維生素C的定量測定

1、南昌大亭實驗報告實驗課程：維生素 C的定量測定（2, 6-二氯酚靛酚滴定法）學(xué)生姓名：xxx學(xué) 號：xxx專業(yè)班級： xxx2017年4 月18 日實驗背景：維生素是維持生物正常生命過程所必須的一類有機(jī)物質(zhì)，其中維生素C是人類營養(yǎng)中最主要的維生素之一，對預(yù)防和治療壞血 病有特殊的功效，故又稱之為抗壞血酸。維生素C能促進(jìn)細(xì)胞間質(zhì)的合成，和體內(nèi)其它還原劑共同維持 細(xì)胞正常的氧化還原電勢和有關(guān)酶系統(tǒng)的活性。在1928年，從牛的腎上腺皮質(zhì)中提取出的結(jié)晶物質(zhì)，證明對治療和預(yù)防壞血病 有特殊功效，因此稱為抗壞血酸。如果人體缺乏維生素C時則會出現(xiàn)壞血病。維生素C廣泛分布于植物的綠色部分和新鮮的水果、蔬菜中。

2、人 體內(nèi)不能自身合成維生素 C,必須由食物提供，所以對新鮮水果、蔬菜中維生素 C的存在進(jìn)行定性檢測和定量測定是很有意義的。實驗?zāi)康牧私廑驼莆沼?, 6-二氯酚靛酚法測定維生素 C的原理和方法。實驗原理還原型抗壞血酸能還原染料 2, 6-二氯酚靛酚鈉鹽，本身則氧化 成脫氫抗壞血酸。在酸性溶液中，2, 6-二氯酚靛酚呈紅色，被還原后變?yōu)闊o色。因此，可用 2, 6-二氯酚靛酚滴定樣品中的還 原型抗壞血酸。當(dāng)抗壞血酸全部被氧化后，稍多加一些染料，使 滴定液呈淡紅色，即為終點。如無其他雜質(zhì)干擾，樣品提取液所 還原的標(biāo)準(zhǔn)染料量和樣品中所含的還原型抗壞血酸量成正比。C1CHjOH誣麻里抗壞血IWCH/>

3、;H 賤媽抗壞血聯(lián)實驗試劑和儀器1、實驗試劑:2簿酸溶液、1腳酸溶液、標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液(0.1 mg/ml)0.1%2, 6-二氯酚靛酚溶液2、實驗儀器：吸管1.0ml、10.0ml各一個， 兩個25 ml容量瓶，微量滴 定管5ml,電子分析天平，研缽，漏斗 .四、實驗步驟1、取材和預(yù)處理：先在研缽中加入15m 2%草酸，再用分析天平 稱取2.5g左右青椒和蘋果分別放入研缽中， 記下數(shù)據(jù)；研磨成漿 后漏斗過濾，濾液轉(zhuǎn)入 25ml容量瓶，用2%草酸定容。2、滴定(1)標(biāo)準(zhǔn)液滴定：準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液 1.0 ml (含0.1mg 抗壞血酸)置100 ml錐形瓶中，加9ml 1%草酸，微量滴定

4、管以 0.1%2, 6-二氯酚靛酚滴定至淡紅色，弁保持 15s鐘即為終點。 由所用染料的體積計算出1ml染料相當(dāng)于多少 mg抗壞血酸。(2)樣液滴定：準(zhǔn)確吸取濾液兩份，每份 10.0ml分別放入兩個 100ml錐形瓶內(nèi)，滴定方法同標(biāo)準(zhǔn)液滴定。五、數(shù)據(jù)記錄和處理1、數(shù)據(jù)記錄項目蘋果質(zhì)量/g青椒質(zhì)量/g標(biāo)準(zhǔn)液/ml蘋果/ml青椒/ml第一次2.542.520.400.141.95第二次0.420.131.95平均0.410.1351.952、計算VTA維生素C含重（mg/100g樣品） * 100wa式中：V -滴定樣品提取液消耗染料平均值（mL）T -每mL染料所能氧化抗壞血酸 mg數(shù)A -樣品

5、提取液定容體積Ai -滴定時吸取樣品提取液體積 W -樣品重量由標(biāo)準(zhǔn)液滴定知每0.41ml染料能氧化0.1mg抗壞血酸，0. 410. 1,T=0.244mg/ml蘋果中維生素C含量（mg/100g樣品）3. 24mg/100g0.1350.24425 * 1002.5410 一一 1 95 0 24425 青椒中維生素C含重（mg/100g樣品） * 100 46. 83mg/100g2.5410中國食物成分表2012修正版中青椒中維生素C含量為72mg/100g；蘋果維生素 C含量為7.36 mg/100 g本實驗測定數(shù)據(jù)均偏小，可能是研磨不夠充分或滴定之前維生素C暴露于濕潤空氣中被氧化所致。六、誤差分析和問題討論1、誤差分析：維生素C水溶液不穩(wěn)定，很快氧化成脫氫抗壞血酸，尤其是在中性或堿性溶液中很快被氧化。暴露在空氣中會被氧化變性。樣品中某些雜質(zhì)亦能還原二氯酚靛酚。可能是研磨不夠充分，導(dǎo)致含量偏?。坏味〞r滴定管中有時會有氣泡，影響讀數(shù)。滴定蘋果時，蘋果液本身淡紅色有顏色，對滴定終點有干擾。2、問題討論(1)為什么滴定過程宜迅速？答：防止維生素C暴露在空氣中被氧化變性(2)為什么滴定終點以淡紅色存在 15s內(nèi)為準(zhǔn)？答：因為樣品中某些雜質(zhì)亦能還原二氯酚靛酚，但速度較抗壞血酸慢。七、參考文獻(xiàn)陳鈞輝、李俊，生物化學(xué)實驗第五版，科學(xué)出版社 2014.5 孫鵬、王寧、孫先鋒，兩種方法對