高中生物選修一 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù) (人教版)(課堂PPT)

1、1人教版選修人教版選修1專題專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)2專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用3課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)4課題背景 尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥。但是尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當土壤中的細菌將尿素分解成氮之后，才能被植物利用。土壤中的細菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成脲酶。 尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的。 1828年，德國化學(xué)家維勒成功地通過無機物的化學(xué)反映合成了尿素，揭開了歷史上人工合成有機物的新篇章。5尿素6研究思路 篩選菌株 PCR的自動化需要耐高溫的 DNA聚合酶，這

2、種酶要能忍受93左右的高溫。 科學(xué)家從水生耐熱細菌Taq中分離到耐高溫的Taq DNA 聚合酶。 為什么Taq 細菌能從熱泉中被篩選出來呢？ 因為熱泉70-80的高溫條件淘汰了絕大多數(shù)微生物，而使耐高溫的Taq 細菌脫穎而出。7實驗室微生物的篩選原理 應(yīng)用篩選 Taq 細菌的原理，人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。8統(tǒng)計菌落數(shù)目 常用稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目。樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為保證結(jié)果準確，一般選

3、擇菌落數(shù)30300的平板計數(shù)。9培養(yǎng)基上的菌落10設(shè)置對照設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。11實驗設(shè)計結(jié)合課本上給出的資料與實驗流程示意圖，思考有關(guān)問題，然后進行實驗設(shè)計，并且給出詳細的實驗方案。 資料一 土壤取樣 資料二 樣品的稀釋 資料三 微生物的培養(yǎng)與觀察12操作提示無菌操作 1.取土樣的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都需要滅菌。 2.應(yīng)在火焰旁稱取土壤。在火焰附近將稱好的土樣倒入燒瓶中，塞好棉塞。 3.在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁操作。13做好標記本實驗使用的平板和試管比較多。為避免混淆，最好在使用前就做好標記。 例如： 在

4、標記培養(yǎng)皿時，應(yīng)注明培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)日期以及平板上培養(yǎng)樣品的稀釋度。 14規(guī)劃時間對于耗時較長的生物實驗，我們需要實現(xiàn)規(guī)劃時間，以便提高工作效率，在操作時更加有條不紊。15結(jié)果分析與評價結(jié)合對照，分析培養(yǎng)物總共是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出一些菌落？是否獲得了某一稀釋度下，菌落數(shù)目在30300的平板。在這一稀釋度下，是否至少有兩個平板的菌落數(shù)相接近？你統(tǒng)計的每克土壤中含有能分解尿素的細菌的菌落數(shù)是多少？與其他同學(xué)的結(jié)果接近嗎？如果差異很大，可能是什么原因引起的？16課題延伸本課題對能分解尿素的細菌進行了初步的篩選，這只是純化菌種的第一步。對分離菌種作進一步的鑒定，還需要借助生物化學(xué)的方法。我們可以通過檢測培養(yǎng)基pH的變化來判斷細菌是否分解尿素的化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。指示劑也可以幫助我們準確地鑒定該種細菌能否分解尿素。17相關(guān)鏈接活菌計數(shù)技術(shù)廣泛應(yīng)用于土壤含菌亮的測定、食品衛(wèi)生和水源污染度的檢驗等方面。如果你趕興