HPLC測定糖尿樂膠囊中人參皂苷Rg1的含量

1、HPLC測定糖尿樂膠囊中人參皂苷Rg1的含量    【摘要】 目的 建立HPLC測定糖尿樂膠囊中人參皂苷Rg1含量的方法。方法 選用Diamonsil(鉆石)柱(46×250 mm,5m);乙腈005%磷酸(19:81)為流動相;檢測波長為203 nm;流速10 ml/min。結(jié)果 人參皂苷Rg1在0995249760 ug范圍內(nèi),呈良好的線性關(guān)系。結(jié)論 本法簡便、準確,適用于糖尿樂膠囊中人參皂苷Rg1的含量測定?！娟P(guān)鍵詞】 HPLC Determination tangniaole capsules in Rg1 ContentLI Ying

2、lian, JIA Guilong, Che Xuan.Pharmacy department of Dongfeng county hospital,Jilin 136300,China【Abstract】 Objective to establish HPLC determination tangniaole capsules in Rg1 content Methods Diamonsil ( diamond ) column (46 × 250 mm, 5 m); acetonitrile 005% phosphoric acid (19: 81) as mobile pha

3、se; detection wavelength for 203nm; velocity 10 ml/min Results ginsenoside Rg 1 in 0995249760 g range,had good linear relationshipConclusion this method is simple, accurate, suitable for tangniaole capsules in Rg1 determination【Key words】 HPLC, tangniaole capsule, ginsenoside本品處方中,人參為傳統(tǒng)名貴中藥,經(jīng)現(xiàn)代醫(yī)學和藥理

4、研究證明,人參皂苷為人參的主要有效成分之一,它具有人參根的主要生理活性。且采用HPLC方法測定人參皂苷含量方法比較成熟,故本品采用靈敏度高,重復性好的高效液相色譜法,以人參皂苷Rg1為指標,測定其含量。1 方法11 儀器與試藥 高效液相色譜儀(島津LC20A、在線脫氣、SPD20A檢測器Diamonsil(鉆石)柱(46×250 mm,5 m),乙腈為色譜純,水為超純水,其他試劑均為分析純,人參皂苷Rg1對照品購自中國藥品生物制品檢定所(批號:110736200424)12 對照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rg1對照品適量,加甲醇制成每1 ml含025 mg的溶液,即得。供試品溶液

5、的制備1取本品內(nèi)容物5 g,精密稱定,置索氏提取器中,加三氯甲烷適量,回流提取至無色,棄去三氯甲烷液,取出濾紙包,吹干,加甲醇適量,回流提取至無色,提取液蒸干,殘渣加正丁醇飽和的水30 ml使溶解,轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,加水飽和的正丁醇振搖提取5次(30 ml、20 ml、20 ml、20 ml、15 ml),合并正丁醇液,加正丁醇飽和的氨試液60 ml洗滌一次,棄去氨液,分取正丁醇液,蒸干,殘渣加甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5 ml量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。測定法 分別精密吸取對照品溶液10 l與供試品溶液20 l,注入液相色譜儀,測定,即得。13 方法學考察131 色譜條件的選

6、擇3 檢測波長 采用DAD檢測器對人參皂苷Rg1進行全波長掃描,結(jié)果人參皂苷Rg1在流動相條件下最大吸收波長為203nm,故確定樣品檢測波長為203 nm。流動相的考查 乙腈005%磷酸(1981),試驗結(jié)果表明,使用此種組合流動相人參皂苷Rg1與其他色譜峰分離較好,且能達到基線分離,故選擇乙腈005%磷酸(19:81)為流動相2。色譜柱的考查 在上述流動相條件下,確定色譜柱為DiamonilC18色譜柱(5m 46×250 nm,迪馬公司,結(jié)果表明采用此色譜柱人參皂苷Rg1與其他色譜峰分離較好,且能達到基線分離。132 陰性對照試驗 稱取處方中除人參以外的其他各味藥材,制備陰性對照

7、品,并按上述【供式品溶液的制備】項下供試品溶液的制備方法制成陰性對照溶液,進行測定。結(jié)果見圖(圖略)。試驗結(jié)果表明,陰性對照溶液與供試品溶液比較,在相應的位置上未出峰,說明陰性對照無干擾。133 提取方法的選擇 取重量差異項下的本品85粒,除去囊殼,取粉末約5 g,精密稱定,(2份)分別加入三氯甲烷30 ml,采用索氏提取和超聲提取,各1 h,提取液過濾,蒸干,殘渣加正丁醇飽和的水30 ml使溶解,按上述供試品制備方法制成供試品溶液,測定,結(jié)果見表1。134 線性關(guān)系的考查 取人參皂苷Rg1適量,精密稱定,加甲醇配制成每1 ml含02488 mg的溶液,即得。分別精密吸取4 l、8 l、12l

8、、16 l、20 l注入液相色譜儀,測定,記錄峰面積。以峰面積為橫坐標,人參皂苷Rg1含量(g)為縱坐標,繪制標準曲線,計算線性方程為:Y=(626E006)X (336E001)(R=09997)。結(jié)果表明 ,人參皂苷Rg1在0995249760 ug范圍內(nèi),呈良好的線性關(guān)系。135 精密度試驗 取線性關(guān)系考查項下的對照品溶液,精密吸取10 l,連續(xù)進樣6次,記錄峰面積,峰面積RSD=14%。結(jié)果表明,該方法精密度良好。136 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液分別于配制后0、4、8、12、16、20 h依法測定峰面積,峰面積RSD=092%。試驗結(jié)果表明,樣品溶液在20 h內(nèi)穩(wěn)定。137 重現(xiàn)性

9、試驗 按上述含量測定項下方法,對同一批號樣品6份進行測定,記錄峰面積,峰面積RSD=059%。結(jié)果表明,測定方法的重現(xiàn)性良好。138 回收率試驗 采用加樣回收法(按11加入)精密稱取已知含量的同一批樣品6份,分別精密加入人參皂苷Rg1對照品0540 mg,按上述含量測定供試品溶液制備方法及色譜條件測定,結(jié)果平均回收率為9935%;RSD=114%。試驗結(jié)果表明,人參皂苷Rg1加樣回收率均在95%105%之間,加樣回收良好。139 樣品含量測定 按上述含量測定項下方法測定,結(jié)果見表2。根據(jù)三批成品的檢測結(jié)果,將本品人參皂苷Rg1含量規(guī)定為本品每粒含人參以人參皂苷Rg1計不得少于25 g。2 三批

10、藥材含量測定結(jié)果見表3。根據(jù)對不同產(chǎn)地藥材進行人參皂苷Rg1含量測定,對每批產(chǎn)品投料量進行指導,以確保藥品質(zhì)量。3 討論31 在色譜柱的考查上,在規(guī)定流動相條件下,考查了以下色譜柱,(1)DiamonilC18色譜柱(5 m 46×250nm),迪馬公司,(2)AgilentZOBAX SBC18色譜柱(5 m 46×250 nm),結(jié)果表明采用色譜柱(1)人參皂苷Rg1與其他色譜峰分離較好,且能達到基線分離,理論板數(shù)為2500,故選擇色譜柱(1)。32 在提取方法上,比較了索氏提取和超聲提取兩種方法,結(jié)果顯示索氏提取法提取率相對較高。參 考 文 獻1 中國藥典,2000,(1)2 王寶栗.中成藥質(zhì)量標準與標準物質(zhì)研究.北京醫(yī)藥科技出版社,1994.3 劉軍,王燕桓.高效液相色譜法分析人參皂苷藥物分析雜志,1998,18(