機(jī)能實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1、不同濃度乙醇對(duì)家兔離體小腸平滑肌活動(dòng)的影響機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)班級(jí)：臨床1302學(xué)號(hào)：132203118姓名：秦佳 睿精選課題名稱：不同濃度乙醇對(duì)家兔離體小腸平滑肌活動(dòng)的影響設(shè)計(jì)思路中華酒文化從杜康釀酒至今已有數(shù)千年的歷史，酒文化的形式發(fā)展也從單一的 獨(dú)自品味酌酒演變成當(dāng)下形式多樣的“酒文化”。勸酒敬酒更是在“酒文化”的 特色之一。然而，當(dāng)下有很多人在“享受”酒文化樂趣的同時(shí)，過度飲酒導(dǎo)致健 康損害，引發(fā)事故悲劇的現(xiàn)狀，也令人十分擔(dān)憂。乙醇進(jìn)入人體，能產(chǎn)生多方面的破壞作用。它使神經(jīng)系統(tǒng)從興奮到高度抑制， 嚴(yán)重地破壞神經(jīng)系統(tǒng)的正常功能。據(jù)臨床觀察和流行病學(xué)調(diào)查表明，乙醇攝入過 多可導(dǎo)致心肌病變、胃炎、

2、潰瘍等，還可使高血壓病的發(fā)病率升高【11 21常飲酒的人喉癌及消化道癌發(fā)病率明顯增加?！?】【4】消化道是乙醇進(jìn)入人體最先受刺激的部位， 有報(bào)道，乙醇進(jìn)入胃內(nèi)可造成胃粘 膜損傷【5】。乙醇對(duì)心肌細(xì)胞鈉離子跨膜內(nèi)流有一定抑制用，對(duì)心肌細(xì)胞內(nèi)貯存 的鈣離子釋放有顯著抑制作用。因認(rèn)為乙醇對(duì)心肌細(xì)胞收縮的抑制作用可能是通 過改變肌水平或肌漿對(duì)鈣離子的轉(zhuǎn)運(yùn)而實(shí)現(xiàn)的【6，但不影響細(xì)胞外跨膜內(nèi)流。 乙醇對(duì)小腸平滑肌的抑制作用可能與乙醇抑制鈉離子、鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)。本實(shí)驗(yàn) 以家兔離體小腸為標(biāo)本，觀察不同濃度乙醇對(duì)離體小腸平滑肌的影響，進(jìn)一步了解乙醇與人體健康的關(guān)系。一、材料和方法（一）實(shí)驗(yàn)對(duì)象及分組選用體重為2

3、-3kg健康家兔15只，雌雄不拘。（二）材料1、器械：恒溫浴槽裝置一套（麥?zhǔn)显〔?、恒溫控制儀、氧氣） 、萬(wàn)能支架、 雙凹夾、燒杯、1ml注射器、手術(shù)器械。2、儀器：生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)、張力換能器。3、藥品：臺(tái)式液、烏拉坦、不同濃度乙醇 （5%、10%、15%、17.5%）?！緩S家批號(hào)】麥?zhǔn)显〔郏罕本﹦P輝盛達(dá)科技發(fā)展有限公司 ，KMYC恒溫控制儀：博宇創(chuàng)智（北京）科技發(fā)展有限公司，XD861-A萬(wàn)能支架：北京凱輝盛達(dá)科技發(fā)展有限公司 ，KWNJ-2雙凹夾：北京凱輝盛達(dá)科技發(fā)展有限公司 ，KHDJ注射器：江蘇治宇醫(yī)療器材有限公司 ，1ml手術(shù)器械：深圳市瑞沃德生命科技有限公司，RWD生物信號(hào)采集

4、處理系統(tǒng)：南京美易科技有限公司，MedLab U/8c502張力換能器：北京眾實(shí)迪創(chuàng)科技發(fā)展有限責(zé)任公司，ZS臺(tái)式液：南京森貝伽生物科技有限公司，SBJ-0213烏拉坦：上海麥恪林生化科技有限公司,U820333無水乙醇：上海高朗化工科技有限公司，L05002（三）實(shí)驗(yàn)步驟與方法1、家兔離體小腸平滑肌標(biāo)本的制備家兔在實(shí)驗(yàn)前24h禁止進(jìn)食，自由飲水。實(shí)驗(yàn)時(shí)采取耳緣靜脈注射烏拉坦進(jìn) 行麻醉。立即放到解剖臺(tái)上固定四肢，剪掉腹部的毛，沿腹中線切開腹腔找到胃 幽門與十二指腸交界處，以此為起點(diǎn)，先將腸系膜沿腸緣分離，再截取小腸近端 腸管20cm ,置于盛有預(yù)冷臺(tái)式液的燒杯中，用注射器抽取臺(tái)氏液洗凈腸內(nèi)容物

5、。 將其剪成23cm的腸段作為實(shí)驗(yàn)標(biāo)本。2、實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的連接取出一段23cm家兔離體腸段，一端用細(xì)線系于張力換能器的懸梁臂上，另 一端固定在掛鉤上，兩者成對(duì)角線。并將家兔離體腸段同通氣鉤放入平滑肌浴槽 中，加入臺(tái)氏液，使家兔離體腸段全部浸入臺(tái)氏生理溶液中， 注意不要使腸段貼 壁，并勻速通入空氣，保持每秒 12個(gè)氣泡。浴槽外的水溫保持 370C,使平滑 肌浴槽的溫度也保持370C。張力傳感器與MSP-007生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng)的輸入接 口 CH- 1連接。打開MSP-007生物機(jī)能試驗(yàn)系統(tǒng),選擇1通道，選擇“張力” 信號(hào)，設(shè)置控制參數(shù)。3、離體小腸平滑肌曲線的記錄先觀察正常情況下離體腸段的運(yùn)動(dòng)情況 2

6、3min ,待其運(yùn)動(dòng)穩(wěn)定后，先加入濃 度5%勺乙醇溶液，采集用藥前后 2min的波形曲線圖。然后用370C的臺(tái)氏生理 溶液沖洗腸段3次，待腸段恢復(fù)正?；顒?dòng)后，再按照上述方法依次加入10% 15% 17.5%的乙醇溶液，分別采集每次用藥前后 2min不同波形曲線圖。實(shí)驗(yàn)過程中， 注意臺(tái)氏液恒溫和不間斷均勻通氣，在每次用藥出現(xiàn)反應(yīng)后，均用 37臺(tái)氏生理 溶液沖洗腸段3次，待腸段活動(dòng)恢復(fù)正常后，再進(jìn)行下一步處理。如若實(shí)驗(yàn)過程 中腸段失去活性，就不能繼續(xù)使用，換腸段活性比較強(qiáng)的重新開始實(shí)驗(yàn)。(四)數(shù)據(jù)結(jié)果分析數(shù)據(jù)結(jié)果用均數(shù)土 S表示，用t檢驗(yàn)法.、預(yù)期結(jié)果不同濃度乙醇對(duì)家兔離體小腸平滑肌活動(dòng)的影響溶液

7、收縮幅度(g)收縮頻率(次/分)38 c臺(tái)式液5%乙醇溶液10%乙醇溶液15%乙醇溶液17.5%乙醇溶液預(yù)測(cè)1:在鈣離子流向肌漿而引起收縮過程中，膜電位逐漸升高，當(dāng)膜電位達(dá) 到一定值，鈣離子通道開始關(guān)閉，也就是說鈣離子通道是一種電壓門控通道， 而 乙醇可以和關(guān)閉的鈣離子通道可逆性結(jié)合， 從而維持后者的關(guān)閉狀態(tài)。因此：(1)收縮曲線的基線上升且?guī)缀跻恢隆?2)乙醇濃度的升高被乙醇維持的關(guān)閉著的鈣離子通道增多，波形越來越緩直 至變成一直線。(3)由于是可逆性結(jié)合故而經(jīng)臺(tái)氏液洗滌后仍能恢復(fù)。預(yù)測(cè)2:乙醇可能影響鈣泵的功能，因?yàn)槭鎻堖^程是由肌漿的鈣離子下降引起， 而鈣離子的下降主要為鈣泵的功勞。乙醇和

8、鈣泵可逆性結(jié)合來抑制鈣泵的作用， 從而使曲線停止于收縮狀態(tài)。三、討論據(jù)報(bào)道，乙醇能加強(qiáng)胃壁環(huán)行肌收縮，抑制胃粘膜分泌，破壞胃粘膜屏障，從 而造成胃粘膜損傷?！?1本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，乙醇對(duì)家兔離體小腸平滑肌活動(dòng)有 抑制性作用。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，乙醇不僅能抑制小腸平滑肌的收縮幅度，抑制收縮頻率， 同時(shí)還能抑制平滑肌張力。并且有一定的劑量效應(yīng)關(guān)系，劑量越大，對(duì)小腸的抑 制作用就越強(qiáng)。離體腸段失去外來神經(jīng)的支配，但壁內(nèi)神經(jīng)叢仍存在，在適宜條件下，仍能保 持平滑肌收縮的特性及腸壁神經(jīng)叢的作用?！?】已知小腸平滑肌的活動(dòng)是依賴 于小腸平滑肌細(xì)胞電活動(dòng)實(shí)現(xiàn)的，而小腸平滑肌動(dòng)作電位的產(chǎn)生與鈣離子和鈉離子有關(guān)。 小腸的節(jié)

9、律性活動(dòng)受小腸的基本電節(jié)律( 即漫波 ) 所控制。 通常認(rèn)為，慢波來源于縱行平滑肌細(xì)胞，也有人認(rèn)為，慢波是縱行肌與環(huán)行肌之間的Cajal 問質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的。關(guān)于慢波的產(chǎn)生機(jī)制，有兩種見解：(1) 可能與細(xì)胞膜上鈉泵活動(dòng)的周期性變化有關(guān)；(2) 也可能與細(xì)胞膜上鈉離子電導(dǎo)和氯離子電導(dǎo)變化有關(guān)?！?9】無論何種見解，慢波的產(chǎn)生可能與細(xì)胞內(nèi)Na 濃度變化有關(guān)?，F(xiàn)有研究報(bào)道， 乙醇對(duì)心肌細(xì)胞鈉離子跨膜內(nèi)流有一定抑制作用，對(duì)心肌細(xì)胞內(nèi)貯存的鈣離子釋放有顯著抑制作用。因而認(rèn)為乙醇對(duì)心肌細(xì)胞收縮的抑制作用可能是通過改變肌絲水平或肌漿對(duì)鈣離子的轉(zhuǎn)運(yùn)而實(shí)現(xiàn)的【10 】，但不影響細(xì)胞外鈣跨膜內(nèi)流?！?1 】根據(jù)上述

10、資料推測(cè)，乙醇對(duì)小腸平滑肌的抑制作用可能與乙醇抑制鈉離子和鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)。四、結(jié)論不同濃度乙醇對(duì)兔離體腸平滑肌有影響，濃度越高，收縮越強(qiáng)。五、參考文獻(xiàn)【 1 】 ChengCP， Shinabiz LittleWC Acute efects ofinildlyintixieatinplevelsofalcoholOnleft ventricularin conscious aogj JCAinInvest 1990 85： 58 61 【 2】 matsAL The relation of alcohol and CaliO vascular systemJ Ann Rev Nutr1982(

11、5) ： 1 6【 3】余德敏，酒精對(duì)健康影響的研究進(jìn)展J 中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng)，2o07(3) 【 4】方忠宏，錢董文酒對(duì)健康的影響J 中國(guó)藥物濫用防治雜志，2oo2(6) 【 5】 胡浩， 臧偉進(jìn)， 于曉紅， 等 乙醇對(duì)離體豚鼠心房肌的作用J 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2oo2(3) ：278 280【 6】解景田，謝申玲生理學(xué)實(shí)驗(yàn)M 北京：高等教育出版社，1987 126 127【 7】王立東，魏開元大黃防治實(shí)驗(yàn)性胃粘膜損傷機(jī)理分析J 生理科學(xué)，1989(3) ： 30 35 【8】張艷如.生理學(xué)M.北京：人民衛(wèi)生出版社，1999-17。- 184.【 9】姚泰人體生理學(xué)M 北京：人民衛(wèi)生出版社，2OOl： 1675 171510 aoViguredo 皿,Chang KC, Bader AJ et al . Chronic alcohol induce