皮膚性病學(xué)醫(yī)學(xué)論文范文 優(yōu)秀醫(yī)學(xué)論文

1、中性粒細(xì)胞淋球菌感染模型的建立來源：醫(yī)學(xué)論文發(fā)表作者：陳嶸，陳 蕾，張國學(xué)，樊翌明，吳志華 作者單位：(廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院皮膚科，廣東湛江524001)【摘要】 目的 研究誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)在中性粒細(xì)胞淋球菌感染模型中的表達(dá)。方法 分離正常人外周血中性粒細(xì)胞，在10%胎牛血清DMEM培養(yǎng)液上培養(yǎng)3 h，A組加入空白培養(yǎng)基，B組加入淋球菌菌液，隨后在0、3、8、12 h分別以實(shí)時定量熒光PCR測定iNOS mRNA表達(dá)，用鎘還原法檢測NO濃度。結(jié)果 B組中iNOS mRNA表達(dá)和NO水平均較A組升高(P0.01)，NO濃度在8 h達(dá)到高峰。結(jié)論 中性粒細(xì)胞淋球菌感染

2、模型可成功模擬該菌體內(nèi)微氧感染環(huán)境，可用于研究淋球菌致病機(jī)制?！娟P(guān)鍵詞】 淋球菌;中性粒細(xì)胞;一氧化氮Establishment of gonococcusinduced neutrophil infection modelCHEN Rongyi, ZHANG Guoxue, CHEN Lei, FAN Yiming, WU Zhihua (Department of Dermatology, Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, China)Abstract:Objective To inves

3、tigate the expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and nitric oxide (NO) in gonococcusinduced neutrophil infection model. Methods Peripheral blood neutrophils were islolated from health men, and then cultured in DMEM medium containing 10% fetal calf serum for 3 h. Blank medium or gonoco

4、ccal inocula was added into group A or group B. NO concentration and iNOS mRNA expression at 0, 3, 8 and 12 h were determined by cadmium reduction method and realtime quantitative fluorescent PCR, respectively.Results Compared with group A, iNOS mRNA expression and NO level increased obviously in gr

5、oup B (P0.01), and NO content peaked at 8 h.Conclusion The gonococcusinduced neutrophil infection model can simulate the microoxygen infection circumstance in vivo, and is suitable for studying the pathogenic mechanism of gonococcus.Key words: gonococcus; neutrophil; nitric oxide淋球菌為兼性厭氧的革蘭陰性雙球菌，可引起

6、生殖系統(tǒng)急性化膿性炎癥，膿性分泌物中存在大量中性粒細(xì)胞1。中性粒細(xì)胞是一種專職吞噬細(xì)胞，感染初期可在炎癥介質(zhì)的介導(dǎo)下聚集在病灶處，通過吞噬攝入致病菌2。中性粒細(xì)胞殺傷吞噬微生物的機(jī)制包括活性氧簇、抗菌蛋白、一氧化氮(NO)等3。盡管中性粒細(xì)胞在淋球菌感染初期可迅速聚集到病灶，但淋病的遷延不愈表明中性粒細(xì)胞引起的炎癥反應(yīng)不足以徹底清除淋球菌。中性粒細(xì)胞可殺滅大部分吞噬的細(xì)菌(如大腸桿菌)，但部分淋球菌可在中性粒細(xì)胞內(nèi)生存甚至繁殖45。淋球菌是如何實(shí)現(xiàn)免疫逃逸并得以在中性粒細(xì)胞內(nèi)生存的問題目前尚未完全闡明。本研究擬建立中性粒細(xì)胞淋球菌感染模型，觀察NO和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的表達(dá)，旨在將

7、其用于研究淋球菌致病機(jī)制。1 材料與方法1.1 淋球菌菌株淋球菌株ST2951用WGC淋球菌專用培養(yǎng)基培養(yǎng)(購自中國科學(xué)院武漢生物制品研究所)制備成OD600值為0.15的細(xì)菌懸液。1.2 外周血中性粒細(xì)胞的分離6名健康成年男性分別抽取2 mL肝素抗凝靜脈血，取抗凝血與Hank液混勻后小心加入到人中性粒細(xì)胞分離液中(天津?yàn)笊镏破房萍加邢薰?，LTS1087)，18、2000 r/min離心20 min，待離心管由上至下分4層;吸取第3層(中性粒細(xì)胞)加入到含Hank液15 mL的試管中，充分混勻，2000 r/min離心10 min，棄上清，沉淀反復(fù)洗滌2次，再用含10%胎牛血清DMEM培

8、養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞(1107/mL);充分混勻后滴入細(xì)胞培養(yǎng)板中，置5%CO2培養(yǎng)箱37培養(yǎng)3 h備用。取少量細(xì)胞液涂片，作臺盼藍(lán)拒染實(shí)驗(yàn)，鑒定其存活率。1.3 中性粒細(xì)胞淋球菌感染模型的建立取出培養(yǎng)板，A組每孔加入含10%胎牛血清DMEM 培養(yǎng)液150L，B組每孔滴入淋球菌懸液150L;加樣完畢后繼續(xù)孵育，按0、3、8、12 h時間點(diǎn)在培養(yǎng)孔中吸出培養(yǎng)液作相應(yīng)檢測，每組設(shè)3個復(fù)孔。1.4 實(shí)時熒光定量PCR檢測iNOS mRNA含量用Trizol溶液(美國GIBCO公司)提取中性粒細(xì)胞總RNA，經(jīng)紫外分光光度計檢測符合純度后逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，再進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR檢測。根據(jù)GeneBank序

9、列設(shè)計iNOS、actin引物，序列見表1。反應(yīng)條件：94預(yù)變性3 min，94變性5 s，60退火10 s，72 延伸20 s，共40個循環(huán)。應(yīng)用SYBR Green熒光染料(美國Biotium公司)技術(shù)行實(shí)時定量PCR反應(yīng)，獲取各組標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算機(jī)分析Ct值(每個反應(yīng)管內(nèi)熒光強(qiáng)度達(dá)到系統(tǒng)認(rèn)為有目的DNA合成時的循環(huán)數(shù)，以陰性對照作參考)。表1 引物序列1.5 NO濃度檢測收集細(xì)胞培養(yǎng)液-70保存，用鎘還原法測定亞硝酸鹽濃度。培養(yǎng)液以3000 r/min離心5 min，用NaOH和硫酸鋅作蛋白沉淀處理，3000 r/min離心5min，取上清液1.5 mL依次加入0.08 mmol/L

10、 甘氨酸NaOH緩沖液1.0 mL、活化鎘3.0 g，搖勻后放置90 min;取1 mL加入新試管，依次加入1% 磺胺0.5 mL、0.1% N1萘基乙二胺鹽酸0.5 mL，搖勻后靜置20 min，用721分光光度計測OD值(=546 nm，靈敏度=1，空白調(diào)0)，根據(jù)該值計算亞硝酸鹽濃度。1.6 統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)以(s)表示，采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析及q檢驗(yàn)、t和t檢驗(yàn)。2 結(jié)果2.1 中性粒細(xì)胞中iNOS mRNA含量實(shí)時熒光定量PCR顯示：淋球菌刺激后B組中性粒細(xì)胞中iNOS mRNA含量均升高，而A組變化不明顯(圖1，表2);同一時間點(diǎn)相比，B組的iNOS mRNA

11、表達(dá)顯著高于A組(F=51.87，P0.01)。2.2 細(xì)胞培養(yǎng)液中NO水平A組NO水平明顯低于B組(P表2 兩組NO與iNOS mRNA表達(dá)同一時間點(diǎn)兩組間比較，*P0.01;同組不同時間點(diǎn)間比較，#P0.01。0.05);B組不同時間點(diǎn)NO濃度差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=106.79,P0.01)，8 h時最高(表2)。2.3 iNOS mRNA與NO表達(dá)的關(guān)系Spearman相關(guān)分析表明，B組中性粒細(xì)胞iNOS mRNA表達(dá)與細(xì)胞培養(yǎng)液中NO水平呈高度正相關(guān)(r=0.87，P0.05)。治療組的副作用發(fā)生率為9.1%，明顯低于對照組的76.2%(2=19.88，P0.01)。結(jié)論 鹵米松乳膏是

12、治療兒童面頸部白癜風(fēng)的有效藥物，且副作用較少?！娟P(guān)鍵詞】 鹵米松乳膏 白癜風(fēng) 兒童白癜風(fēng)是一種原發(fā)性局限性或泛發(fā)性的皮膚色素脫失癥，發(fā)病率為0.5%1%。白癜風(fēng)好發(fā)于顏面、四肢等暴露部位, 容易引起人們注意，患者常遭受非議甚或受到歧視, 造成極大的精神痛苦1。兒童也有發(fā)生，易造成心理損傷，影響人際交往。目前治療白癜風(fēng)手段多樣，但療效不盡人意，尤其是兒童白癜風(fēng)的治療更為困難。我科用0.05%鹵米松乳膏治療兒童面頸部白癜風(fēng)22例，取得良好療效，現(xiàn)報道如下。1 資料和方法1.1 病例與分組43例面頸部白癜風(fēng)患兒均為我院2006年6月至2008年6月間門診就診確診的患者，將患兒隨機(jī)分治療組和對照組。治

13、療組22例，其中男15例，女7例，年齡212歲;病程2個月至3a，平均(12.20.3)個月;靜止期17例，進(jìn)展期5例。對照組21例，其中男13例，女9例，年齡312歲;病程3個月至3年半，平均(12.10.5)個月;靜止期16例，進(jìn)展期6例。所有患兒均無系統(tǒng)性疾病，2月內(nèi)均未接受系統(tǒng)治療，3個月內(nèi)未接受糖皮質(zhì)激素、紫外線以及其他外用藥物治療。兩組患兒在年齡、性別、病程、病情方面無明顯差別，具有可比性。1.2 治療方法治療組用鹵米松乳膏(澳能乳膏，香港澳美制藥有限公司生產(chǎn))搽涂于皮損處，對照組外用丙酸氯培他索乳膏(恩膚霜，廣東順峰藥業(yè)有限公司)，輕揉5min使藥物盡量吸收，每天2次，均不加用其

14、他藥物，3個月為1療程。每月復(fù)查1次，記錄療效及副作用。所有患兒均完成并觀察全過程。1.3 療效判定標(biāo)準(zhǔn)參照中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會制定的標(biāo)準(zhǔn)2。痊愈：色素脫失斑全部消失，恢復(fù)正常膚色;顯效:色素脫失斑部分消退或縮小，恢復(fù)正常膚色的面積為50%90%;有效：色素脫失斑為部分消退或縮小，恢復(fù)正常膚色的面積0.05)。不良反應(yīng)：治療組有2例(9.1%)發(fā)生皮膚毛囊性丘疹及皮膚紅斑，均出現(xiàn)在用藥第3個月。對照組共有16例(76.2%)發(fā)生不良反應(yīng)，其中3例出現(xiàn)毛囊性丘疹，5例出現(xiàn)皮膚紅斑及毛細(xì)血管擴(kuò)張，3例出現(xiàn)皮膚萎縮，5例出現(xiàn)不同程度的色素沉著。不良反應(yīng)發(fā)生時間：5例出現(xiàn)在第1個月，10例出現(xiàn)在第2個月

15、，1例出現(xiàn)在第3個月，未作特殊處理。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，兩組在副作用發(fā)生方面的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(2=19.88，P0.05);但鹵米松副作用少而輕，且發(fā)生較晚，在觀察期第3個月才出現(xiàn)。對照組有16例出現(xiàn)不良反應(yīng)，發(fā)生率為76.2%，與治療組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)，且副作用發(fā)生較早，多出現(xiàn)在觀察期治療第1、2個月。由于兒童皮膚較薄，藥物吸收較多，所以用藥不宜超過3個月5。綜上所述，鹵米松乳膏是治療兒童面頸部白癜風(fēng)療效好、副作用少的藥物之一，值得臨床推廣應(yīng)用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1侯霞,梁玉梅.穩(wěn)定期白癜風(fēng)自體表皮移植術(shù)治療的施護(hù)與體會J.廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2002，20(1)：71.2中國中西醫(yī)結(jié)合

16、學(xué)會皮膚性病專業(yè)委員會色素病學(xué)組.白癜風(fēng)的臨床分型及療標(biāo)準(zhǔn)(2003年修訂稿)J.中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病雜志，2004，3(1)：65.3Kovacs S O.VitligoJ. J Am Acad Dermatol,1998, 38(5Pt1):647666.4王俠生，廖康煌.楊國亮皮膚病學(xué)M.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，2005：651.5李建明，唐楊婷. 鹵米松乳膏治療兒童白癜風(fēng)臨床27例療效觀察J.中國皮膚性病學(xué)雜志，2005，19(3):186.中藥配合針灸治療中老年人帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛的臨床觀察來源：醫(yī)學(xué)論文發(fā)表創(chuàng)新醫(yī)學(xué)網(wǎng)作者：賴新平 作者單位：廣東省興寧市慢性病防治院皮膚科，廣

17、東 興寧 514500【摘要】目的：探討中藥配合針灸治療老年帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛的療效。方法:將166例患者隨機(jī)分為中藥口服加穴位針灸治療組(A組)72例;針灸組(B組)56例;西藥口服組(C組)38例，比較3組臨床療效。結(jié)果：A組與B組及C組總有效率比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.050.01)。結(jié)論:口服中藥配合針灸治療帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛療效顯著，且無明顯不良反應(yīng)，易被患者接受?！娟P(guān)鍵詞】 帶狀皰疹;神經(jīng)痛;后遺癥;中藥;針灸Effect of combined therapy of traditional Chineses medicine and acupuncture on post h

18、erpetic neuralgia after zoster in the middleaged and eldersLAI Xinping(Dermatology Department, Preventive and Treatment Hospital for Chronic Diseases in Xingning, Xingning 514500, China)ABSTRACT Objective: To explore the effects of combined therapy of traditional Chineses medicine and acupuncture on

19、 post herpetic neuralgia after zoster in the middleaged and elders. Methods: A total of 166 cases were randomly divided into combined therapy group (Group A, 72 cases) , acupuncture group (Group B, 56 cases), and western medicine group (Group C, 38 cases), and clinic effects in three groups were com

20、pared. Results: There were significant differences of total effective rate among three groups (P0.050.01). Conclusions: Combined therapy of traditional Chineses medicine and acupuncture is effective on post herpetic neuralgia after zoster without inducing side effect, and is acceptable for patients.

21、KEY WORDS Zoster; Neuralgia; Sequela; Traditional Chinese medicine; Acupuncture帶狀皰疹是由水痘帶狀皰疹病毒引起的累及神經(jīng)及皮膚的常見病，臨床以身體一側(cè)出現(xiàn)帶狀分布的成簇小水皰，并伴有局部神經(jīng)痛為特征。好發(fā)于老年患者。2007年3月2008年5月我科采用中藥口服加穴位針灸治療該病，療效滿意，現(xiàn)報道如下。1 資料與方法1.1 一般資料搜集2007年3月2008年5月我院門診及住院的166例帶狀皰疹患者。年齡4578歲，平均63.28歲，排除嚴(yán)重心、肝、腎功能損害者;嚴(yán)重高血壓、糖尿病患者;長期使用皮質(zhì)類固醇者及各種原因

22、中斷治療者。將166例患者隨機(jī)分為中藥口服加穴位針灸組(A組)72例，針灸組(B組)56例，西藥組(C組)38例。A組男性37例，女性35例，病程20d18個月;B組男性32例，女性24例，病程24d20個月;C組男性19例，女性19例，病程18 d18個月。1.2 方法A組患者采用中藥內(nèi)服以理氣活血，疏肝止痛為主，方藥以柴胡疏肝散與活絡(luò)效靈丹加減，基本處方：柴胡15g、枳殼15g、當(dāng)歸15g、赤芍15g、陳皮15g、甘草10g、丹參30g、乳香5g、沒藥5g、元胡15g、郁金15g，余邪未盡加黃芩15g、梔子10g，正氣不足加黃芪30g，氣陰兩傷加黨參15g、當(dāng)歸15g，頭部加川芎10g，下

23、肢加牛膝15g，夜寐不安加遠(yuǎn)志15g、合歡皮15g，水煎服，每日1付。穴位治療：根據(jù)西醫(yī)神經(jīng)解剖定位取穴，確定支配疼區(qū)的神經(jīng)節(jié)段，取其患側(cè)夾脊穴：發(fā)于面頰部者，取頸2頸4夾脊穴;發(fā)于胸背部者，取胸4胸11夾脊穴;發(fā)于腰腹部者，取胸10腰2夾脊穴;發(fā)于上肢者，取頸5胸2夾背穴;發(fā)于下肢者，取腰1腰5夾脊穴。有明顯痛點(diǎn)者，可配合阿是穴，采用圍刺法，即視疼痛局部范圍大小，每次在痛區(qū)內(nèi)取阿是穴38個，由痛區(qū)中心開始，依次向外圍取穴，穴間上下左右間隔3cm左右，均勻分布。不同患者手法不同。(1)實(shí)證、急性痛癥患者則用提插捻轉(zhuǎn)，用瀉法，留針2030min，每日2次，用毫針刺，局部臥針橫刺;(2)實(shí)證、急性

24、病癥患者可用三棱針于龍眼穴放血23滴，每日或隔日1次;(3)皮膚針或梅花針于皰疹周圍淺刺，每日12次。B組患者口服維生素B1、維生素B6各10mg每日3次，每日肌肉注射維生素B12 1mL，同時配合針灸(針灸方法同上)。C組口服藥物同B組，再配合曲安奈得注射液10mg、2%利多卡因注射液4 mL局部注射。1.3 療效判定標(biāo)準(zhǔn)痊愈為疼痛基本消失，功能恢復(fù);顯效為疼痛明顯減輕，偶有疼痛;有效為疼痛較前減輕，但仍有疼痛;無效為疼痛無改善，仍明顯疼痛?？傆行室匀?有效+顯效計算。1.4 統(tǒng)計學(xué)處理采用2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)=0.05。2 結(jié)果3組療效見表1。A組總有效率(95.8%)明顯高于B組(91.1%)和C組(65.8%)(P0.050.01)。表1 3組臨床療效比較(略)3 討論帶狀皰疹是由水痘帶狀皰疹病毒引起累及神經(jīng)及皮膚的病毒性皮膚病，病因傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)描述為：(1)多因情志不遂、飲食失調(diào)，以致脾失健運(yùn)，濕濁內(nèi)停，郁而化熱，濕熱搏結(jié)，兼感毒邪而發(fā)。(2)以針灸言，帶狀皰疹病常為心經(jīng)火旺、脾肺濕熱與肝膽火旺所引發(fā)。再者帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛為“絡(luò)”病，“久