2020浙科版生物選修一新素養(yǎng)同步練習：實驗2分離以尿素為氮源的微生物(Word版含解析)

1、知能演練、選擇題1.土壤中有些微生物能利用尿素是因為（）A.其體內含有月尿酶B.其體內含有氨（NH3）酶C.它能將CO2合成為有機物D.它們不需要氮源解析：選A。能利用尿素的微生物就是因為體內含有月尿酶，可降解尿素為其生長繁殖提供氮源。2.從土壤中分離以尿素為氮源的微生物時，所用的LB培養(yǎng)基由以下哪一組成分構成（）A.蛋白月東、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂B.蛋白月東、NaCl、水、瓊脂糖C.蛋白月東、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂糖D.葡萄糖、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂解析：選C。LB培養(yǎng)基必須含五大營養(yǎng)元素：碳源、氮源、水、無機鹽、生長因子。 由于是固體培養(yǎng)基還必須有凝固劑，為與尿素

2、培養(yǎng)基作對比，所用凝固劑不能帶來氮源干擾， 因此只能選擇相對更為純凈的瓊脂糖了。3.用10 4稀釋度的細菌懸?分別涂布于LB、尿素培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后的結果，以下敘述正確的是（）A. LB培養(yǎng)基上未出現(xiàn)任何菌落B.尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數量和種類都多于LB培養(yǎng)基上的C.尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數量和種類都少于LB培養(yǎng)基上的D.尿素培養(yǎng)基上是不可能出現(xiàn)菌落的解析：選C。LB培養(yǎng)基為完全培養(yǎng)基，會出現(xiàn)大量菌落。尿素培養(yǎng)基上只有能以尿素 做氮源的微生物能存活，因此其上的菌落數量和種類都將會減少。尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落就是能利用尿素的那些微生物菌落。4 .在做分離分解尿素白細菌實驗時，A同學從對應稀釋倍數為

3、 106的培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。A同學的結果產生原因可能有 （）由于土樣不同由于培養(yǎng)基污染由于操作失誤沒有設置對照A.B.C.D.解析：選A。該同學可能取的土樣不同，可取其他同學的土樣進行培養(yǎng)，同時將未接種 的培養(yǎng)基同時培養(yǎng)，如果結果不是大約50個菌落，可能是培養(yǎng)基污染或操作有誤；如果結果和其他同學數據相同，且未接種的培養(yǎng)基沒有菌落生成，說明是土樣不同。5 .能合成月尿酶的微生物所需的碳源和氮源分別是（）A.二氧化碳和氮氣B.葡萄糖和氨C.二氧化碳和尿素D.葡萄糖和尿素解析：選D。能合成月尿酶的微生物主要是分解尿素的細菌，其碳源為葡萄糖，氮源為尿 素

4、。6 .某同學在稀釋倍數為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數的平均值為234,那么每克樣品中的菌落數是（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1 mL）（ ）A. 2.34X 108B. 2.34X109C. 234D. 23.4解析：選B。每克樣品中的菌落數= （CW） X M = （234田.1）X 106 = 2.34 X 109。7 .可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是（）A .以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑8 .以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹出試劑D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮月尿試劑解析：選Ao酚紅指示劑是靈敏性高的堿性指示劑

5、，分解尿素的細菌合成的月尿酶將尿素分解成氨，使pH升高，使酚紅指示劑變紅。9 .進行系列稀釋時，按怎樣的順序進行（）A.稀釋倍數遞增B.稀釋倍數遞減C.不論稀釋度大小D . A、B兩者都可解析：選A。將菌液進行系列梯度稀釋，在稀釋倍數足夠高的菌液里，聚集在一起的微 生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。10 有關倒平板的操作錯誤的是 （）A.將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上B.使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰C.將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌子上D.等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置解析：選Co在倒平板時，左手將皿蓋打開一條縫隙，不能將培養(yǎng)皿完全打開，以免雜 菌污染。11 .將

6、接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入37 c恒溫箱的目的是（）A .對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用B.對比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌C.沒必要放入未接種的培養(yǎng)基37 C恒溫箱的目的是檢D.為了下次接種時再使用解析：選B。將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入測培養(yǎng)基是否被雜菌污染，即制備是否合格。12 .如圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數”實驗中樣品稀釋示意圖。據圖分析正確的是（）A . 3號試管的稀釋倍數為103倍B. 4號試管中稀釋液進行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數恰好為5號試管的10倍C. 5號試管的結果表明每克土壤中的菌株數為1.7X109個D.該實驗方法統(tǒng)計得到的結果往往會

7、比實際活菌數目要高答案：C12 .統(tǒng)計菌落數目的方法是（）涂布平板法 重量法直接計數法 比濁法生理指標法 膜過濾法A.B.C.D.解析：選D。微生物計數法主要有顯微鏡直接計數法、平板菌落計數法、光電比濁法、 最大可能數（MPN）法、膜過濾法等。13 .分離以尿素為氮源的細菌和分離大腸桿菌都使用了LB培養(yǎng)基，其成分（）A.前者含瓊脂，后者不含瓊脂和瓊脂糖B.兩者都含有瓊脂C.前者含有瓊脂糖，后者不含瓊脂糖但含瓊脂D.兩者都不含瓊脂和瓊脂糖解析：選C。瓊脂和瓊脂糖都起凝固劑的作用， 用于制備固體培養(yǎng)基。 但瓊脂為混合物， 含少量含氮化合物，瓊脂加以純化，去除含氮化合物就成為瓊脂糖。 分離大腸桿菌和

8、含月尿酶 的細菌用的都是固體培養(yǎng)基，因此都必須含有凝固劑：瓊脂或瓊脂糖。但是，由于瓊脂為混合物，其中含一定量的含氮化合物，因此不能用于分離以尿素為氮源的細菌。 瓊脂糖為瓊脂 的純化物，不含含氮化合物，可用于分離以尿素為氮源的細菌。14 .下列說法不正確的是（）A.科學家從7080 C熱泉中分離得到耐高溫的TaqDNA聚合酶B.統(tǒng)計某一稀釋度的 5個平板的菌落數依次為 M1、M2、M3、M4、M5,以M3作為該 樣品菌落數的估計值C.設置對照實驗的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗 結果的可信度D.同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數量最大，種類最多解析：選B。統(tǒng)計菌落數

9、應注意選擇菌落數在30300的平板進行計數，且至少涂布 3個平板作為重復組，重復組的結果不能相差太多，然后取平均值進行計算。15 .通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培 養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入10%的酚類可以抑制細菌和霉菌。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分離出（）A .大腸桿菌B .霉菌C.放線菌D.固氮細菌解析：選A。缺乏氮源的培養(yǎng)基可以選擇出固氮細菌；在培養(yǎng)基中加入青霉素，可以選擇出霉菌；在培養(yǎng)基中加入10%的酚類可以選擇出放線菌。16 .在農田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的

10、稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其他細菌分開，對培養(yǎng)基的要求是（）加抗生素不加抗生素加氮素 不加氮素加葡萄糖不加葡萄糖37 c恒溫箱中培養(yǎng)2830 C溫度下培養(yǎng)A.B.C.D.解析：選Co自生固氮菌生長繁殖的適宜溫度是2830 C ,能夠將無機氮源合成有機氮，不需要加氮源。細菌對抗生素敏感。固氮菌是異養(yǎng)生物，需要加葡萄糖。17 .能夠測定樣品活菌數的方法是 （）A.稀釋涂布平板法B.直接計數法C.重量法D.比濁法解析：選Ao利用稀釋涂布平板法能夠在不影響生活的情況下將細菌個體從固體培養(yǎng)基 上分離出來，并可以繁殖形成菌落，可根據菌落數測定出樣品活菌數。18 .在做土壤中分解尿素的

11、細菌的分離與計數實驗時，甲組實驗用氮源只含尿素的培養(yǎng) 基，乙組實驗用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基，其他成分都相同，在相同條件下操作， 培養(yǎng)與觀察，則乙組實驗屬于 （）A.空白對照B.標準對照C.相互對照D.條件對照解析：選D。乙組和甲組實驗僅是培養(yǎng)條件不同，所以為條件對照。19 .下列是關于“檢測土壤中細菌總數”實驗操作的敘述，其中錯誤的是（）A.用蒸儲水配制牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基，經高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平板上C.將實驗組和對照組平板倒置，37 C恒溫培養(yǎng)2448小時D.確定對照組無菌后，選擇菌落數在300以上的

12、實驗組平板進行計數解析：選D。選擇菌落數在 30300的一組平板為代表進行計數，所以 D不對。20 .用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數，在對應稀釋倍數為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結果，正確的是（）A.涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數是230B.涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數是215和260,取平均值238C.涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數分別是21、240和250,取平均值163D.涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數分別是210、240和250,取平均值233解析：選D。在設計實驗時，一定要涂布至少3個平板，作為重復組，才能增強實驗的說服力與準確性，所以 A、B不正確。C項雖涂布了 3個平

13、板，但是，其中1個平板的計數 結果與另兩個相差太遠，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地將3個平板的計數值用來求平均值。二、非選擇題21 .某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列問題：（1）有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產生 。 能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產物 CO2作為碳源，原因是但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是（答出兩點即可）。（2）為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應選擇（填“尿 素” “NHNO3”或“尿素+ NH4NO3” ）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有

14、KH2PO4和Na2HPO4 ,其作用有（答出兩點即可）。解析：（1）土壤中的某些細菌之所以能夠分解尿素，是因為它們能產生月尿酶。尿素分解菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機物，必須利用現(xiàn)成的有機物（如葡萄糖）作為碳源；葡萄糖通過呼吸作用被分解時，能為細胞生命活動提供能量，同時，葡萄糖還可以轉化成脂肪、某些氨基酸等物質，所以進入細菌體內的葡萄糖能為其他有機物的合成提供原料。（2）選擇培養(yǎng)基是只允許特定種類的微生物（目的微生物）生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。本實驗的目的菌是可分解尿素的細菌，因此，配制的培養(yǎng)基應只允許尿素分解菌生長，NH4NO3可以作為所有細菌的氮源，培養(yǎng)基中

15、如含有NH4NO3,將不能起到篩選作用。(3)KH 2PO4和Na2HPO4能為細菌生長提供鉀鹽、鈉鹽和磷酸鹽，而H2PO4/HPO4可以使培養(yǎng)基中pH保持相對穩(wěn)定。答案：(1)月尿酶 分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機物為細胞生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料(2)尿素 其他兩組都含有 NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用(3)為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定A。研究人員用化22 .某化工廠的污水池中，含有一種有害的、難于降解的有機化合物合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功

16、地篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答問題:漪黑懶擷第島*I國軍昌昌接種固體 刀養(yǎng)刀而厘的次，力受祗也口的掂培養(yǎng)基中加入化合物 A的目的是篩選 ,這種培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。(2) “目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的 ,實驗需要振蕩培養(yǎng), 由此推測“目的菌”的代謝類型是 。(3)培養(yǎng)若干天后，應選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量 的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數量 。(4)轉為固體培養(yǎng)時，常采用 的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(5)若研究“目的菌”的生長規(guī)律，將單個菌落進行液體培養(yǎng)，可采用 的方法 進行計數，以時間為橫坐標，以 為縱

17、坐標，繪制生長曲線。(6)實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基應該進行 處理后，才能倒掉。解析：加入化合物A的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)目的菌。由于化合物A為有機物，且要振蕩，說明目的菌為異養(yǎng)需氧型。“目的菌”生長繁殖過程中要不斷消耗營養(yǎng)物質，培養(yǎng)若干天后，應選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量減少的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數量增加。轉為固體培養(yǎng)時，常采用劃線的方法接種，獲得單菌落后 繼續(xù)篩選。若研究“目的菌”的生長規(guī)律，將單個菌落進行液體培養(yǎng)，可采用定期取樣的方 法進行計數，繪制生長曲線應以時間為橫坐標，以細菌數目的對數為縱坐標。實驗結束后要對培養(yǎng)基進行滅菌，以免污染環(huán)境。答案：(1)

18、目的菌選擇(2)化合物A異養(yǎng)需氧型(3)減少增加劃線(5)定期取樣細菌數目的對數(6)滅菌23 .土壤中的微生物種類和數量繁多，同學們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解 作用，設計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如表所示，實驗步驟如圖所示。請分析回答：士通，稿料倍數為1?二1仃的試ft看限/靖養(yǎng)MKH 2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO4 7H2O0.2 g葡萄糖10 gwr1 g瓊脂糖15 g將上述物質溶解后，用蒸儲水定容到1 000 mL(1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選 ,這種培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。(2) “目的菌”生長所需的氮源和碳源分

19、別來自培養(yǎng)基中的 和,實驗 需要振蕩培養(yǎng)，原因是 。(3)圖中將細菌轉到固體培養(yǎng)基上時，常采用 的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù) 篩選。(4)下列材料或用具：培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿，玻棒、試管、錐形瓶和吸管，實驗操作者的雙手。其中需要滅菌的是： ;需要消毒的是： 。(填序號) 解析：培養(yǎng)基中添加尿素為氮源，目的是篩選分解尿素的微生物，這種培養(yǎng)基從功能上來說，屬于選擇培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基的氮源為尿素， 碳源為葡萄糖。培養(yǎng)過程中震蕩的目的是 增加培養(yǎng)液中的氧氣，說明尿素分解菌為需氧型微生物；將菌液接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)， 一般要采用稀釋涂布平板法或平板劃線法；培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿要進行高壓蒸汽滅

20、菌，玻棒、試管、錐形瓶和吸管要用干熱滅菌，實驗操作者的雙手用酒精消毒。答案：(1)目的菌選擇(2)尿素 葡萄糖 為目的菌提供氧氣(3)涂布平板(劃線)(4)24 .幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內采集 樣本并制成菌液后，進行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下：配制培養(yǎng)基 > 滅菌、倒平板> | X | >培養(yǎng) > 觀察請回答下列問題：(1)在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有,它能以尿素作為氮源；若有 Hp,則菌落周圍會出現(xiàn) 色環(huán)帶。(2)下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是 滅菌。A.高壓蒸汽B.紫外燈照射C. 70%

21、酒精浸泡D.過濾(3)步驟X表示。在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液 到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得 菌落。(4)在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在 中。若不倒置培養(yǎng)，將導致(5)臨床上用14C呼氣實驗檢測人體是否感染Hp,其基本原理是 Hp能將14C標記的分解為NH3和14CO2。解析：(1)幽門螺桿菌(Hp)含有月尿酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培 養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp,由于尿素經月尿酶的降解可產生堿性的NH3, NH 3能使培養(yǎng)基中的酚紅指示劑變成紅色，故菌落周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會分解，對尿素溶液進行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過濾。(3)微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基 一>滅菌、倒平板 一>接種一培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面 上即可。(4)微生物培養(yǎng)時需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無法形 成單菌落。(5)幽門螺桿菌能將14C標記的尿素分解為 NH3和14CO2,故臨床上常用14C呼氣 實驗檢測人體內幽門螺桿菌的存在。答案：(1)月尿酶紅(2)D(3)接種涂布單(4)恒溫培養(yǎng)箱無法形成單菌落(5)尿素25.臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗，實驗時，首先要從病人身上獲取少 量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某