機能實驗設(shè)計

1、不同濃度乙醇對家兔離體小腸平滑肌活動的影響機能學實驗設(shè)計班級：臨床1302學號：132203118姓名：秦佳 睿精選課題名稱：不同濃度乙醇對家兔離體小腸平滑肌活動的影響設(shè)計思路中華酒文化從杜康釀酒至今已有數(shù)千年的歷史，酒文化的形式發(fā)展也從單一的 獨自品味酌酒演變成當下形式多樣的“酒文化”。勸酒敬酒更是在“酒文化”的 特色之一。然而，當下有很多人在“享受”酒文化樂趣的同時，過度飲酒導致健 康損害，引發(fā)事故悲劇的現(xiàn)狀，也令人十分擔憂。乙醇進入人體，能產(chǎn)生多方面的破壞作用。它使神經(jīng)系統(tǒng)從興奮到高度抑制， 嚴重地破壞神經(jīng)系統(tǒng)的正常功能。據(jù)臨床觀察和流行病學調(diào)查表明，乙醇攝入過 多可導致心肌病變、胃炎、

2、潰瘍等，還可使高血壓病的發(fā)病率升高【11 21常飲酒的人喉癌及消化道癌發(fā)病率明顯增加?！?】【4】消化道是乙醇進入人體最先受刺激的部位， 有報道，乙醇進入胃內(nèi)可造成胃粘 膜損傷【5】。乙醇對心肌細胞鈉離子跨膜內(nèi)流有一定抑制用，對心肌細胞內(nèi)貯存 的鈣離子釋放有顯著抑制作用。因認為乙醇對心肌細胞收縮的抑制作用可能是通 過改變肌水平或肌漿對鈣離子的轉(zhuǎn)運而實現(xiàn)的【6，但不影響細胞外跨膜內(nèi)流。 乙醇對小腸平滑肌的抑制作用可能與乙醇抑制鈉離子、鈣離子轉(zhuǎn)運有關(guān)。本實驗 以家兔離體小腸為標本，觀察不同濃度乙醇對離體小腸平滑肌的影響，進一步了解乙醇與人體健康的關(guān)系。一、材料和方法（一）實驗對象及分組選用體重為2

3、-3kg健康家兔15只，雌雄不拘。（二）材料1、器械：恒溫浴槽裝置一套（麥氏浴槽、恒溫控制儀、氧氣） 、萬能支架、 雙凹夾、燒杯、1ml注射器、手術(shù)器械。2、儀器：生物信號采集處理系統(tǒng)、張力換能器。3、藥品：臺式液、烏拉坦、不同濃度乙醇 （5%、10%、15%、17.5%）?！緩S家批號】麥氏浴槽：北京凱輝盛達科技發(fā)展有限公司 ，KMYC恒溫控制儀：博宇創(chuàng)智（北京）科技發(fā)展有限公司，XD861-A萬能支架：北京凱輝盛達科技發(fā)展有限公司 ，KWNJ-2雙凹夾：北京凱輝盛達科技發(fā)展有限公司 ，KHDJ注射器：江蘇治宇醫(yī)療器材有限公司 ，1ml手術(shù)器械：深圳市瑞沃德生命科技有限公司，RWD生物信號采集

4、處理系統(tǒng)：南京美易科技有限公司，MedLab U/8c502張力換能器：北京眾實迪創(chuàng)科技發(fā)展有限責任公司，ZS臺式液：南京森貝伽生物科技有限公司，SBJ-0213烏拉坦：上海麥恪林生化科技有限公司,U820333無水乙醇：上海高朗化工科技有限公司，L05002（三）實驗步驟與方法1、家兔離體小腸平滑肌標本的制備家兔在實驗前24h禁止進食，自由飲水。實驗時采取耳緣靜脈注射烏拉坦進 行麻醉。立即放到解剖臺上固定四肢，剪掉腹部的毛，沿腹中線切開腹腔找到胃 幽門與十二指腸交界處，以此為起點，先將腸系膜沿腸緣分離，再截取小腸近端 腸管20cm ,置于盛有預冷臺式液的燒杯中，用注射器抽取臺氏液洗凈腸內(nèi)容物

5、。 將其剪成23cm的腸段作為實驗標本。2、實驗系統(tǒng)的連接取出一段23cm家兔離體腸段，一端用細線系于張力換能器的懸梁臂上，另 一端固定在掛鉤上，兩者成對角線。并將家兔離體腸段同通氣鉤放入平滑肌浴槽 中，加入臺氏液，使家兔離體腸段全部浸入臺氏生理溶液中， 注意不要使腸段貼 壁，并勻速通入空氣，保持每秒 12個氣泡。浴槽外的水溫保持 370C,使平滑 肌浴槽的溫度也保持370C。張力傳感器與MSP-007生物機能試驗系統(tǒng)的輸入接 口 CH- 1連接。打開MSP-007生物機能試驗系統(tǒng),選擇1通道，選擇“張力” 信號，設(shè)置控制參數(shù)。3、離體小腸平滑肌曲線的記錄先觀察正常情況下離體腸段的運動情況 2

6、3min ,待其運動穩(wěn)定后，先加入濃 度5%勺乙醇溶液，采集用藥前后 2min的波形曲線圖。然后用370C的臺氏生理 溶液沖洗腸段3次，待腸段恢復正?；顒雍?，再按照上述方法依次加入10% 15% 17.5%的乙醇溶液，分別采集每次用藥前后 2min不同波形曲線圖。實驗過程中， 注意臺氏液恒溫和不間斷均勻通氣，在每次用藥出現(xiàn)反應后，均用 37臺氏生理 溶液沖洗腸段3次，待腸段活動恢復正常后，再進行下一步處理。如若實驗過程 中腸段失去活性，就不能繼續(xù)使用，換腸段活性比較強的重新開始實驗。(四)數(shù)據(jù)結(jié)果分析數(shù)據(jù)結(jié)果用均數(shù)土 S表示，用t檢驗法.、預期結(jié)果不同濃度乙醇對家兔離體小腸平滑肌活動的影響溶液

7、收縮幅度(g)收縮頻率(次/分)38 c臺式液5%乙醇溶液10%乙醇溶液15%乙醇溶液17.5%乙醇溶液預測1:在鈣離子流向肌漿而引起收縮過程中，膜電位逐漸升高，當膜電位達 到一定值，鈣離子通道開始關(guān)閉，也就是說鈣離子通道是一種電壓門控通道， 而 乙醇可以和關(guān)閉的鈣離子通道可逆性結(jié)合， 從而維持后者的關(guān)閉狀態(tài)。因此：(1)收縮曲線的基線上升且?guī)缀跻恢隆?2)乙醇濃度的升高被乙醇維持的關(guān)閉著的鈣離子通道增多，波形越來越緩直 至變成一直線。(3)由于是可逆性結(jié)合故而經(jīng)臺氏液洗滌后仍能恢復。預測2:乙醇可能影響鈣泵的功能，因為舒張過程是由肌漿的鈣離子下降引起， 而鈣離子的下降主要為鈣泵的功勞。乙醇和

8、鈣泵可逆性結(jié)合來抑制鈣泵的作用， 從而使曲線停止于收縮狀態(tài)。三、討論據(jù)報道，乙醇能加強胃壁環(huán)行肌收縮，抑制胃粘膜分泌，破壞胃粘膜屏障，從 而造成胃粘膜損傷?！?1本實驗結(jié)果表明，乙醇對家兔離體小腸平滑肌活動有 抑制性作用。實驗發(fā)現(xiàn)，乙醇不僅能抑制小腸平滑肌的收縮幅度，抑制收縮頻率， 同時還能抑制平滑肌張力。并且有一定的劑量效應關(guān)系，劑量越大，對小腸的抑 制作用就越強。離體腸段失去外來神經(jīng)的支配，但壁內(nèi)神經(jīng)叢仍存在，在適宜條件下，仍能保 持平滑肌收縮的特性及腸壁神經(jīng)叢的作用?！?】已知小腸平滑肌的活動是依賴 于小腸平滑肌細胞電活動實現(xiàn)的，而小腸平滑肌動作電位的產(chǎn)生與鈣離子和鈉離子有關(guān)。 小腸的節(jié)

9、律性活動受小腸的基本電節(jié)律( 即漫波 ) 所控制。 通常認為，慢波來源于縱行平滑肌細胞，也有人認為，慢波是縱行肌與環(huán)行肌之間的Cajal 問質(zhì)細胞產(chǎn)生的。關(guān)于慢波的產(chǎn)生機制，有兩種見解：(1) 可能與細胞膜上鈉泵活動的周期性變化有關(guān)；(2) 也可能與細胞膜上鈉離子電導和氯離子電導變化有關(guān)?！?9】無論何種見解，慢波的產(chǎn)生可能與細胞內(nèi)Na 濃度變化有關(guān)?，F(xiàn)有研究報道， 乙醇對心肌細胞鈉離子跨膜內(nèi)流有一定抑制作用，對心肌細胞內(nèi)貯存的鈣離子釋放有顯著抑制作用。因而認為乙醇對心肌細胞收縮的抑制作用可能是通過改變肌絲水平或肌漿對鈣離子的轉(zhuǎn)運而實現(xiàn)的【10 】，但不影響細胞外鈣跨膜內(nèi)流?！?1 】根據(jù)上述

10、資料推測，乙醇對小腸平滑肌的抑制作用可能與乙醇抑制鈉離子和鈣離子轉(zhuǎn)運有關(guān)。四、結(jié)論不同濃度乙醇對兔離體腸平滑肌有影響，濃度越高，收縮越強。五、參考文獻【 1 】 ChengCP， Shinabiz LittleWC Acute efects ofinildlyintixieatinplevelsofalcoholOnleft ventricularin conscious aogj JCAinInvest 1990 85： 58 61 【 2】 matsAL The relation of alcohol and CaliO vascular systemJ Ann Rev Nutr1982(

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