正交試驗法優(yōu)選清瘟解毒分散片提取工藝

1、正交試驗法優(yōu)選清瘟解毒分散片提取工藝摘要 目的：優(yōu)選清瘟解毒分散片提取工藝。方法：以揮發(fā)油提取量、干浸膏得率和黃芩苷保留率為考察指標(biāo)，以高效液相色譜法測定，采用正交試驗優(yōu)選最佳工藝條件。結(jié)果：羌活、川芎、防風(fēng)、柴胡最佳工藝條件為：加12倍水，提取5h;其余藥材水煎3次，每次加10倍量水，每次煎煮1h;水煎濃縮液相對密度為1.181.22(25)乙醇提取濃度為70%，靜置時間6h。結(jié)論：最佳提取工藝合理，穩(wěn)定性好，可為工業(yè)生產(chǎn)提供參考。關(guān)鍵詞 清瘟解毒分散片; 提取工藝;正交試驗;揮發(fā)油;干浸膏;黃芩苷Optimization of the Extraction Technology of Qi

2、ngwen Jiedu Dispersible Tablets by the use of Orthogonal ExperimentWang Xiao-Li，Wu Zhi-Cheng(The affiliated Hospital of Gansu College of Traditional Chinese Medicine, Lanzhou 730020)Abstract Objective: To optimize the extraction process of Qingwen Jiedu Dispersible Tablets. Methods: Setting volatile

3、 oil extraction volume, dry extract yield and baicalin retention rate as investigation index, test by high performance liquid chromatography (HPLC)method, adopt the orthogonal experiment to optimize the best technological conditions Results: the best extraction technology are as follows: adding 12-f

4、old volume of water in notopterygium root, ligusticum chuanxiong hort, Saposhnikovia divaricata, and radix bupleuri and extracting 5 hours; boiling other materials for 1hour, adding 10-fold volume of water per time and boiling three times; the relative density of boiling concentrate is 1.181.22(25);

5、consistency of alcohol is 70%; standing time is 6 hours. Conclusion: The above technology is reasonable and stable, and it can providie reference for the industrialized production.Key words: Qingwen Jiedu Dispersible Tablets ;Orthogonal Experiment; Extraction Technology ;Volatile Oil; Dry Extract; B

6、aicalin清瘟解毒分散片是由中國藥典(2005年版一部)收載品種清瘟解毒丸改劑型而來，由羌活、川芎、防風(fēng)、柴胡、黃芩等16味藥材組成。臨床用于治療外感時疫，憎寒壯熱，頭痛無汗，口渴咽干，痄腮，大頭瘟等癥1。本試驗根據(jù)有效成分的溶解性，對羌活、川芎、防風(fēng)、柴胡采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油;對其余藥物采用水煎醇沉法提取有效成分。并采用正交試驗優(yōu)選其最佳提取工藝。1、材料Agilent HP1100高效液相色譜儀(美國安捷倫公司);BS110電子天平(北京塞多利斯儀器系統(tǒng)有限公司);黃芩苷對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號：0715-9909);以上16味藥材均購自蘭州黃河藥材市場，由甘肅中醫(yī)學(xué)

7、院附屬醫(yī)院楊錫倉主任中藥師鑒定為真品;甲醇為色譜純;水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。2 方法與結(jié)果2.1 黃芩苷含量測定取藥材0.5g，精密稱定，加70%乙醇50mL超聲處理(功率220W，頻率50kHz)10分鐘，濾過，濾液置100mL量瓶中，用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘渣，洗滌液濾入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻。精密量取1mL，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45m)濾過，即得。圖1 高效液相色譜圖A.黃芩苷對照品;B.供試品;C.陰性對照2.2 提取工藝表1 因素水平表表2 正交試驗及結(jié)果表3 方差分析表F0.05(2，2)=19.00;F0.01(2

8、，2)=99.00直觀分析結(jié)果為CBA。方差分析結(jié)果為A2B1C3。即加12倍水，提取5小時，其中，浸泡時間對試驗結(jié)果的影響無顯著性差異，故加水后不浸泡。表4 水煎正交試驗因素水平表表5正交試驗及結(jié)果表6 干浸膏得率及黃芩苷量方差分析表F0.05(2，2)=19.00;F0.01(2，2)=99.00直觀分析：干膏得率影響因素順序為CAB，黃芩苷影響因素順序為CAB。方差分析：干膏得率最優(yōu)組合A3B2C3，黃芩苷提取量最優(yōu)組合A2B2C3?？紤]到生產(chǎn)成本，結(jié)合生產(chǎn)實際，綜合分析，確定A3B2C3為水煎最佳工藝.即：水煎3次，每次加10倍量水，每次煎煮1h。表7 醇沉正交試驗因素水平表表8 醇沉

9、正交試驗及結(jié)果表9 干浸膏得率及黃芩苷方差分析表F0.05(2，2)=19.00;F0.01(2，2)=99.00進行直觀分析結(jié)果為干浸膏得率影響因素順序為ABC，黃芩苷保留率影響因素順序為BAC。方差分析結(jié)果為干浸膏得率A1B1C2為最佳，黃芩苷保留率A1B2C1為最佳?？紤]到黃芩苷指標(biāo)的重要性，結(jié)合生產(chǎn)實際，綜合生產(chǎn)成本分析，確定A1B2C1為水煎液醇沉的最佳工藝，即：水煎濃縮液相對密度為1.181.22(25)，含醇度為70%，靜置時間6h。2.3 驗證試驗 按以上最佳工藝進行三次平行驗證試驗，并分別測定揮發(fā)油提取量、干膏得率、黃芩苷保留率，結(jié)果：揮發(fā)油平均提取量為1.412g，平均提取

10、率為0.63%。;黃芩苷平均提取量為0.822g，干膏得率為21.60%;黃芩苷平均保留率為93.97%。與正交試驗結(jié)果比較，各含量均較高，表明最佳提取工藝可行。3 討論本試驗中，對羌活、川芎、防風(fēng)、柴胡等含揮發(fā)油成分的藥材采用水蒸氣蒸餾法提取，以揮發(fā)油的提取量為考察指標(biāo);對黃芩、大青葉、連翹、玄參、天花粉、牛蒡子、赤芍、甘草、白芷、桔梗等水溶性藥材采用水煎醇沉法，以干浸膏得率和黃芩苷提取率及保留率為考察指標(biāo)。曾用不同濃度的乙醇進行醇沉，實驗中發(fā)現(xiàn)，乙醇濃度過高或過低均會影響黃芩苷的保留率。本試驗確定的羌活、川芎、防風(fēng)、柴胡最佳工藝條件為：加12倍水，提取5h;其余藥材水煎3次，每次加10倍量水，每次煎煮1h;水煎濃縮液相對密度為1.181.22(25)乙醇提取濃度為70%，靜置時間6h。并通過驗證試驗證明本提取純化工藝，穩(wěn)定性好，可為工業(yè)生產(chǎn)提供參考。參考文獻1 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(一部)S2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，