RP-HPLC法測定鼻舒適片中芍藥苷的含量(1)

1、RP-HPLC法測定鼻舒適片中芍藥苷的含量(1)        作者：楊庚生，李少玲，程永紅，歐陽惠芳，盧 綿，吳愛鑾 【摘要】 目的 建立鼻舒適片中芍藥苷的含量測定方法。方法 采用高效液相色譜法測定芍藥苷的含量。選用ODS色譜柱，芍藥苷以0.025mol/ L磷酸二氫鉀溶液乙腈（89：11）為流動相；檢測波長為230nm。結(jié)果 芍藥苷在0.079763.988g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，=0.9999，平均回收率100.2%，RSD為2.7%。結(jié)論 鑒別方法專屬性強，定量方法簡便、準確，本含量測定方法可用于鼻舒適片的定

2、量檢測。 【關(guān)鍵詞】 鼻舒適片；芍藥苷；高效液相色譜法    【Abstract】 Objective To establish the content determination of Paeoniflorin in Bishushi tablet.Methods HPLC was performed to determine on ODS column,the mobile phase consisting of 0.025mol/L potassium dihydrogen phosphate and acetonitrile（89:11）,and

3、 its detection wavelength at 230nm.Results Paeoniflorin showed a good linear relationship in the a range of 0.079763.988g, = 0.9999. The average recovery was 100.2 and RSD was 2.7.Conclusion The established method are accurate,reproducible and can be used for the quantitation control of Bishushi tab

4、let.    【Key words】 Bishushi tablet；Paeoniflorin；HPLC    鼻舒適片由蒼耳子、野菊花、墨旱蓮、防風、白芍等十一味藥物組成的中藥制劑，清熱消炎，通竅。用于治療慢性鼻炎引起的噴嚏、流涕、鼻塞、頭痛，過敏性鼻炎，慢性鼻竇炎。鼻舒適片收載于衛(wèi)生部藥品標準中藥成方制劑第七冊。原標準項下，沒有定量檢測項目1。為了有效控制本品的質(zhì)量，進行了定量研究，制定了芍藥苷的高效液相色譜定量的方法，該方法專屬性好，重現(xiàn)性好，能有效控制產(chǎn)品的質(zhì)量?，F(xiàn)報告如下。1 儀器與試藥 &#

5、160;  1.1 儀器 Agilent 1100高效液相色譜儀，Agilent WVD檢測器；Agilent DAD檢測器（上海安捷倫公司）；依利特 Hypersil C18（10/120/7100），5m，4.6mm×250mm。    1.2 試藥 芍藥苷化學對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110736-200422，供含量測定用），甲醇、乙腈（色譜純，TEDIA company INC.，USA），磷酸二氫鉀（分析純），水（重蒸餾水）。2 方法與結(jié)果    2.1 色譜分

6、析條件 依利特 Hypersil C18（5m，4.6mm×250mm）色譜柱；以0.025mol/ L 磷酸二氫鉀溶液乙腈（89: 11）為流動相；檢測波長為230nm； 流速為1.0ml/min。在此條件下芍藥苷與其他組分達到基線分離，分離度大于1.5。    2.2 對照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥器中干燥36h的芍藥苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含30g的溶液，即得。    2.3 供試品溶液的制備 取鼻舒適片10片，除去包衣，研細，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇

7、25ml，密塞，稱定重量，超聲處理45min，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。    2.4 陰性對照品溶液制備 取自制不含白芍的處方量制劑樣品，按供試品制備方法，制成陰性對照溶液。    2.5 準確度試驗 精密吸取0.2714mg/ml的芍藥苷對照品1、2、3ml各3份，分別加入50ml錐形瓶中，水浴蒸干。精密稱取0.25g 供試品（B6A003，含量1.037mg/g，平均片重0.287g）加入上述錐形瓶中，按質(zhì)量標準方法處理，吸取10l注入液相色譜儀中進行含量測定，計算回收率，結(jié)果見

8、表1。    2.6 重復(fù)性試驗 取供試品溶液溶液，按含量測定方法重復(fù)測定6次。芍藥苷峰面積RSD為1.3%。    2.7 專屬性試驗 制備對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液溶液，精密吸取各10l，注入液相色譜儀，照上述色譜條件試驗，記錄色譜圖。結(jié)果供試品色譜圖中有與芍藥苷標準品保留時間相同的吸收峰，陰性對照溶液未檢出芍藥苷峰，表明用本方法測定芍藥苷含量無陰性干擾，專屬性強。見圖1。 表1 供試品準確度試驗    2.8 線性范圍考察 精密稱取經(jīng)置五氧化二磷干燥器中干燥3

9、6h的芍藥苷對照品8.0mg，置20m1容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，作為貯備液，分別取貯備液1ml置2、10、15、25、50ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別取各稀釋液及貯備液各進樣10l，按上述色譜條件測定峰面積。以峰面積積分值為縱坐標，芍藥苷含量為橫坐標，繪制標準曲線，進行回歸分析。得回歸方程Y = 1262.5X 21.655，r=0.9999,表明芍藥苷在0.079763.988g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。    2.9 穩(wěn)定性試驗 分別在樣品制備后0、3、6、9、12h測定。結(jié)果表明，芍藥苷的RSD為1.73%。  

10、;  2.10 含量測定 取供試品，依標準草案的含量方法測定含量，結(jié)果見表2。    A.芍藥苷對照品；B.鼻舒適片；C.缺白芍的陰性對照譜表2 鼻舒適片樣品測定    3 討論    3.1 提取方法考察 用甲醇為提取溶劑，對回流法和超聲法處理30min比較，結(jié)果表明，超聲法處理提取效率較高，故選用超聲法處理。    3.2 超聲時間考察 用甲醇為提取溶劑，對不同回流時間進行考察，結(jié)果提示，超聲60min提取最大，但是與超聲45min的結(jié)果接近，為節(jié)約提取時間，故確立超聲時間為45min。    3.3 流動相系統(tǒng)考察 本實驗對芍藥苷進行HPLC分析采用的流動相系統(tǒng)組成做了比較，甲醇水（25：75）2，0.1%磷酸-乙腈（82:18）3，0.025mol/ L磷酸二氫鉀溶液乙腈（80:20）4，0.025mol/ L磷酸二氫鉀溶液乙腈（89:11）等流動相進樣考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以0.025mol/ L 磷酸二氫鉀溶液乙腈（89:11）分離效果最好，重現(xiàn)性好?！緟⒖嘉墨I】1 中華人民共和國衛(wèi)生部標準.中藥成方制劑，第五冊，199