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文檔簡介

1、植物病害標本制作植物病害的標本是對其癥狀的最直觀的記載和描述。 所以,在進行植物病害 的教學或研究過程中, 植物病害標本的采集和制作是首要的工作。 在植物病害標 本的采集和制作過程中, 應對癥狀的變化情況給以特殊的注意。 例如,癥狀可能 表現(xiàn)為典型癥狀, 也可能表現(xiàn)為非典型癥狀, 在采集時均應加以注意。 一種病害, 在同一種植物上, 可以同時表現(xiàn)出多種不同類型的癥狀; 在植物生長發(fā)育的不同 時期,也可以先后表現(xiàn)出多種不同類型的癥狀,如谷子白發(fā)病。標本采集之后, 除去需要及時分離和鑒定的標本外, 其余的一般都要經(jīng)過制 作之后保存起來, 以備需要時進行分離和鑒定; 或者是在教學和研究時, 供觀察

2、和識別;或者是供相關人員間進行交流。 標本一般都用干燥法或浸漬法保存, 要 求是能盡量保持原來的性狀。一、目的要求學會采集植物病害標本的基本方法。 通過對常見的葉片和果穗等干標本以及 對柔嫩果實的浸漬標本的制作, 學習并掌握標本干燥制作和標本浸漬制作的基本 方法。二、基本原理 室外采集標本是獲取植物病害標本的重要途徑,也是熟悉植物病害的癥狀, 了解植物病害發(fā)病情況的最好方式。 植物病害的發(fā)病時期與植物的生育期及當?shù)?的氣候條件和生產(chǎn)條件有著密切的關系, 所以在采集標本前應對某種植物病害的 發(fā)病條件有著比較清楚的了解。首先,應明確在當?shù)氐臍夂驐l件和生產(chǎn)條件下, 某種植物病害的始發(fā)期和盛發(fā)期; 某

3、種植物病害主要在植物的哪一個生育期間發(fā) ?。灰约澳撤N植物病害主要發(fā)生在哪些植物上等等。標本的制作是為了日后能較為方便地觀察植物病害的癥狀, 并能及時提供研 究的材料。 穩(wěn)妥的保存方法可為教學及相關的科研工作提供可靠的保障。 無論用 干燥制作法保存標本, 還是用浸漬制作法保存標本, 都是為了盡量減緩所保存標 本變質(zhì)的速度或不使其腐爛霉變。 同時,也是為了盡量使標本保持其原色, 以延 長標本的使用時間和提高標本的保存質(zhì)量。三、采集和制作標本用具1采集標本的用具 采集夾、標本夾、標本紙、標本箱 (筒) 、剪刀、修枝剪、 高枝剪、手鋸、手鏟、紙袋、標簽、手持放大鏡及采集記錄本、海拔儀等。(1) 采集夾

4、。在野外臨時收存新采標本的輕便夾子。一般由兩個對稱的用一 些木條按適當?shù)拈g距平行排列的柵狀板 (亦有用膠合板或硬紙板組成的 ) ,其上附 有背帶,在接近四個角落的地方, 設有長短可以調(diào)整的活動固定帶或彈簧, 以適 應采集過程中標本逐漸增多的需要。(2) 采集箱。用于臨時收存新采集的果實等柔軟多汁的標本。是由鐵皮制成 的扁圓箱,內(nèi)側(cè)較平,外側(cè)較鼓,箱門設在外側(cè),箱上設有背帶。(3) 標本夾。是用來翻曬、壓制標本的木夾。由兩個對稱的一些平行排列的 柵狀板組成。 每塊柵狀板在接近上下端處釘一根厚實的方木條, 木條端部向外突 出約 5cm長,以便于用繩捆綁標本夾。標本夾上:應附有約 6m長的一條繩子。

5、(4) 標本紙。主要用來吸收標本的水分,使標本逐漸干燥。般用草紙或麻 紙作標本紙,它們的吸水性較好。 舊報紙也可代替, 但因其上有油墨吸水性較差。(5) 修枝剪。主要用于剪取較硬或韌性較強的枝條,高處的枝條要使用高枝 剪,難于折斷的枝干則要借助于手鋸。手鏟用來挖掘地下患病植物器官( 如根、塊根、塊莖等 ) 。2制作標本用具及試劑 剪刀、標簽、標本瓶、玻璃瓶、玻璃板、塑料繩、 水浴鍋 (或簡單的加熱裝置 ) 、水、硫酸酮試劑、明膠、石蠟等。四、實驗操作( 一 ) 室外采集1病葉 用剪刀剪取病植物上的發(fā)病葉片。 如小麥銹病的病葉、 水稻稻瘟病 的病葉、玉米彎孢菌葉斑病的病葉、大豆霜霉病的病葉、馬鈴

6、薯晚疫病的病葉、 丁香白粉病的病葉及梨黑星病的病葉等,裝入采集夾中。盡量剪取整個一致的。2病穗 用剪刀剪取玉米絲黑穗病的病穗、 高粱絲黑穗病的病穗及谷子白發(fā) 病的病穗等, 裝入采集筒中。 對于黑粉類的病穗, 每種病穗要及時放入小的采集 袋中,同時注意隔離,以防黑粉散落和不同病穗間相互混雜。3病果 用剪刀剪取茄子褐紋病的病果、 番茄潰瘍病的病果、 辣椒炭疽病的 病果以及梨黑星病的病果等, 裝入采集筒中。 對于此類標本, 特別是對于像番茄 一類多汁的病果, 要特別加以注意, 應先以標本紙分別包裹后, 置于采集筒 ( 箱) 中,以防相互擠壓而變形。4病根 用鐵鏟挖取大豆胞囊線蟲病的病根以及葡萄根癌病

7、的病根等, 裝入 采集筒中。 在挖取此類病害的標本時, 要注意挖取點的范圍要比較大一些, 以保 證取得整個根部。 同時,對于像大豆胞囊線蟲病害一類的病根, 在除去根須上的 泥土時,操作要謹慎,保證其根須上的胞囊不散落。一般情況下,各種病害的標本最好采集 10份 K上。對于較薄的較易失水 的葉片, 如小麥和水稻的葉片, 在采集時應隨時攜帶吸水紙或廢舊的書, 隨采隨 壓,以免葉片迅速打卷而不易展開。提示:在采集病斑類的葉片標本時, 一個葉片上應只有一種類型的病斑。 尤 其是在各種病害混合發(fā)生時采集標本, 更需進行仔細的選擇; 對于真菌病害, 標 本應帶有子實體,無子實體在回到室內(nèi)后,鑒定將非常困難

8、。( 二 ) 采集記錄 采集時,要隨時作標記。臨時標簽上一般應記錄如下項目: 寄主名稱:俗名和學名都有時,應同時記下。采集時間:一般應記錄年、月、日。 采集地點:一般記錄到省、市 ( 縣) 即可,需要時也可記錄到鎮(zhèn) ( 鄉(xiāng)) 等。 海拔高度:按海拔儀指示記錄。生態(tài)環(huán)境:按照山坡地、平坦地、沼澤地;砂質(zhì)土、肥沃土等記錄。 采集序號:一般按照采集時間的先后順序記錄。提示:寄主名稱如有不清楚的,能及時向當?shù)厝藛柮鞲茫蝗绮荒?,應記?采集地的位置以及寄主的一些主要性狀, 以備鑒定時參考。 必要時還應將寄主的 花、果實以及其他部位標本一起采得, 以便憑借寄主的標本對該寄主進行分類鑒 定。( 三 ) 標

9、本的攜帶田間采集后, 莖或葉片類的標本裝入采集袋中, 每一種病葉放入一個小袋內(nèi) 之后,最好再放入一個大一點的采集袋內(nèi); 對于根或果實類的標本, 各種標本在 裝入采集筒之前應分別用小采集袋裝好密封或用紙包裹好, 然后,再裝入采集筒 中。對于黑粉類的標本 ( 如玉米絲黑穗的病穗 ) ,或腐爛類的標本 ( 如茄子褐紋病 病果) 等,要特別注意,標本間不要相互接觸沾污,否則,對于病原的鑒定和病 害的診斷會有影響。( 四 ) 標本的整理 在完成田間采集的過程之后,首先要在室內(nèi)進行標本的取舍和初步的整理。對于同一種病害的標本, 應盡量保留帶有典型癥狀的標本。 同時,對于真菌性病 害,在發(fā)病部位應帶有子實體

10、,葉片或果實要保持完整。在整理時,應使其形狀 盡量恢復自然狀態(tài)。 對于采集到的比較稀少的標本, 如癥狀不典型, 或暫時觀察 不到子實體,也不要舍棄。應該同樣制作成標本,以備日后采取措施進行鑒定。 如果外出采集, 每天晚上都要將當天采集的標本進行整理、 壓制, 第二天及時換 紙或晾曬,防止霉變。( 五 ) 干燥標本的制作1含水量小的標本的壓制 對于像水稻和小麥等植物, 其葉片比較薄, 它們 的葉片病害標本,需要經(jīng)過整理后,立即進行壓制。對于此類標本,在壓制時, 標本間的標本紙最好要多放幾層,一般每層至少用 35 張標本紙,以利于標本 中水分的快速散失。2含水量大的標本的壓制 對于像甘藍、大白菜、

11、馬鈴薯等比較厚、不易失 水的葉片,最好經(jīng)過一段時間 (1 2d)的自然散失水分,然后,再進行壓制。自 然散失水分的時間不宜過長。 在具體操作時, 最好是在葉片將要卷曲但還未卷曲 時進行,這與具體植物和環(huán)境條件有關。3附臨時標簽 在壓制時, 每份標本都要附上臨時標簽, 即將臨時標簽隨著 標本壓在吸水紙之間。 臨時標簽上的項目不必記載過多, 一般只需記錄寄主名稱 和順序號即可,以防標本間相互混雜。寫臨時標簽時,應使用鉛筆記錄,以防受 潮后字跡模糊,影響識別。4標本整理 在第 1 次換紙前, 要對標本進行形狀的整理, 盡量使其舒展自 然。在整理時,要十分小心。特另樹于比較柔嫩的植物標本,更應多加注意

12、,以 免破損。5換紙 一般情況下, 前一周的時間里要每天換干燥的吸水紙 1 次。以后的 時間,可隔天換紙,視情況而定,直至標本完全干燥為止 ( 在正常的晴好的天氣 條件下,一般經(jīng)過 10d 左右的時間即完全干燥 ) 。在換紙時,注意不要遺失臨時 標簽;要特別注意不要混用已經(jīng)污染了的紙張; 對于完全干燥的標本, 要特別小 心移動,以防破碎。6果穗及較粗大莖的標本的干燥 對于這類標本應置于朝陽 ( 但應避免強光 直射) 通風處,置于吸水紙上,進行自然干燥。同時,也要定期進行翻動使其 整體較為均勻地干燥。 對于此類標本的干燥, 開始時, 就要選擇在比較寬敞的空 間內(nèi)進行,以免其整個形狀不被擠壓而發(fā)生

13、變形。7裝袋保存 用重磅道林紙 ( 也可用牛皮紙,對于不用作交流的標本,也可 報紙代替 ) ,折成紙袋如下圖,紙袋的大小可據(jù)標本的大小而定,其折疊方式也 可據(jù)標本的不同形狀而做適當?shù)母倪M。在裝袋時,要隨時貼上正式標簽( 六 ) 浸漬標本的制作此法制作的標本易保持標本原來的形態(tài)和色澤, 但保存的時間有限, 且需占 用比較大的空間。一般用于制作教學和示范標本。1常用的浸漬液(1) 防腐漂白浸漬液。此種浸漬液是由亞硫酸飽和溶液、酒精和水按照一定 比例配制而成。亞硫酸飽和溶液,即指二氧化硫的飽和水溶液。(2) 保存綠色的浸漬液。常用的有如下幾種:醋酸銅浸漬液。反復用多, 次后保色能力會逐漸減弱,需定期

14、補加適量的醋酸銅。硫酸銅亞硫酸浸漬液。 用于保存綠色植物組織的效果很好, 但應注意密封容器, 必要時每年換 1 次亞硫 酸浸漬液。此種方法也是實驗室較為常用的液浸標本的保存方法。 瓦查 (Vacha) 浸漬液。由亞硫酸、硫酸銅、酒精、乙酰水楊酸、福爾馬林、香油和水等成分按 比例配制而成。適于保存葉片和果實的綠色,也可保存梨和蘋果等的黃色。 (3) 保存黃色和橘紅色標本的浸漬液。配制方法是將亞硫酸 ( 含二氧化硫 5 6) 配成 4 10的水溶液 ( 二氧化硫 02 05 ) ??杀4嫒缧?、梨、柿、黃 蘋果、柑橘和紅辣椒等標本。 (4) 保存紅色的浸漬液。 瓦查(Vacha) 保存紅色的浸 漬液

15、。此種浸漬液分兩部分:浸潰液 1 的主要成分為硝酸亞鈷、福爾馬林、氯化 錫等;浸漬液的主要成分為福爾馬林、亞硫酸、酒精等。將標本洗凈后,在浸漬 液 1 中浸兩周,然后在侵漬液 2 中保存??捎糜诒4娌葺?、辣椒、馬鈐薯以及其 他紅色的植物組織,是一種效果比較好的浸漬液。2浸漬標本的保存 浸漬標本一般保存在標本瓶、 玻璃瓶或試管中。 浸漬標 本最好置于暗處, 以減緩藥液的氧化, 或防止氣溫過高時瓶口碎裂。 瓶口一般需 要密封,臨時性封口時,可用蜂蠟、松香和凡士林配成的混劑封口;永久性封口 時,可用酪膠和消石灰配成的混劑封口; 也可用明膠、 重鉻酸鉀和熟石膏調(diào)制而 成的混劑進行永久性的封口。(1)

16、配制硫酸銅溶液。根據(jù)需要,一般配制 1000m1 5的硫酸銅水溶液,在 適當?shù)牟A萜髦小?配制溶液前, 要考慮到所浸標本的大小, 保證所浸標本全部 位于液面下。(2) 預浸病果。從室外采來新鮮的辣椒炭疽病的病果,在盛有5的硫酸銅溶液的玻璃瓶中浸 24h。浸病果時,需臨時將病果用塑料繩縛在玻璃板上,一起 放人溶液中。否則,病果易浮在液面上,特別是對于像辣椒這樣的空心的果實, 更易漂浮在液面上。(3) 漂洗病果。從 5的硫酸銅溶液中取出病果,用清水漂洗 6h??晒潭ㄔ?水籠頭下,打開水讕用流水進行沖洗。在沖洗時,水流不宜太急,否則,易破損 標本,或?qū)⒆訉嶓w沖刷掉。(4) 配制亞硫酸溶液。在標本瓶中將含 5-6 二氧化硫的亞硫酸溶液 15ml 加水 1 000 咖( 也可用如下方法配制,即將濃硫酸 20m1,稀釋在 1000血水中然 后加亞硫酸鈉 16g) 。提示:配制溶液時,要記住,將濃硫酸沿瓶壁緩緩倒入水中,切不可將水倒 入濃硫酸中,以防發(fā)生事故。(5) 固定病果。將沖洗后的病果用甥料繩將其縛在玻璃板上,一起浸入配制 好的亞硫酸溶液中。固定時,要小心操作,盡量不要損壞標本,保持其完整。(6) 封口。先配制封口劑,具體方法是:取明膠 200g,石蠟 50g( 此兩試劑

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