乳腺癌與抑癌基因甲基化及MicroRNA的研究進(jìn)展

1、#綜 述#乳腺癌與抑癌基因甲基化及M icro RNA 的研究進(jìn)展林 帥,吳誠義收稿日期:2009-10-10作者單位:重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院內(nèi)分泌外科,重慶 400016作者簡介:林 帥,男,碩士研究生。E 2m ai:l li nshuai 3410yahoo .com .cn吳誠義,男,主任醫(yī)師,教授,博士生導(dǎo)師,通訊作者。E 2m ai:l NF MWK1192hos p ital 2cqm u .co m摘要:抑癌基因DN A 的異常甲基化在腫瘤的發(fā)生與演進(jìn)過程中起著重要作用,最近研究發(fā)現(xiàn)M icro RN A 表達(dá)與多種癌癥相關(guān),并且受表觀遺傳學(xué)改變的控制。該文對乳腺癌抑癌基因甲

2、基化及M i cro RNA 和乳腺癌的發(fā)生機制及治療的研究進(jìn)展作一綜述。關(guān)鍵詞:乳腺腫瘤;抑癌基因;DN A 甲基化;M icro RNA 中圖分類號:R 737.9 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:1001-7399(201001-0089-05乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展包括基因的遺傳性改變和基因的表觀遺傳的改變。表觀遺傳學(xué)是不涉及D NA 序列的變化、可遺傳的基因表達(dá)調(diào)控方式。D NA 甲基化(m ethylatio n是目前研究得最清楚、也是最重要的表觀遺傳修飾形式。目前深入研究發(fā)現(xiàn)D NA 甲基化導(dǎo)致M i cro RNA 失活與大多數(shù)癌癥有關(guān),在正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞以及腫瘤細(xì)胞侵襲性不斷增強的

3、過程中表觀遺傳學(xué)的改變,特別是抑癌基因DNA 的異常甲基化和M icro RNA 在腫瘤的發(fā)生與演進(jìn)過程起著重要作用。本文就乳腺癌抑癌基因甲基化及M icro RNA 和乳腺癌的發(fā)生機制及治療的研究現(xiàn)狀作一綜述。1 DNA 甲基化D NA 甲基化是通過將S 2腺苷甲硫氨酸作為甲基供體,并在DN A 甲基轉(zhuǎn)移酶(DN A m ethyltransferase ,DN MT的催化下,Cp G 二核苷酸中的胞嘧啶環(huán)上5.位置的氫被活性甲基所取代,從而轉(zhuǎn)變成52甲基胞嘧啶(52mC。D NA 甲基化具有多方面的生理意義,正常的甲基化對于維持機體的功能是必需的,如基因印記、X 染色體失活、細(xì)胞分化、胚胎

4、發(fā)育等1。而異常的D NA 甲基化則會引發(fā)疾病甚至腫瘤的發(fā)生,異常CpG 的重新甲基化通常被認(rèn)為是人類癌癥發(fā)生的一個早期特征2。常見的甲基化可分為高甲基化和低甲基化,前者指正常組織中不發(fā)生甲基化的位點被甲基化,后者是指在正常組織中發(fā)生甲基化的位點去甲基化。低甲基化通常發(fā)生在中度和高度重復(fù)序列,包括異染色質(zhì)DNA 重復(fù)序列、散布的逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子(rctrotransposons和內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒元件。低甲基化可導(dǎo)致染色質(zhì)的不穩(wěn)定性,特別是重復(fù)序列染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的不穩(wěn)定性,如微衛(wèi)星DNA 、長散布元件(I INES、A l u 順序等。這種廣泛的低甲基化會造成基因組不穩(wěn)定與多種腫瘤如尿道上皮細(xì)胞癌3,宮

5、頸癌等的發(fā)生有關(guān)。另外低甲基化也可發(fā)生在某些單一序列,如一些癌基因的啟動區(qū)等。啟動子區(qū)低甲基化可提高基因的表達(dá)而激活癌基因,在乳腺癌中可呈現(xiàn)廣泛低甲基化,并且隨著惡性程度的增加而漸進(jìn)性增加4。低甲基化可能通過活化原癌基因或通過增強染色體的不穩(wěn)定性而促進(jìn)癌癥發(fā)生。對于整體基因組的低甲基化,一些跨越管家基因和腫瘤抑制基因啟動子的CpG 島區(qū)卻是高甲基化,最受關(guān)注的就是啟動子區(qū)的Cp G 島的高甲基化導(dǎo)致的抑癌基因轉(zhuǎn)錄沉默,這也可能是癌性增生的最初表現(xiàn)。基因啟動子區(qū)的Cp G 島在正常狀態(tài)下一般是非甲基化的,當(dāng)其發(fā)生甲基化時常導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄沉寂,使重要基因如抑癌基因、DN A 修復(fù)基因等喪失功能,從而

6、導(dǎo)致正常細(xì)胞的生長分化調(diào)控失常以及DN A 損傷不能被及時修復(fù),這與多種腫瘤形成密切相關(guān)。Issa 等5證實了Cp G 島甲基化表型(Cp G is 2land m e t hyl a t or phenotype ,C I M P的存在,其特征是同時存在的多種基因具有腫瘤特異性的CpG 島甲基化。在細(xì)胞遺傳過程中子代細(xì)胞擁有與親代細(xì)胞相同的甲基狀態(tài),如果這種模式在胎兒發(fā)育時期發(fā)生紊亂會增加兒童發(fā)生瘤的易感性,在人體衰老的過程中發(fā)生改變則會增加成人發(fā)生瘤的危險性。2 抑癌基因甲基化與乳腺癌啟動子區(qū)的CpG 島的高甲基化導(dǎo)致的抑癌基因轉(zhuǎn)錄沉默,這也可能是癌性增生的最初表現(xiàn)。最早報告啟動子區(qū)的Cp

7、 G 島的高甲基化是視網(wǎng)膜成神經(jīng)細(xì)胞瘤抑癌基因(R b,后來發(fā)現(xiàn)的CpG 島的高甲基化導(dǎo)致的抑癌基因BRCA1(乳腺癌的易感基因轉(zhuǎn)錄沉默6,7。啟動子區(qū)的Cp G 島的高甲基化影響基因包括在細(xì)胞周期、DNA 的修復(fù)、致癌物的代謝作用、細(xì)胞間的的相互作用、凋亡和血管的發(fā)生,所有這些都包括在腫瘤的發(fā)展過程中8。超甲基化發(fā)生在腫瘤發(fā)展的不同階段和不同的細(xì)胞網(wǎng)絡(luò),它用基因損害來達(dá)到干擾作用,這種干擾通過超甲基化滅活DNA 修復(fù)基因(BRCA1啟動子區(qū)的Cp G 島實現(xiàn)。如此看來DNA 修復(fù)基因的沉默阻礙了修復(fù)基因的錯誤,因此打開了細(xì)胞腫瘤轉(zhuǎn)移的一條道路。最近發(fā)明的表觀遺傳學(xué)技術(shù)已經(jīng)揭示了CpG 島的高

8、甲基化圖譜,這就意味著確定腫瘤啟動子區(qū)的100400個Cp G 島的高甲基化的出現(xiàn)8。抑癌基因一方面通過突變,缺失并與癌基因協(xié)同作用導(dǎo)致乳腺癌形成;另一方面在不改變DNA核苷酸序列,通過堿基修飾導(dǎo)致基因表達(dá)的改變,并可通過細(xì)胞分裂、增殖而遺傳,導(dǎo)致乳腺癌形成的分子基礎(chǔ)。為研究乳腺癌形成的分子基礎(chǔ)拓展了另一條道路。甲基化的D NA是突變熱點及DNA的異常甲基化可使抑癌基因(TSG的表達(dá)失活已被廣泛接受。抑癌基因啟動子區(qū)甲基化可導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄沉默而失活,故檢測腫瘤及其前驅(qū)病變中的抑癌基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)可以探討抑癌基因在腫瘤發(fā)生中的作用。研究抑癌基因甲基化狀況,有助于闡明乳腺癌發(fā)生發(fā)展可能機制。下面介

9、紹幾種主要抑癌基因甲基化與乳腺癌的關(guān)系。2.1p161976年初發(fā)現(xiàn),定位于9p21,全長815kb有3個外顯子和2個內(nèi)含子。p16是人類腫瘤中最常見的抑癌基因,是細(xì)胞周期蛋白激酶抑制劑,它通過結(jié)合并抑制細(xì)胞周期依賴的蛋白激酶CDK4和CD K6,使Rb磷酸化程度降低來調(diào)控細(xì)胞通過G1期。在人乳腺上皮細(xì)胞(HM EC中,p16基因Cp G島的逐步甲基化使其逐漸失活,從而促使HMEC突破增生抑制期(M,因此檢測p16甲基化沉默有助于判斷乳腺腫瘤的發(fā)生。關(guān)于p16基因失活和甲基化的關(guān)系,在腫瘤細(xì)胞系中研究很多。W ong等9用甲基化特異聚合酶鏈反應(yīng)(MPCR研究了p16基因Cp G島中47個Cp

10、G雙核苷酸的甲基化狀態(tài),發(fā)現(xiàn)p16基因CpG島中3個不同區(qū)域的CpG 雙核苷酸初始甲基化與p16基因轉(zhuǎn)錄抑制,從而使HMEC越過M期有關(guān),該現(xiàn)象支持p16基因啟動子區(qū)域甲基化使p16永久沉默這一假說。2.2BR CA1BRCA1是乳腺癌及卵巢癌特異性抑癌基因,定位于17q21,迄今為止,BRCA1在散發(fā)性乳腺癌中尚未發(fā)現(xiàn)體細(xì)胞突變,僅在極少量的散發(fā)性卵巢癌中發(fā)現(xiàn)突變。并且在很多情況下,散發(fā)性乳腺癌BRCA1基因序列完整,但mRNA水平卻下降。提示在散發(fā)性乳腺癌中BR C A1除基因突變和雜合性丟失(1oss of heterozygosity,LO H外尚有其他機制。研究發(fā)現(xiàn)DNA甲基化可能是

11、B R C A1在散發(fā)性乳腺癌中表達(dá)下降或缺失的一種機制。Estell er等10在84例無選擇性原位乳腺癌組織中檢出11例(13%BRCA1基因異常甲基化,且與髓樣癌、黏液腺癌組織分型相關(guān)。Sho wa 等11報道BRCA1基因啟動子甲基化與乳腺癌分級有關(guān), BRCA1基因啟動子甲基化使該基因失活,導(dǎo)致乳腺癌患者惡性程度高。此外,由于甲基化的胞嘧啶可自發(fā)的脫氨基而突變?yōu)樾叵汆奏?因此異常甲基化是家族性乳腺癌中BBCA1突變的重要機制。2.3142323R基因142323R抑癌基因(也叫ep i the lial m arker,HME1定位于1p35,它的主要功能是參與D NA損傷后修復(fù),使

12、細(xì)胞周期停滯于G2期,是負(fù)責(zé)G2細(xì)胞周期檢查點的基因家族成員為CDK抑制因子。隨著表觀遺傳學(xué)研究的深入,發(fā)現(xiàn)基因啟動區(qū)甲基化是142323R基因失活的主要機制之一。在原發(fā)性膀胱癌、結(jié)腸癌和乳腺癌中142323cr基因表達(dá)下調(diào),原因是該基因第一外顯子區(qū)高度甲基化,而不是雜合型缺失、基因突變等。142323R抑癌基因改變與乳腺癌的發(fā)生的關(guān)系極為密切。研究發(fā)現(xiàn)142323R在乳腺癌中有著較高的甲基化頻率12,13。U m bricht等14發(fā)現(xiàn)乳腺癌變過程中142323R基因啟動子甲基化頻率不同,25例浸潤性乳腺癌病例24例高甲基化。這些都表明在散發(fā)性乳腺癌中, 142323R基因啟動子甲基化改變是

13、轉(zhuǎn)錄下降乃至失活的重要原因。研究142323R甲基化與其轉(zhuǎn)錄的關(guān)系,有助于闡明散發(fā)性乳腺癌中抑癌基因失活的表觀遺傳機制。2.4R ASSF1A基因R as相莢區(qū)域家族1A(R as assoc i a2 tio n do m ain fa m ily1A,RASSF1A是2000年發(fā)現(xiàn)的一種新型候選抑癌基(tu m or suppressor gene。TS G。近年來的大量研究表明RASSF1A的失活在肺癌、乳腺癌、胃腸道腫瘤等多種實體瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用。由于3p2113區(qū)域等位基因缺失(all e li c loss的現(xiàn)象,提示這一區(qū)域可能含有抑癌基因,對多種腫瘤的發(fā)生都能起到抑

14、制作用。Damm ann 等15通過甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(m ethylatlo n spec ific PCR,MSP分析發(fā)現(xiàn)5種細(xì)胞株中RASSF I A基周均發(fā)生了啟動子區(qū)域Cp G島的異常甲基化,而突變分析則未發(fā)現(xiàn)RASSF1A基因的突變。應(yīng)用適當(dāng)濃度的甲基化抑制劑52氮雜22c2脫氧胞苷(52aza22c2deo xycyti dine,52AzaCdR處理上述細(xì)胞株,4天后可以觀察到RASSF I A的重新表達(dá),提示異常甲基化是乳腺癌中RASSF I A失活的重要機制。Burbee 等16的研究也取得了類似的結(jié)果和結(jié)論。他們發(fā)現(xiàn)RASSF1A在正常乳腺上皮細(xì)胞中100%表達(dá),而

15、在60% (15/25的HTB和HCC系列乳腺癌細(xì)胞株中則表達(dá)缺失?？梢姰惓＜谆瘜?dǎo)致的RASSF1A基因失活在乳腺癌的發(fā)生中起著重要作用。2.5TI M P3基因TI MP3基因位于人類染色體22q12112 1312上,編碼一種組織金屬蛋白酶抑制物3(ti ssue inh i bitors of m eta llo prote i nases23,TI M P3的蛋白質(zhì)。該蛋白在細(xì)胞外合成后被分泌到細(xì)胞內(nèi)基質(zhì)中,具有抑制組織中的基質(zhì)金屬蛋白酶(m atr i x m e tall oprote i nases,MM Ps的活性。MMP s是一種細(xì)胞外基質(zhì)降解酶,具有促進(jìn)腫瘤生長、浸潤和轉(zhuǎn)

16、移的作用。因此,腫瘤中或其周圍組織內(nèi)的MMP s和TI MP3失去平衡(MM Ps增加或T I M P3減少將可能導(dǎo)致和促進(jìn)腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移。在乳腺癌中,T I M P23的表達(dá)缺失與其啟動子區(qū)域的甲基化程度增高有關(guān),而正常乳腺組織卻未發(fā)現(xiàn)TI MP2 3基因甲基化。楊舉倫等17的研究結(jié)果顯示,在MCF10模型的增生細(xì)胞系、癌前細(xì)胞系、導(dǎo)管內(nèi)癌細(xì)胞系、浸潤癌細(xì)胞系和轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞系中,T I M P3基因啟動子區(qū)均呈高度甲基化狀態(tài),提示TI M P3基因失活不僅在乳腺癌的浸潤中起作用,而且在乳腺癌的發(fā)生中起作用,可能是早期診斷乳腺癌和判斷乳腺癌預(yù)后的潛在分子生物學(xué)標(biāo)記。2.6APC基因結(jié)腸腺瘤性息肉

17、病基因(adeno m atous pol2 yposisco,l iAPC是1986年發(fā)現(xiàn)的抑癌基因位于人類染色體5q21上,長約900kb,開放讀碼區(qū)8535bp,由15個外顯子組成,編碼由2843個氨基酸組成的相對分子質(zhì)量為3105的蛋白質(zhì)。研究發(fā)現(xiàn),APC基因啟動子1A高度甲基化及其所致的轉(zhuǎn)錄沉默不僅存在于結(jié)直腸腺瘤、散發(fā)性結(jié)直腸腺癌及癌旁組織中,也存在于遺傳性乳腺癌、散發(fā)性乳腺癌及部分乳腺癌細(xì)胞系,提示APC基因啟動子區(qū)甲基化不僅與結(jié)直腸癌的發(fā)生有關(guān),還可能與乳腺癌的發(fā)生有關(guān)。V ir m ani 等18在44%(34/77的乳腺癌組織和乳腺癌細(xì)胞系中檢測到APC基因1A啟動子異常甲

18、基化,提示這種異常甲基化可能與乳腺癌的發(fā)生有關(guān)。APC基因是與腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān)的抑癌基因,其變異可導(dǎo)致B2caten i n在胞清內(nèi)聚集并轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核內(nèi)啟動細(xì)胞增殖相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄,引起Wn t信號通路異常,導(dǎo)致腫瘤發(fā)生發(fā)展。2.7RUNX3基因RUNX3基因最初被命名為急性髓性白細(xì)胞2基因,后被稱作為多瘤病毒強化因子結(jié)合蛋白2基因,核心結(jié)合因子A3基因位于人1號染色體斷臂三區(qū)6帶(1p3611。RUNX3蛋白負(fù)責(zé)T GF2B信號通路下游的一個轉(zhuǎn)錄因子。當(dāng)RUNX基因表達(dá)受抑制時,影響TGF2B信號通路的轉(zhuǎn)導(dǎo),從而誘導(dǎo)腫瘤的發(fā)生,目前研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多腫瘤中存在RUNX3失活,其失活的機制主要為基

19、因啟動子區(qū)域Cp G島的甲基化。啟動子所含的CpG島的5c2m c會阻礙轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合體與D NA結(jié)合,導(dǎo)致基因失活。杜金榮等19對40例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌和乳腺增生病組織的檢測中發(fā)現(xiàn)40例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中RUNX3基因啟動子甲基化頻率是4715%,15例乳腺增生病組織中均未發(fā)現(xiàn)甲基化,表明RUNX3基因啟動子甲基化參與了乳腺癌的發(fā)生。3M icro RNA表觀遺傳學(xué)和m i RNAs在將來是兩個很重要的研究方向,它們之間關(guān)系才剛剛被了解。M icro RNA又稱m i R N A,微RNA,即為長度為22n t左右的5c端帶磷酸基團(tuán)、3c端帶羥基的非蛋白編碼的調(diào)控小RNA家族。它是含有莖環(huán)

20、結(jié)構(gòu)的m i R NA前體,經(jīng)過D i cer加工之后的一類非編碼的小RNA 分子(21223個核苷酸。M i cro RNA在細(xì)胞的生長和發(fā)育過程的調(diào)解過程中起著多種作用,目前只了解到一小部分M i RNA,最近的研究發(fā)現(xiàn)m i R N A與腫瘤的形成,癌癥發(fā)生密切相關(guān)。m i R NA一方面有癌基因作用,比如敲掉致癌m i R2 NA m i R221能夠觸發(fā)培養(yǎng)的惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡20。其他的致癌的m i R NAs也存在,比如乳腺癌中M i R2155較正常組織高表達(dá)21。這些致癌m i R NAs能夠作為治療癌癥的重要靶點,敲掉這些m i R NAs能夠阻止癌癥的生長;另一方面有抑癌

21、基因的作用,研究表明下調(diào)m i R NA亞群揭示了m i R NA 的腫瘤抑癌功能22,23,比如靶向m i R215/m i R216可使致癌基因bc l22下調(diào),達(dá)到抑制腫瘤的目的24。M icro RNAs的l e t-7家族是首先證實調(diào)解原癌基因的表達(dá),Johnson等25發(fā)現(xiàn)肺癌病人的l e t27表達(dá)顯著降低導(dǎo)致R as蛋白的高表達(dá),這個實驗證實l e t27M i R NA能夠抑制R as在人類腫瘤細(xì)胞系中的表達(dá)。在肺癌中丟失或減少let27會導(dǎo)致R as的過度表達(dá),因而促進(jìn)細(xì)胞的生長和腫瘤的發(fā)生,著者因此認(rèn)為l et27扮演著抑癌基因角色。某些m i R NA的表達(dá)狀態(tài)受到癌細(xì)

22、胞中表觀遺傳學(xué)改變的控制,研究發(fā)現(xiàn)m i R NA也有CpG島結(jié)構(gòu),從而能被DNA 甲基化調(diào)解,改變m i R N A的表達(dá)。例如研究發(fā)現(xiàn)m i R N A5c 端DNA高甲基化能解釋在腫瘤中下調(diào)m i RNA的發(fā)生機制26,27。一些新的研究也顯示m i RNA的表達(dá)會受到甲基化的調(diào)控,例如在肺癌中,m i R921、m i R2124a3、m i R2148、m i R2 152和m i R2663都發(fā)生了不同程度的甲基化異常(34% 86%。研究人員通過分析發(fā)現(xiàn)這些m i R N A的高甲基化與一些已知的抑癌基因的甲基化密切相關(guān),同時利用甲基化抑制劑的作用降低某些m i R N A的甲基

23、化水平,從而可以達(dá)到使該m i RNA表達(dá)上調(diào)的目的28;在其他一些腫瘤的細(xì)胞中,人們同樣觀察到了m i RNA表達(dá)明顯地受到其啟動子區(qū)甲基化的調(diào)控29。毫無疑問除了缺失和突變之外,甲基化狀態(tài)同樣是m i R N A表達(dá)異常的重要原因之一,這也就意味著m i RN A啟動子區(qū)的甲基化對于腫瘤的發(fā)生同樣具有重要的意義。4抑癌基因甲基化與乳腺癌的治療與其他治療法不同的是表觀遺傳治療不是一種方法,而是包括任何能修正導(dǎo)致疾病的表觀遺傳異常的治療手段,狹義的表觀遺傳治療目前僅限于DNA甲基化和組蛋白去乙?；乃幬镏委煛１碛^遺傳機制造成的異?；虮磉_(dá)與由于基因突變造成的異常最明顯的不同就是前者是可逆的而后

24、者完全不可逆的。故有可能用脫甲基化的因子重新表達(dá)腫瘤細(xì)胞中的DNA甲基化基因,恢復(fù)它們的功能。由于Cp G 島高甲基化導(dǎo)致抑癌基因轉(zhuǎn)錄失活是一個可以逆轉(zhuǎn)的表觀遺傳學(xué)基因修飾過程,該逆轉(zhuǎn)(Cp G島去甲基化可直接恢復(fù)抑癌基因功能。因此通過逆轉(zhuǎn)啟動子的甲基化,可使沉默的基因重新表達(dá),這成為一條腫瘤治療新靶點有希望的治療途徑30。目前有許多藥物被證明具有改變D NA甲基化模式,并且部分藥物正在進(jìn)行臨床實驗。通過表觀修飾的治療,患者可能對化療、干擾素、免疫治療更具有敏感性。以DNA甲基化作用為治療靶點,低劑量的DNA脫甲基化藥物已經(jīng)在臨床上有效的治療一些腫瘤,如52氮雜胞嘧啶核苷(azac iti2

25、di ne,52Aza2CR和它的脫氧類似物52氮雜脫氧胞嘧啶核苷(52aza22c2deo xycy2ti dine,52Aza2Cd R已經(jīng)證實治療骨髓增生異常綜合征和白血病31,32。D NA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑:52氮雜胞嘧啶核苷(azaciti d i ne,52A za2CR和它的脫氧類似物5-氮雜脫氧胞嘧啶核苷(52aza22c2deoxycy2tidi ne,52Aza2Cd R是有效的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制33,它們通過DN A復(fù)制過程中取代胞嘧啶或與DN MT形成共價鍵抑制DN MT的兩種活性途徑來抑制DNA甲基化。但是這兩種藥物在水溶液中不穩(wěn)定且有毒性,因此在臨床應(yīng)用中存在局限

26、性。此外已有針對甲基化基因特異性治療的研究,比如對于某些低甲基化,高表達(dá)的腫瘤相關(guān)基因(原癌基因,可以靶向誘導(dǎo)其啟動子甲基化,使其基因沉默;另外si RNA的基因治療,RNA干擾已成為1種特異地抑制靶基因表達(dá)的有效工具。si RNA基因治療成功的關(guān)鍵,除了建立具有高效感染效率和高度靶向的載體以外,靶點的選擇也是重要因素,治療的靶點主要包括癌基因、抗癌基因、細(xì)胞因子、協(xié)同刺激分子以及腫瘤藥物相關(guān)基因等34。目前,RNA i應(yīng)用于腫瘤基因治療的主要針對腫瘤相關(guān)基因的啟動子特異序列(如Cp G 島設(shè)計的si RNA,可以高效地抑制靶基因的表達(dá),降低靶蛋白的水平,干擾腫瘤細(xì)胞的正常信號傳導(dǎo)過程,從而對

27、腫瘤進(jìn)行基因治療。通過D NA脫甲基化治療意味著新的表觀遺傳學(xué)治療策略值得更遠(yuǎn)的探索。5展望在人乳腺癌組織中,甲基化模式的異常已被觀察到,包括完全甲基化、D NA甲基化轉(zhuǎn)移酶活性增強、Cp G島局部DNA甲基化,其中最重要的是腫瘤組織中的腫瘤抑制基因被cpG島甲基化阻遏。m i RNAs在癌癥形成過程中的作用也逐漸被意識到,這將使m i R NA可能成為疾病診斷的新的生物學(xué)標(biāo)記,使得這一分子成為藥靶,或是模擬這一分子進(jìn)行新藥研發(fā),可能會給人類疾病的治療提供一種新的手段。研究D NA甲基化和m i R NA將更深入的闡明乳腺癌發(fā)生的機制,并為乳腺癌的治療提供新的靶點。參考文獻(xiàn):1Robertso

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32、es t hat undergo cl ona l expansion i n Bar2rett c s m et ap lasti c ep i theli umJ.Cancer Res,2001,61(22:8284-9.10Es t ell erM,Corn P G,Bayli n S B,et al.A gen e hyper m et hylati onp rofile of hum an can cerJ.Can cer Res,2001,61(8:3225-9. 11Sho wa Y,Oya m a T,Naka ji m a T.B RC A1expression stat u

33、 s i n rel a2tion to DNA m et hy l ation of B RCA1pro m oter reg i on i n sporad i cb reast can cerJ.J pn J Can cer Res,2000,91(5:519-26.12Yang H,W en Y Y,Zhao R,et al.DNA da m age2i nduced protei n142323s i g m a i nh i b it s protei n k i nase B/Ak t acti vati on and supp res2 ses Akt2acti vated c

34、ancerJ.Can cer Res,2006,66(6:3097-105.13H enri que R,Jer n i m o C,H oque M O,et a l.Frequen t142323sig m apromoterm ethyl ati on i n ben i gn and m ali gn ant p ros t ate les i on sJ.DNA Cell Bi o,l2005,24(4:264-9.14Umb ri ch t C B,Evron E,Gab ri els on E,et a l.H yper m ethylati on of142323s i g m

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36、tage of hum an b reast cancersJ.Cancer Res,2001,6l(7:3105-9.16BurbeeD G,Forgacs E,Zochb auer2Mu ller S,et al.Ep i genetic i n ac2ti vati on of RASSF I A i n l ung and breast can cers and m ali gnant phenot ype suppressi onJ.J N atlCancer Inst,2001,93(9:691 -9.17楊舉倫,David K li nkeb i e,l M i chael J

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