植物組織培養(yǎng)實驗室建設

1、植物組織培養(yǎng)實驗室建設 一、植物組織培養(yǎng)試驗室的設置 植物組織培養(yǎng)試驗室與其他試驗室的主要區(qū)分是要求無菌操作，避開微生物及其他有害因素的影響。植物組織培養(yǎng)試驗室的面積大小和裝備取決于兩個因素：一是試驗性質和討論內容，二是能承受的經費能力。然而，一個標準的植物組織培養(yǎng)試驗室必需具備下列條件：清洗和儲存玻璃器皿、塑料器皿和其他試驗器皿；培養(yǎng)基的配制、滅菌和儲存；植物材料的無菌操作；可控溫度、光照、濕度等條件，以便對材料舉行體外培養(yǎng)；培養(yǎng)物生長發(fā)育過程的顯微觀看。因此，植物組織培養(yǎng)試驗室起碼需要有三間相連但互相隔開的房間：第一間用于玻璃器皿的清洗和儲存，以及培養(yǎng)基的制備(稱為培養(yǎng)基室)；其次間用于無

2、菌操作(稱為接種室)；第三間用于放置培養(yǎng)物(稱為培養(yǎng)室)。此外，假如條件許可，應配備能舉行組織和細胞生長顯微觀看的細胞學試驗室。 (一)培養(yǎng)基室 培養(yǎng)基室的清洗區(qū)應備有各種類型的毛刷、大水槽和冷熱水源。此外，還應備有塑料桶，用以浸泡需要清洗的試驗室器皿；鼓風干燥箱，用以干燥清洗后的器皿；防塵廚，用以儲存整潔的器皿。條件允許的話，清洗區(qū)應單獨設一個房間。假如培養(yǎng)基的制備和器皿的清洗在同一個房間內舉行，應特殊注重不要使清洗干擾培養(yǎng)基的制備，嚴格防止肥皂水等濺入培養(yǎng)基內?？梢栽谇逑磪^(qū)與培養(yǎng)基制備區(qū)之間暫時加一塊擋板，或把清洗時光和配制培養(yǎng)基時光錯開。 配制培養(yǎng)基所需的普通設備包括以下幾種。工作臺：工

3、作臺的高度應適合于操作人員工作，要求表面平整、耐高溫、放置水平。低溫冰箱：用以儲存長久保存的藥品。一般冰箱：用以儲存各種化學藥品、植物材料和短期儲存儲備液及母液等。大塑料瓶：用以儲存蒸餾水。天平：用于稱量。電熱磁力攪拌器：用以溶解化學藥品。電爐：用于加熱融化瓊脂和手提式高壓滅菌鍋的加熱。酸度計或ph試紙。抽氣機或真空泵：用以輔助過濾滅菌。恒溫水浴：用于溶化瓊脂。高壓滅菌鍋：用以舉行培養(yǎng)基滅菌。其他用具。 (二)接種室 接種室也稱為無菌操作室，最好能與外界隔離，不能穿行或不受其他干擾。接種室分更衣間、緩沖間及操作間三部分。更衣間供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩之用。緩沖間位于更衣間與操作間之間，

4、目的是為了保證操作間的無菌環(huán)境，同時可放置恒溫箱及某些小型儀器。操作間則用于無菌操作，其大小要適當，且其頂部不宜過高以保證紫外線的滅菌效果，墻壁光潔無死角以便清洗和消毒。接種室為密閉式，用紫外線滅菌燈舉行空氣消毒。有些試驗室用法電子消毒滅菌器，它在高壓電場作用下，電子管的內外電極發(fā)生劇烈電子轟擊，使空氣電離而將空氣中的氧轉換成臭氧。臭氧是一種強氧化劑，能與細菌的胞膜及酶蛋白舉行氧化分解反應，因此靠臭氧氣體充滿性蔓延達到殺菌的目的，使消毒時沒有死角。消毒后空間內的殘留臭氧只需3040min即能自行還原成氧氣，對空間不留異味、消毒物體表面不留殘毒。 接種室的主要儀器設備是超凈工作臺。超凈工作臺可挺

5、直購買，安裝便利，占用空間小且凈化效果很好，為植物組織培養(yǎng)工作提供了良好的無菌操作環(huán)境。 (三)培養(yǎng)室 培養(yǎng)室的溫度必需是可控的，普通是用空調或熱風機使溫度保持在(25±12)。若要求更高或更低的溫度，可用法裝有熒光燈的培養(yǎng)箱。培養(yǎng)箱可安裝在培養(yǎng)室之外任何便利和平安的地方。 植物組織培養(yǎng)要求一定的光照，采納日光燈源，普通光照強度為100030001x。但有些試驗需要在散射光下舉行，有些則要求徹低黑暗條件。因此，在設備上對此應有所預備。光源可由自動定時開關控制。暗培養(yǎng)普通是在特制的木櫥內舉行或加蓋黑布。 培養(yǎng)室的濕度應控制在相對濕度80左右，當培養(yǎng)室的相對濕度降低到50以下時，應實行措

6、施增強濕度，以免培養(yǎng)基變干。假如濕度太高則應除濕，以免培養(yǎng)瓶蓋塞發(fā)潮，增強污染的機會。 在培養(yǎng)室內應設有若干培養(yǎng)架以放置培養(yǎng)物。培養(yǎng)架大小普通為1200mm×600mm×400mm，層數按照培養(yǎng)室的空間高度而定，每層培養(yǎng)架裝上玻璃板。但玻璃板下面的日光燈在工作時易使玻璃發(fā)熱，使放置其上的培養(yǎng)瓶及培養(yǎng)基的溫度增強，影響培養(yǎng)效果。安裝剛硬的鐵絲網或細鋼管，在其上放篩孔塑料盤，以便空氣流淌和穩(wěn)定溫度，同時也可使頂層的燈光能透射到下層的培養(yǎng)物上。培養(yǎng)架可以木制也可以鋼制，每層分離裝有日光燈管。燈管和上一層架子之間裝有隔熱層，以免上層培養(yǎng)物的底部受熱。 三角瓶、玻璃罐或培養(yǎng)皿都可挺直置于培養(yǎng)架上，或先置于大小合適的盤子上。再將盤子置于培養(yǎng)架上。所用的容器若為試管，就需要有試管架。試管架可用鐵絲制作，每個試管架能裝25個或50個試管。培養(yǎng)容器必需粘上標簽或用記號筆標注，注明具體的試驗詳情(