內(nèi)蒙古地方標(biāo)準(zhǔn)亞麻籽中α亞麻酸的測(cè)定液相色譜法編制說(shuō)明

1、百度文庫(kù)-讓每個(gè)人平等地提升自我亞麻籽中a 亞麻酸含量的測(cè)定液相色譜法標(biāo)準(zhǔn)編制說(shuō)明一、標(biāo)準(zhǔn)制定的背景及任務(wù)來(lái)源亞麻是我區(qū)的優(yōu)勢(shì)雜糧作物，亞麻籽中 -亞麻酸的含量很高。而-亞麻酸是一種多不飽和脂肪酸，是一種必需脂肪酸，是一種生 命核心物質(zhì)，是構(gòu)成人體腦細(xì)胞和組織細(xì)胞的重要成分、-亞麻酸是人體自身不能合成的，也無(wú)法由其他營(yíng)養(yǎng)來(lái)合成的，必須要依靠膳 食來(lái)獲得。為篩選出亞麻優(yōu)良品種以指導(dǎo)生產(chǎn)，實(shí)現(xiàn)亞麻籽中-亞麻酸含量的準(zhǔn)確檢測(cè)，內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院資源環(huán)境與檢測(cè)技術(shù)研究所起草 并制定了 “亞麻籽中 -亞麻酸的測(cè)定 液相色譜法”標(biāo)準(zhǔn)。二、本標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)內(nèi)現(xiàn)有分析方法的技術(shù)差異經(jīng)過(guò)對(duì)國(guó)內(nèi)關(guān)于 -亞麻酸檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的

2、調(diào)研發(fā)現(xiàn)，目前亞麻籽中 “亞麻酸含量測(cè)定多采用 GCg GC-MJ&,分析過(guò)程中柱溫高使目標(biāo) 組分易產(chǎn)生異構(gòu)現(xiàn)象，且需用到數(shù)種高制毒試劑。液相標(biāo)準(zhǔn)還屬空白。 三、標(biāo)準(zhǔn)編制概況以?xún)?nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院資源環(huán)境與檢測(cè)技術(shù)研究所近年來(lái)對(duì)農(nóng)畜產(chǎn)品加工及農(nóng)畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)方法研究為基礎(chǔ)，起草并擬訂工 作計(jì)劃，具體分以下幾個(gè)階段進(jìn)行：1.工作進(jìn)度/2012年上半年，主要通過(guò)實(shí)地調(diào)研及走訪，掌握了亞麻品種及 其種植范圍的大概情況。查閱資料，完成相關(guān)資料的收集、整理和實(shí)施方案的確定工作。主要參考文獻(xiàn)如下：(1)亞麻籽的保健功能和開(kāi)發(fā)利用J.中國(guó)油脂，2006,31(3):71-74 (2)亞麻油中 -亞

3、麻酸含量的測(cè)定J.大理學(xué)院學(xué)報(bào)，2007, 6(12):1-3(3) GB/T食品中脂肪的測(cè)定(4) GB/T 5512-2008糧油檢驗(yàn) 糧食中粗脂肪含量的測(cè)定/ (5) GB 28404-2012食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 保健食品中 -亞麻酸、二 十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的測(cè)定2012年下半年，基本確定試驗(yàn)品種范圍，樣品的采集和制備、 試驗(yàn)設(shè)備準(zhǔn)備及試劑耗材采購(gòu)。并初步摸索亞麻籽中-亞麻酸含量測(cè)定的實(shí)驗(yàn)條件。2013年上半年，以前一年初步摸索條件為基礎(chǔ)，進(jìn)行了改進(jìn)優(yōu) 化，確定了標(biāo)準(zhǔn)方法，并以亞麻籽中亞麻酸含量的測(cè)定液相色譜法征求意見(jiàn)稿為標(biāo)準(zhǔn)，測(cè)定了種植范圍較廣較常見(jiàn)的16個(gè)品種亞

4、麻籽中a亞麻酸的含量。2013年下半年，選取了 “晉亞七號(hào)”、“輪選2號(hào)”兩個(gè)品種與 自治區(qū)級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了比對(duì)試驗(yàn)，對(duì)結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn) 行了驗(yàn)證。2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果/提取時(shí)間及石油醍用量確定結(jié)合資料，對(duì)同一亞麻籽的超聲波震蕩提取進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，最終確定提取兩次，每次30分鐘，分別加石油醍60mL與50mL表1提取時(shí)間試驗(yàn)（稱(chēng)取，每次加石油醴 100mL提取 時(shí)間15min1次30min1次45min1次60min1次'15min2次30min2次45min2次60min2次得油重（g）RS D%表2石油醴加入量試驗(yàn)（稱(chēng)取，超聲波提取 30min； 2次）第1次第2次得油重RSD （如1

5、0010010075100501002580758050607560504075、40502025一波長(zhǎng)選擇使用PDA僉測(cè)器進(jìn)行190 nm至300 nm掃描，發(fā)現(xiàn)最大吸收波長(zhǎng) 為nm,如圖1。但因?qū)崪y(cè)樣品的不同，有時(shí)會(huì)存在干擾且太接近遠(yuǎn) 紫外區(qū)，選擇205 nm時(shí)目標(biāo)組分響應(yīng)基本不降低，且基線噪音明顯 減少，故此選擇205 nm。圖1 a -亞麻酸190nm至300nm PDAm描光譜圖流動(dòng)相選擇流動(dòng)相只用甲醇和水，分離度不理想影響積分，調(diào)整水相為 %瞬 酸水溶液后，峰型尖銳對(duì)稱(chēng)分離度好。當(dāng)流動(dòng)相甲醇與 麻酸水溶液 比例為90+10時(shí) -亞麻酸保留時(shí)間為 min，如圖2;流動(dòng)相比例95+5

6、時(shí)磷酸溶液保留時(shí)間min ,如圖3。最終選擇95+5,分離度好用時(shí)短。圖2甲醇+%#酸水溶液=90+10 （上標(biāo)品，下試樣）10檢出限 UCi圖3甲醇+%#酸水溶液=90+10 （上標(biāo)品，下試樣）名稱(chēng)稱(chēng)籽重（g）得油重（g）油脂率（%晉業(yè)七號(hào)同業(yè)12號(hào)隴亞八號(hào)輪T輪三號(hào)輪選2號(hào)H10-19925-7-4-3-299-42l067H08-22000-16Y0310 H10-29301D-11-2-2-99143-4表3北方地區(qū)種植面積較廣的亞麻品種籽實(shí)油脂率逐級(jí)稀釋標(biāo)準(zhǔn)工作液，測(cè)定 -亞麻酸含量，得到儀器響應(yīng)限值 為w g/mL （即2 ng）。從表3中大量實(shí)驗(yàn)看到，大部分亞麻籽油脂率均在40施

7、右，故此設(shè)定50 %由脂率為極限值，即稱(chēng)取亞麻籽可得油（即公式1中的m-mi）。故此根據(jù)公式計(jì)算得到方法檢出限為g/100g。/ 計(jì)算公式：X C V3 V1 m2 m1V2 m3 m 10X 樣品中a -亞麻酸的含量，單位為克每百克（g/100g）C 樣液中a -亞麻酸的檢出濃度，單位為微克每毫升（以g/mL）;賦值m 稱(chēng)取研磨好的亞麻籽重量，單位克（g）;賦值 m 茄形瓶干重，單位克（g）m2經(jīng)提取后茄形瓶與亞麻籽油脂的總重，單位克（g）m 稱(chēng)取亞麻籽油脂的重量，單位毫克（mg ；賦值Vi調(diào)至中性的定容體積，單位毫升（mD ;賦值V 調(diào)至中性定容后從中吸取樣液的體積，單位毫升（ mD ;賦

8、值 V3吸取樣液后定容體積，單位毫升（mD ;賦值線性精密稱(chēng)取 -亞麻酸標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇定容至，得濃度為 mL的- 亞麻酸標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，并用甲醇稀釋至w g/mL待用。以濃度w g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液為基礎(chǔ)，用甲醇配置成g g/mL至g g/mL不同濃度對(duì) 照品溶液，搖勻，分別進(jìn)樣10pL。得到曲線Y=x 104X+X 104, R =。 多次測(cè)定得到不同曲線，R2在至之間。圖4 a-亞麻酸標(biāo)準(zhǔn)工作曲線精密度和回收率濃度為g g/mL的廠亞麻酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液重復(fù)進(jìn)樣 7次，測(cè)得峰面積，計(jì)算RS防制備晉亞七號(hào)亞麻籽平行樣6份，分別進(jìn)樣10wL測(cè)得含量，RS兩%精密稱(chēng)取亞麻籽油脂適量，準(zhǔn)確加入 mL

9、 0c-亞麻酸2mL測(cè)得平士回收率 RSM%表4 <> g/mL重復(fù)7次表5六份“晉亞七號(hào)”試樣亞麻酸含量實(shí)測(cè)值ug/mL平均值ug/mLRSD(%)檢測(cè)量ug/mL油脂中含量 g/100g籽實(shí)中含量g/100g籽實(shí)中含量RSD (%)平均值一表6 “晉亞七號(hào)”加入mlLx -亞麻酸稱(chēng)油重g檢測(cè)量ug/mL實(shí)測(cè)含量 g/100g理論添加量 g/100g實(shí)測(cè)量 g/100g回收率ck +1+1+2+2+3+3回收率RSD (%四、標(biāo)準(zhǔn)編制原則為保證亞麻籽中 -亞麻酸的準(zhǔn)確測(cè)定，確定優(yōu)勢(shì)品種的選擇和 后期的加工工藝，有效地指導(dǎo)種植，在制定本標(biāo)準(zhǔn)的過(guò)程中，汲取國(guó) 內(nèi)外同類(lèi)相關(guān)先進(jìn)的檢測(cè)標(biāo)

10、準(zhǔn)及編制的先進(jìn)經(jīng)驗(yàn)和方法，力求實(shí)事求 是的原則，使本標(biāo)準(zhǔn)具有較強(qiáng)的科學(xué)性、先進(jìn)性。在進(jìn)行大量實(shí)驗(yàn)室研究的基礎(chǔ)上， 參考國(guó)內(nèi)相關(guān)資料，對(duì)亞麻籽 中-亞麻酸的檢測(cè)方法進(jìn)行了大量試驗(yàn)摸索，確定了具體的、可操 作性好的、高效可靠的快速檢測(cè)方法。五、采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)本標(biāo)準(zhǔn)的編制、編寫(xiě)、調(diào)研完全依照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)尺度，并遵照GB/T 要求進(jìn)行撰寫(xiě)。五、與現(xiàn)行法律法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系本標(biāo)準(zhǔn)完全符合現(xiàn)行法律法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)，不存在任何與現(xiàn)行法律法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)相違背之處。六、重大分歧意見(jiàn)的處理經(jīng)過(guò)和依據(jù)亞麻籽中0c亞麻酸含量的測(cè)定液相色譜法目前在我區(qū)是一項(xiàng)空白，因此在編制“標(biāo)準(zhǔn)”中無(wú)重大的分歧意見(jiàn)。七、標(biāo)準(zhǔn)作為強(qiáng)制性或推薦性標(biāo)準(zhǔn)的意見(jiàn)本標(biāo)準(zhǔn)作為推薦性地方規(guī)范，發(fā)布實(shí)施后，對(duì)亞麻籽中-亞麻酸含量的準(zhǔn)確測(cè)