高壓蒸汽滅菌

1、復(fù)習(xí)：復(fù)習(xí)：控制微生物生長的方法都有控制微生物生長的方法都有哪些？哪些？ 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材 實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)思考題思考題v了解高壓蒸汽滅菌的基了解高壓蒸汽滅菌的基本原理及應(yīng)用范圍。本原理及應(yīng)用范圍。v 熟練掌握高壓蒸汽滅菌熟練掌握高壓蒸汽滅菌的操作方法。的操作方法。 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康膙 高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加熱滅高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加熱滅菌鍋內(nèi)，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。菌鍋內(nèi)，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關(guān)

2、閉待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關(guān)閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時(shí)由于蒸氣不能溢出，排氣閥，繼續(xù)加熱，此時(shí)由于蒸氣不能溢出，而增加了滅菌而增加了滅菌器內(nèi)的壓力，從而使沸點(diǎn)增高，得到高于器內(nèi)的壓力，從而使沸點(diǎn)增高，得到高于100的溫度，導(dǎo)的溫度，導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。v 在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí)，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí)，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否完全極為重要，因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒羝呐蛎洺欠裢耆珮O為重要，因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒羝呐蛎泬?，所以，?dāng)水蒸汽中含有空氣時(shí)，在同一壓力下，含空氣壓，所以，當(dāng)水蒸

3、汽中含有空氣時(shí)，在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 滅菌鍋內(nèi)留有不同分量空氣時(shí)，壓力與溫度的關(guān)系滅菌鍋內(nèi)留有不同分量空氣時(shí)，壓力與溫度的關(guān)系壓壓 力力 數(shù)數(shù)全部空全部空氣排出氣排出時(shí)的溫時(shí)的溫度度 ()2/3空空氣排出氣排出時(shí)的溫時(shí)的溫度度()l/2空氣空氣排出排出時(shí)時(shí)的溫度的溫度 ()1/3空空氣排出氣排出時(shí)的溫時(shí)的溫度度 ()空氣全空氣全不排出不排出時(shí)的溫時(shí)的溫度度 ()MPakg/cm2 1b/in20.030.070.100.140.170.210.350.701.051.401.752.10 51015202530

4、108.8115.6121.3126.2130.0134.610010911512112613094105112118124128901001091151211267290100109115121 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 培養(yǎng)皿、試管、三角瓶、移液管 手提式高壓蒸汽滅菌鍋等三、實(shí)驗(yàn)器材三、實(shí)驗(yàn)器材1. 加水加水：將內(nèi)層鍋取出，再向外層鍋內(nèi)加入適量的水使水面與三角擱架相平為宜。 四、實(shí)驗(yàn)方法四、實(shí)驗(yàn)方法2.裝鍋裝鍋：放回內(nèi)層鍋，并裝入待滅菌物品。3. 3. 加蓋加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層鍋的，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層鍋的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時(shí)旋緊相排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時(shí)旋

5、緊相對的兩個(gè)螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。對的兩個(gè)螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。4.加熱、排氣加熱、排氣 打開放氣閥，同時(shí)接通電源，進(jìn)行加熱，待鍋內(nèi)水沸騰并有大量水蒸氣自放氣閥冒出時(shí)，維持3-5min以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣完全排盡后，關(guān)上放氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。5.保溫保壓保溫保壓 當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時(shí)，控制熱源，維持壓力至所需時(shí)間。 6.出鍋出鍋 滅菌所需的時(shí)間到后，關(guān)閉電源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表降至“0”時(shí)，打開放氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。7.保養(yǎng)保養(yǎng) 滅菌完畢取出物品后，將鍋內(nèi)余水倒出，以保持內(nèi)壁及內(nèi)膽干燥，蓋好鍋蓋。8.無菌檢查無菌檢查 將取出的滅菌培養(yǎng)基放入37溫箱培養(yǎng)24h，經(jīng)檢查若無雜菌生長，即可待用。 1切勿忘記加水，同時(shí)加水量不可過少，以防滅菌鍋燒干而引起炸裂事故。 2壓力一定要降到“0”時(shí)，才能打開排氣閥，開蓋取物。否則就會(huì)因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染，甚至灼傷操作者。 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)1高壓蒸汽滅菌開始之前，為什么要將鍋內(nèi)