中藥化學(xué)實驗指導(dǎo)—實驗十黃連中鹽酸小檗堿的提取分離與檢識

1、實驗十 黃連中鹽酸小檗堿的提取分離與檢識（一）目的要求學(xué)習(xí)提取精制和檢識黃連中的小檗堿，通過實驗要求：1掌握小檗堿的結(jié)構(gòu)特點和理化性質(zhì)。2熟悉浸漬法、鹽析法、結(jié)晶法和薄層色譜法的基本操作過程及注意事項。3了解鹽酸小檗堿的檢識方法。（二）主要化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)黃連為毛茛科植物黃連Coptis chinensis Franch.、三角葉黃連Coptis deltoidea、峨嵋野連Coptis omeiensis或云連Coptis teeta Wall.的根莖。黃連的根狀莖含多種生物堿，主要為小檗堿（黃連素），約58，其次為黃連堿、甲基黃連堿、掌葉防己堿、藥根堿、木蘭堿等。葉含小檗堿1.49。小

2、檗堿(berberine)：分子式(C20H18NO4)，分子量336.37。系季銨生物堿。游離小檗堿為黃色針狀結(jié)晶（乙醚），mp.145，能緩緩溶于冷水（120），可溶于冷乙醇（1100），易溶于熱水或熱乙醇，難溶于丙酮、氯仿、苯，幾乎不溶于石油醚。鹽酸小檗堿(C20H17NO4·HCl·2H2O)，為黃色結(jié)晶，微溶于冷水（1500），易溶于沸水，幾乎不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。硫酸小檗堿( (C20H18NO4)2·SO4·3H2O)，溶于水（130），溶于乙醇。重硫酸小檗堿(C20H18NO4·HSO4)為黃色結(jié)晶或粉末，溶于水（1150）

3、，微溶于乙醚。 小檗堿 木蘭堿（三）實驗原理根據(jù)小檗堿的鹽酸鹽在水中溶解度小，而小檗堿的硫酸鹽水中溶解度較大。因此，從植物原料中提取小檗堿時常用稀硫酸水溶液浸泡或滲漉，然后向提取液中加入10的食鹽，在鹽析的同時，也提供了氯離子，使其硫酸鹽轉(zhuǎn)變?yōu)槁然￠迚A（即鹽酸小檗堿）而析出。（四）實驗內(nèi)容1鹽酸小檗堿的提取、精制 略2鹽酸小檗堿的檢識（1）濃硝酸或漂白粉試驗：取鹽酸小檗堿少許，加4ml稀硫酸溶解，分置于兩支試管中。一支試管滴加濃硝酸數(shù)滴，即顯櫻紅色。另一支試管加少許漂白粉，也立即顯櫻紅色。（2）丙酮試驗：取鹽酸小檗堿約50mg，加蒸餾水3ml緩緩加熱溶解后，加氫氧化鈉試劑2滴，顯橙色。溶液放

4、冷后，加丙酮4滴振搖，即發(fā)生混濁。放置后析出黃色丙酮小檗堿沉淀。（3）沒食子酸試驗：取鹽酸小檗堿約20mg，置白瓷皿中，加硫酸1ml溶解后，加5沒食子酸的乙醇溶液5滴，置水浴上加熱，即顯翠綠色。（4）薄層色譜檢識薄層板：中性氧化鋁（軟板）試 樣：自制鹽酸小檗堿乙醇溶液對照品：鹽酸小檗堿對照品乙醇溶液展開劑：氯仿甲醇（91）顯 色：自然光下觀察黃色斑點或紫外燈下觀察熒光（5）紙色譜檢識支持劑：新華層析濾紙（中速、20cm×7cm）試 樣：自制鹽酸小檗堿乙醇溶液對照品：鹽酸小檗堿對照品乙醇溶液展開劑：正丁醇-醋酸-水（411）顯 色：紫外燈下觀察熒光（五）實驗說明及注意事項1浸泡黃連粗粉

5、的硫酸水溶液，一般為0.20.3為宜。若硫酸水溶液濃度過高，小檗堿可成為重硫酸小檗堿，其溶解度（1150）明顯較硫酸小檗堿（130）小，從而影響提取效果。硫酸水溶液浸出效果與浸漬時間有關(guān)，有報道，浸漬12小時約可浸出小檗堿80，浸漬24小時，可浸出92。常規(guī)提取應(yīng)浸漬多次，使小檗堿提取完全，本實驗中只收集第一次浸出液。2進行鹽析時，加入氯化鈉的量，以提取液量的10（g/v）計算，即可達到析出鹽酸小檗堿的目的。氯化鈉的用量不可過多，否則溶液的相對密度增大，造成析出的鹽酸小檗堿結(jié)晶呈懸浮狀態(tài)難以下沉。鹽析用的氯化鈉用市售的精制食鹽，因粗制食鹽混有較多泥沙等雜質(zhì)，影響產(chǎn)品質(zhì)量。3在精制鹽酸小檗堿過程中，因鹽酸小檗堿放冷極易析出結(jié)晶，所以加熱煮沸后，應(yīng)迅速抽濾或保溫濾過，防止溶液在濾過過程中冷卻，析出鹽酸小檗堿結(jié)晶阻塞濾材，造成濾過困難，減低提取率。4本實驗流程也適用于以三棵針、黃柏為原料提取小檗堿，但因其小檗堿含量較低，應(yīng)加大藥材量，以150g以上為宜。（六）思考題1怎樣