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文檔簡介
1、考點考點 一一微生物的實驗室培養(yǎng)微生物的實驗室培養(yǎng)考點考點 二二微生物的篩選與計數(shù)微生物的篩選與計數(shù)二級訓練二級訓練達標沖關達標沖關編號編號成分成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量含量0.4 g4.0 g0.5 g0.5 g100 mL培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點用途用途液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基不加凝固劑不加凝固劑工業(yè)生產工業(yè)生產半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基加凝固劑加凝固劑(如瓊脂如瓊脂)觀察微生物的運動、分觀察微生物的運動、分類鑒定類鑒定固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基加凝固劑加凝固劑(如瓊脂如瓊脂)微生物分離、鑒定微生物分離、鑒定,活菌活菌計數(shù)計數(shù),菌種保藏菌種保藏種類種類制備方法
2、制備方法原理原理用途用途舉例舉例選擇選擇培養(yǎng)培養(yǎng)基基培養(yǎng)基中培養(yǎng)基中加入某些加入某些化學物質化學物質依據(jù)某些微依據(jù)某些微生物對某些生物對某些物質的特殊物質的特殊需求或抗性需求或抗性而設計而設計從眾多微生從眾多微生物中分離所物中分離所需的微生物需的微生物加入青霉素加入青霉素分離得到酵分離得到酵母菌和霉菌母菌和霉菌鑒別鑒別培養(yǎng)培養(yǎng)基基培養(yǎng)基中培養(yǎng)基中加入某種加入某種指示劑或指示劑或化學藥品化學藥品產生特定的產生特定的顏色或其他顏色或其他變化變化鑒別不同種鑒別不同種類的微生物類的微生物用伊紅美用伊紅美藍培養(yǎng)基鑒藍培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌別大腸桿菌消毒和滅菌的比較消毒和滅菌的比較項目項目消毒消毒滅菌滅菌條件
3、條件較為溫和的物理或化學較為溫和的物理或化學方法方法強烈的理化因素強烈的理化因素結果結果僅殺死物體表面或內部僅殺死物體表面或內部的部分微生物的部分微生物(不包括芽不包括芽孢和孢子孢和孢子)殺死物體內外所有的微殺死物體內外所有的微生物生物,包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子常用常用方法方法煮沸消煮沸消毒法毒法巴氏巴氏消毒消毒法法化學藥化學藥劑消毒劑消毒法法灼燒灼燒滅菌滅菌法法干熱干熱滅菌滅菌法法高壓蒸高壓蒸汽滅菌汽滅菌法法項目項目消毒消毒滅菌滅菌使用使用條件條件100 C煮沸煮沸56min80 C煮煮15 min或在或在7075 C煮煮30 min70%乙乙醇、氯醇、氯氣等氣等酒精酒精燈火燈火焰的焰的
4、外焰外焰干熱滅干熱滅菌菌箱箱,160170C,維持維持12 h高壓蒸汽高壓蒸汽滅菌鍋滅菌鍋,恒溫恒溫121 C,維持維持1530 min應用應用范圍范圍日常用日常用品品不耐高溫不耐高溫的液體的液體用酒精用酒精擦拭雙擦拭雙手手,用用氯氣消氯氣消毒水源毒水源接種接種工具工具玻璃器玻璃器皿、金皿、金屬工具屬工具培養(yǎng)基及培養(yǎng)基及容器的滅容器的滅菌菌項目項目平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法關鍵關鍵操作操作接種環(huán)在固體平板培養(yǎng)基接種環(huán)在固體平板培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線表面連續(xù)劃線一系列的梯度稀釋一系列的梯度稀釋涂布平板法操作涂布平板法操作注意注意事項事項每次劃線前后均需灼燒接每次劃線前后均需灼燒
5、接種環(huán)種環(huán)稀釋度要足夠高稀釋度要足夠高,為確保實驗為確保實驗成功可以增加稀釋度的范圍成功可以增加稀釋度的范圍菌體菌體獲取獲取在具有顯著的菌落特征的在具有顯著的菌落特征的區(qū)域菌落中挑取菌體區(qū)域菌落中挑取菌體從適宜的稀釋度的平板上的菌從適宜的稀釋度的平板上的菌落中挑取菌體落中挑取菌體適用適用范圍范圍適用于好氧菌適用于好氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌優(yōu)點優(yōu)點可以根據(jù)菌落的特點獲得可以根據(jù)菌落的特點獲得某種微生物的單細胞菌落某種微生物的單細胞菌落既可以獲得單細胞菌落既可以獲得單細胞菌落,又能又能對微生物計數(shù)對微生物計數(shù)缺點缺點不能對微生物計數(shù)不能對微生物計數(shù)操作復雜操作復雜,需要
6、涂布多個平板需要涂布多個平板第一次操作第一次操作每次劃線之前每次劃線之前劃線結束劃線結束目目的的殺死接種環(huán)殺死接種環(huán)上原有的微上原有的微生物生物殺死上次劃線后接種環(huán)上殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種殘留的菌種,使下次劃線使下次劃線的菌種直接來源于上次劃的菌種直接來源于上次劃線的末端線的末端,使每次劃線菌使每次劃線菌種數(shù)目減少種數(shù)目減少殺死接種環(huán)上殺死接種環(huán)上殘存的菌種殘存的菌種,避免微生物污避免微生物污染環(huán)境和感染染環(huán)境和感染操作者操作者 灼燒接種環(huán)灼燒接種環(huán),待其冷卻后才能伸入菌液待其冷卻后才能伸入菌液,以免以免 溫度太高殺死菌種。溫度太高殺死菌種。 第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始開始,能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少,最最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落。終得到由單個細菌繁殖而來的菌落。 劃線時最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。劃線時最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。 劃線用力大小要適當劃線用力大小要適當,防止用力過大將
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