蘆筍提取物對慢性鉛中毒小鼠解毒的影響 成型稿

1、基礎醫(yī)學綜合實驗實驗設計 系 隊 學號 、 、 姓名 、 、 蘆筍提取物對慢性鉛中毒小鼠解毒的影響口腔醫(yī)學系15隊韓士超，呼嘯，劉彬，田立寶一、 實驗目的和意義鉛離子對人體尤其是嬰幼兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)有明顯的損害作用，其理想的血濃度為0，但環(huán)境中鉛離子普遍存在，當體內(nèi)的鉛離子超過一定水平時就會對人體健康產(chǎn)生危害。鉛及其化合物進入機體后對神經(jīng)、造血、消化、腎臟、心血管和內(nèi)分泌的多個系統(tǒng)產(chǎn)生危害1。目前常見的鉛中毒大多屬于輕度慢性鉛中毒，主要病變是鉛對體內(nèi)金屬離子和酶系統(tǒng)產(chǎn)生影響，引起植物神經(jīng)功能紊亂、貧血、免疫力低下等。蘆筍 (asparagusof ficinalis)又稱石刁柏、龍

2、須菜，屬百合科天門冬屬多年生宿根草本植物，雌雄異株。蘆筍嫩莖味美鮮嫩，營養(yǎng)豐富，具有極高的營養(yǎng)保健價值，在國際上享有“蔬菜之王”的美稱。蘆筍主要含有維生素、蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)并富含多種活性成分，蘆筍富含十八種氨基酸及谷胱甘肽和鋅、銅、鈣等元素，蘆筍具有抗腫瘤、抗衰老、降血壓、解毒等功能。2但是對于它對鉛中毒的解毒作用目前尚無報道。 谷胱甘肽是谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸構(gòu)成的三肽化合物，能夠與體內(nèi)的鉛結(jié)合形成水溶性化合物經(jīng)腎臟排出體外3。早在上世紀七十年代國外就提出了用谷胱甘肽作為解毒劑治療某些中毒患者，且國內(nèi)也有用谷胱甘肽治療鉛中毒的報道。鈣離子和鉛離子在人體的代謝過程中具有競爭作用，鈣的補給能抑制

3、和減少鉛的吸收4。蘆筍作為生活常見蔬菜，研究其對鉛中毒的解毒作用具有很大的實際意義。因而本實驗的結(jié)果對于人們通過日常飲食和臨床用藥防治鉛中毒具有指導意義。二、 材料和方法1實驗動物及飼養(yǎng)條件5清潔級昆明種健康小鼠60只，雌雄不限，體重202g；動物飼養(yǎng)在本中心SPF級屏障設施內(nèi)，室溫保持在2025 ，相對濕度40一70，通風換氣，每周換窩12次。2樣品、儀器與試劑 清潔級昆明種健康小鼠60只，雌雄不限，體重202g；基礎飼料（40天用）；蒸餾水；三水醋酸鉛；蘆筍莖葉粉；水浸法提取全套裝置；代謝籠；手術(shù)器械若干；SMP-2型溶出分析儀（C型）；。其中，昆明小鼠、基礎飼料來自實驗動物中心，三水醋酸

4、鉛購自學校試劑中心，綠蘆筍購自蔬菜市場。3實驗方法我們先建立慢性鉛中毒小鼠模型，喂食蘆薈提取物一段時間后，用SMP-2型溶出分析（C型）測定小鼠血鉛(PbB)、尿鉛(PbU)、記憶障礙指標，來證明蘆筍提取物對慢性鉛中毒小鼠解毒的作用。3.1 實驗分組及步驟6小鼠60只，適應性喂養(yǎng)3天后，隨機分為兩組。對照組10只，模型組50只。 建立慢性鉛中毒小鼠模型后，從中隨機抽取10只小鼠作為模型A組。A組和對照組于代謝籠中收集各組小鼠24h尿液備檢。小鼠采用Morris水迷宮法測定平臺象限的游泳時間和其穿越平臺的次數(shù)以測定其記憶障礙指標，然后脊椎離斷法處死小鼠心臟采血，立即稱取1ml血于清潔試管內(nèi)，加入

5、抗凝劑后備檢。 將余下的模型小鼠中隨機分為兩組即B組和C組，每組20只。B組為病理對照組（即不予任何治療），僅喂食基礎飼料；C組為蘆筍提取液解毒組，在喂食基礎飼料的基礎上，每天按0.3ml/10kg體重用蘆筍提取物對小鼠進行灌胃。 在治療的第10天分別從模型B組和C組各隨機取10只小鼠，按前述方法采集樣本備檢。 治療20天時，將剩余動物按前述方法采集樣本備檢。3.2蘆筍提取物的制備7蘆筍提取物的制備 新鮮蘆筍莖葉洗凈晾干，按1：2的比例加入蒸餾水，搗碎，用NaHCO3調(diào)至pH 72，水解過液離心，取上清液即為實驗所需提取物。3.3慢性鉛中毒小鼠模型的建立8 昆明小鼠在喂食基礎飼料的基礎上飲用2

6、.0gL三水醋酸鉛水溶液15天染毒建立慢性鉛中毒小鼠模型。3.4觀察指標記錄小鼠血鉛(PbB)、尿鉛(PbU)、記憶障礙指標。PbB和PbU測定均用SMP-2型溶出分析（C型）；記憶障礙采用Morris水迷宮法測定。3.5 統(tǒng)計學方法數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計軟件進行兩組均數(shù)t檢驗。三、 預期結(jié)果按下表進行數(shù)據(jù)記錄，并對數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計軟件進行兩組均數(shù)t檢驗。表一 模型組和對照組鉛離子指標比較 分組檢測指標對照組模型A組模型B組模型C組10天組20天組10天組20天組記憶障礙平臺象限時間穿越平臺次數(shù)PbUPbB四、 經(jīng)費預算小鼠60只： 500元三水醋酸鉛：蘆筍莖葉粉：參考文獻1朱傳芳 陳津等 我國兒童鉛中毒的研究現(xiàn)狀職業(yè)與健康 20072封林林 蘆筍的營養(yǎng)成分及保健功能 種子世界 20083梁智萬 林秋紅 口服谷胱甘肽（GSH）治療慢性鉛中毒臨床療效觀察 中國工業(yè)醫(yī)學雜志 19974張軍 發(fā)育期鉛暴露的遠期危害及其機制研究進展 國外醫(yī)學：衛(wèi)生學分冊 19995. 李愛學 尚世臣等 SPF級KM小鼠繁殖及生長發(fā)育性能測定 實驗動物與比較醫(yī)學 20096薛莎 馬威等 富鋅中藥驅(qū)鉛丸對慢性鉛中毒大鼠體內(nèi)部分元