藥物腸道吸收研究方法-very important

1、- 222 - Drug Evaluation Research Vol.33 No.6 June 2010 綜 述 藥物腸道吸收研究方法祝誠誠 1,何 新 1,2,3 *1 天津中醫(yī)藥大學(xué) 中藥學(xué)院,天津 300193;2 教育部方劑學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300193;3 天津市中藥化學(xué)與分析重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300193摘 要 藥物在腸道內(nèi)的吸收程度和吸收特征是影響口服藥物生物利用度的重要因素。 腸道吸收研究可以預(yù)測影響藥物在腸 道吸收的機(jī)制與因素,研究方法主要包括體內(nèi)法(in vivo 、在體法(in situ 、體外法(in vitro等。就目前藥物小 腸吸收的研究方法及其特點(diǎn)進(jìn)行綜述。

2、關(guān)鍵詞 腸吸收; 在體腸灌流法; 外翻腸囊法; Ussing chamber; 細(xì)胞培養(yǎng)模型法; 藥物溶出 /吸收動態(tài)仿生系統(tǒng)法 (DDASS 中圖分類號:R969.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:16746376(2010 03022206Methodology study of drug intestinal absorptionZHU Cheng-cheng1, HE Xin1,2,3 *1 College of Chinese Materia Medica, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 30019

3、3, China;2 Key Laboratory of Pharmacology of Traditional Chinese Medical Formulae,Ministry of Education, (Tianjin Universityof Traditional Chinese Medicine Tianjin 300193, China;3 Tianjin Key Laboratory of TCM Chemistry and Analysis, Tianjin 300193, ChinaAbstract The degree and character of intestin

4、al tract absorption is an important factor that affects bioavailability of oral drugs. The absorption study of intestinal tract, including in vivo, in situ, in vitro, and so on, can predict mechanisms and factors that affect drug absorption in intestine. In this paper, the current methods of drug in

5、testinal absorption and their characteristics are reviewed.Key wordsintestinal absorption; intestinal perfusion; everted gut sacs; Ussing chamber; cell models; drug dissolution/absorption simulating system (DDASS經(jīng)口給藥是最常用的臨床給藥途徑之一。小腸 是藥物吸收的主要部位,藥物經(jīng)口吸收的程度與速 度主要取決于腸內(nèi)酶及其細(xì)胞對藥物的代謝和屏障 作用。因此,獲得藥物在腸道的吸收動力學(xué)、有

6、效 吸收部位、吸收機(jī)制、影響吸收的因素等信息,對 新藥設(shè)計(jì)、劑型改進(jìn)以及降低新藥研發(fā)投資的風(fēng)險(xiǎn) 具有重要意義。近年來,腸吸收模型的廣泛應(yīng)用對 合理確定臨床給藥方案及各種制劑處方設(shè)計(jì)發(fā)揮了 積極作用。 腸道吸收的實(shí)驗(yàn)方法主要包括體內(nèi)法 (in vivo 、 在體法 (in situ 、 體外法(in vitro等。本文 就藥物腸道吸收的實(shí)驗(yàn)方法及其特點(diǎn)綜述如下。 1體內(nèi)法該方法反映藥物在體內(nèi)的總體吸收情況,適用 于多種藥物的藥動學(xué)研究。本文綜述了經(jīng)口給藥后 藥物在腸道吸收的研究方法。本方法是指經(jīng)口給藥 后, 不同時間點(diǎn)采集血液、 尿液等, 測定藥物濃度, 繪制體內(nèi)藥物的經(jīng)時曲線,計(jì)算 C max

7、 、 T max 等藥動 學(xué)參數(shù)來評價藥物吸收的速度和程度。龔明濤等 1采用大鼠 ig 給予等量黃芩素和黃芩 苷, 研究黃芩苷的體內(nèi)藥動學(xué)特征。 結(jié)果表明, 黃芩 苷水解成苷元黃芩素后可以改善苷類化合物的理化 性質(zhì)和滲透性,提高了黃芩苷的經(jīng)口吸收生物利用收稿日期:2010-02-24基金項(xiàng)目:國家重大新藥創(chuàng)制專項(xiàng) (編號 2009ZX09304-002 、國家自然科學(xué)基金 (編號 30772778 國家高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金 (編號 200800630005 、國家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)藥行業(yè)科研專項(xiàng) (編號 200807051 資助。作者簡介:祝誠誠 (1985 ,女,黑龍江省,碩士研究生

8、,中藥學(xué)專業(yè)。 Tel: Email: zhucheng_0829通訊作者 何新,女,教授,博士生導(dǎo)師,主要從事中藥藥代動力學(xué)研究。 Tel: Email: hexintn 第 33卷 第 3期 2010年 6月 - 223 -度,為其劑型設(shè)計(jì)提供了新的思路。此法能夠真實(shí)反映藥物體內(nèi)的總體吸收情況, 但它是綜合了物化、生理、劑型等因素的結(jié)果,很 難從細(xì)胞或分子水平研究藥物的吸收機(jī)制,不能特 異性的反映腸道的吸收情況,且周期長,影響因素 較多,如存在個體差異大帶來的誤差、實(shí)驗(yàn)結(jié)果受 所研究物質(zhì)在體內(nèi)分解的影響等。2在體法本法主要是應(yīng)用于完整動

9、物實(shí)驗(yàn),具有完整的 血液供應(yīng)和神經(jīng)支配,保證腸道神經(jīng)完好無損,直 接反映藥物的吸收情況,常用于研究藥物的滲透和 吸收動力學(xué)。主要有在體腸灌流法、腸襻法、腸道 的血管插管法和測氮法等。2.1 在體腸灌流法(intestinal perfusion 2該法最初是由 Curran 等于 1957年研究在體腸 道時創(chuàng)立的 2。方法是用一雙腔管經(jīng)口腔插入所研 究腸段 (在實(shí)驗(yàn)動物中則是通過開腹手術(shù)將灌注管 和引流管分別插入被研究的腸段的近端和遠(yuǎn)端 , 用 蠕動泵將含有所研究藥物的溶液以一定的速度灌入 腸腔,收集流出液,如圖 1所示,分別測定其中的 研究藥物和示蹤物的濃度,計(jì)算所研究藥物的吸收 率。在體灌

10、流方法根據(jù)灌流方式的不同可分為:單 向灌流、循環(huán)灌流和振動灌流等。 D-十二指腸; J-空腸; I-回腸; C-結(jié)腸D- duodenum; J- jejunum; I- ileum; C- colon圖 1在體腸灌流法裝置示意圖Fig.1 Schematic diagram of intestinal perfusion DU 等 3使用單向腸灌流模型研究瑞香素在大 鼠腸道吸收特性, 結(jié)果表明瑞香素 (1040 µg/mL 的吸收機(jī)制為被動擴(kuò)散, 在小腸內(nèi)無特定吸收部位, 并推斷瑞香素不是 P-gp 底物。該法即可以在不同時間測定灌流液內(nèi)藥物濃度 的變化,又可以從血液中取樣,以獲得

11、藥物透過腸 上皮細(xì)胞的情況,但該法只限于溶液狀態(tài)給藥, pH 值、藥物濃度、吸收部位等因素均有可能影響其測 定的準(zhǔn)確性。2.2 腸襻法(intestinal loop 4最早在 1971年由 Kannikar 報(bào)道 4。 方法是麻醉 大鼠,開腹結(jié)扎腸腔,需作部位研究時,可分段結(jié) 扎腸腔,將一定濃度的人工腸液注入腸襻中,經(jīng)過 一定時間后,取出腸襻,收集腸襻沖洗液,測定藥 物剩余量。Khuriah 等 5研究新型增溶劑 Wellsolve 對灰黃 霉素在大鼠體內(nèi)腸屏障作用和腸吸收中的影響,結(jié) 果表明,在低濃度下, Wellsolve 是一種提高灰黃霉 素等水溶性較差藥物的溶解和吸收的有效增溶劑。

12、該法操作簡單, 但由于腸腔中存在大量內(nèi)容物, 樣品處理較復(fù)雜。2.3 腸道的血管插管法(vascular cannulation 6 在體腸灌流的基礎(chǔ)上,進(jìn)行腸道血管處插管。 實(shí)驗(yàn)過程中,既可插管于對一段腸管供血的腸系膜 血管,也可以插管于對整段小腸供血的腸系膜上動 脈和肝門靜脈,在不同時間內(nèi)抽取門靜脈或體靜脈 血以研究該物質(zhì)從腸腔直接吸收入血的情況。 Fukatsu 等 6報(bào)道了關(guān)于在嚴(yán)重的腸缺血再灌 注后早期給予營養(yǎng)的不利作用,利用了腸道靜脈插 管法和胃造口術(shù)等技術(shù),結(jié)果表明,嚴(yán)重的腸缺血 再灌注后,早期給予營養(yǎng)可能會降低器官存活,該 結(jié)果可能是由于在 IV-TPN 中增加了組織損傷或者

13、在 IG-TPN 和 CED 中的其他機(jī)制所引起的。本法中藥物的吸收量是以藥物被吸收到血液的 變化量來計(jì)算,不受動物的大小及血容量的限制, 能真實(shí)反映藥物在小腸吸收的通透情況。但是,實(shí) 驗(yàn)結(jié)果受所研究藥物在體內(nèi)分解代謝的影響。 2.4 測氮法(measuring nitrogen 7通過測定動物排泄物與所給食物中氮的量的差 異來計(jì)算該藥物的吸收量。王國興等 8采用 sibbald 的強(qiáng)飼法測定氨基酸的 消化率,并通用無氮日糧法、梯度回歸法及饑餓法 測定內(nèi)源氨基酸的排泄量,證實(shí)了該法的在測定氨 基酸真消化率及內(nèi)源氨基酸排泄量的可行性。 該方法不需要給動物做手術(shù),對動物本身無生 理影響,方法簡單。

14、但是,該方法較粗略,在研究 有機(jī)物質(zhì)如氨基酸時易受到動物腸內(nèi)細(xì)菌及內(nèi)源性 物質(zhì)的影響而產(chǎn)生誤差。3體外法體外法簡便易行,重復(fù)性好,實(shí)驗(yàn)環(huán)境和條件- 224 - Drug Evaluation Research Vol.33 No.6 June 2010便于控制,使影響因素單一化、簡單化,但不能反 映藥物在機(jī)體的實(shí)際吸收狀態(tài),因此多用此法研究 腸吸收機(jī)制等。該法主要包括外翻腸囊法、腸片孵 育法、 膜囊泡、 細(xì)胞培養(yǎng)模型法、 平行人造膜通透性 測定法、 in silico、 藥物溶出 /吸收動態(tài)仿生系統(tǒng)法等。 3.1 外翻腸囊法(everted gut sacs 9自從 1954年 Wilson

15、和 Wiseman 9采用此法研 究腸道吸收功能以來,一直被廣泛應(yīng)用。該法是麻 醉動物, 開腹取出小腸, 將腸段套于玻璃棒上外翻, 置于含有藥物的 Krebs-Ringers 溶液中,定時從腸 管內(nèi)外兩側(cè)取樣,測定藥物濃度的變化,如圖 2所 示?？紤]到組織活性,實(shí)驗(yàn)時間不宜過長。 圖 2外翻腸囊法裝置示意圖Fig.2 Schematic diagram of everted gut sacsSha 等 10應(yīng)用外翻腸囊法和 Caco-2細(xì)胞膜型法 評價 9-硝基喜樹堿的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制, 結(jié)果顯示 9-硝基喜 樹堿的吸收和外排受 pH 和外排轉(zhuǎn)運(yùn)體的調(diào)節(jié),這 也是影響 9-硝基喜樹堿經(jīng)口吸收差的主要影

16、響因 素。本法是一種廣泛用于研究腸吸收的方法,可用 于研究生物膜的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制;另外,漿膜側(cè)的體積相 對較小,藥物積累較快,便于樣品的分析。但該法 只能觀察藥物透過腸壁的濃度,無法計(jì)算較詳盡的 吸收動力學(xué)參數(shù),并且因其缺乏血液及神經(jīng)供應(yīng), 組織易死亡;翻轉(zhuǎn)小腸時易造成形態(tài)學(xué)破壞。 3.2 腸片孵育法(Ussing chamber 11該法需要一種稱為 Ussing 槽或孵育槽的裝置, 這種方法是 Ussing 等 11在研究蛙皮膚對鈉離子主 動轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制時提出的。其方法是將大小合適的腸片 或黏膜固定于互不相通的分別含有黏膜液和漿膜液 的槽之間的孔上,孵育一定時間后,測定膜兩側(cè)研 究藥物的量,計(jì)算出研

17、究藥物從黏膜到漿膜的吸收 率, 如圖 3所示。 還可利用 Ussing 槽通過控制膜兩 側(cè)的膜電位而求出藥物被動轉(zhuǎn)運(yùn)的量。 圖 3 Ussing chamber 擴(kuò)散池裝置示意圖Fig.3 Schematic diagram of Ussing chamber diffusion cell Bergmann 等 12為驗(yàn)證腸片孵育法是研究藥物 代謝、 轉(zhuǎn)運(yùn)的良好模型, 將部分結(jié)腸安裝 Ussing 槽 上,結(jié)果證實(shí)了 T84細(xì)胞是模擬腸粘膜的有利模型 體系,并且多酚類能夠增加 T84細(xì)胞的上皮電阻。 該法在試驗(yàn)過程中可以測定小腸膜的電阻以判 斷小腸的存活情況;可比較不同小腸部位對藥物吸 收的影

18、響;所需藥物數(shù)量相對較少且樣品干凈易于 分析;也適合于人體小腸的研究,用于比較種間差 異。但該法缺乏血液及神經(jīng)供應(yīng),在手術(shù)及鑲嵌過 程中易造成形態(tài)學(xué)破壞。3.3 膜囊泡(membrane vesicle 13最早在 1973年由 Hopfer 13報(bào)道,該法是將膜 囊泡混懸在含藥緩沖液中,攝取藥物,從而模擬藥 物吸收的過程,用于研究藥物的吸收或代謝,包括 刷狀緣膜囊泡和基底膜囊泡。Oulianova 等 14應(yīng)用刷狀緣膜囊泡法研究 23種 化合物的吸收特性,結(jié)果與人口服吸收情況相關(guān)性 良好, 相關(guān)系數(shù)為 0.853(P <0.001 , 證明該法用于 預(yù)測藥物吸收的可行性。該法實(shí)驗(yàn)時間比

19、較短;所需的藥物比較少;膜 囊泡制備比較方便;精確度高,可以用于深入研究 藥物的特性、營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)。但是,膜囊泡不是 很純, 可能含有其他碎片; 在制備膜囊泡的過程中, 因?yàn)槭褂昧讼?可能對蛋白質(zhì)造成損傷;制備 膜囊泡的重現(xiàn)性并不好;缺少細(xì)胞代謝,因此不能 用于研究 ATP 依賴性轉(zhuǎn)運(yùn),以及細(xì)胞旁路轉(zhuǎn)運(yùn)。 3.4 細(xì)胞培養(yǎng)模型法為了在細(xì)胞 /分子水平更深入的研究藥物吸收 機(jī)制, 多種細(xì)胞模型應(yīng)運(yùn)而生, 主要有 Caco-2、 TC7、 MDCK 等細(xì)胞模型。其中 Caco-2細(xì)胞模型作為研 究小腸表皮細(xì)胞藥物轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝的體外模型,已廣 泛應(yīng)用于口服藥物的篩選和研究藥物腸吸收的過 程,成為

20、了研究藥物吸收較適合的模型。 第 33卷 第 3期 2010年 6月 - 225 -3.4.1 Caco-2細(xì)胞模型法 15Caco-2細(xì)胞來源于人體結(jié)腸腺癌細(xì)胞。 該法由 Hidalgo 等 16在 1989年最初提出。 Caco- 2細(xì)胞單層 模型(圖 4應(yīng)用于研究藥物雙向轉(zhuǎn)運(yùn)情況,通過 考察時間、藥物濃度及抑制劑等影響因素,計(jì)算其 表觀滲透系數(shù),研究藥物吸收機(jī)制。 圖 4Caco-2細(xì)胞模型示意圖Fig.4 Schematic diagram of Caco-2 cell model Hang 等 15用 Caco-2細(xì)胞進(jìn)行 4種綠茶兒茶酚 的雙向轉(zhuǎn)運(yùn)研究,發(fā)現(xiàn) MRP 對五倍子酸兒茶

21、酚代 謝物的外排表現(xiàn)出抑制作用。 兒茶酚在 Caco-2細(xì)胞 中的代謝產(chǎn)物主要是硫酸化和甲基化代謝物。 Han 等 17使用 Caco-2單層細(xì)胞作為體外模型, 研究 Rg 1通過腸粘膜的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。結(jié)果顯示, Caco-2單層細(xì) 胞對 Rg 1的攝取存在溫度依賴性,但不受環(huán)孢霉素 A 影響。 Rg 1的攝取和轉(zhuǎn)運(yùn)是非飽和的,為被動轉(zhuǎn) 運(yùn)。其優(yōu)點(diǎn)為:Caco-2細(xì)胞來源是人結(jié)腸癌細(xì)胞, 同源性好; 可用于區(qū)分腸腔內(nèi)不同吸收途徑的差別, 判斷藥物吸收的方式, 求出藥物吸收的動力學(xué)參數(shù)。 但 Caco-2細(xì)胞也有一定的缺點(diǎn), 如缺少腸壁的粘液 層;缺少部分代謝酶;屏障特性與結(jié)腸上皮細(xì)胞類 似,而與小

22、腸上皮細(xì)胞有一定差別。但大量的研究 表明, Caco-2模型適用于新藥開發(fā)的早期階段,是 目前國內(nèi)外公認(rèn)的研究藥物腸吸收的較理想的體外 模型。3.4.2 TC7細(xì)胞模型法TC7細(xì)胞是 Caco-2細(xì)胞經(jīng)甲氨蝶呤處理后分 離得到的, 是 Caco-2細(xì)胞的良好替代, 是藥物經(jīng)小 腸吸收和生物轉(zhuǎn)化作用評價的良好模型。CYP3A 表達(dá)比 Caco-2細(xì)胞高,能主動轉(zhuǎn)運(yùn)牛 磺膽酸, 以及高表達(dá)刷狀邊緣的蔗糖酶 -異麥芽糖酶 的活性,但其 P-gp 的表達(dá)比 Caco-2細(xì)胞低 18-20。 3.4.3 MDCK(Madin-Darby canine kidney 細(xì)胞模 型法 21MDCK 細(xì)胞系由

23、Leighton 等 21首先建立起來。 MDCK 細(xì)胞是在遺傳學(xué)方面及細(xì)胞的脂質(zhì)、 蛋白質(zhì) 組成方面最為理想的上皮細(xì)胞系。制藥公司也經(jīng)常 應(yīng)用它監(jiān)控腸內(nèi)藥物轉(zhuǎn)運(yùn)。 MDCK 細(xì)胞具有極性, 基底側(cè)貼于瓶底,面向液層由微絨毛形成,并形成 圓頂,研究表明這些細(xì)胞與腎遠(yuǎn)曲小管很接近。 Irvine 等 22研究表明:Caco-2細(xì)胞和 MDCK 細(xì) 胞的滲透性有良好的相關(guān)性,親水分子在 Caco-2細(xì)胞中的滲透性通常比 MDCK 細(xì)胞低, 這同 Caco-2細(xì)胞電阻稍高一致。MDCK 細(xì)胞比 Caco-2細(xì)胞的培養(yǎng)時間短,跨 上皮電阻低,接近于小腸。但該細(xì)胞單層只能用于 預(yù)測腸上皮細(xì)胞的被動轉(zhuǎn)運(yùn),

24、不能用于研究透過制 或預(yù)測經(jīng)腸上皮細(xì)胞主動吸收或外流。3.5 平行人造膜通透性測定法(PAMPA-Parallel Artificial Membrane Permeability Assay 23Kansy 等 23最早提出利用 PAMPA 方法研究藥 物通過磷脂覆蓋的濾膜的通透性。該法是一種用于 測定化合物通過(和保留于濃縮的帶負(fù)電荷的磷 脂雙分子層屏障的通透性的方法。Koljonen 等 24通過利用 PAMPA 與 Caco-2對水 楊酸的通透性研究,說明 PAMPA 能在不受主動轉(zhuǎn) 運(yùn)的因素干擾下,較好的評價化合物的理化性質(zhì)對 膜通透性的影響。此法在新藥研發(fā)的早期作為一種非常重要的通

25、 透性篩選工具。 但不能用于模擬主動轉(zhuǎn)運(yùn)的化合物, 只適用于考察被動擴(kuò)散,而且主要是不帶電的化合 物的被動擴(kuò)散。3.6 In silico 25In silico最早在 2001年由 Lipinski 25報(bào)道。 In silico 是生物信息學(xué)的新名詞, 它強(qiáng)調(diào)使用計(jì)算機(jī)來 解決生物學(xué)上的問題。 In silico的技術(shù)核心為結(jié)構(gòu)活 性關(guān)系,原理基于分析研究分子或原子的基本結(jié)構(gòu) 特征及其理化性質(zhì)以預(yù)測藥物動力學(xué)性質(zhì)。Lu 等 26使用 In silico方法預(yù)測丹參酚酸類成分 的滲透性和溶解性,結(jié)果表明,就溶解度而言,丹 參中所含有的主要酚酸類成分屬于可溶或易溶的化 合物,并且氫鍵容量和脂溶

26、性是影響多酚酸化合物 的膜通透性,進(jìn)而影響吸收的最主要因素,因?yàn)榻Y(jié) 構(gòu)類似,分子量對膜通透性的影響體現(xiàn)在氫鍵容量- 226 - Drug Evaluation Research Vol.33 No.6 June 2010的影響。In silico方法簡便快速, 對于化合物早期設(shè)計(jì)和 候選藥物篩選是很好的工具,適合藥物研究初期的 高通量篩選。但是,用 In silico預(yù)測吸收情況只有 在沒有轉(zhuǎn)運(yùn)體參與的被動擴(kuò)散時才適用。3.7 藥物溶出 /吸收仿生系統(tǒng)法(drug dissolution/ absorption simulating system, DDASS 27有關(guān)藥物體外溶出 /吸收動態(tài)

27、評價系統(tǒng)的報(bào)道 并不多見。 1999年, Ginskin 等 28建立了藥物溶解 /Caco-2細(xì)胞膜系統(tǒng), 成功預(yù)測可溶性藥物的吸收能 力。該仿生體系由藥物溶解室(模擬胃 、 pH 調(diào)整 室(模擬腸以及擴(kuò)散池 3個部分組成(圖 5 ,擴(kuò) 散池又由供給室、接收室以及嵌合在兩者之間的 Caco-2單層細(xì)胞膜或大鼠離體腸管組成; 測定時將 藥物固體粉末加入到藥物溶解室中,由恒流蠕動泵 將溶解的藥物移送至 pH 調(diào)整室,然后進(jìn)一步移送 至擴(kuò)散池的供給室,通過樣品程控自動收集器可隨 時分別從供給室和接收室收集樣品。 圖 5藥物溶出 /吸收動態(tài)仿生系統(tǒng)裝置示意圖Fig.5 Equipment schem

28、atic diagram of DDASS He 等 27完善了該模型,并將其用于解析藥物 投與后的崩解、溶出和膜透過規(guī)律,用數(shù)學(xué)模型和 動力學(xué)參數(shù)表征藥物變化規(guī)律的動力學(xué)特點(diǎn)。在此 基礎(chǔ)上, He 等 29用大鼠腸管代替藥物溶解與吸收 體外預(yù)測系統(tǒng)中的 Caco-2單層細(xì)胞膜, 準(zhǔn)確預(yù)測了 酯 前 體 藥 物 pivampicillin 經(jīng) 小 腸 降 解 代 謝 為 ampicillin 后的吸收率。為使研究對象從藥物固體 粉末或顆粒劑擴(kuò)展到片劑、 膠囊劑等多種固體劑型, 本實(shí)驗(yàn)室在原有模型基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn) 30:在藥物溶 解室加入載藥籃,解決受力不均勻的問題;在 pH 調(diào)整室頂部加入篩網(wǎng)和

29、微孔濾器,解決堵塞管道的 問題。 分別采用該仿生系統(tǒng)和槳法體外釋放度實(shí)驗(yàn), 對黃芩苷不同固體制劑進(jìn)行體外釋放度研究,結(jié)果 表明該仿生系統(tǒng)作為評價藥物固體制劑釋藥特性的 合理性,擴(kuò)大了評價對象,發(fā)展和完善了 DDASS 模型,為藥物劑型設(shè)計(jì)研究提供了新方法。有關(guān)在 該仿生系統(tǒng)中嵌合 Caco-2單層細(xì)胞膜或大鼠離體 腸管的體外吸收實(shí)驗(yàn)正在進(jìn)行。該仿生系統(tǒng)不僅考慮到藥物從胃(pH 1.8移 行至腸 (pH 6.0 過程中 pH 的急劇變化對藥物溶解 性、穩(wěn)定性、以及藥物釋出的影響,并且連續(xù)模擬 藥物在胃內(nèi)溶解、繼而移行至腸道及透膜吸收的胃 腸道連續(xù)動態(tài)過程;在實(shí)時監(jiān)測藥物固體制劑整個 釋放過程,評

30、價釋藥規(guī)律的同時,還能同步監(jiān)測藥 物固體制劑的透過情況,為藥物劑型設(shè)計(jì)研究提供 了新技術(shù)和新方法。4 結(jié)語在新藥研發(fā)的早期階段,通常采用各種腸道吸 收模型預(yù)測藥物的經(jīng)口生物利用度及吸收機(jī)制研 究,進(jìn)行新藥設(shè)計(jì)和劑型的改進(jìn),降低新藥研發(fā)投 資的風(fēng)險(xiǎn)。研究者應(yīng)根據(jù)各模型的特點(diǎn)和實(shí)際需要 選擇合適的研究方法,結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果和模型因素對 藥物的腸道吸收行為作出科學(xué)評價。參考文獻(xiàn):1龔明濤 , 虞麗芳 , 陳慶華 , 等 . 大鼠灌胃黃芩苷及其苷 元 黃 芩 素 的 藥 動 學(xué) 研 究 J. 中 草 藥 , 2009, 40(3:392-3942Curran P F, Solomon A K. Ion a

31、nd water fluxes in the ileum of ratsJ. J Gen Physiol, 1957, 41(1:143-168. 3Du Q, Di L Q, Shan J J, et al. Intestinal absorption of daphnetin by rats single pass perfusion in situJ. Acta Pharm Sin, 2009, 44(8 :922-926.4Kannikar P, Richard A F. Enteropathogencity of Escherichia coliJ. Infect Immun, 19

32、71, 4(4:473-478 5 Hamida K A, Lin Y L, Gao Y, et al. The effect of wellsolve, a novel solubilizing agent, on the intestinal barrier function and intestinal absorption of Griseofulvin in ratsJ. Biol Pharm Bull, 2009, 32(11, 1898-1905. 6Fukatsu K, Ueno C, Maeshima Y, et al. Detrimental effects of earl

33、y nutrition administration after severe gut ischemia-reperfusionJ. J Surg Res, 2008, 149(1, 31-38. 7董紅林 , 蔡軍偉 , 楊 晶 . 研究小腸吸收的常用方法 J. 醫(yī)學(xué)研究通訊 , 1999, 28(l2:28-29.8王國興 , 王康寧 , 賈 剛 , 等 . 差量法測定鴨飼料氨基 酸真消化率和內(nèi)源氨基酸排泄量的研究 J. 動物營養(yǎng) 學(xué)報(bào) , 2008, 20(1:16-229Wilson T H, Wiseman G. The use of sacs of everted small第 3

34、3 卷 第 3 期 2010 年 6 月 of a newly isolated Caco-2 clone (TC-7, J Pharm, 1995, 116:147-158. Transport characteristics of - 227 as a model of intestine for the study of the trsnsference of substances from the mucosal to the serosal surfaceJ.J Physiol, 1954, 123(1:116-125. 10 Sha X, Fang X. 9-nitrocampto

35、thecin in the human intestinal cell line Caco-2 and everted gut sacsJ. Int J Pharm, 2004, 272(1-2:161-171 11 Ussing H H, Zerahn K. Active transport of sodium as the source of electric current in the short-circuited isolated frog skinJ. Acta Physiol Scand, 1951, 23(2-3:110-127. 12 Bergmann H, Rogoll

36、D, Scheppach W, et al. The Ussing type chamber model to study the intestinal transport and modulation of specific tight-junction genes using a colonic cell lineJ. Mol Nutr Food Res, 2009, 53(10: 1211-1125 13 Hopfer U, Nelson K, Perrotto J, et al. Glucose transport in isolated brush-border membrane f

37、rom rat small intestineJ. J Biol Chem, 1973, 248:25-32. 14 Oulianova N, Cheng D P, Huebert N, et al. Human oral drugs absorption is correlated to their in vitro uptake by brush border membrane vesicles J. Int J Pharm, 2007, 336:115-121 15 Hang L Z, Zheng Y, Chow M S S, et al. Investigation of intest

38、inal absorption and disposition of green tea catechus by Caco-2 monolayer model J. Int J Pharm, 2004, 287 (1-2 :1-12. 16 Hidalgo I J, Raub T J, Borchardt R T. Characterization of the human colon carcinoma cell line (Caco-2 as a model system for intestinal epithelial permeability J. Gastroenterology,

39、 1989, 96(3:736-739. 17 Han M, Fang X L. Difference in oral absorption of ginsenoside Rg1 between in vitro and in vivo models J. Acta Pharmacol Sin, 2006, 27(4:499-505. 18 Raeissi S D, Guo Z, Dobson G L, et al. Comparison of CYP3A activities in a subclone of Caco-2 cells (TC7 and human intestine J.

40、Pharm Res, 1997, 14(8:1019-1025. 19 Raeissi S D, Hidalgo I J, Segura-Aguilar J, et al. nterplay between CYP3A-mediated metabolism and polarized efflux of terfenadine and its metabolites in intestinal epithelial Caco-2 (TC7 cell monolayers J. Pharm Res, 1999, 16(5, 625-632. 20 Isabelle C, Xavier B, M

41、onique R, et al. Characterisation 29 27 26 transport processes and biotransformation of drugs J. Int 21 Leighton J, Brada Z, Estes L W. Secretory activity and oncogenicity of a cell line (MDCK derived from canine kidney J. Science, 1969, 163(866:472-473. 22 Irvine J D, Takahashi L, Lockhart K, et al. MDCK(Madin-Darby canine kidney cells: a tool for membrane permeability screening J. J Pharm Sci, 1999, 88(1:28 -33. 23 Kansy M, Senner F, Gubernator K. Physicoche