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1、實驗觀察不同濃度的高滲葡萄糖溶液對蟾蜍坐骨神經-腓腸肌收縮的影響張秀敏40508040 王黎40508038于浩60508018申靈玲40508027實驗日期:2008年4月21日 周一晚一、實驗設計1.1、目的:觀察不同濃度的高滲葡萄糖溶液對蟾蜍坐骨神經-腓腸肌收縮的影響。1.2、選題依據(jù):有人做過以下實驗:取蟾蜍坐骨神經-脛腓神經,用電生理方法分別測定其在三種高滲葡萄糖溶液(任氏液中分別加入10%,20%,40%葡萄糖),及20% 甘露醇注射液中其動作電位的幅度及傳導速度的變化. 結果:三種高滲溶液均可使動作電位幅度降低,傳導速度減慢,在一定范圍內其效果與滲透壓高低明顯呈正相關。結論:高滲
2、透壓能通過脫水作用等機制對神經動作電位進行抑制。既然葡萄糖溶液能影響蟾蜍坐骨神經-脛腓神經的動作電位的幅度及傳導速度,而腓腸肌又是在坐骨神經的支配下收縮的,于是,我們就有了這樣一個思路:葡萄糖溶液是否也能影響蟾蜍坐骨神經-腓腸肌的收縮?為了探索這個問,我們在前人實驗的基礎上,設計了這個實驗:實驗觀察不同濃度的高滲葡萄糖題溶液對蟾蜍坐骨神經-腓腸肌收縮的影響。1.3、參考文獻:1姜景衛(wèi) 實驗觀察不同濃度的高滲葡萄糖溶液對蟾蜍坐骨神經-腓腸肌收縮的影響 中國期刊網 當代醫(yī)學(學術版) 2007/01二、實驗報告2.1 材料與方法2.1.1 實驗材料蟾蜍;手術器械一套;神經標本屏蔽盒;標準任氏液;1
3、0%葡萄糖溶液(任氏液中加入10%葡萄糖晶體,下同);20%及40%葡萄糖溶液;20%甘露醇注射液;RM6240計算機采集系統(tǒng)2.1.2 實驗方法分解制作蟾蜍坐骨神經脛腓神經標本。結扎后浸入任氏液中備用。設置刺激器參數(shù)為:粗電壓、單刺激、手動外觸發(fā)、強度3.65v、波寬0.05s、延時5ms、頻率10.0、放大倍數(shù)200倍。將標本置于神經標本盒內,刺激并記錄其正常狀態(tài)下動作電位的幅值(A)與時程(D),用脫脂棉球浸取10%的高滲液置于兩引導電極之間的神經干上,每隔2min記錄一次動作電位的幅值與時程,直至動作電位消失或即將消失。取出該神經干浸泡于任氏液中,直至動作電位恢復正常,再取出用以測量加
4、20%、40%高滲液及20%甘露醇注射液的結果(方法同10%高滲液)。用其它神經標本重復上述操作。三、試驗結果(圖見附件)標本A最適刺激強度0.075V潛伏期(ms)收縮期(ms)舒張期(ms)峰峰值(g)10%葡萄糖12.552.5161.251.63020%葡萄糖45(102.27)2750.55740%葡萄糖32.5(75.8)222.50.46920%甘露醇35(87.5)1750.447標本B最適刺激強度0.42V潛伏期(ms)收縮期(ms)舒張期(ms)峰峰值(g)10%葡萄糖10010551029.9320%葡萄糖9011555040.3840%葡萄糖859048542.6120
5、%甘露醇608543543.60四、分析與討論本次試驗因為時間關系,只做了兩組對照,而且實驗數(shù)據(jù)相差很大,因此實驗結果不代表真實情況,下面就從我們的實驗結果談一下:我們認為高滲葡萄糖溶液的作用機制有二方面:一方面,高滲透壓導致神經脫水。神經纖維脫水后,直徑變小,電阻增大,從而導致其傳導動作電位的機能下降,甚至出現(xiàn)神經傳導阻滯。從而影響肌肉收縮能力(有文獻報道,神經軸突中的水份被吸出80%,神經傳導即停止)。另一方面,雖然葡萄糖作為一種能量物質,進入細胞后使其新陳代謝旺盛,神經傳導機能增強所以實驗中我們設計了20%的甘露醇作為對照,看到底是哪一種因素起主導作用。若葡萄糖可作為一種能量物質,進入細
6、胞后使其新陳代謝旺盛,神經傳導機能增強,那么用20%甘露醇處理的標本的時程應比用20%葡萄糖處理的標本所需的傳導時間大。而實際測得用20%甘露醇處理的標本的時程比用20%葡萄糖處理的標本的時程小,這說明在20%濃度下的葡萄糖溶液對標本的作用只有滲透作用。 按照預期,隨著葡萄糖溶液濃度的增加,傳導速度應該依次變慢,各時程應該變長。但由以上的圖表可以看出,用20%葡萄糖溶液處理的標本相對于用10%的葡萄糖溶液處理的標本的時程在增加,但用40%的葡萄糖溶液處理的標本相對于用20%葡萄糖溶液處理的標本的時程反而減小。這說明在10%,20%的濃度下,標本的確應為滲透壓的增高而使得神經傳導阻滯,從而影響肌肉收縮能力。但在40%的濃度下,葡萄糖溶液的作用不僅僅是高滲透壓導致神經脫水,也有作為能源物質使神經傳導機能增強,肌肉收縮的速度變快,所以用40%的葡萄糖溶液處理的標本相對于用20%的葡萄糖溶液處理的標本的時程略有減小。 我們在本次實驗中的具體操作中有很多失誤,如應實驗時間
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