。通知送檢者，指出重復(fù)標(biāo)本，在拒收標(biāo)本記錄本上 登記。重新采樣 重新采樣4.4 下表中列舉了一些不適合微生物學(xué)檢查的標(biāo)本及替代處理方法或建議。標(biāo)本類型替代方法或建議燒傷，傷口（拭子）送檢深部組織標(biāo)本或抽吸物結(jié)腸造口術(shù)排出物不處理褥瘡（拭子）送檢深部組織標(biāo)本或抽吸物Foley 導(dǎo)管頭不處理壞疽損傷（拭子）送檢深部組織標(biāo)本或抽吸物牙周損害（拭子）送檢組織標(biāo)本或抽吸物直腸周

16、圍膿腫（拭子）送檢組織標(biāo)本或抽吸物4.5 在不合格標(biāo)本處理記錄表上登記相關(guān)信息，至少包括：病人信息、標(biāo)本種類、標(biāo)本 采集人姓名、標(biāo)本采集時間、不合格原因及性狀描述、識別者簽名及時間。細(xì)菌檢驗標(biāo)本處理操作規(guī)程1目的： 規(guī)范細(xì)菌檢驗標(biāo)本處理操作規(guī)程。2適用范圍： 細(xì)菌檢驗標(biāo)本。3職責(zé)： 細(xì)菌檢驗人員嚴(yán)格執(zhí)行本程序。4程序：4.1 血液標(biāo)本接收標(biāo)本后， 立即抄寫檢驗記錄單， 住院病人需先收取細(xì)菌培養(yǎng)鑒定費(fèi)用。 門診病人在 檢驗記錄單上記錄住址、聯(lián)系電話等信息。將血細(xì)菌培養(yǎng)瓶置于全自動培養(yǎng)儀中培養(yǎng)。4.2 痰標(biāo)本4.2.1 接收時檢查送檢標(biāo)本質(zhì)量，隨后抄寫檢驗記錄單，住院病人需先收取細(xì)菌培養(yǎng)鑒定費(fèi) 用

17、。門診病人在檢驗記錄單上記錄住址、聯(lián)系電話等信息。4.2.2 用接種環(huán)挑取膿性痰液后在第一區(qū)反復(fù)涂抹， 盡量將包裹在痰中的病原菌接種在平板 上，如無法用接種環(huán)挑取痰液時， 用無菌棉簽挑取標(biāo)本分別涂布于血瓊脂平板、 巧克力瓊脂 平板，麥康凱平板的第一區(qū)，然后用接種環(huán)劃第二、第三區(qū)。4.3 咽拭子標(biāo)本： 接收時檢查送檢標(biāo)本質(zhì)量， 隨后抄寫檢驗記錄單， 住院病人需先收取細(xì)菌 培養(yǎng)鑒定費(fèi)用。 門診病人在檢驗記錄單上記錄住址、 聯(lián)系電話等信息。 將標(biāo)本涂布于血瓊脂 平板、巧克力瓊脂平板，麥康凱平板的第一區(qū)，然后用接種環(huán)劃第二、第三區(qū)。4.4 腦脊液、 關(guān)節(jié)液、 心包穿刺液、 胸腹水等穿刺液： 床邊抽取體

18、液標(biāo)本 （成人瓶： 58ml； 小兒瓶： 1 3ml）注入細(xì)菌培養(yǎng)瓶后送實驗室。接收標(biāo)本后，立即抄寫檢驗記錄單，住院病 人需先收取細(xì)菌培養(yǎng)鑒定費(fèi)用。 門診病人在檢驗記錄單上記錄住址、 聯(lián)系電話等信息。 將血 細(xì)菌培養(yǎng)瓶置于全自動培養(yǎng)儀中培養(yǎng)。4.5 糞便或肛拭標(biāo)本： 接收時檢查送檢標(biāo)本質(zhì)量， 隨后抄寫檢驗記錄單， 住院病人需先收取 細(xì)菌培養(yǎng)鑒定費(fèi)用。 門診病人在檢驗記錄單上記錄住址、 聯(lián)系電話等信息。 立即取糞便膿血 部位標(biāo)本接種血瓊脂平板、麥康凱平板和SS 平板。4.6 尿標(biāo)本： 接收時檢查送檢標(biāo)本質(zhì)量， 隨后抄寫檢驗記錄單， 住院病人需先收取細(xì)菌培養(yǎng) 鑒定費(fèi)用。門診病人在檢驗記錄單上記錄住

19、址、聯(lián)系電話等信息。將尿標(biāo)本混勻，用10 l（可用定量加液器）定量接種環(huán)立即接種血瓊脂平板、麥康凱平板、 TM 巧克力平板，分離 細(xì)菌和菌落計數(shù)。備注：值班人員執(zhí)行 4.1 4.6 程序，可不抄檢驗紀(jì)錄單和收費(fèi)！ ！細(xì)菌檢驗標(biāo)本接種操作規(guī)程1目的規(guī)范細(xì)菌檢驗標(biāo)本接種操作規(guī)程，確保檢驗結(jié)果準(zhǔn)確可靠。2范圍： 細(xì)菌室所有標(biāo)本的接種。3職責(zé)細(xì)菌檢驗人員嚴(yán)格執(zhí)行本程序。4程序4.1 分區(qū)劃線法4.1.1 此法多用于糞便等含菌量較多的標(biāo)本。4.1.2 用接種環(huán)先將標(biāo)本涂布在平板第一區(qū)并作數(shù)次劃線， 再在二、三區(qū)依次用接種環(huán)劃線。 每劃一個區(qū)域， 應(yīng)將接種環(huán)燒灼 1 次，待冷卻后再劃下一區(qū)域。 每一區(qū)域的

20、劃線應(yīng)接觸上一 區(qū)域的接種線 23 次，使菌量逐漸減少，以形成單個菌落。4.2 定量接種劃線法4.2.1 本法用于尿液等標(biāo)本的細(xì)菌計數(shù)。4.2.2 將尿標(biāo)本混勻，用 10l （可用定量加液器）定量接種環(huán)立即接種劃線，不需分區(qū)。4.3 斜面接種法4.3.1 此法主要用于鑒定或保存菌種，或觀察細(xì)菌的某些生化特性和動力。4.3.2 用左手握住菌種管和斜面培養(yǎng)管底部，右手持接種針（環(huán)） 。用右手小指與手掌、小 指與無名指分別拔出兩管的棉塞，將管口通過火焰滅菌。 用接種針 （環(huán)） 伸入菌種管內(nèi)挑取 移種之菌落。 伸入斜面培養(yǎng)管內(nèi)， 先從斜面底部到頂端拖一條接種線， 再自下而上地蜿蜒劃 線，或直接自下而上地蜿蜒劃線。 將接種針垂直插入半固體培養(yǎng)基的中央， 穿刺至培養(yǎng)基底 部，然后沿原穿刺線退出接種針。4.4 穿刺培養(yǎng)法4.4.1 此法用于保存菌種，觀察動力及某些生化反應(yīng)。4.4.2 以接種針挑取細(xì)菌培養(yǎng)物， 插入半固體培養(yǎng)基的中央， 穿刺至培養(yǎng)基底部， 然后沿原 穿刺線退出接種針。4.5 液體培養(yǎng)基