實(shí)驗(yàn)二十八植物染色體壓片法

1、遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)須知一、實(shí)驗(yàn)課的目的1、培養(yǎng)鍛煉科學(xué)的思維方法、 實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度和嚴(yán)格的科學(xué)作風(fēng)， 提高分析問 題解決問題的能力。2、通過實(shí)驗(yàn)加深對理論的理解，學(xué)習(xí)掌握基本的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技能與實(shí)驗(yàn)方法， 為今后的學(xué)習(xí)和研究打下一定的基礎(chǔ)。3、培養(yǎng)學(xué)生愛護(hù)公物、愛護(hù)集體、團(tuán)結(jié)互助的優(yōu)良道德品質(zhì)。二、實(shí)驗(yàn)課的要求1、課前必須預(yù)習(xí)，了解基本原理和主要步驟及意義，寫出預(yù)習(xí)報(bào)告。2、上實(shí)驗(yàn)課必須穿白大衣，帶實(shí)驗(yàn)講義和實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙。3、遵守實(shí)驗(yàn)制度，注意安全（如水、電、煤氣、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有毒物質(zhì)等） 。4、實(shí)驗(yàn)中要正規(guī)操作，動手動腦主動進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；掌握關(guān)鍵，力求得出準(zhǔn)確結(jié)果；仔 細(xì)觀察，認(rèn)真思考，及時

2、做好記錄；綜合分析得出正確結(jié)論。5、在實(shí)驗(yàn)過程中不許大聲喧嘩，有問題及時請教老師。6、器材、藥品等按規(guī)定使用，嚴(yán)禁亂用亂放。7、愛護(hù)儀器， 實(shí)驗(yàn)過程中因個人未能按實(shí)驗(yàn)要求操作而導(dǎo)致的器材損壞， 按規(guī)章制 度進(jìn)行賠償。8、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，相關(guān)器材要徹底清洗干凈，放到指定位置。9、廢棄物按要求分類收集、處理。10、值日生要打掃干凈實(shí)驗(yàn)臺、地面等，并負(fù)責(zé)關(guān)好門窗，檢查水、電、煤氣等。11、因故不能上實(shí)驗(yàn)者應(yīng)有請假手續(xù)，是否進(jìn)行補(bǔ)課由教研室研究決定。14目錄實(shí)驗(yàn)須知實(shí)驗(yàn)一 實(shí)驗(yàn)二 實(shí)驗(yàn)三 實(shí)驗(yàn)四 實(shí)驗(yàn)五1 洋蔥根尖壓片與有絲分裂觀察 染色體組型分析 減數(shù)分裂 人工誘發(fā)多倍體植物植物的離體培養(yǎng)和快速繁殖實(shí)驗(yàn)

3、預(yù)習(xí)報(bào)告格式要求 實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式要求1313911實(shí)驗(yàn)洋蔥根尖壓片與有絲分裂觀察一、實(shí)驗(yàn)原理植物根尖的分生細(xì)胞的有絲分裂，每天都有分裂高峰時間，此時把根尖固定， 經(jīng)過染色和壓片，再置放在顯微鏡下觀察，可以看到大量處于有絲分裂各時期的細(xì) 胞和染色體。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 、學(xué)習(xí)根尖染色體壓片法。2、掌握有絲分裂過程。、實(shí)驗(yàn)材料洋蔥( Aillumcepa )的鱗基四、實(shí)驗(yàn)器具和藥品1. 用具：染色板，載玻片，蓋玻片，指管，溫度計(jì)，試劑瓶，滴瓶，鑷子，解 剖針，毛邊紙。2. 藥品：無水酒精， 70酒精，冰醋酸，對二氯苯或秋水仙素，堿性品紅，石 碳酸，甲醛，山梨醇，二甲苯?？ㄖZ固定液的配制：用 3 份無水酒

4、精，加入 1 份冰醋酸(現(xiàn)配現(xiàn)用) 。 染色液的配制：配方I .石碳酸品紅(Carbolfuchsin ),先配母液A和B。母液A:稱取3克堿性品紅，溶解于100毫升的70%酒精中(此液可長期保存)。 母液B:取母液A10毫升，加入90毫升的5%石碳酸水溶液(2周內(nèi)使用)。石碳酸品紅染色液:取母液 B45 毫升，加入 6 毫升冰醋酸和 6 毫升 37%的甲 醛。此染色液含有較多的甲醛， 在植物原生質(zhì)體培養(yǎng)過程中， 觀察核分裂比較適宜， 后來在此基礎(chǔ)上，加以改良的配方n,稱改良石碳酸品紅，可以普遍應(yīng)用于植物染 色體的壓片技術(shù)。配方n：改良石碳酸品紅取配方I .石碳酸品紅染色液210毫升，加入90

5、 98毫升45%的醋酸和1.8 克山梨醇(sorbitol )。此染色液初配好時顏色較淺，放置二周后，染色能力顯著增 強(qiáng)，在室溫下不產(chǎn)生沉淀而較穩(wěn)定。五、實(shí)驗(yàn)說明1. 根尖由于取材方便，是觀察植物染色體最常用的材料，有些植物種子難以發(fā) 芽，或僅有植株而無種子，也可以用莖尖作為材料。2. 植物細(xì)胞分裂周期的長短不盡相同，通常在十到幾十小時之間，溫度明顯地 影響分裂周期，對于一個不太熟悉的實(shí)驗(yàn)材料，最好在特定溫度下長根，掌握有絲 分裂高峰期，以便得到更多的有絲分裂的細(xì)胞。3. 前處理的目的是降低細(xì)胞質(zhì)的粘度，使染色體縮短分散，防止紡錘體形成，讓更多的細(xì)胞處于分裂中期，一般在分裂高峰前，把根尖放到藥

6、劑中處理34 小時?？商幚淼乃巹┖芏?，如秋水仙素、對二氯苯、 8- 羥基喹啉等。4. 解離的目的是使分生組織細(xì)胞間的果膠質(zhì)分解，細(xì)胞壁軟化或部分分解，使 細(xì)胞和染色體容易分散壓平，解離方法有酸解法和酶解法。（1）酸解法是用鹽酸水解根尖， 步驟簡便、容易掌握， 廣泛應(yīng)用于染色體計(jì)數(shù)、 核型分析和染色體畸變的觀察。根尖分生組織經(jīng)過酸解和壓片后，都呈單細(xì)胞，但 是大部分分裂細(xì)胞的染色體還包在細(xì)胞壁中間。（2）酶解法常用于染色體顯帶技術(shù)或姊妹染色單體交換等項(xiàng)研究， 通過解離和 壓片，使分生細(xì)胞的原生質(zhì)體，能夠從細(xì)胞壁里壓出，再經(jīng)過精心的壓片，使染色 體周圍不帶有細(xì)胞質(zhì)或僅有小量細(xì)胞質(zhì)，致使多項(xiàng)制片措施

7、直接作用于染色體。六、實(shí)驗(yàn)步驟（一）將洋蔥的鱗基，置于盛水的小燒杯上，放在25C溫箱中，待根長到2cm左 右時，在上午九時摘下根尖，放到卡諾固定液中，固定 24 小時。固定材料可以轉(zhuǎn) 入70%酒精中，在4C冰箱中保存，保存時間最好不超過二個月。（二）解離酸解：從固定液中取出大蒜或洋蔥根尖，用蒸餾水漂洗，再放到 0.1mol/LHCl 中，在60C水浴中解離810分鐘，用蒸餾水漂洗后，放在染色板上，加上幾滴改 良石碳酸品紅染色液，根尖著色后即可壓片觀察。（三）壓片，把染色后的根尖放在清潔的載玻片上，用解剖針把根冠及延長區(qū)部分截去，加上少量染色液，并蓋上蓋玻片。一個解離良好的材料，只要用鑷子尖 輕

8、輕的敲打蓋玻片，分生組織細(xì)胞就可鋪展成薄薄的一層，再用毛邊紙把多余的染 色液吸干，經(jīng)顯微鏡檢查后，選擇理想的分裂細(xì)胞，再在這個細(xì)胞附近輕輕敲打， 使重疊的染色體漸漸分散，就能得到理想的分裂相，要達(dá)到這個目的，必需掌握以 下幾點(diǎn)：1. 壓片材料要少，避免細(xì)胞緊貼在一起，致使細(xì)胞和染色體沒有伸展的余地。2. 用鑷子敲打蓋玻片時，用力要均勻，若在壓片時稍不留意，使個別染色體丟 失，而被迫放棄一個良好的分裂相的細(xì)胞。（四）鏡檢觀察：要求找到有絲分裂的各個時期的典型圖像。七、作業(yè)：1、繪制有絲分裂中期圖。八、實(shí)驗(yàn)要求：1、學(xué)生要分組參與實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備，參加的小組負(fù)責(zé)在課堂上向全班報(bào)告實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 情況。2、課前寫

9、出預(yù)習(xí)報(bào)告，課前上交，方可參加實(shí)驗(yàn)，并準(zhǔn)備課堂上的實(shí)驗(yàn)原理 與實(shí)驗(yàn)基本步驟的提問。3、攜帶必備的工具參加實(shí)驗(yàn)，如鉛筆、實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙、白大衣、教材等。4、在課堂上完成作業(yè)。5、在鏡檢觀察時，如找到所要求的圖像，要請老師檢查一下再畫圖。實(shí)驗(yàn)染色體組型分析一、實(shí)驗(yàn)原理各種生物的染色體數(shù)目是恒定的。大多數(shù)高等動植物是二倍體（ diploid ）。也 就是說，每一個體細(xì)胞含有兩組同樣的染色體，用 2n 表示。其中與性別直接有關(guān) 的染色體，即性染色體，可以不成對。每一個配子帶有一組染色體，叫做單倍體（ haploid ），用 n 表示。兩性配子結(jié)合后， 具有兩組染色體， 成為二倍體的體細(xì)胞。 如蠶豆的體細(xì)胞

10、2n=12,它的配子n=6,玉米的體細(xì)胞2n=20,配子n=10。水稻2n=24, n=12。有些高等植物還是多倍體。染色體在復(fù)制以后， 縱向并列的兩個染色單體 （ chromatids ），往往通過著絲粒 （ centromere ）聯(lián)在一起。著絲粒在染色體上的位置是固定的。由于著絲粒位置的 不同，可以把染色體分成相等或不等的兩臂 （arms）,造成中間著絲粒，亞中間著絲 粒、亞端部著絲粒和端部著絲粒等形態(tài)不同的染色體。此外，有的染色體還含有隨 體或次級縊痕。所有這些染色體的特異性構(gòu)成一個物種的染色體組型。染色體組型 分析是細(xì)胞遺傳學(xué)、 現(xiàn)代分類學(xué)和進(jìn)化理論的重要研究手段， 也是一種簡便的方

11、法。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 學(xué)習(xí)分析染色體組型，計(jì)算有關(guān)數(shù)據(jù)。三、實(shí)驗(yàn)材料由實(shí)驗(yàn)室提供染色體制片或放大照片。四、實(shí)驗(yàn)器具和藥品 鑷子，剪刀，繪圖紙。五、實(shí)驗(yàn)說明 染色體組型分析方法分為兩大類，一類是分析體細(xì)胞有絲分裂時期的染色體數(shù) 目和形態(tài)。另一類是分析減數(shù)分裂時期的染色體數(shù)目和形態(tài)， 均能得到染色體組型。 這里我們要做的是有絲分裂時期的分析。各染色體的長臂與短臂之比稱為臂率。臂率為1.0 1.7的歸為中間著絲粒染色體，用（M表示。1.7 3.0的歸為亞中間著絲粒染色體，用（SM表示。3.0 7.0的歸為亞端部著絲粒染色體，用（St）表示。 7.0 更大的歸為端部著絲粒染色體，用（Ot）表示。用 S

12、AT 代表具隨體的染色體， 計(jì)算染色體長度時， 可以包括隨體也可以不包括， 但均要注明。六、實(shí)驗(yàn)步驟（一）有絲分裂時期染色體組型分析1. 測量：根據(jù)放大照片測量、記錄染色體形態(tài)測量數(shù)據(jù)如下：1臂空吐F曲件（P）< 著絲粒指數(shù)二婪5 K100I汝染色Ph氏度(3)總?cè)旧w長度=該細(xì)胞單倍體全部染色體長度（包括性染色體）之和“一2宀斑個染色休的長度總as列表（表格于實(shí)驗(yàn)結(jié)果中）配對：根據(jù)測量數(shù)據(jù)，即染色體相對長度、臂率、著絲粒指數(shù)、次縊痕的有無相對長度=X 100（5）（6）及位置、隨體的形狀和大小等進(jìn)行同源染色體的剪貼配對。（7）染色體排列：染色體對從大到小，短臂向上、長臂向下，各染色體的

13、著絲粒排 在一條直線上。有特殊標(biāo)記的染色體（如含有隨體的）以及性染色體等可單獨(dú)排列。（8）翻拍或繪圖。完成上述步驟的染色體剪貼，可以通過翻拍攝影或描圖成為染色 體組型圖。高等植物屬異源多倍體種類的較多，進(jìn)行組型分析時，不完全根據(jù)染色體的大 小進(jìn)行排列，而事先要根據(jù)系統(tǒng)發(fā)育的來源進(jìn)行分組，然后各組按大小進(jìn)行編排。 例如，人工培育的小黑麥。來自小麥的染色體組是 AABBD，來自于黑麥的染色體組 是RR組型分析時不僅應(yīng)將 RR分開，而且小麥本身是個天然的異源多倍體，又應(yīng) 分成AA BB DD組幾組進(jìn)行分析。經(jīng)常見到的植物如棉花、煙草、馬鈴薯以及許 多果樹、花卉均具有多倍體品種，分析時應(yīng)特別注意。七、

14、作業(yè) 列表并說明。八、實(shí)驗(yàn)要求：1、課前寫出預(yù)習(xí)報(bào)告，課前上交，方可參加實(shí)驗(yàn)，并準(zhǔn)備課堂上的實(shí)驗(yàn)原理 與實(shí)驗(yàn)基本步驟的提問。2、攜帶必備的工具參加實(shí)驗(yàn)，如尺、鉛筆、實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙、白大衣、教材等。3、在課堂上完成作業(yè)。4、在鏡檢觀察時，如找到所要求的圖像，要請老師檢查。實(shí)驗(yàn)三 減數(shù)分裂一、實(shí)驗(yàn)原理減數(shù)分裂是一種特殊方式的細(xì)胞分裂，僅在配子形成過程中發(fā)生。這一過程的 特點(diǎn)是：連續(xù)進(jìn)行兩次核分裂，而染色體只復(fù)制一次，結(jié)果形成四個核，每個核只 含單倍數(shù)的染色體，即染色體數(shù)減少一半，所以稱作減數(shù)分裂。另外一個特點(diǎn)是前 期特別長，而且變化復(fù)雜，包括同源染色體的配對、交換與分離等。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 學(xué)習(xí)油鏡的

15、使用。2. 掌握減數(shù)分裂的各時期特征。三、實(shí)驗(yàn)材料減數(shù)分裂裝片四、實(shí)驗(yàn)器具和藥品1. 用具：裝片、吸水紙，顯微鏡。2. 藥品：二甲苯、石蠟油。五、實(shí)驗(yàn)說明在植物花粉形成過程中，花藥內(nèi)的一些細(xì)胞分化成小抱子母細(xì)胞 （2n）,每個小 孢子母細(xì)胞進(jìn)行二次連續(xù)的細(xì)胞分裂 （第一次減數(shù)分裂和第二次減數(shù)分裂） 。每一小 抱子母細(xì)胞產(chǎn)生四個子細(xì)胞，每個子細(xì)胞就是一個小抱子。小抱子內(nèi)的染色體數(shù)目 是體細(xì)胞的一半。在動物的有性生殖過程中，也有一個由雙倍體到單倍體的減數(shù)過程。動物的精巢分 化出精母細(xì)胞，精母細(xì)胞減數(shù)分裂，形成單倍染色體的精子。在適當(dāng)?shù)臅r機(jī)采集植物的花蕾或動物的精巢，經(jīng)固定、染色壓片后，就可以在 顯

16、微鏡下觀察到細(xì)胞的減數(shù)分裂。整個減數(shù)分裂可分為下列各個時期。第一次減數(shù)分裂前期I細(xì)線期：第一次分裂開始，染色質(zhì)濃縮為幾條細(xì)而長的細(xì)線。每一染色體已 復(fù)制為二個單體，但在顯微鏡下還看不出染色體的雙重性。同源染色體配對完畢，這種配對的染色體叫雙價體，每個雙價體含 有四個染色單體，但僅有兩個著絲粒。染色體繼續(xù)短粗。配對的同源染色體開始分開。由于染色單體間起過交換，同源染色體有交叉現(xiàn)象。染色體螺旋化程度加深。又叫終變期，交叉向染色體端部移動，交叉數(shù)減少，染色體變得更 短粗。濃縮期末核膜消失。中期I各個雙價體排列在赤道上，紡錘體形成，兩個同源染色體上的著絲粒逐漸遠(yuǎn)離。雙價體開始分離。染色體數(shù)仍為 2n，

17、但每一染色體含有兩個染色單體。后期I兩條同源染色體分開，分別移向兩極。每一染色體有一著絲粒，帶著兩個染雙線期：偶線期：染色體形態(tài)與細(xì)線期沒有多大變化，同源染色體開始配對。 粗線期：色單體。每一極得到 n 條染色體。染色體數(shù)已減半。末期I染色體解旋，又呈絲狀，核膜形成，胞質(zhì)分裂，成為二個子細(xì)胞。間期 在第二次分裂開始以前，兩個子細(xì)胞進(jìn)入間期。但有的植物如延齡草 (Trillium )和大多數(shù)動物不經(jīng)過末期和間期，直接進(jìn)入第二次減數(shù)分裂的 晚前期。第二次減數(shù)分裂前期n染色體縮短變粗，染色體開始清晰起來。每個染色體含有一個著絲粒和縱向 排列的兩條染色單體。前期快結(jié)束，染色體更短粗，核膜消失。中期n染

18、色體排列在赤道面上，每個染色體含一個著絲粒、兩條染色單體。兩條染 色單體開始分離。此時細(xì)胞的染色體數(shù)為 n，每一染色體有兩條染色單體。 后期n兩條染色單體分離，移向兩極，每極含 n條染色體。末期n染色體逐漸解螺旋，變?yōu)榧?xì)絲狀，核膜重建，核仁重新形成。胞質(zhì)分裂，各 成為兩個子細(xì)胞。減數(shù)分裂結(jié)束， 一個細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成四個子細(xì)胞， 每個子細(xì)胞中只有 n 個染色 體。因?yàn)榧?xì)胞分裂兩次，染色體只復(fù)制一次。六、實(shí)驗(yàn)步驟1、取減數(shù)分裂各時期裝片觀察，找到各時期典型圖像，用油鏡觀察。七、作業(yè) 1、寫出油鏡使用注意事項(xiàng)。2、列表比較減數(shù)分裂與有絲分裂的區(qū)別。八、實(shí)驗(yàn)要求：1、課前寫出預(yù)習(xí)報(bào)告，課前上交，方可

19、參加實(shí)驗(yàn)，并準(zhǔn)備課堂上的實(shí)驗(yàn)原理 與實(shí)驗(yàn)基本步驟的提問。3、攜帶必備的工具參加實(shí)驗(yàn)，如鉛筆、實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙、白大衣、教材等。4、在課堂上完成作業(yè)。實(shí)驗(yàn)四人工誘發(fā)多倍體植物一、實(shí)驗(yàn)原理自然界各種生物的染色體數(shù)目是相當(dāng)恒定的，這是物種的重要特征。例如玉米 體細(xì)胞染色體有20個，配成10對。遺傳學(xué)上把一個配子的染色體數(shù)， 稱為染色體 組（或稱基因組）用n表示。如玉米染色體組內(nèi)包含10個染色體，它的基數(shù)n=10。 一個染色體組內(nèi)每個染色體的形態(tài)和功能各不相同，但又互相協(xié)調(diào)，共同控制生物 的生長和發(fā)育、遺傳和變異。由于各種生物的來源不同，細(xì)胞核內(nèi)可能具有一個或一個以上的染色體組，凡 是細(xì)胞核中含有一套完整染

20、色體組的就叫做單倍體，也用n表示。具有兩套染色體組的生物體稱為二倍體，以 2n表示。細(xì)胞內(nèi)多于兩套染色體組的生物體稱為多倍 體。例如三倍體（3n）、四倍體（4n）、六倍體（6n）等，這類染色體數(shù)的變化是以 染色體組為單位的增減，所以稱作整倍體。在整倍體中，又可按染色體組的來源，區(qū)分為同源多倍體和異源多倍體。凡增 加的染色體組來自同一物種或者是原來的染色體組加倍的結(jié)果，稱為同源多倍體。 如果增加的染色體組來自不同的物種，則稱為異源多倍體。多倍體普遍存在于植物界，目前已知道被子植物中有1/3或更多的物種是多倍 體，如小麥屬（Triticum ）染色體基數(shù)是7,屬二倍體的有一粒小麥，四倍體的有 二粒

21、小麥，六倍體的有普通小麥。除了自然界存在的多倍體物種之外，又可采用高 溫、低溫、X射線照射、嫁接和切斷等物理方法人工誘發(fā)多倍體植物。在誘發(fā)多倍 體方法中，以應(yīng)用化學(xué)藥劑更為有效。如秋水仙素、萘嵌戊烷、異生長素、富民農(nóng) 等，都可誘發(fā)多倍體，其中以秋水仙素效果最好，使用最為廣泛。秋水仙素是由百合科植物秋種番紅花秋水仙（Colchicumautumnale ）的種子及器官中提煉出來的一種生物堿。化學(xué)分子式為5訓(xùn)總畀g十具有麻醉作用，對植物種子、幼芽、花蕾、花粉、嫩枝等可產(chǎn)生誘變作用。它的主要作用是抑 制細(xì)胞分裂時紡錘體的形成，使染色體不走向兩極而被阻止在分裂中期，這樣細(xì)胞 不能繼續(xù)分裂，從而產(chǎn)生染色

22、體數(shù)目加倍的核。若染色體加倍的細(xì)胞繼續(xù)分裂，就 形成多倍性的組織，由多倍性組織分化產(chǎn)生的性細(xì)胞，所產(chǎn)生的配子是多倍性的， 因而也可通過有性繁殖方法把多倍體繁殖下去。多倍體已成功地應(yīng)用于植物育種，用人工方法誘導(dǎo)的多倍體，可以得到一般二 倍體所沒有的優(yōu)良經(jīng)濟(jì)性狀，如粒大、穗長、抗病性強(qiáng)等。三倍體西瓜、三倍體甜 菜、八倍體小黑麥已在生產(chǎn)上應(yīng)用。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 了解人工誘發(fā)多倍體植物的原理、方法及其在植物育種上的意義。2. 觀察多倍體植物，鑒別植物染色體數(shù)目的變化及引起植物其它器官的變異。三、實(shí)驗(yàn)材料 洋蔥的鱗莖。四、實(shí)驗(yàn)器具和藥品1. 藥品：0.1 和 0.025 秋水仙素溶液， 1mol/LHC

23、l 溶液，改良石碳酸品紅溶 液（配方見實(shí)驗(yàn)一），碘化鉀溶液。五、實(shí)驗(yàn)說明 染色體加倍后必須進(jìn)行鑒別。 同源多倍體主要是根據(jù)形態(tài)特性來判斷， 如葉色、 葉形及氣孔和花粉粒的大小。最為可靠的方法，是制做根尖壓片，然后檢查細(xì)胞內(nèi) 的染色體數(shù)目，只有染色體數(shù)目加倍了，才能證明植株已誘變成四倍體。六、實(shí)驗(yàn)步驟（一）把洋蔥2n=16鱗莖浸在0.1 %秋水仙素溶液24小時。（二）用自來水沖洗 23 次。（三）同期浸泡未經(jīng)處理的洋蔥鱗莖作為對照。（四）鑒定多倍體植物1. 觀察四倍體洋蔥、二倍體洋蔥根尖的形態(tài)區(qū)別，細(xì)胞大小區(qū)別。2. 制作根尖細(xì)胞壓片，檢查染色體數(shù)目（見實(shí)驗(yàn)一） 。七、作業(yè)1、列出染色體人工加倍

24、的方法以及鑒別方法。八、實(shí)驗(yàn)要求：1、學(xué)生要分組參與實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備，參加的小組負(fù)責(zé)在課堂上向全班報(bào)告實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 情況。2、課前寫出預(yù)習(xí)報(bào)告，課前上交，方可參加實(shí)驗(yàn)，并準(zhǔn)備課堂上的實(shí)驗(yàn)原理 與實(shí)驗(yàn)基本步驟的提問。3、攜帶必備的工具參加實(shí)驗(yàn)，如鉛筆、實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙、白大衣、教材等。4、在課堂上完成作業(yè)。5、在鏡檢觀察時，如找到所要求的圖像，要請老師檢查。實(shí)驗(yàn)五 植物的離體培養(yǎng)和快速繁殖一、實(shí)驗(yàn)原理分化了的植物根、莖、葉細(xì)胞往往具有全能性，在一定條件下進(jìn)行離體培養(yǎng)， 給于一定的營養(yǎng)與激素，可以脫分化為愈傷組織，由愈傷組織制備成細(xì)胞懸浮液， 在一定的條件下經(jīng)振蕩培養(yǎng)，逐漸形成具有兩極性的胚狀體，經(jīng)過進(jìn)一步的分化培

25、 養(yǎng)，給于不同的營養(yǎng)和激素成分，又可以生出完整的小植株。植物的脫分化和分化 培養(yǎng)，證明分化了的植物細(xì)胞仍具備形成全整植株所需要的全套基因。在一定條件 下，活動的基因可以關(guān)閉、已關(guān)閉的基因又可以重新啟動、再行由胚到成熟植株發(fā) 育過程中有關(guān)基因的先后活動程序。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握無菌操作方法，將胡蘿卜貯藏根培養(yǎng)成為愈傷組織。三、實(shí)驗(yàn)材料 胡蘿卜貯藏根每組二根。四、實(shí)驗(yàn)器具和藥品每組鋁飯盒3個，大培養(yǎng)皿2套，250毫升燒杯2只，漂白粉過濾液200毫 升, 70%酒精，酒精棉花，鑷子2把，保安刀2把，小鑷1把，無菌水。脫分化培養(yǎng)基各組6瓶，30毫升/瓶MS培養(yǎng)基：每升中含CclCln *2H,00.

26、11 克EXO"1. 9'克1. 65 克EH.POm0. 15 克MeSO,叫00. 37 AVInSO.j 地022. 3毫克ZnSO 7H.011. 0老克& 2提克KI0. 33竜克CuSOj *5址00. 025庭克 2時0. 25毫克CoCln -6冬00. 025毫克FeSO.j 了唧27. S 恵克Na.EDTA37. 3怎克Nicotinieacid （煙酸0. 毫克ThiamineHCl （）Oh 1奄血FyridoxineHCl （ Bg ）0, 1奄克丨風(fēng)酸3.0奄克肌-肌禪100. 0垂克20. 0 克固體培養(yǎng)基： MS 液體加 0.8 瓊脂 脫分化培養(yǎng)： MS 培養(yǎng)基加 2， 4D2 毫克/ 升BA 0.2 毫克/ 升五、實(shí)驗(yàn)說明培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于激素的成分和含量上，說明各種激素的出現(xiàn)和含量改變 對于植物組織分化起著重要的作用。許多植物從脫分化到分化過程對培養(yǎng)基里激