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1、實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度的高滲葡萄糖溶液對(duì)蟾蜍坐骨神經(jīng)-腓腸肌收縮的影響張秀敏40508040 王黎40508038于浩60508018申靈玲40508027實(shí)驗(yàn)日期:2008年4月21日 周一晚一、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1.1、目的:觀察不同濃度的高滲葡萄糖溶液對(duì)蟾蜍坐骨神經(jīng)-腓腸肌收縮的影響。1.2、選題依據(jù):有人做過(guò)以下實(shí)驗(yàn):取蟾蜍坐骨神經(jīng)-脛腓神經(jīng),用電生理方法分別測(cè)定其在三種高滲葡萄糖溶液(任氏液中分別加入10%,20%,40%葡萄糖),及20% 甘露醇注射液中其動(dòng)作電位的幅度及傳導(dǎo)速度的變化. 結(jié)果:三種高滲溶液均可使動(dòng)作電位幅度降低,傳導(dǎo)速度減慢,在一定范圍內(nèi)其效果與滲透壓高低明顯呈正相關(guān)。結(jié)論:高滲
2、透壓能通過(guò)脫水作用等機(jī)制對(duì)神經(jīng)動(dòng)作電位進(jìn)行抑制。既然葡萄糖溶液能影響蟾蜍坐骨神經(jīng)-脛腓神經(jīng)的動(dòng)作電位的幅度及傳導(dǎo)速度,而腓腸肌又是在坐骨神經(jīng)的支配下收縮的,于是,我們就有了這樣一個(gè)思路:葡萄糖溶液是否也能影響蟾蜍坐骨神經(jīng)-腓腸肌的收縮?為了探索這個(gè)問(wèn),我們?cè)谇叭藢?shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)了這個(gè)實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度的高滲葡萄糖題溶液對(duì)蟾蜍坐骨神經(jīng)-腓腸肌收縮的影響。1.3、參考文獻(xiàn):1姜景衛(wèi) 實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度的高滲葡萄糖溶液對(duì)蟾蜍坐骨神經(jīng)-腓腸肌收縮的影響 中國(guó)期刊網(wǎng) 當(dāng)代醫(yī)學(xué)(學(xué)術(shù)版) 2007/01二、實(shí)驗(yàn)報(bào)告2.1 材料與方法2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料蟾蜍;手術(shù)器械一套;神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒;標(biāo)準(zhǔn)任氏液;1
3、0%葡萄糖溶液(任氏液中加入10%葡萄糖晶體,下同);20%及40%葡萄糖溶液;20%甘露醇注射液;RM6240計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法分解制作蟾蜍坐骨神經(jīng)脛腓神經(jīng)標(biāo)本。結(jié)扎后浸入任氏液中備用。設(shè)置刺激器參數(shù)為:粗電壓、單刺激、手動(dòng)外觸發(fā)、強(qiáng)度3.65v、波寬0.05s、延時(shí)5ms、頻率10.0、放大倍數(shù)200倍。將標(biāo)本置于神經(jīng)標(biāo)本盒內(nèi),刺激并記錄其正常狀態(tài)下動(dòng)作電位的幅值(A)與時(shí)程(D),用脫脂棉球浸取10%的高滲液置于兩引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)干上,每隔2min記錄一次動(dòng)作電位的幅值與時(shí)程,直至動(dòng)作電位消失或即將消失。取出該神經(jīng)干浸泡于任氏液中,直至動(dòng)作電位恢復(fù)正常,再取出用以測(cè)量加
4、20%、40%高滲液及20%甘露醇注射液的結(jié)果(方法同10%高滲液)。用其它神經(jīng)標(biāo)本重復(fù)上述操作。三、試驗(yàn)結(jié)果(圖見(jiàn)附件)標(biāo)本A最適刺激強(qiáng)度0.075V潛伏期(ms)收縮期(ms)舒張期(ms)峰峰值(g)10%葡萄糖12.552.5161.251.63020%葡萄糖45(102.27)2750.55740%葡萄糖32.5(75.8)222.50.46920%甘露醇35(87.5)1750.447標(biāo)本B最適刺激強(qiáng)度0.42V潛伏期(ms)收縮期(ms)舒張期(ms)峰峰值(g)10%葡萄糖10010551029.9320%葡萄糖9011555040.3840%葡萄糖859048542.6120
5、%甘露醇608543543.60四、分析與討論本次試驗(yàn)因?yàn)闀r(shí)間關(guān)系,只做了兩組對(duì)照,而且實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)相差很大,因此實(shí)驗(yàn)結(jié)果不代表真實(shí)情況,下面就從我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果談一下:我們認(rèn)為高滲葡萄糖溶液的作用機(jī)制有二方面:一方面,高滲透壓導(dǎo)致神經(jīng)脫水。神經(jīng)纖維脫水后,直徑變小,電阻增大,從而導(dǎo)致其傳導(dǎo)動(dòng)作電位的機(jī)能下降,甚至出現(xiàn)神經(jīng)傳導(dǎo)阻滯。從而影響肌肉收縮能力(有文獻(xiàn)報(bào)道,神經(jīng)軸突中的水份被吸出80%,神經(jīng)傳導(dǎo)即停止)。另一方面,雖然葡萄糖作為一種能量物質(zhì),進(jìn)入細(xì)胞后使其新陳代謝旺盛,神經(jīng)傳導(dǎo)機(jī)能增強(qiáng)所以實(shí)驗(yàn)中我們?cè)O(shè)計(jì)了20%的甘露醇作為對(duì)照,看到底是哪一種因素起主導(dǎo)作用。若葡萄糖可作為一種能量物質(zhì),進(jìn)入細(xì)
6、胞后使其新陳代謝旺盛,神經(jīng)傳導(dǎo)機(jī)能增強(qiáng),那么用20%甘露醇處理的標(biāo)本的時(shí)程應(yīng)比用20%葡萄糖處理的標(biāo)本所需的傳導(dǎo)時(shí)間大。而實(shí)際測(cè)得用20%甘露醇處理的標(biāo)本的時(shí)程比用20%葡萄糖處理的標(biāo)本的時(shí)程小,這說(shuō)明在20%濃度下的葡萄糖溶液對(duì)標(biāo)本的作用只有滲透作用。 按照預(yù)期,隨著葡萄糖溶液濃度的增加,傳導(dǎo)速度應(yīng)該依次變慢,各時(shí)程應(yīng)該變長(zhǎng)。但由以上的圖表可以看出,用20%葡萄糖溶液處理的標(biāo)本相對(duì)于用10%的葡萄糖溶液處理的標(biāo)本的時(shí)程在增加,但用40%的葡萄糖溶液處理的標(biāo)本相對(duì)于用20%葡萄糖溶液處理的標(biāo)本的時(shí)程反而減小。這說(shuō)明在10%,20%的濃度下,標(biāo)本的確應(yīng)為滲透壓的增高而使得神經(jīng)傳導(dǎo)阻滯,從而影響肌肉收縮能力。但在40%的濃度下,葡萄糖溶液的作用不僅僅是高滲透壓導(dǎo)致神經(jīng)脫水,也有作為能源物質(zhì)使神經(jīng)傳導(dǎo)機(jī)能增強(qiáng),肌肉收縮的速度變快,所以用40%的葡萄糖溶液處理的標(biāo)本相對(duì)于用20%的葡萄糖溶液處理的標(biāo)本的時(shí)程略有減小。 我們?cè)诒敬螌?shí)驗(yàn)中的具體操作中有很多失誤,如應(yīng)實(shí)驗(yàn)時(shí)間
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