高效液相色譜質(zhì)譜法對飼料及食品添加劑中三聚氰胺的測定

1、第卷第期年月分析測試學(xué)報（）高效液相色譜一質(zhì)譜法對飼料及食品添加劑中三聚氰胺的測定黃芳，黃曉蘭，吳惠勤，鄧欣，林曉珊，朱志鑫×（中國廣州分析測試中心，廣東省化學(xué)危害應(yīng)急檢測技術(shù)重點實驗室，廣東廣州）摘要：建立了飼料中三聚氰胺的高效液相色譜一質(zhì)譜測定方法。色譜條件：。柱（，），流動相：乙腈一（體積分?jǐn)?shù)）甲酸（體積比：），流速。采用正離子模式的電噴霧質(zhì)譜檢測，以一級質(zhì)譜得到的準(zhǔn)分子離子作為母離子，進(jìn)行碰撞誘導(dǎo)解離（）二級質(zhì)譜（）分析，選擇母離子和的碎片離子、定性確證，提取、三個離子質(zhì)量色譜峰面積定量。實驗優(yōu)化了質(zhì)譜條件。線性范圍為一，檢出限（），回收率為。關(guān)鍵詞：三聚氰胺；液相色譜一質(zhì)譜

2、；飼料；食品添加劑中圖分類號：文獻(xiàn)標(biāo)識碼：文章編號：（），（，（），）：（），（，（：。）（）（），一，（），：；三聚氰胺（，。）是一種重要的氮雜環(huán)有機(jī)化工原料，主要用于生產(chǎn)三聚氰胺一甲醛樹脂，廣泛用于木材加工、塑料、涂料、造紙、紡織、皮革、電氣、醫(yī)藥等行業(yè)。因其含氮比例高（），常被不法商人添加進(jìn)動物飼料中，冒充蛋白質(zhì)。三聚氰胺不但沒有任何營養(yǎng)價值，甚至對動物有害。年月中旬以來，美國發(fā)生多起貓、狗等寵物中毒死亡事件。初步認(rèn)為是寵物食品中含有的三聚氰胺所致。歐盟、美國當(dāng)前已對添加三聚氰胺飼料的出口商發(fā)出禁令。中國于年月禁止在出：的植物蛋白或國內(nèi)食物中添加三聚氰胺。現(xiàn)有的三聚氰胺檢測方法的報道很少

3、，我國有國標(biāo)方法重量法、高效液相色譜法和電位滴定法心。但這些方法均是針對化工產(chǎn)品中常量三聚氰胺的測定，而飼料及添加劑產(chǎn)品的基質(zhì)成分復(fù)雜，用以上方法檢測干擾因素多，不能得到準(zhǔn)確結(jié)果。本文建立了飼料中檢測三聚氰胺的高效液相色譜一質(zhì)譜（）法，優(yōu)化了質(zhì)譜條件。應(yīng)尉本方法檢測了大量樣品中三聚氰胺的含量，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。實驗部分安捷倫液相色譜一電噴霧離子源一離子阱質(zhì)譜系統(tǒng)。儀器與試劑收稿日期：；修回日期：一第一作者：黃芳（一），女，湖南岳陽人，高級工程師，：，：分析測試學(xué)報第卷三聚氰胺：分析純，純度不低于；三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取三聚氰胺至容量瓶中，用流動相定容，作為標(biāo)準(zhǔn)儲備液。乙醇、甲酸為分析純。樣品處

4、理方法將樣品粉碎后準(zhǔn)確稱?。ň_至）至具塞錐形瓶中，加入水（含體積分?jǐn)?shù)甲酸）一乙醇（體積比：），超聲波振蕩提取，過濾；殘渣再用上述提取液提取次，過濾合并濾液，氮吹儀上濃縮并定容至，經(jīng)斗濾膜過濾后上機(jī)測定。實驗條件色譜條件色譜柱柱（×，）；流動相：乙腈一（體積分?jǐn)?shù)）甲酸（體積比：），流速：，進(jìn)樣量燦。；：質(zhì)譜條件電噴霧電離（），正離子化模式；毛細(xì)管電壓：溫度：；掃描范圍。；毛細(xì)管出口電壓：；碎裂電壓；霧化器壓力：×；干燥氣流量：；干燥氣結(jié)果與討論質(zhì)譜條件的優(yōu)化三聚氰胺的一級質(zhì)譜用的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，以流動注射方式注入電噴霧（）質(zhì)譜。分別在正離子、負(fù)離子模式下進(jìn)行母離子全掃描，

5、對比兩種模式，得出三聚氰胺正離子模式的離子峰強(qiáng)度比負(fù)離子峰強(qiáng)度高個數(shù)量級。因此選擇正離子模式檢測，此時得到了很強(qiáng)的三聚氰胺的準(zhǔn)分子離子為。三聚氰胺的二級質(zhì)譜以為母離子作二級，質(zhì)潛，并進(jìn)行質(zhì)譜條件優(yōu)化。在電噴霧電壓，電壓，毛細(xì)管出口電壓碎裂電壓范【內(nèi)分別對上述各質(zhì)譜參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，最后得到的理想質(zhì)譜條件為“”所述。三聚氰胺二級質(zhì)譜圖見圖，主要碎片離子為和，其豐度比渤粕。置印為：。以二級質(zhì)譜碎片離子和及其豐度比作定性確證，提取、三個離子質(zhì)量色譜峰面積作定量。圖標(biāo)準(zhǔn)品三聚氰胺（）質(zhì)潛圖（）色譜分離條件的選擇三聚氰胺含有多個胺基，是一種強(qiáng)極性化合物，用甲醇一水作流動相，在，。柱上幾乎沒有保留，和溶劑同時

6、流出，很難分離，在流動相中添加甲酸作為離子對試劑，改善了分離，并選用長的柱獲得了穩(wěn)定的保留時間，甲酸的加入也有利于三聚氰胺分子離子化，提高了靈敏度。樣品提取方法的選擇因三聚氰胺在水和有機(jī)溶劑中溶解度均很小，而所檢樣品中三聚氰胺含量相差很大，經(jīng)過多次對樣品提取方法的對比，最后確定樣品的前處理條件為“”節(jié)所述。加入甲酸有利于提高三聚氰胺的萃取率；加入乙醇有利于沉淀水溶性蛋白，減少干擾。由于采用方法測定，避免了樣品基體雜質(zhì)的干擾，故樣品提取液可直接上機(jī)分析，簡便陜速，且回收率高。線性范圍與檢出限將配制好的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液用流動相稀釋成、，按上述質(zhì)潛條件分離測定，以質(zhì)量濃度（）和峰面積（）作線性回歸

7、，得到三聚氰胺回歸方程為，相關(guān)系數(shù)，在范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。三聚氰胺檢出限。（）為（），按照“”方法處理樣品，樣品的定量下限為精密度與回收率實驗取份飼料樣品（經(jīng)檢測不含三聚氰胺）各，分成組，每組分別加入相當(dāng)于、第期黃芳等：高效液相色譜一質(zhì)譜法對飼料及食品添加劑中三聚氰胺的測定三聚氰胺的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按上述方法處表法測定三聚氰胺的回收率（，）理后測定，每個樣品平行測定次，結(jié)果見表，可見回收率介于，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在至之間。（凡）實際樣品測定對多個飼料及添加劑類樣品進(jìn)行檢測，結(jié)果檢出部分樣品中含有三聚氰胺，含量在×之間，圖分別為標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中三聚氰胺提取離子流色譜圖；表列舉了典型樣品中三聚氰胺測定

8、結(jié)果。圖三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品（）和樣品（）的提取離子流色譜圖（）（）表實際樣品中三聚氰胺的測定結(jié)果“（”一）（魚粉）（魚粉）“（）一一（棉子粕）（米糠粕）（肉骨粉）（魚粉）×（肉骨粉）（檸檬渣）（羽毛粉）（玉米蛋白粉撐）（辣椒粉）（肉粉）（豆粕）（豆粕）（菜籽粕）（蝦粉）（玉米蛋白粉）一（酵母粉）一（干酵母）（干酵母）一參考文獻(xiàn)：馮建民，秸俊紅中國三聚氰胺生產(chǎn)應(yīng)用現(xiàn)狀及產(chǎn)業(yè)技術(shù)分析化工科技市場，（）：中華人民共和國化學(xué)工業(yè)部工業(yè)三聚氰胺吳明禮，陳彩虹高效液相色譜法（）測定單氰胺中三聚氰胺的含量寧夏石油化工，（）：袁立勇，馬朝衛(wèi)，杜亞輝溶液中三聚氰胺含量的快速測定河南化工，（）： 高效液相色

9、譜-質(zhì)譜法對飼料及食品添加劑中三聚氰胺的測定作者：作者單位：刊名：英文刊名：年，卷(期：被引用次數(shù)：黃芳， 黃曉蘭， 吳惠勤， 鄧欣， 林曉珊， 朱志鑫， HUANG Fang， HUANG Xiao-lan，WU Hui-qin， DENG Xin， LIN Xiao-shan， ZHU Zhi-xin中國廣州分析測試中心,廣東省化學(xué)危害應(yīng)急檢測技術(shù)重點實驗室,廣東,廣州,510070分析測試學(xué)報JOURNAL OF INSTRUMENTAL ANALYSIS2008，27(344次參考文獻(xiàn)(4條1. 袁立勇;馬朝衛(wèi);杜亞輝 溶液中三聚氰胺含量的快速測定期刊論文-河南化工 2004(042.

10、 吳明禮;陳彩虹 高效液相色譜法(HPLC測定單氰胺中三聚氰胺的含量期刊論文-寧夏石油化工 2005(023. 中華人民共和國化學(xué)工業(yè)部 GB/T 9567-1997.工業(yè)三聚氰胺4. 馮建民;秸俊紅 中國三聚氰胺生產(chǎn)應(yīng)用現(xiàn)狀及產(chǎn)業(yè)技術(shù)分析期刊論文-化工科技市場 2006(05相似文獻(xiàn)(10條1.期刊論文 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法對多種食品基體中三聚氰胺的檢測 -分析測試學(xué)報2009,28(112.期刊論文 趙慧芬. 水明. 張雪林. 常碩. 周玉虎. 許國慶. 高星 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測定乳品中三聚氰胺含量的簡便方法 -中國奶牛2009(1本文建立了一種用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法(LC-MS

11、/MS測定三聚氰胺的較簡便方法.采用Zorbax RX-SIL色譜柱,以乙腈+5mmol/L甲酸銨溶液(90+10為流動相,流速0.4ml/min,柱溫30,串聯(lián)質(zhì)譜檢測.本方法精密度、線性關(guān)系、回收率均較好,檢測限低,耗時短,操作簡便.3.期刊論文 陳冬東. 彭濤. 李曉娟. 李淑娟. 邵兵. 徐嬌. CHEN Dong-dong. PENG Tao. LI Xiao-juan. LI Shu-juan. SHAO Bing. XU Jiao 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測定乳與乳制品中的三聚氰胺 -中國食品衛(wèi)生雜志2009,21(34.期刊論文 劉國美. LIU Guo-mei LC-MS/MS

12、法測定乳制品中三聚氰胺 -山西化工2009,29(4采用LC-MS/MS法測定乳制品中的三聚氰胺,具有靈敏度高、精確度好的優(yōu)點.檢測結(jié)果表明,在0.005 g/mL0.5 g/mL,三聚氰胺質(zhì)量濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)r>0.999 8,回收率>85%,變異系數(shù)RSD<1.50%.5.期刊論文 胡梅. 王駿. 張卉. 張喜琦. 祝建華. HU Mei. WANG Jun. ZHANG Hui. ZHANG Xi-qi. ZHU Jian-hua 超高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定禽蛋制品中三聚氰胺 -山東農(nóng)業(yè)科學(xué)2010(16.期刊論文 梁劍. 鐘茂生. 朱品玲.

13、陳舒奕 水產(chǎn)品中三聚氰胺含量的快速檢測方法研究 -安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)2009,37(287.期刊論文 王旭東. 賴偉華. 王緒明. Wang Xudeng. Lai Xinhua. Wang Xuming 高效液相色譜-質(zhì)譜技術(shù)在食品安全檢測中的應(yīng)用 -現(xiàn)代儀器2010(3本文綜述高效液相色譜及其與紫外、質(zhì)譜檢測器在食品安全檢測中的應(yīng)用.詳述食品中三聚氰胺、蘇丹紅、食品添加劑、農(nóng)藥殘留量、抗生素藥物殘留量、毒素的檢測等的檢測技術(shù).對于保證食品質(zhì)量、維護(hù)人民健康安全有著重要意義.8.期刊論文 柳其芳. LIU Qi-fang ELISA法測定三聚氰胺效果分析 -中國熱帶醫(yī)學(xué)2010,10(59.期刊論

14、文 蔣伯成. 張劍平. 于秋影. JIANG Bo-cheng. ZHANG Jian-ping. YU Qiu-ying 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法快速測10.期刊論文 江鑫. 顏流水. 羅旭彪. 熊萌瑤. 任艷. JIANG Xin. YAN Liu-shui. LUO Xu-biao. XIONG Meng-yao. REN YanSPE-LC-MS聯(lián)用同時測定環(huán)境水樣中痕量三聚氰胺和滅蠅胺 -分析試驗室2010,29(7建立了一種同時測定環(huán)境水樣中痕量三聚氰胺和滅蠅胺的固相萃取-高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(SPE-LC-Ms分析方法.水樣經(jīng)PCX柱固相萃取,以CN柱為分析柱,V(甲醇:V(水=30

15、:70為流動相,采用電噴霧正離子模式全掃描,三聚氰胺、滅蠅胺的定量離子分別為m/z 127,m/z 167,獲得的最低檢出限分剮為0.05,0.08g/L,對不同來源的實際水樣加標(biāo)回收率為85.2%104.2%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.5%5.1%.應(yīng)用該方法測定了湖水、河水、江水等不同基質(zhì)實際水樣.引證文獻(xiàn)(44條1. 張靜. 羅飛. 臧勇軍 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜/質(zhì)譜法聯(lián)用檢測雞蛋與蛋制品中的三聚氰胺期刊論文-實驗技術(shù)與管理 2010(42. 胡梅. 王駿. 張卉. 張喜琦. 祝建華 超高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定禽蛋制品中三聚氰胺期刊論文-山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2010(13. 陳德瑩. 徐繼林. 嚴(yán)小

16、軍 膨化食品中三聚氰胺及其類似物的UPLC-Q-TOF-MS分析期刊論文-寧波大學(xué)學(xué)報（理工版） 2010(14. 陳運江 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析飼料中三聚氰胺含量期刊論文-江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2010(35. 彭濤. 陳冬東. 代漢慧. 李曉娟. 李娜. 丁雙陽. 江海洋. 鄧曉軍 牛奶中多種中性與酸性藥物殘留的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定期刊論文-分析測試學(xué)報 2010(76. 朱鶴云. 關(guān)皎. 王黎明 三聚氰胺檢測方法的國內(nèi)外研究進(jìn)展期刊論文-吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報 2010(57. 范萬東. 蔣玉明. 臧鵬偉. 李啟鳳 液相色譜法檢測牛乳及乳制品中三聚氰胺方法改進(jìn)期刊論文-畜牧與獸醫(yī)2

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