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1、動(dòng)物解剖生理實(shí)驗(yàn)指導(dǎo).作者:日期:實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)一、顯微鏡的使用、組織切片的顯微觀察 實(shí)驗(yàn)二、犬骨骼的觀察、骨骼辨認(rèn)測(cè)試 實(shí)驗(yàn)三、血液的凝固 實(shí)驗(yàn)四、紅細(xì)胞的脆性試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)五、蛙心活動(dòng)觀察 實(shí)驗(yàn)六、紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 實(shí)驗(yàn)七、反射弧分析及脊髓反射活動(dòng)觀察 實(shí)驗(yàn)八、胃腸運(yùn)動(dòng)觀察和小腸吸收觀察實(shí)驗(yàn)顯微鏡的構(gòu)造、使用和保養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私怙@微鏡的基本構(gòu)造,掌握顯微鏡的使用方法和保養(yǎng)方法。材料設(shè)備顯微鏡、組織切片、擦鏡紙等。方法步驟(一)機(jī)械部分1、鏡筒2、物鏡轉(zhuǎn)換器J-証趾範(fàn):込IHL照相暗肚ff槪悅n物說轉(zhuǎn)換器圖 I-IBE眩Jt糙)物粗標(biāo)本移訥孫聚光器Jt W鏡座粗調(diào)節(jié)螺買圖卜M nVupus顯鍛鏈(郵型)3
2、、鏡臂4、調(diào)焦器5、載物臺(tái)6、鏡柱7、鏡座聚光器和光圈等)。 )的目鏡,可根據(jù)不(二)光學(xué)系統(tǒng)部分目鏡和照明裝置(反光鏡、光鏡的光學(xué)系統(tǒng)主要包括物鏡、1、 目鏡:常見的有5X、 10X和1 5X ( X表示放大倍數(shù) 同的需要選擇使用,最常使用的是10X 目鏡。2、物鏡:常用物鏡的放大倍數(shù)有1 0X、40X和100X等幾種。一般將8X或1 0X的物鏡稱為 低倍鏡(而將5 X以下的叫做放大鏡);將40X或45 X的稱為高倍鏡;將90 X或1 0 0 X的稱為油鏡(這種鏡頭在使用時(shí)需浸在鏡油中)。圖1 -3 物鏡的性能參數(shù)及工作距離C線為蓋玻片的的上表面,1 0物鏡的工作距 離為7. 63mm 4
3、0物鏡的工作距離為0.198mm ;10/0.25、40/0.65、1 0 0/1 . 25 表示 鏡頭的放大倍數(shù)和數(shù)字孔徑。 160/ 0.17表示鏡筒長(zhǎng)度為160mm ,蓋玻片厚度為0.17 m3、聚光器:調(diào)節(jié)光線的強(qiáng)弱, 升高聚光器可使光線增強(qiáng),反之則光線變?nèi)?。光圈能控制進(jìn)入聚光器的光束大小的可變光闌。以調(diào)節(jié)光線的強(qiáng)弱。 在光圈的下方常裝有濾光片框,可放置不同顏色的濾光片。4、反光鏡:反光鏡有兩個(gè)面,一面為平面鏡 ,另一面為凹面鏡,凹面鏡有聚 光作用,適于較弱光和散射光下使用,光線較強(qiáng)時(shí)則選用平面鏡。二、光學(xué)顯微鏡的使用方法(-)準(zhǔn)備將顯微鏡平穩(wěn)地放在身前的實(shí)驗(yàn)桌上,略偏左,使鏡臂對(duì)著身
4、體,鏡筒向前。(二)對(duì)光 轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔,轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器,使低倍鏡前端距載物臺(tái)約1- 2厘米的距離。 將光圈放大;讓左眼朝目鏡里注視,同時(shí)用手將反光鏡轉(zhuǎn)向光源;調(diào)節(jié)反光鏡, 直至從目鏡里看到一個(gè)白色明亮的圓形視野。(三)低倍鏡觀察,用彈簧夾片壓住載 將玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)上,使待檢查部分位于通光孔中心 玻片兩端。 兩眼從側(cè)面注視,將物鏡降至距標(biāo)本約0.5厘米時(shí)停止。 用左眼朝目鏡里觀察,同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器,緩慢上升鏡筒,直到視野中出現(xiàn)物象,再用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)。(四)高倍鏡觀察,把要進(jìn)一步放大的部位移到視野正中央。,再微微調(diào)節(jié)細(xì) 先將低倍鏡下找到所需觀察的物象 轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使高倍鏡到位。
5、調(diào)節(jié)反光鏡和光圈,使光照明亮 調(diào)節(jié)器,直到物象清晰。(五)顯微鏡復(fù)原,把兩個(gè)物鏡偏用擦鏡紙揩凈目鏡和物鏡,用清潔紗布揩凈鏡體。再轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器 到兩旁,并將鏡筒下降,然后將顯微鏡平穩(wěn)地放入鏡箱內(nèi)保存。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要組織的顯微鏡識(shí)別實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆諉螌颖馄缴掀ぁ螌又鶢钌掀?、單層立方上皮、疏松結(jié)締組織、骨骼肌、 平滑肌、神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。材料設(shè)備顯微鏡、單層扁平上皮、單層柱狀上皮、單層立方上皮、疏松結(jié)締組織、骨 骼肌、平滑肌、神經(jīng)組織切片及相關(guān)的圖。方法步驟1、取鏡與放置移動(dòng)顯微鏡時(shí),要一手拿鏡臂,一手托鏡座 ,將顯微鏡放置在前方桌面上。2、打開光源,上升聚光鏡,開大孔徑光闌。3、觀察將被檢標(biāo)本置于載物臺(tái)
6、上,用壓片夾夾住,旋轉(zhuǎn)最低倍數(shù)物鏡觀察。調(diào)節(jié)粗調(diào)焦螺旋,使載物臺(tái)緩緩上升,直至物鏡鏡頭接近標(biāo)本。這時(shí),一邊使 用目鏡觀察,一邊調(diào)節(jié)粗調(diào)焦螺旋使載物臺(tái)下降,直至視野中看到物像為止。移動(dòng)載片位置,使物象處于視野的中心, 此時(shí)再調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)焦螺旋以增加物象 的清晰度,可以調(diào)節(jié)聚光鏡和孔徑光闌,使光線強(qiáng)弱適中,以便于觀察。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器,換用高倍鏡頭。用細(xì)調(diào)焦螺旋調(diào)節(jié),換用高倍鏡后,可調(diào) 節(jié)聚光鏡和孔徑光闌以增加亮度。觀察更細(xì)微結(jié)構(gòu)必需使用油鏡時(shí),則在制片上滴一滴香柏油。 油鏡使用完后,要及時(shí)地用蘸有乙醚的擦鏡紙把油鏡鏡頭擦拭干凈。4、收顯微鏡關(guān)閉光源;下降聚光鏡;關(guān)閉孔徑光闌;轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器,使之處于最
7、低倍數(shù) 物鏡下。顯微鏡保持清潔。顯微鏡的光學(xué)部分只能用專門的擦鏡紙擦拭。按實(shí)驗(yàn)室的要求,做好顯微鏡的使用記錄等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1. 復(fù)層上皮組織2. 平滑肌3. 神經(jīng)組織4 .心肌切片5、硬骨組織6 .軟骨組織實(shí)驗(yàn)三 犬全身主要骨、關(guān)節(jié)、骨性標(biāo)志的識(shí)別實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谌趋罉?biāo)本上識(shí)別各部位骨骼及骨性標(biāo)志。方法步驟1 .2.3.材料設(shè)備 犬骨骼標(biāo)本。脊柱骨的組成:頸椎、胸椎、腰椎、薦椎、尾椎的形態(tài)與連結(jié)。 胸廓的組成:胸椎、肋骨和胸骨。骨盆腔構(gòu)造:背側(cè)薦骨、側(cè)面髖骨、后側(cè)坐骨、腹側(cè)恥骨組成。 四肢骨組成及分布:骨骼名稱、形態(tài)、關(guān)節(jié)名稱、關(guān)節(jié)角度。骨性標(biāo)志:肩胛岡、大結(jié)節(jié)、髖結(jié)節(jié)、大轉(zhuǎn)子、坐骨結(jié)節(jié)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪
8、制犬全身主要骨、關(guān)節(jié)和骨性標(biāo)志的圖示。技能考核在標(biāo)本和活體上識(shí)別主要骨、關(guān)節(jié)及骨性標(biāo)志。*骨骼辨認(rèn)測(cè)試實(shí)驗(yàn)三血液凝固實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊匝耗虝r(shí)間作為指標(biāo),了解對(duì)血液凝固影響的因素,加深對(duì)生理止血過 程的理解。實(shí)驗(yàn)原理血液凝固是一個(gè)酶的有限水解激活過程,可分為三個(gè)環(huán)節(jié):(1)凝血酶原激活物的形成;(2)凝血酶原激活為凝血酶;(3)纖維蛋白的形成。在此過程中有多種 凝血因子和C a離子的參與。根據(jù)凝血過程起動(dòng)時(shí)激活因子來源不同,可將血液 凝固分為內(nèi)源性激活途徑和外源性激活途徑。內(nèi)源性激活途徑是指參與血液凝固的所有凝血因子在血漿中,外源性激活途徑是指受損的組織中的組織因子進(jìn)入血管后,與血管內(nèi)的凝血因子共同
9、作用而啟動(dòng)的激活過程。實(shí)驗(yàn)藥品和器材生理鹽水,液狀石蠟、草酸鹽、檸檬酸鹽、肝素(8 U /ml)。注射器,試管6支,小燒杯2個(gè),試管架,竹簽1束(或細(xì)試管刷),秒表。實(shí)驗(yàn)方法與步驟1. 采血(動(dòng)物不限)。2.準(zhǔn)備試管。試管1不加任何處理(對(duì)照管)試管2用液狀石蠟潤(rùn)滑整個(gè)試管內(nèi)表面試管3放少許脫脂棉試管4加草酸鉀12 m 1試管5加檸檬酸鹽12 m 13. 每管加入血液1 -2 m 1。將多余的血盛于小燒杯中,并不斷用竹簽攪動(dòng)直至 纖維蛋白形成。4. 記錄凝血時(shí)間每個(gè)試管加血1 -2 m 1后,即刻開始計(jì)時(shí),每隔壁15 s傾斜一次,觀察血液是否凝固,至血液成為凝膠狀不再流動(dòng)為止,記錄所經(jīng)歷的時(shí)
10、間。4、5號(hào)試管加入血液后,用拇指蓋住試管口將試管顛倒兩次,使血液與藥 物混合。5. 如果加草酸鉀和檸檬酸鹽的試管不出現(xiàn)血凝,可再向兩管內(nèi)分別加入0.025mo 1?L 1的C a Cl2溶液23滴,觀察血液是否發(fā)生凝固? 注意事項(xiàng)1.采血的過程盡量要快,以減少計(jì)時(shí)的誤差。對(duì)比實(shí)驗(yàn)的采血時(shí)間要緊接著 進(jìn)行。2. 判斷凝血的標(biāo)準(zhǔn)要力求一致。一般以傾斜試管達(dá) 4 5度時(shí),試管內(nèi)血液不見流動(dòng)為準(zhǔn)。3 .每支試管口徑大小及采血量要相對(duì)一致,不可相差太大。實(shí)驗(yàn)結(jié)果將實(shí)驗(yàn)結(jié)果及各種條件下的凝血時(shí)間,并進(jìn)行比較、分析解釋產(chǎn)生差異的原因。思考題1 .血液凝固的機(jī)制及影響血凝的外界因素?2 .為什么有幾管不凝?
11、為什么有幾管比對(duì)照組管凝血時(shí)間長(zhǎng)?為什么有幾 管比對(duì)照管凝血時(shí)間短 ?實(shí)驗(yàn)四紅細(xì)胞脆性的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)測(cè)定紅細(xì)胞滲透脆性的方法,理解細(xì)胞外液滲透張力對(duì)維持細(xì)胞正常形 態(tài)與功能的重要性。實(shí)驗(yàn)原理正常紅細(xì)懸浮于等滲的血漿中,若置于高滲溶液內(nèi),則紅細(xì)胞會(huì)因失水而皺縮;反之,置于低滲溶液內(nèi),則水進(jìn)入紅細(xì)胞,使紅細(xì)胞膨脹。如環(huán)境滲透壓繼續(xù)下降,紅細(xì)胞會(huì)因繼續(xù)膨脹而破裂,釋放血紅蛋白,稱之為溶血。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液具有一定的抵抗力,這一特征稱為紅細(xì)胞的滲透脆性。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液的抵抗力越大,紅細(xì)胞在低滲溶液中越不容易發(fā)生溶血,即紅細(xì)胞滲透脆性越小。將血液滴入不同的低滲溶液中 ,可檢查紅細(xì)胞膜對(duì)于低滲溶
12、液抵抗力的大小。 開始出現(xiàn)溶血現(xiàn)象的低滲溶液濃度,為該血液紅細(xì)胞的 最小抵抗力;出現(xiàn)完全溶血時(shí)的低滲溶液濃度,則為該血液紅細(xì)胞的最大抵抗力。生理學(xué)上將與血漿滲透壓相等的溶液稱為等滲溶液;而將能維持紅細(xì)胞正常形態(tài)、大小和懸浮于其中的溶液稱為等張溶液。等滲溶液不一定是等張溶液(如1 . 9 9 %的尿素溶液),但等張溶液一定是等滲溶液。實(shí)驗(yàn)藥品1%肝素,1 %氯化鈉溶液,2 %氯化鈉溶液,蒸餾水。儀器與器材10 m 1小試管試管架滴管,1 ml移液管,2 m 1移液管。實(shí)驗(yàn)方法與步驟1. 溶液配制:取11個(gè)小試管,配制出11種不同濃度的氯化鈉低滲溶液。不同濃度的N a CL溶液配制試管號(hào)試液123
13、4567891 01 11%NaCI /ml1.41.31 .21 . 11 .00.90.80.70.60 .52 %NaCI 2蒸餾水/ m 10.60. 70.80.91.01.11 .1 .1.41.5023NaC 1濃度/%0.70.650 .60. 550.50. 450.40.350.30. 2522.制備抗凝血:不同動(dòng)物采血方法各有所異,但多采用末梢血,將血滴在有1 %肝素(或檸檬酸鹽)的表面皿上,混勻(1 %肝素0 .1 ml可抗10 ml血)。3. 加抗凝血:用滴管吸取抗凝血,在各試管中各加一滴,輕輕搖勻,靜置0.5-1 h。4. 觀察結(jié)果:根據(jù)各管中液體顏色和渾濁度的不同
14、,判斷紅細(xì)胞脆性。表明無 未發(fā)生溶血的試管:液體下層為大量紅細(xì)胞沉淀,上層為無色透明, 紅細(xì)胞破裂。 部分紅細(xì)胞溶血的試管:液體下層為紅細(xì)胞沉淀,上層出現(xiàn)透明淡紅(淡 紅棕)色,表明部分紅細(xì)胞已經(jīng)破裂 ,稱為不完全溶血。 紅細(xì)胞全部溶血的試管: 液體完全變成透明紅色, 管底無紅細(xì)胞沉淀, 表 明紅細(xì)胞完全破裂,稱為完全溶血。實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物紅細(xì)胞的最小滲透抵抗力和最大滲透抵抗力。將全班的結(jié)果加以統(tǒng)計(jì),并用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。討論如何通過滲透脆性特征判斷機(jī)體的健康 狀況。注意事項(xiàng)小試管要干燥,加抗凝血的量要一致,只加一滴?;靹驎r(shí),輕輕傾倒12次,減少機(jī)械震動(dòng),避免人為溶血。抗凝劑
15、最好為肝素,其他抗凝劑可改變?nèi)芤旱臐B透性。配制不同濃度的Na Cl溶液時(shí)應(yīng)力求準(zhǔn)確、無誤。Na C I溶液的濃度梯度可根據(jù)動(dòng)物的實(shí)際情況適當(dāng)進(jìn)行調(diào)整。思考題1. 紅細(xì)胞的形態(tài)與生理特征有何關(guān)系?2 .根據(jù)結(jié)果分析血漿晶體滲透壓保持相對(duì)穩(wěn)定的生理學(xué)意義。3 .輸液時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)。實(shí)驗(yàn)五蛙心活動(dòng)觀察實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察滴加乙酰膽堿、腎上腺素對(duì)心臟運(yùn)動(dòng)的影響。實(shí)驗(yàn)原理心臟的特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)具有自動(dòng)節(jié)律性,但各部分的自動(dòng)節(jié)律性高低不同。兩棲類動(dòng)物的心臟起搏點(diǎn)是靜脈竇(哺乳動(dòng)物的是竇房結(jié))。正常情況下,靜脈竇(竇房結(jié))的自律性最高,能自動(dòng)產(chǎn)生節(jié)律性興奮,并依次傳到心房、房室交界區(qū)、 心室,引起整個(gè)心臟興奮和收縮,因
16、此靜脈竇(竇房結(jié))是主導(dǎo)整個(gè)心臟興奮和 搏動(dòng)的正常部位,被稱為正常起搏點(diǎn);其他部位的自律組織僅起著興奮傳導(dǎo)作用,故稱之為潛在起搏點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)材料蛙或蟾蜍。任氏液、1: 1 00 0 0腎上腺素、1: 10 0 00乙酰膽堿。儀器與器械蛙板,蛙類常用手術(shù)器械一套 ,蛙釘,玻璃分針,秒表,滴管。實(shí)驗(yàn)方法與步驟1. 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備(1)在體蛙心的制備取蛙一只,破壞腦、脊髓后背位固定于蛙板上,左手持鑷子提起胸骨后端的 皮膚剪一小口,然后向左、右兩側(cè)鎖骨外側(cè)剪開皮膚。把游離的皮膚掀向頭端。 再用鑷子,提起胸骨后方的腹肌,剪開一小口后,剪刀伸入胸腔(勿傷及心臟和血管),沿皮膚切口剪開胸壁,剪斷左右烏喙骨和鎖骨,使
17、創(chuàng)口呈一倒三角形,充分暴 露心臟部位。持眼科鑷提起心包膜并用眼科剪剪開心包膜,暴露心臟(圖5.41)。15'代-2ISI備.4 I emu IM汗MZ:岸星«忌聲LKII 凰(次-min - 1),注意它們的跳動(dòng)次序(2)在靜脈竇上分別滴加1:10000滴加數(shù)滴任氏液,用吸水紙吸干。腎上腺素2滴,記錄每分鐘心臟收縮次數(shù)(3 )再在靜脈竇上滴加 1:10000滴加數(shù)滴任氏液,用吸水紙吸干。乙酰膽堿2滴,記錄每分鐘心臟收縮次數(shù)2. 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目1識(shí)別蛙類心臟。自心臟腹面可觀察到(1)觀察心臟的結(jié)構(gòu)參照?qǐng)D5 .4-心室、心房,動(dòng)脈球和主動(dòng)脈。用玻璃分針向前翻轉(zhuǎn)蛙心,暴露心臟背面可觀察到
18、 靜脈竇和心房。記錄每分鐘的收縮次數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄并分析各項(xiàng)結(jié) 果。思考題1. 正常情況下,兩棲類動(dòng)物(或哺乳類動(dòng)物)的心臟起搏點(diǎn)是心臟的哪一部分? 它為什么能控制潛在起搏點(diǎn)的活動(dòng)?2 .如何證明兩棲類心臟的起搏點(diǎn)是靜脈竇r二實(shí)驗(yàn)六紅細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)、掌握應(yīng)用稀釋法計(jì)數(shù)紅細(xì)胞和白細(xì)胞的方法。實(shí)驗(yàn)原理血液中血細(xì)胞數(shù)很多,無法直接計(jì)數(shù),需要將血 液稀釋到一定倍數(shù),然后再用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板,在顯微 鏡下計(jì)數(shù)一定容積的稀釋血液中的紅、 白細(xì)胞數(shù)量, 最后將之換算成每升血液中所含的紅、白細(xì)胞數(shù)。常用的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板是改良式牛鮑爾計(jì)數(shù)板(Ne ubaue r),為優(yōu)質(zhì)厚玻璃制成。每塊計(jì)數(shù)板由“H”型凹槽分為兩
19、個(gè)同樣的計(jì)數(shù)池(圖6.5-1)。計(jì)數(shù)池的兩側(cè)各有一個(gè)支持堤,比計(jì)數(shù)池高出0.111:血理麼熬iStrmm計(jì)數(shù)池的長(zhǎng)、寬各-A-2)。3.00 mm ,平均分成邊長(zhǎng)為1 mm的9個(gè)大格。每個(gè)大格容積為0.1mn?。在 9個(gè)大格中,位于四角的四個(gè)大方格是計(jì)數(shù)白細(xì)胞的區(qū)域,每個(gè)大方格又用單線分為16個(gè)中方格;位于中央的大方格用雙線分成25個(gè)中方格,其中位于正中及四角的5個(gè)中方格是計(jì)數(shù)紅細(xì)胞和血小板的區(qū)域,每個(gè)中方格又用單線分為16個(gè)小方格(圖6 . 5-Bfi' A二 aWRittAl實(shí)驗(yàn)對(duì)象動(dòng)物種類不限。實(shí)驗(yàn)藥品蒸餾水,75%酒精,95 %酒精,乙醚,血細(xì)胞稀釋液。儀器器材顯微鏡,血細(xì)胞記
20、數(shù)板(改良Neuba ue r),小試管,微量(血紅蛋白)采血管,1ml、5 ml移液管,玻璃棒,刺血針,干棉球。實(shí)驗(yàn)方法和步驟1. 采血與血液的稀釋:用微量(血紅蛋白)采血管吸20卩1血液,加至有紅細(xì)胞稀釋液(4 ml)的試 管中,吹打幾次,使稀釋液與血液混勻。這樣使紅細(xì)胞稀釋了 20 0倍(白細(xì)胞稀釋20倍)。充池(布血)將蓋玻片的一邊與計(jì)數(shù)池的縱線末端接觸,然后緩慢放下,使蓋玻片平放在 計(jì)數(shù)室兩側(cè)的隆起上(這樣可趕走蓋玻片下的空氣 ),用微量采血管或蘸有紅細(xì)胞 懸浮液的玻璃棒靠近蓋玻片的前方邊緣,靠毛細(xì)管作用將紅細(xì)胞懸浮液充入計(jì)數(shù)池。室溫中平放35分鐘,待細(xì)胞下沉后顯微鏡下計(jì)數(shù)。若計(jì)數(shù)池
21、未被布滿或 過多以致使蓋玻片浮動(dòng),或弄到蓋玻片外面都需重新充池(布血)。2. 計(jì)數(shù):于高倍鏡下計(jì)數(shù)中間大方格內(nèi)四角及中央的5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)?;蛩闹芩膫€(gè)大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。計(jì)數(shù)視野的移動(dòng)路線如圖6. 5-3所示。如果細(xì)胞壓邊線,則按數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右原則進(jìn)行。如果各中方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)相 差2 0個(gè)以上(魚類紅細(xì)胞相對(duì)較少不應(yīng)多于 10個(gè)),四周各大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù) 相差8個(gè)以上,則說明血細(xì)胞分布不均勻,需振蕩稀釋液,重新充池(布血)。3. 計(jì)算:紅細(xì)胞數(shù)-L 1 = N- 200 10 2 5 5 -1= N- 100 0 0N:表示5個(gè)中方格內(nèi)數(shù)得的紅細(xì)胞數(shù) ;25 ,5 - 1 :
22、將五個(gè)中方格紅細(xì)胞數(shù)換算為一個(gè)大方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù);1 0:將一個(gè)大方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)換算為1血液內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)。2 00 :為血液稀釋倍數(shù)。注意事項(xiàng)1、取血操作應(yīng)迅速,以免凝血。2、吸取血液時(shí),采血管中不得有氣泡,吸血和稀釋液的體積一定要準(zhǔn)確。3、計(jì)數(shù)時(shí),顯微鏡要放穩(wěn),載物臺(tái)應(yīng)置水平位,不得傾斜。一般在暗光下計(jì)數(shù) 的效果較好。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板只能用清水浸泡、漂洗和蒸餾水漂洗,4、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板洗滌然后以濾紙吸干。實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用平均值報(bào)告該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的紅細(xì)胞數(shù)和白細(xì)胞數(shù)。并對(duì)全班的結(jié)果加以統(tǒng)計(jì)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。思考題1. 稀釋液裝入計(jì)數(shù)板后,為什么要靜止一段時(shí)間才開始計(jì)數(shù)2. 顯微鏡載物臺(tái)為什么應(yīng)置于水平位,
23、而不能傾斜?3. 分析影響計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的可能因素。實(shí)驗(yàn)七反射弧分析及脊髓反射活動(dòng)觀察實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 通過對(duì)脊蛙的屈肌反射的分析 ,探討反射弧的完整性與反射活動(dòng)的關(guān)系2. 以蛙的屈肌反射為指標(biāo),觀察脊髓反射中樞活動(dòng)的某些基本特征,并分析它們產(chǎn)生可能的神經(jīng)機(jī)制。實(shí)驗(yàn)原理在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的參與下,機(jī)體對(duì)刺激所產(chǎn)生的適應(yīng)反應(yīng)過程稱為反射。較 復(fù)雜的反射需要由中樞神經(jīng)系統(tǒng)較高級(jí)的部位整合才能完成,較簡(jiǎn)單的反射只需通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)較低級(jí)的部位就能完成。將動(dòng)物的高位中樞切除,僅保留脊髓的動(dòng)物稱為脊動(dòng)物。此時(shí)動(dòng)物產(chǎn)生的各種反射活動(dòng)為單純的脊髓反射。由于脊髓已失去了高級(jí)中樞的正常調(diào)控,所以反射活動(dòng)比較簡(jiǎn)單, 便于觀察
24、和分析反射過程的某些特征。反射活動(dòng)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是反射弧。典型的反射弧由感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng) 中樞、傳出神經(jīng)和效應(yīng)器五個(gè)部分組成。引起反射的首要條件是反射弧必須保持完整性。反射弧任何一個(gè)環(huán)節(jié)的解剖結(jié)構(gòu)或生理完整性一旦受到破壞,反射活動(dòng)就無法實(shí)現(xiàn)。反射 由于中間 反射活動(dòng)的范圍和持續(xù)時(shí)間,反射形成難易程度都不一完成一個(gè)反射所需要的時(shí)間稱為反射時(shí)。反射時(shí)除與刺激強(qiáng)度有關(guān)外,時(shí)的長(zhǎng)短與反射弧在中樞交換神經(jīng)元的多少及有無中樞抑制存在有關(guān)。 神經(jīng)元連結(jié)的方式不同, 樣。硫酸溶液(0.1%、 械、鐵支柱、玻璃平皿、 紗布、秒表。實(shí)驗(yàn)藥品與器材0.3%、0. 5 %、1%)、1%可卡因或普魯卡因。蛙類手術(shù)器燒
25、杯(50 0 ml或搪瓷杯)、小濾紙(約1 cmx 1 c m)、實(shí)驗(yàn)方法與步騾1.標(biāo)本制備入腦腔,破壞腦髓,制成脊蟾蜍。將動(dòng)物俯臥位固定在蛙板上 縱行剪開皮膚,在股二頭肌和半膜肌之間的溝內(nèi)找到坐骨神經(jīng)干 一條細(xì)線備用。將脊蟾蜍懸掛在鐵支柱上。取一只蟾蜍,用粗剪刀由兩側(cè)口裂剪去上方頭顱,或用探針沿枕骨大孔刺,于右側(cè)大腿背部,在神經(jīng)干下穿2. 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(1)脊髓反射的基本特征:騷扒反射 將浸有1%硫酸溶液的小濾紙片貼在蟾蜍的下腹部,可見四肢向此處騷扒。之后將蟾蜍浸入盛有清水的大燒杯中,洗掉硫酸濾紙片。 屈肌反射和反射時(shí)的測(cè)定:在平皿內(nèi)盛適量的0.1%硫酸溶液,將蟾蜍 一側(cè)后肢的一個(gè)腳趾,浸入硫酸
26、溶液中,同時(shí)按動(dòng)秒表開始記錄時(shí)間,當(dāng)屈肌反射 一出現(xiàn)立刻停止記時(shí),并立即將該足趾浸入大燒杯水中浸洗數(shù)次,然后用紗布擦 干。此時(shí)秒表所示時(shí)間為從刺激開始到反射出現(xiàn)所經(jīng)歷的時(shí)間,稱為反射時(shí)。用上述方法重復(fù)三次,注意每次浸入趾尖的深度要一致,相鄰兩次實(shí)驗(yàn)間隔至少要23 S。三次所測(cè)時(shí)間的平均值即為此反射的反射時(shí)。再用不同的硫酸濃度 測(cè)定反射的反射時(shí)。(2)反射弧的分析分別將左右后肢趾尖浸入盛有1%硫酸的平皿內(nèi)(深入的范圍一致 ),雙后 肢是否都有反應(yīng)?實(shí)驗(yàn)完后,將動(dòng)物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸, 用紗布擦干皮膚。在左后肢趾關(guān)節(jié)上作一個(gè)環(huán)形皮膚切口,將切口以下的皮膚全部剝除(趾尖皮膚一定要?jiǎng)?/p>
27、除干凈),再用1 %硫酸溶液浸泡該趾尖,觀察該側(cè)后肢的反應(yīng)。 實(shí)驗(yàn)完后,將動(dòng)物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸,用紗布擦干皮膚。 將浸有1 %硫酸溶液的小濾紙片貼在蛙的左后肢的皮膚上。觀察后肢 有何反應(yīng)?寺出現(xiàn)反應(yīng)后,將動(dòng)物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸,用 紗布擦干皮膚。 提起穿在右側(cè)坐骨神經(jīng)下的細(xì)線,剪斷坐骨神經(jīng),刺激右后肢趾,觀察有 無反應(yīng)?以探針搗毀蟾蜍的脊髓后再重復(fù)上步驟,觀察有何反應(yīng)。注意事項(xiàng)1.制備脊蛙時(shí),顱腦離斷的部位要適當(dāng),太高因保留部分腦組織而可能出現(xiàn)自 主活動(dòng),太低又可能影響反射的產(chǎn)生。2.用硫酸溶液或浸有硫酸的紙片處理蛙的皮膚后,應(yīng)迅速用自來水清洗, 以清除皮
28、膚上殘存的硫酸,并用紗布擦干,以保護(hù)皮膚并防止沖淡硫酸溶液。3. 浸入硫酸溶液部位應(yīng)限于一個(gè)趾尖,每次浸泡范圍應(yīng)一致,切勿浸入太多。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.描述各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,探討形成的機(jī)制。2.說出有反射活動(dòng)時(shí)的反射弧的組成。思考題1.右側(cè)坐骨神經(jīng)被剪斷后,動(dòng)物的反射活動(dòng)發(fā)生了什么變化?這是損傷了反 射弧的哪一部分?2. 剝?nèi)ブ宏P(guān)節(jié)以下皮膚后,不再出現(xiàn)原有的反射活動(dòng),為什么 可能出現(xiàn)的問題與解釋在測(cè)反射時(shí)時(shí),有可能出現(xiàn)H 2SO4的濃度低,反而反射時(shí)短。(1)隨著實(shí)驗(yàn)進(jìn)程,標(biāo)本產(chǎn)生了適應(yīng)性,反應(yīng)靈敏性下降,因此濃度增加,反射 時(shí)有可能增加。(2)標(biāo)本本身興奮性就很低。實(shí)驗(yàn)八胃腸運(yùn)動(dòng)和小腸吸收觀察實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察胃腸道的各種形式的運(yùn)動(dòng),以及神經(jīng)和體液因素對(duì)胃腸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)。了解 小腸吸收與內(nèi)容物滲透壓間的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)原理消化道平滑肌具有自動(dòng)節(jié)律性,可以形成多種形式的運(yùn)動(dòng),主要有:緊張性收縮、蠕動(dòng)、分節(jié)運(yùn)動(dòng)及擺動(dòng)。在整體情況下,消化道平滑肌的運(yùn)動(dòng)受到神經(jīng)和體 液的調(diào)節(jié)。阿托品具有松弛內(nèi)臟平滑肌的作
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