二味康口服液對小鼠Lewis肺癌的抗癌作用

1、    二味康口服液對小鼠Lewis肺癌的抗癌作用        摘要目的:探討二味康口服液的抗癌作用。方法: 用Lewis肺癌小鼠模型，觀察二味康抗癌作用。結(jié)果:二味康口服液預防和治 療給藥均能延長Lewis肺癌小鼠平均生存時間；對小鼠Lewis肺癌瘤重增長及自發(fā)肺轉(zhuǎn)移有明顯抑制作用。結(jié)論:二味康口服液有明顯的抗癌作用，與環(huán)磷酰胺合用作用 可見增強。關(guān)鍵詞二味康口服液，抗癌，Lewis肺癌 Antitumor activity of Er Wei Kang oral sol

2、ution on mice bearing lewis lung cancerMao Baoxia,Yin Yinjia,Yu Xiangcai,et al(Tongji Hospital Tongji Medical University Wuhan 430030)ABSTRACTOBJECTIVE:To study the antitumor activity of Er Wei Kang oral solution(EWK).METHODS:Antitumor activity of EWK on mice bearing lewis lung cancer(LLC) was obser

3、ved.RESULTS:EWK could prolong the survival time of the mice bearing LLC,inhibit the growth of tumor and spontaneous metastasis of Lewis Lung cancer.CONCLUSIONS:EWK has a positve antitumor activity in mice bearing LLC.The activity was increased when ( KEY WORDSEr Wei Kang koufuye,antitumor,lewis lung

4、 cancer二味康口服液為復方中藥制劑，處方源自我院刺五加黃芪片。臨床應用表明，對多種體弱易病患者，尤其腫瘤病人收到明顯的扶正祛邪作用。為了探討其確切的藥理作用及其機理，進行了一系列藥效學及藥理學研究，本文報告二味康口服液對荷瘤小鼠抗癌作用的研究結(jié)果。1實驗材料1.1藥物與試劑二味康口服液由同濟醫(yī)科大學同濟醫(yī)院藥劑科研究室制備。生藥2.2 g.ml-1，批號：930426，臨用前用生理鹽水稀釋，口服給藥。環(huán)磷酰胺(Cy)，上海第十二制藥廠，批號：930505。1.2動物與瘤細胞C57BL/6J小鼠，兼用，68周齡，體重1 8±3 g，由上海動物中心和安徽醫(yī)科大學實驗動物中心提供；L

5、ewis肺癌瘤株，從上海藥物所引進，安徽醫(yī)科大學臨床藥理研究所實驗室用同系C57BL/6J小鼠皮下接種傳代；L929細胞株(小鼠纖維瘤細胞)，購于山東醫(yī)科院免疫室，在含有10%小牛血清的RPMI16 40小牛血清中傳代培養(yǎng)。2方法和結(jié)果2.1荷瘤小鼠模型的制備1無菌取出Lewis肺癌瘤塊，用 0.25%胰蛋白酶-0.04%EDTA消化30 min，磨碎經(jīng)5號尼龍篩網(wǎng)過濾，離心(1 500 r.m in-1，5 min)，洗滌2次。計數(shù)并配成濃度為1×107活細胞.min-1，每 鼠右足跖皮下注射0.1 ml，48 h后灌胃(ig)給予受試藥物或等量溶媒，觀察藥物對荷瘤小鼠治療作用及免

6、疫功能的影響。2.2二味康口服液治療給藥對荷瘤小鼠生存時間的影響小鼠接種LLC瘤 細胞2 d后，按表1隨機分組，每組n=10，灌胃給藥，每日一次，連續(xù)15 d，觀察時間為 45 d。實驗重復3次，結(jié)果見表1。結(jié)果表明，二味康口服液(13.75，27.50 g.kg -1)與陽性對照藥環(huán)磷酰胺(0.02 g.kg-1)治療給藥皆可明顯提高荷瘤小鼠生存時間和生命延長率。表 1二味康口服液治療對荷瘤小鼠生存時間的影響組別劑量g.kg-1.d-1生存時間/dn=10×3生命延長率%腫瘤對照組22.9±4.8二味康組6.8824.7±4.6*17.913.7530.1

7、77;6.0*331.427.5035.3±6.5*354.1環(huán)磷酰胺組0.0234.6±6.9*351.1注：*1 為P0.05，*2 為P0.05，*3 為P 0.01與腫瘤對照組比較。2.3二味康口服液預防給藥對荷瘤小鼠生存時間的影響按表2隨機分組，每組n=10，在灌胃給藥7 d后，各組小鼠接種LLC瘤細胞。并繼續(xù)每天給藥(共15 d)， 觀察時間為45 d。實驗重復3次，結(jié)果見表2。結(jié)果表明，二味康口服液預防給藥亦可明顯提高荷瘤小鼠生存時間和生命延長率。生命延長率=(給藥組平均生存天數(shù)-對照組平均生存天數(shù))/對照組平均生存天數(shù)×100%表 2二味康口服液預

8、防給藥對荷瘤小鼠生存時間的影響組別劑量g.kg-1.d-1生存時間/dn=10×3生命延長率%腫瘤對照組21.7±4.6二味康組6.8823.0±4.7*16.013.7525.3±5.4*316.627.5031.1±6.0*343.3環(huán)磷酰胺組0.0229.2±6.3*334.6注：*1 為P0.05，*3 為P0.01與腫瘤對照組比較 。2.4二味康口服液治療對荷瘤小鼠瘤重及自發(fā)肺轉(zhuǎn)移的影響小鼠接種LLC瘤細胞后2 d，按表3隨機分組，每組n=10，灌胃給藥，分別于給藥后7 d和15 d處死動物，取出瘤塊稱重；剖胸取肺，經(jīng)氣管注

9、入Bowin's液，再放入Bwin's液固定，48 h后在解剖顯微鏡下觀察肺表面轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)目。實驗重復3次，結(jié)果見表3，4，5。結(jié)果表明，二味康口服液治療給藥7 d及給藥(13.75，27.50 g.kg-1)15 d時對荷瘤小鼠瘤重有明顯抑制作用,其療效低于環(huán)磷酰胺對照組(P0.01)；給藥15 d后，二味康口服液(13.75，27.50 g.kg-1)治療使荷瘤小鼠肺表面轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)目明顯減少，且二味康(27.50 g.kg-1)組抑制肺轉(zhuǎn)移作用明顯比環(huán)磷酰胺組強(P0.01)。表 3二味康口服液治療7 d對荷瘤小鼠瘤重的影響組別劑量g.kg-1.d-1動物數(shù)始/末瘤重抑制率

10、%腫瘤對照組30/301.7±0.5二味康組6.8830/301.6±0.5*16.013.7530/301.4±0.5*112.727.5030/301.1±0.3*331.3環(huán)磷酰胺組0.0230/300.8±0.3*352.4注：*1 為P0.05，*3 為P0.01與腫瘤對照組比較。表 4二味康口服液治療15 d對荷瘤小鼠瘤重的影響組別劑量g.kg-1.d-1動物數(shù)始/末瘤重抑制率 %腫瘤對照組30/303.7±1.0二味康組6.8831/303.3±0.8*111.113.7530/302.4±0.5*1

11、35.127.5030/301.8±0.5*350.8環(huán)磷酰胺組0.0230/301.0±0.3*373.2注：*1 為P0.05，*3 為P0.01與腫瘤對照組比較。表 5二味康口服液治療15 d對小鼠LLC自發(fā)肺轉(zhuǎn)移的影響組別劑量g.kg-1.d-1n肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)抑制率%腫瘤對照組1022.9±6.4二味康組6.881019.0±5.9*117.013.751016.2±6.6*229.327.50109.6±5.1*358.1環(huán)磷酰胺組0.021015.2±6.7*333.7注：*1 為P0.05，*2 為P0.05，

12、*3 為P0.01與腫瘤對照組比較。2.5二味康口服液對荷瘤小鼠環(huán)磷酰胺治療的增效作用將小鼠接種LLC瘤細胞2 d后按表6隨機分組，每組n=10，進行實驗，灌胃給藥，連續(xù)15 d。觀察給藥后動物生存時間，觀察時間為45 d。結(jié)果表見6。結(jié)果表明，二味康口服液(13.75，27.50 g.kg-1)與環(huán)磷酰胺(0.02 g.kg-1)聯(lián)合應用，以及二味康(27.50 g.kg-1)與環(huán)磷酰胺(0.01 g.kg-1)聯(lián)合應用，均可明顯延長荷瘤小鼠生存時間和提高生命延長率，且均高于各藥單獨使用時的療效。結(jié)果提示，二味康口服液對荷瘤小鼠化療有增效作用的趨勢。表 6二味康口服液治療對荷瘤小鼠化療的增效

13、作用組別劑量g.kg-1.d-1生存時間/dn=10生命延長率%腫瘤對照組21.9±3.9二味康組13.7530.1±5.7*337.427.5033.9±6.0*354.7環(huán)磷酰胺組0.0233.1±6.6*351.4二味康+Cy組13.75+0.0236.3±7.0*365.6二味康+Cy組27.50+0.0238.1±7.0*374.0二味康+Cy組27.50+0.0135.5±6.9*362.1注：*3 為P0.01與腫瘤對照組比較。3討論3.1近年來藥理研究證實，黃芪和刺五加及其有效成分在癌癥患者體內(nèi)可促進TNF、

14、IL-的形成，IFN的誘生；對艾氏腹水癌、小鼠肉瘤S180、人白血病K562有很強的抑制作用26。本方組成側(cè)重于益氣固本，以黃芪補五臟之虛及一身之氣，刺五加助黃芪益氣健脾兼補益腎氣。二者相須配伍，起協(xié)同作用，使“后天”得以固護，“先天”得以充實，因而使正氣內(nèi)固，氣血旺盛，精氣充實，達到扶正固本，扶正祛邪的目的。3.2黃芪和刺五加的研究成果提示，二藥有益氣固本、扶正抑癌等方面的藥理學基礎(chǔ)。本實驗結(jié)果說明：二味康口服液對Lewis肺癌荷瘤小鼠預防及治療給藥(13.7527.50 g.kg-1.d-1)均可明顯延長荷瘤小鼠生存時間，顯著抑制瘤重增長(抑制率31.3%50.80%)和自發(fā)肺轉(zhuǎn)移。二味康口服液抑制肺轉(zhuǎn)移作用明顯比環(huán)磷酰胺強(P0.01)。二味康口服液與環(huán)磷酰胺聯(lián)合應用可進一步明顯延長荷瘤小鼠生存時間，提高生命延長率。作者單位：馬寶瑕尹銀嘉魏世超(同濟醫(yī)科大學附屬同濟醫(yī)院 武漢430030)李俊王斌(安徽醫(yī)科大學臨床藥理所)參考文獻1徐叔云.藥理實驗方法學.第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1991：14232趙克勝，丁麗軒，金伯泉等.黃芪多糖增強人外周血單個核細胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子的研究.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，19